天然抗癫痫活性化合物及其在药物制剂中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，具体地说，本发明涉及天然抗癫痫活性化合物及其在 药物制剂中的用途。
【背景技术】
[0002] 癫痫（Epil印sy)，或称脑痫、羊痫，是慢性反复发作性短暂脑功能失调综合征。据 统计，我国癫痫的发病率约23/10万/年左右，患病率为3. 5%。-4. 8%。。癫痫发作会引发一 系列症状，痉挛是典型的癫痫症状之一，包括肢体重复运动、不正常行为和伴有意识丧失的 全身抽搐等，甚至造成机体损伤或死亡。癫痫的治疗包括药物治疗、手术治疗、物理治疗和 心理治疗等多种方法，其中药物治疗是目前最常用、最重要的手段。目前临床上用于癫痫的 治疗药物包括卡马西平（Carbamazepine)、丙戊酸钠（Depakene)、苯妥英钠（Dilantin)等， 但这些药物通常具有着非常明显的副作用，长期服用对身体照成较大的影响，甚至在一小 部分用药患者中可能引发自杀想法或行为。中药复方、中成药制剂产品也占有不少市场，但 由于中药制方成分复杂，并且植物产地不同、气候多变、收获期不同等原因影响着药物主要 成分的含量，因此给中药制方的质量控制照成相当大的难度，这也限制了中药制剂的推广。 因此，寻找安全无毒有效并且质量可控的新型抗癫痫药物在癫痫症的预防和治疗中有着极 其重要的意义。
[0003] 鹅絨藤属（Cynanchum)是夹竹桃科（Apocynum)的一属，约200种，分布于热带 和温带地区，我国约53种，全国均产之。牛皮消（C.auriculatum)，又称白首乌，是我国 特有植物品种，约95%生长于江苏省滨海县，具有益肝肾、补精血、抗衰老等功效。隔山 消（C. wilfordii)产于辽宁、河南、湖北等地，常用以健胃、消饱胀、治噎食等。青阳参 (C.otophyllum)产于湖南、广西、贵州、云南、四川和西藏等省区，具有解毒，镇痉，祛风湿等 功效，临床用于治风湿骨痛，癫痫及毒蛇咬伤。
[0004] 青阳参提取物青阳参总苷是临床治疗癫痫的辅助用药。但是青阳参片成分复杂， 对质量控制带来一定难度，作用靶标不明，临床主要与苯妥英钠或苯巴比妥等抗癫痫药合 用治疗。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供天然抗癫痫活性化合物及其在药物制剂中的用途。
[0006] 本发明的第一方面，提供了一种结构如式A所示的化合物或其在药学上可接受的 盐，其特征在于：
[0007]
[0008] 式A中，R1为糖基，R2为取代或未取代的Cl~C6烷基或者取代或未取代的Cl~ C6烯基，R3为取代或未取代的Cl~C6烷基；
[0009] 所述取代是指一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：Cl~ClO烷基、C3~ ClO环烷基、Cl~ClO烷氧基、羟基、羧基、Cl~ClO羰基、Cl~ClO酰胺基、C2~ClO酯 基、C6~C30芳基和氧（=0)。
[0010] 在另一优选例中，所述糖基由加拿大麻糖基（cymarosyl)、夹竹桃糖基 (oleandrosyl)、迪吉糖基（diginosyl)、黄夹糖基（thevetosyl)、洋地黄毒糖基 (digitoxosyl)、卡那糖基（canarosyl)、鼠李糖基（rhamnosyl)和葡萄糖基（glucosyl)中 的一种或多种组成。
[0011] 在另一优选例中，所述糖基包括1~6个相同或不同的单糖单元，优选地，包括 2~4个相同或不同的单糖单元。
[0012] 在另一优选例中，R1中不含有糖单元
[0013] 在另一优选例中，当R2为羟基苯基时，R1中糖单元数量不为3。
[0014] 在另一优选例中，所述糖单元数量可以为0、1、2、3或4。
[0015] 在另一优选例中，所述R3为
其中R4为取代或未取代的Cl~ C6烷基；R5为取代或未取代的Cl~C6烷基。
[0016] 在另一优选例中，所述R1
η为1~4的正整数，R7为 H或甲基或Cl~ClO酯基，^为H或C2~ClO酯基。
[0017] 在另一优选例中，所述Rl选自下组：
[0018]
[0020] 在另一优选例中，所述R2选自下组：
[0022] 在另一优选例中，所述R3选自下组：
[0024] 在另一优选例中，所述化合物结构如式I所示：
[0026] 在另一优选例中，所述化合物结构如式II所示：
[0028] 在另一优选例中，所述化合物结构如式III所示：
[0029]
[0030] 在另一优选例中，所述化合物结构如式IV所示：
[0032] 在另一优选例中，所述化合物结构如式V所示：
[0034] 在另一优选例中，所述化合物结构如式VI所示：
[0036] 在另一优选例中，所述化合物结构如式W所示：
[0038] 在另一优选例中，所述化合物结构如式VID所示：
[0040] 在另一优选例中，所述化合物结构如式IX所示：
[0042] 在另一优选例中，所述化合物结构如式X所示：
[0043]
[0044] 在另一优选例中，所述化合物结构如式XI所示：
[0046] 在另一优选例中，所述化合物结构如式ΧΠ 所示：
[0048] 在另一优选例中，所述化合物结构如式XIII所示：
[0050] 在另一优选例中，所述化合物结构如式XV所示：
[0052] 在另一优选例中，所述化合物结构如式XVI所示：
[0054] 本发明的第一方面，提供了一种药物组合物，其包含如本发明第一方面所述的化 合物或其药学上可接受的盐，以及任选的药学上可接受的载体或赋形剂。
[0055] 在另一优选例中，所述药物组合物中还包括任选的选自下组的药物：卡马西平 (Carbamazepine)、丙戊酸钠（Depakene)和苯妥英钠（Dilantin)。
[0056] 本发明的第三方面，提供了如本发明第一方面所述的化合物或其药学上可接受的 盐、Wilfoside G或其药学上可以接受的盐、或者如本发明第二方面所述的药物组合物在制 备治疗或预防癫痫病药物中的应用
[0057] 在另一优选例中，所述wilfoside G结构如式XIV所示：
[0059] 本发明的第四方面，提供了夹竹桃科鹅绒藤属（Cynanchum)植物耳叶牛皮消 (C.auriculatum Royle ex Wight)或隔山消（C.wilfordii Hemsl.)或其提取物在制备治 疗或预防癫痫病药物中的应用。
[0060] 本发明的第五方面，提供了一种植物总苷或含所述植物总苷的中药提取物，所述 植物总苷或所述提取物中含有抗癫痫活性成分，并且所述提取物中所述抗癫痫活性成分的 含量Cl满足下式B :
[0061] C1/(C1+C2) ^ 50% 式 B
[0062] 式B中，Cl为抗癫痫活性成分的含量；C2为促癫痫活性成分的含量。
[0063] 在另一优选例中，ClAC1+C2)彡80% ;更佳地，彡90% ;最佳地，彡95%，如96%、 97%、98%、99%、99· 5%〇
[0064] 在另一优选例中，所述的抗癫痫活性成分选自下组中的一种或多种：
[0065] 式 I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI、XII、XIII、XIV、XV、XVI 所示的化合 物。
[0066] 在另一优选例中，所述的促癫痫活性成分选自下组中的一种或多种：
[0067] 式a、b、c和d所示的化合物
[0070] 在另一优选例中，所述植物包括：耳叶牛皮消（C. auriculatum Royle ex Wight)、 隔山消（C.wilfordii Hemsl·)。
[0071] 在另一优选例中，所述提取物的制备方法如下：
[0072] 将药材以95%乙醇浸渍提取三次，减压浓缩提取液得到乙醇浸膏，加水混悬，以乙 酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，将乙酸乙酯浸膏溶于70%乙醇溶液中，过滤或离心去除不溶物 后，进行大孔树脂柱色谱分离，收集75 %乙醇洗脱流分，浓缩，即得。
[0073] 本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，包含如本发明第五方面所述的中药 提取物，以及任选的药学上可接受的载体或赋形剂。
[0074] 本发明的第七方面，提供了一种对抗癫痫产品进行质量控制方法，包括步骤：
[0075] (a)测定所述产品或其原料中促癫痫活性成分的含量C2,并与预定值CO进行比 较；
[0076] (b)当所述含量C2高于CO时，则判定所述产品的质量不合格；当所述含量C2低 于或等于CO时，则判定所述产品的质量合格。
[0077] 在另一优选例中，所述的促癫痫活性成分选自下组中的一种或多种：式a、b、c和d 所示的化合物。
[0078] 在另一优选例中，所述抗癫痫产品包括含青阳参提取物的抗癫痫药品。
[0079] 在另一优选例中，所述C2为促癫痫活性成分在所述产品或原料中的重量百分比。
[0080] 在另一优选例中，所述CO < 10% (w/w)，优选地，所述CO < 5% (w/w)，更优选地， 所述 CO 彡 1%，所述 CO 可以为 0· 01%、0· 05%、0· 1%、0· 2%、0· 5%、1· 0%、5%、10%。
[0081] 本发明的第八方面，提供了选自下组的化合物在制备药剂或试剂中的用途，所述 药剂或试剂用于构建动物癫痫模型：式a、b、c和d所示的化合物。
[0082] 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文（如实施例）中具 体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附图说明】
[0083] 图IA显示了 cynawilfoside A各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图 IB显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0084] 图2A显示了 wilfoside ClN各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图2B 显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0085] 图3A显示了 wilfoside KlN各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图3B 显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0086] 图4A显示了 taiwanoside C各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图4B 显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0087] 图5A显示了青阳参苷己各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图5B显 示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0088] 图6A显不了罗素他命3_0_ β -D-夹竹桃糖批喃糖基-(1 - 4) - β -D-加拿大麻糖 批喃基_ (1 - 4) - β -D-加拿大麻糖[rostratamine 3-0- β -D-oleandropyranosyl- (1 - 4) -β -D-cymaropyranosyl- (I - 4) - β -D-cymaropyranoside]各浓度组与癫痫模型组的斑马 鱼快速运动轨迹；图6B显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0089] 图7A显示了 wilfoside C3N各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图7B 显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0090] 图8A显示了 cynauricoside A各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨迹；图 8B显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0091] 图9A显示了耳叶牛皮消活性部位各浓度组与癫痫模型组的斑马鱼快速运动轨 迹；图9B显示了根据斑马鱼快速运动距离平均值mean±SE绘制的柱形图。
[0092] 图10显示了青阳参苷元（qingyangshengenin)、告达庭（caudatin)、青阳参苷甲 (otophylloside A)、青阳参苷丙（otophylloside C)、青阳参苷己（otophylloside F，式 I)、青阳参苷M(otophylloside M，式b)、告达庭 3-0- β -D-加拿大麻糖[caudatin3-0_ β -D -cymaropyranoside，式IX]、青阳参苷元3-〇-β -D-加拿大麻糖批喃基-(1 - 4)-β -D-洋 地黄毒糖[qinyangshengenin 3-0-β-D-cymaropyranosyl-(1 - 4) - β-D-digitoxopyr anoside，式XVII]、告达庭3-0- β -D-加拿大麻糖吡喃基-(I - 4) - β -D-加拿大麻糖 [caudatin3-0_i3 -D_cymaropyranosyl-(l - 4)_β -D-cymaropyranoside,式 X]、罗素他 命3-0-β-D-夹竹桃糖吡喃糖基-(1 - 4)-β-D-加拿大麻糖吡喃基-(1 - 4)-β-D-加 拿大麻糖[rostratamine3-0-β -D-oleandropyranosyl-(I - 4)-β -D-cymaropyrano syl_(l - 4)-β -D-cymaropyranoside，式 II]、罗素他命 3-〇-α -L-加拿大麻糖批喃糖 基-(1 - 4) - β -D-加拿大麻糖吡喃基-(1 - 4) - a -L-迪吉糖吡喃糖基-(1 - 4) - β -D-加 拿大麻糖[rostratamine3-0-a -L_cymaropyranosyl-(l - 4)-β -D_cymaropyranosyl-(l -4) - α -L-diginopyranosyl- β -D-cymaropyranoside，式XIII]