本发明属于植物病理学领域，具体涉及红黄两色植物病害标本原色保存方法。
背景技术：
红黄两色植物病害标本是植物病害标本中的重要组成部分之一。红黄两色植物病害标本与绿色标本在保存上有很多的不同，绿色标本是纯色，占比例重，研究力度较大，目前技术比较成熟。红色黄色病害标本基本是果实型标本，完整的一份红、黄植物病害标本，往往是带有绿色部分的叶片、果柄、果蒂、果枝等的果实，要做到完整标本的原色保存必须做到多种颜色的同时保存。目前专做红黄两色植物病害标本的保存技术研究不多，普遍采用一种保存液直接保存，保色效果不佳，标本色泽与新鲜标本差异过大，容易裂果。有些保色效果稍好的方法，配方里含有甲醛成分，众所周知，甲醛为有毒有害物质，不利于制作使用者的身体健康。
针对目前植物病理学教学科研领域植物病害标本保存的现实问题，如何设计一种红黄两色植物病害标本原色保存方法，可以保存两种颜色标本，而且简单易行、安全环保，具有积极的现实意义。
技术实现要素：
本发明的目的旨在提供一种红黄两色植物病害标本原色保存方法，保存方法操作简单、安全环保、红黄两色病害标本原形原色保存。
为实现上述目的，本发明红黄两色植物病害标本原色保存方法，步骤如下：
1）植物病害标本采集整理灭菌：采集7-8成熟具有单一、典型症状，带有叶片、果柄、果蒂、果枝的红色黄色果实病害标本，修剪整理好后将完整标本用清水洗净，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分钟，用蒸馏水洗净3-4遍；
2）颜色固定：把消毒清洗好的标本放入固定液中，标本占固定液的空间不超过80%，标本要完全浸没在固定液中，5-10天后标本绿色部分由绿变黄，逐渐由黄变绿1～2天后，取出用清水漂洗；
3）颜色修复：漂洗好的标本放入70%酒精中浸泡2-3分钟，取出用蒸馏水洗净晾干，把标本放入复色液中保存12-15天；
4）原色保存：把标本从复色液中取出，放入灭菌消毒好的标本瓶中，标本按自然状态排放好，对于中空的标本在果柄处用解剖剪剪开1-2个小洞，然后往标本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm处，保存液浸泡标本过程中进行排气，排气1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm处，1-2天后在空气湿度为70%以内的环境条件下用封口液进行封口，把标本放到空气湿度为70%-80%避光的干净条件中长期保存。
进一步地，所述固定液由以下原料制成：15～25克硫酸铜、40～60ml乙酸、50～80ml丙三醇、15～20ml亚硫酸，制备方法为将15～25克硫酸铜放入800ml蒸馏水中，搅拌至硫酸铜完全溶解，再加入乙酸、丙三醇和亚硫酸，最后加蒸馏水定容至1000ml即得固定液。
进一步地，所述复色液由以下原料制成：13～16ml亚硫酸、80～100ml丙三醇、4～5克硼酸，制备方法为将4～5克硼酸放入150ml蒸馏水中，搅拌至硼酸完全溶解，再加入亚硫酸和丙三醇，最后加蒸馏水定容至1000ml即得复色液。
进一步地，所述复色液由以下原料制成：13～16ml亚硫酸、80～100ml丙三醇、80～100ml95%酒精，制备方法为将亚硫酸、丙三醇、酒精混合后，最后加蒸馏水定容至1000ml即得复色液。
进一步地，所述保存液由以下原料制成：10～12ml亚硫酸、50～70ml丙三醇ml、4～5克硼酸，制备方法为将4～5克硼酸放入150ml蒸馏水中，搅拌至硼酸完全溶解，再加入亚硫酸和丙三醇，最后加蒸馏水定容至1000ml即得保存液。
进一步地，所述保存液由以下原料制成：10～12ml亚硫酸、50～70ml丙三醇、50～80ml95%酒精，制备方法为：将亚硫酸、丙三醇、酒精混合后，最后加蒸馏水定容至1000ml即得保存液。
本发明的实质性特点和显著进步是：
本发明的红黄两色植物病害标本原色保存方法，独创颜色固定、颜色修复、原色保存的三个颜色处理步骤，采用一种方法就可以保存两种颜色标本。原料安全环保，制作方法简单易行、省时省力、随采随制、可批量制作，用于完整标本原形原色保存，保存液清晰透明，在植物病理学教学科研领域的应用具有积极的现实意义。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
实施例一：
本发明红黄两色植物病害标本原色保存方法，用于黄色枇杷炭疽病的保存，具体步骤为：
1）枇杷炭疽病标本采集整理灭菌。采集成串7-8成熟具单一、典型症状的枇杷炭疽标本，除去多余的老叶、其他病果，留下典型症状的病果和健康正常的果实。带有果枝、果柄、果蒂、病果、健康果实的完整标本。修剪整理好后将完整标本用清水清洗干净，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分钟，用蒸馏水洗净3-4遍。
2）颜色固定。把消毒清洗好的枇杷炭疽病标本放入固定液中，标本占固定液的空间不超过80%，标本要完全浸入固定液中。5天后标本绿色部分由绿变黄，逐渐由黄变绿2天后，取出用清水漂洗。
固定液的制备：将15克硫酸铜放入800ml蒸馏水中，搅拌至硫酸铜完全溶解，再加入40ml乙酸、50ml丙三醇和15ml亚硫酸，最后加蒸馏水定容至1000ml即得固定液。
3）颜色修复。漂洗好的标本放入70%酒精中浸泡2-3分钟，用蒸馏水洗净取出晾干，把标本放入复色液中保存15天。
复色液的制备：将15ml亚硫酸、100ml丙三醇、95%酒精100ml加入300ml蒸馏水中混合，最后加蒸馏水定容至1000ml搅拌均匀即得复色液。
4）原色保存。把枇杷炭疽病标本从复色液中取出，放入灭菌消毒好的标本瓶中，标本按自然状态排放好，在果柄附近用解剖剪开1到2个小洞，然后往标本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm处，标本中不可避免含有气体，在保存液浸泡标本过程中进行排气，排气1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm处。2天后在空气湿度为70%以内的环境条件下用封口剂进行封口，封口剂的配方为蜂蜡、凡士林各1份。最后，把标本放到湿度为70%至80%避光的干净条件中长期保存。
保存液的制备：将10ml亚硫酸、70ml丙三醇、95%酒精60ml加入300ml蒸馏水中混合，最后加蒸馏水定容至1000ml搅拌均匀即得保存液。
实施例二：
本发明红黄两色植物病害标本原色保存方法，用于红色番茄晚疫病的保存，具体步骤为：
1）番茄晚疫病标本采集整理灭菌。采集成串7-8成熟具单一、典型症状的番茄晚疫病，除去多余的老叶、其他病果，留下典型症状的病果和健康正常的果实。带有叶片、果枝、果柄、果蒂、病果、健康果实的完整标本。修剪整理好后将完整标本用清水清洗干净，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分钟，用蒸馏水洗净3-4遍。
2）颜色固定。把消毒清洗好的番茄晚疫病标本放入固定液中，标本占固定液的空间不超过80%，标本要完全浸入固定液中。6天后标本绿色部分由绿变黄，逐渐由黄变绿2天后，取出用清水漂洗。
固定液的制备：将20克硫酸铜放入800ml蒸馏水中，搅拌至硫酸铜完全溶解，再加入50ml乙酸、65ml丙三醇和15ml亚硫酸，最后加蒸馏水定容至1000ml即得固定液。
3）颜色修复。漂洗好的标本放入70%酒精中浸泡2-3分钟，用蒸馏水洗净取出晾干，把标本放入复色液中保存15天。
复色液的制备：将15ml亚硫酸、100ml丙三醇、95%酒精100ml加入300ml蒸馏水中混合，最后加蒸馏水定容至1000ml搅拌均匀即得复色液。
4）原色保存。把番茄晚疫病标本从复色液中取出，放入灭菌消毒好的标本瓶中，标本按自然状态排放好，然后往标本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm处，标本中不可避免含有气体，在保存液浸泡标本过程中进行排气，排气1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm处。2天后在空气湿度为70%以内的环境条件下用封口剂进行封口，封口剂的配方为蜂蜡、凡士林各1份。最后，把标本放到湿度为70%至80%避光的干净条件中长期保存。
保存液的制备：将10ml亚硫酸、70ml丙三醇、95%酒精60ml加入300ml蒸馏水中混合，最后加蒸馏水定容至1000ml搅拌均匀即得保存液。
实施例三：
本发明红黄两色植物病害标本原色保存方法，用于红色和黄色甜椒炭疽病的保存，具体步骤为：
1）甜椒炭疽病标本采集整理灭菌。分别采集7-8成熟具单一、典型症状的红色和黄色甜椒炭疽病病果，选出典型症状的病果和健康正常的果实，带有叶片、果柄、果蒂、病果、健康果实的完整标本。修剪整理好后将完整标本用清水清洗干净，放入70%的酒精中浸泡消毒3-4分钟，用蒸馏水洗净3-4遍。
2）颜色固定。把消毒清洗好的甜椒炭疽病标本放入固定液中，标本占固定液的空间不超过80%，标本要完全浸入固定液中。5天后标本绿色部分由绿变黄，逐渐由黄变绿2天后，取出用清水漂洗。
固定液的制备：将25克硫酸铜放入800ml蒸馏水中，搅拌至硫酸铜完全溶解，再加入60ml乙酸、80ml丙三醇和20ml亚硫酸，最后加蒸馏水定容至1000ml即得固定液。
3）颜色修复。漂洗好的标本放入70%酒精中浸泡2-3分钟，用蒸馏水洗净取出晾干，把标本放入复色液中保存15天。
复色液的制备：将5克硼酸放入150ml蒸馏水中，搅拌至硼酸完全溶解，再加入15ml亚硫酸和100ml丙三醇，最后加蒸馏水定容至1000ml即得复色液。
4）原色保存。把红色和黄色甜椒炭疽病标本从复色液中取出，同时放入灭菌消毒好的标本瓶中，标本按自然状态排放好，然后往标本瓶中注入保存液，液面距瓶口2cm处，标本中不可避免含有气体，在保存液浸泡标本过程中进行排气，排气1天后再次添加保存液以保持液面距瓶口2cm处。2天后在空气湿度为70%以内的环境条件下用封口剂进行封口，封口剂的配方为蜂蜡、凡士林各1份。最后，把标本放到湿度为70%至80%避光的干净条件中长期保存。
保存液的制备：将4克硼酸放入150ml蒸馏水中，搅拌至硼酸完全溶解，再加入10ml亚硫酸和70ml丙三醇，最后加蒸馏水定容至1000ml即得保存液。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思做出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。