硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方法
【技术领域】
[0001] 本发明的技术方案涉及化学化合物的抗植物病毒剂，具体地说是硫脲化合物用于 抗烟草花叶病毒活性的方法。
【背景技术】
[0002] 植物病毒广泛分布于自然界中，它们对农作物的生长造成严重的危害，进而对 现代农业生产造成重大损失，烟草花叶病毒（TMV)作为一种病原体能对多种作物造成 危害。据统计，它能侵染22种单子叶植物的约198种个体，能够造成大约5 %到90% 不等的损失(Hari, V. ；Das, P. Ultra microscopic detection of plant viruses and their gene products. In plant disease virus control. Hadidi, A. ；Khetarpal, R. K.； Koganezawa, H. , Eds. ;APS Press: St. Paul, MN, 1998:417-427.)到目前为止，还没有一种化 学农药能够彻底保护作物免受TMV的侵害。同样，也没有一种药物能够完全治愈被TMV侵 害的作物。
[0003] 现有技术中，病毒唑（Ribavirin)，作为一种比较成功的植物病毒抑制剂，被广 泛的用于防治烟草花叶病毒造成的病害，但是，该药物在500 yg/mL浓度下的对烟草花 叶病毒的离体活性、活体钝化、活体治疗和活体保护中的抑制率还不到50% ;从微生物发 酵产生的宁南霉素用药量为500 y g/mL时对烟草花叶病毒的治疗效果只有54%左右；文 献[Mei-hang Chen, Zhuo Chen, Bao-an Song,氺Pinaki S. Bhadury, Song Yang, Xun-jian Cai,De-yu Hu, Wei Xue，Song Zeng. Synthesis and antiviral activities of chiral thiourea derivatives containing an a -aminophosphonate moiety. J. Agric.Food Chem.，2009, 57 (4)，1383-1388】报道了含a -膦酸酯的手性硫脲衍生物及其制备方 法和用途，其中部分化合物在浓度为500 y g/mL时对烟草花叶病毒的治疗效果（抑 制率为54. 8% )，相同测试条件下，还低于对照药宁南霉素（抑制率为56. 2% ) ;CN 200910102561. 1公开了含膦酸酯的手性双硫脲衍生物及其制备方法和用途，相同测试 条件下，其中部分化合物在浓度为500 y g/mL时对烟草花叶病毒的治疗效果（抑制率为 50.8%)还低于对照药宁南霉素（抑制率为55.3%);文献【闫志坤，蔡学建，杨璇，宋宝 安，陈卓，Pinaki S. Bhadury,胡徳禹，金林红，薛伟，卢平.Synthesis and antiviral activities of chiral thiourea, Chinese Journal of Chemistry, 2009, 27, 593-601.)] 报道了含茚基手性硫脲化合物用药量为500mg/L时，活体保护、活体钝化和活体治疗的 抑制率分别为57. 0 %，96. 4 %及55. 0 %，在相同的测试条件下，商品化品种宁南霉素为 55. 9%，96. 5%，53. 9 %，虽然保护和治疗作用均稍高于对照药剂宁南霉素，钝化作用与宁 南霉素相当，但是该手性硫脲化合物（S)-l-(l-茚基）_3_苯基硫脲的的合成需要原料为 (S)-l-氨基茚烷（售价为580元左右/克）及苯基异硫氰酸酯，价格昂贵；总之本技术 领域中所用的手性硫脲化合物试剂一般价格都比较高；CN201410344605. 2公开了 3-芳 基-5-甲基丁内酯化合物用作抗植物病毒剂的方法，其存在的缺陷也是对烟草花叶病毒的 离体活性、活体钝化、活体治疗和活体保护中的抑制率仍然较低（CN201410344605. 2中公 开的化合物，治疗效果和保护效果最好的化合物3-(4_氟苯基）-5-甲基-Y - 丁内酯的活 体治疗和活体保护抑制率分别为57. 1%和60. 0%，在相同测试条件下商品化品种宁南霉 素的活体治疗和活体保护抑制率分别为54%和64% )。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是：提供硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方 法，由此证明该类化合物用于防治烟草花叶病毒造成的病害的活性好于现有技术的化合物 和药物，而且该类化合物生产成本低，可以在农业上得到广泛应用。
[0005] 本发明解决该技术问题所采用的技术方案是：硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活 性的方法，步骤如下：
[0006] A.所述的硫脲化合物为具有如下通式（I )所示结构的化合物：
【主权项】
1.硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方法，其特征在于步骤如下： A.所述的硫脲化合物为具有如下通式（I )所示结构的化合物：
通式（I)所示结构的化合物有包括Ia，Ib和I。三类，具体个别化合物如表1所示： 表1.具体的硫脲化合物
B.上述硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方法，步骤如下： 第一步，烟草花叶病毒提纯及浓度测定： 烟草花叶病毒提纯及浓度测定参照南开大学元素所生测室编制烟草花叶病毒SOP规 范执行，病毒粗提液经2次聚乙二醇离心处理后，测定浓度，于4°C冷藏备用； 第二步，选定硫脲化合物药剂溶液的配制： 称量选定上述表1中所列硫脲化合物中的一个40mg作为原药，然后在该原药加入 0. 4mL DMF进行溶解，制得I X IO5 μ g/mL母液，再用质量百分比浓度为1%。吐温80水溶液 稀释至测试浓度500 μ g/mL或100 μ g/mL，由此配制得所用硫脲化合物为表1中所列的硫脲 化合物药剂溶液； 第三步，离体作用： 摩擦接种3 - 5叶期珊西烟适龄叶片，用流水冲洗，病毒浓度10 μ g/mL，收干后剪下，沿 叶中脉对剖，左右半叶分别浸于质量百分比浓度为1%。的吐温80水溶液及第二步配制得的 上述硫脲化合物的个别化合物药剂溶液中，30min后取出，于适宜光照温度下保湿培养，每 3片叶为1次重复，重复3次，3天后记录病斑数，计算防效； 第四步，活体保护作用： 选长势均匀一致的3 - 5叶期珊西烟，全株喷雾施第二步配制得的上述硫脲化合物的 个别化合物药剂溶液，每处理3次重复，并设置质量百分比浓度为1%。吐温80水溶液对照， 24h后，叶面撒布500目的金刚砂，用毛笔蘸取病毒液，在全叶面沿支脉方向轻擦2次，叶片 下方用手掌支撑，病毒浓度10 μ g/mL，接种后用流水冲洗，3天后记录病斑数，计算防效； 第五步，活体治疗作用： 选长势均匀一致的3 - 5叶期珊西烟，用毛笔全叶接种病毒，病毒浓度为10 μ g/mL，接 种后用流水冲洗，叶面收干后，全株喷雾施第二步配制得的上述硫脲化合物的个别化合物 药剂溶液，每处理3次重复，并设置质量百分比浓度为1%。吐温80水溶液对照，3天后记录 病斑数，计算防效； 第六步，活体钝化作用： 选长势均匀一致的3 - 5叶期珊西烟，将第二步配制得的上述硫脲化合物的个别化合 物药剂溶液与等体积的病毒汁液混合钝化30min后，摩擦接种，病毒浓度20 μ g/mL，接种后 即用流水冲洗，重复3次，设置质量百分比浓度为1%。吐温80水溶液对照，3天后数病斑数， 计算结果。
【专利摘要】本发明硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方法，涉及化学化合物的抗植物病毒剂，该方法步骤如下：A.所述的硫脲化合物为具有如下通式(Ⅰ)所示结构的化合物：B.上述硫脲化合物用于抗烟草花叶病毒活性的方法，步骤是：烟草花叶病毒提纯及浓度测定；选定硫脲化合物药剂溶液的配制；离体作用；活体保护作用；活体治疗作用；活体钝化作用。该类化合物用于防治烟草花叶病毒造成的病害的活性好于现有技术的化合物和药物，而且该类化合物生产成本低，可以在农业上得到广泛应用。
【IPC分类】A01N47-30, A01N47-32, A01N47-28, A01P1-00
【公开号】CN104522014
【申请号】CN201510013285
【发明人】卢爱党, 陈建新, 苏敏, 李银辉, 韩健
【申请人】河北工业大学
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2015年1月9日