一种五加皮组培快繁方法与流程

文档序号:11879713阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种五加皮组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:

步骤1,芽诱导培养:以五加皮树带芽茎段作为外植体,剪去叶片,切成6cm长的带有5个腋芽的节段先用洗衣粉溶液浸泡12min,再用毛刷刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除,然后用自来水冲洗5h后置于超净工作台中,先用75%乙醇消毒32s后用无菌水洗6次,再用0.1%升汞溶液消毒30min,用无菌水冲洗8次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后接种到芽诱导培养基进行芽诱导,接种后先在29℃条件下全暗培养5天,然后每天光照10小时,光照强度为2500lx条件下培养32天,统计其芽诱导率及生长情况;

步骤2,增殖培养:将步骤(1)培养得到的生长正常、有明显茎、叶结构的芽体切下并转入增殖培养基上进行继代培养,接种后先在29℃条件下全暗培养5天,然后每天光照1小时,光照强度为2500lx,培养温度为29℃的条件下培养32天后观察生长情况和芽增殖情况,多次反复切割芽体进行继代培养,得到丛生芽;

步骤3,生根培养:将步骤(1)或(2)过程获得的高度约为3.8cm、生长良好、无褐化、玻璃化和白化现象的不定芽分切接种到生根培养基上进行生根培养,接种后先在29℃条件下全暗培养5天,然后每天光照1小时,光照强度为3200lx,培养温度为29℃的条件下培养36天后统计生根情况;

步骤4,炼苗移栽:将步骤(3)获得的高约9cm的生长良好且健壮的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗8天后,将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,栽入由营养土:珍珠岩=4:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养,每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水,保持湿度,待幼苗成活后再移栽大田。

2. 根据权利要求1所述的一种五加皮组培快繁方法,其特征在于步骤(1)所述的芽诱导培养基为:MS+6mg/L6-BA+3mg/L NAA+32g/L蔗糖+8.0g/L琼脂,pH为5.9。

3.根据权利要求1所述的一种五加皮组培快繁方法,其特征在于步骤(2)所述的增殖培养基为:MS+1.5mg/LNAA+8mg/L 6-BA+32g/L蔗糖+6.0g/L琼脂,pH为5.9。

4.根据权利要求1所述的一种五加皮组培快繁方法,其特征在于步骤(3)所述的生根培养基为:1/4MS+2mg/L NAA+2mg/L IBA+32g/L蔗糖+8.0g/L琼脂,pH为5.9。

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