本发明装置能够进行植物幼苗的无菌培养，可以为苜蓿等豆科植物根瘤菌接菌及结瘤效果观察评价提供无菌密闭环境；水培营养液能够为植物提供良好生长所需的各种营养元素，根瘤菌接菌方便；在此装置提供的无菌环境下植物幼苗生长速度快，不受其它根瘤菌和外界细菌、病毒、真菌影响。
[0027]选择的颗粒较大的石英砂培养基质和不锈钢滤网对植物根的生长具有很好的适应性。常规水培方法通常使用较细的石英砂、海绵等作为固定基质，在这些基质中植物根系生长受限，且观察、收集植物根系不便，与此相比，该发明装置能够使植物根系在较粗的石英砂孔隙中生长良好，便于植物根系的收集，植物根系还能通过金属滤网网孔伸出，便于根系观察。
[0028]本发明装置适合高度低于30cm的植物及幼苗的无菌水培，本发明装置操作简单，将适合的植物无菌幼苗或消毒后的植物种子在超净台中放入该水培装置内部的石英砂表面，用带滤片的封口膜将玻璃杯口密封，然后置于人工气候箱中进行水培。如需进行长期培养，可打开杯体底部开孔将旧水培液的放出，然后用橡胶塞密封后从杯口加入新的水培液，从而进行水培液的更换。此水培液的更换操作简便。
[0029]与常规固体琼脂培养基中进行无菌培养相比，采用本装置进行无菌水培的植物幼苗根系发育良好，根系发达，幼苗健壮，茎叶粗壮，刈割再生性好，解决了常规固体琼脂培养基中植物苗生长缓慢、根系短小、侧根稀少、刘割后再生缓慢以及培养基不易更换等问题。
[0030]下面结合附图对本发明的植物无菌水培装置及采用该装置进行水培苜蓿的根瘤菌接菌及结瘤效果的评价方法作进一步说明。
【附图说明】
[0031]图1为本发明植物无菌水培装置的玻璃杯的结构示意图；
[0032]图2为本发明植物无菌水培装置的滤网的结构示意图；
[0033]图3为本发明实施例1中植物无菌水培装置的结构示意图；
[0034]图4为图3的剖面结构示意图；
[0035]图5为本发明实施例2中植物无菌水培装置的结构示意图；
[0036]图6为图5的剖面结构示意图；
[0037]图7为苜蓿根瘤菌结瘤效果评价图；其中，A为所接根瘤菌菌株为苜蓿中华根瘤菌17576，B为所接根瘤菌为苜蓿中华根瘤菌17581，C为未接菌对照。
【具体实施方式】
[0038]实施例1
[0039]如图1?图4所示，一种植物无菌水培装置，包括玻璃杯I和固定在其内部的底部的至少一个滤网2，在滤网2内设置有培养基质3，玻璃杯I的顶部开口采用封口膜4封口，在玻璃杯I内设置有水培液5，水培液5的液面高度低于培养基质3的上表面。
[0040]玻璃杯I的内部的底部中心位置设置有固定柱6，滤网2的底部设置有与固定柱6相匹配的固定孔7，固定孔7穿过固定柱6固定在玻璃杯I的底部，滤网2为不锈钢筒状滤网，滤网2的顶部直径大于底部直径。
[0041]滤网2采用厚度为0.5mm、孔密度为10目的不锈钢滤网制作而成，滤网2的底部外径为40mm，顶部外径为43mm，高度为50mm ;固定孔6的直径为10mm。
[0042]滤网2为一个，玻璃杯I的侧壁的下部设置有换液口 8，换液口 8采用锥形橡胶塞9密封，换液口 8为圆柱形管体，长度为5mm，内径为8mm、外径为10mm，其一端与玻璃杯I的下部相连，另一端采用锥形橡胶塞8密封，锥形橡胶塞8的长度为10_，一端直径为5_，另一端直径为10mm。培养基质3为粒径3?5mm的石英砂，水培液5为Hogland营养液或无氮MS营养液。
[0043]玻璃杯I为圆桶形，侧壁和底部的厚度为3mm，内径为94mm，外径为100mm，高度为200?300mm，固定柱6为圆柱形玻璃柱，直径为8mm，高度为30mm。
[0044]实施例2
[0045]如图1、图2、图5和图6所示，一种植物无菌水培装置，包括玻璃杯I和固定在其内部的底部的至少两个滤网2，在滤网2内设置有培养基质3，玻璃杯I的顶部开口采用封口膜4封口，在玻璃杯I内设置有水培液5，水培液5的液面高度低于培养基质3的上表面。
[0046]玻璃杯I的内部的底部中心位置设置有固定柱6，滤网2的底部设置有与固定柱6相匹配的固定孔7，固定孔7穿过固定柱6固定在玻璃杯I的底部，滤网2为不锈钢筒状滤网，滤网2的顶部直径大于底部直径。滤网2采用厚度为0.5_、孔密度为10目的不锈钢滤网制作而成，滤网2的底部外径为40mm，顶部外径为43mm，高度为50mm ;固定孔6的直径为10mm。滤网2为多个，多个滤网2上下叠加到设计高度，最底部的滤网2固定在玻璃杯I的底部，在最上端的滤网2中设置有培养基质3，相邻两个滤网2之间的叠加部分的高度为30mmo
[0047]玻璃杯I的侧壁的下部设置有换液口 8，换液口 8采用锥形橡胶塞9密封。换液口 8为圆柱形管体，长度为5mm，内径为8mm、外径为10mm，其一端与玻璃杯I的下部相连，另一端采用锥形橡胶塞8密封，锥形橡胶塞8的长度为10_，一端直径为5_，另一端直径为10mm。培养基质3为粒径3?5mm的石英砂，水培液5为Hogland营养液或无氮MS营养液。玻璃杯I为圆桶形，侧壁和底部的厚度为3mm，内径为94mm，外径为100mm，高度为200?300mm,固定柱6为圆柱形玻璃柱，直径为8mm，高度为30mm。
[0048]实施例3
[0049]采用本发明实施例1或实施例2所述的植物无菌水培装置进行水培苜蓿的根瘤菌接菌及结瘤效果的评价方法，包括如下步骤:
[0050](A)、将盛放满石英砂的滤网2与玻璃杯I组合，用封口膜4将杯口密封，使用锥形橡胶塞9将底部开孔密封，组合后在121°C下湿热灭菌30min后放入超净台备用；配制无氮MS水培液，121°C下湿热灭菌30min放入超净台备用。
[0051](B)、将0.1mL根瘤菌保存液接种于1mL液体YEB培养基中，在摇床中200r/min，28°C振荡培养10?20小时，根瘤菌培养至浓度达到OD6qq= 0.5?0.8时备用。筛选籽粒饱满的苜蓿种子，使用75%酒精消毒15min，然后用灭菌蒸馏水冲洗三遍，每遍lmin。取ImL刚摇好的根瘤菌菌液浸泡灭菌后的苜蓿种子I?2h。打开上述植物无菌水培装置的封口膜4，将浸泡根瘤菌的苜蓿种子I?2粒放入滤网2中的石英砂表面，从玻璃杯I内侧壁加入经高温灭菌的无氮MS水培液，液面高度不高于石英砂表面高度，然后用封口膜4将玻璃杯I的上口密封，上述播种操作在超净工作台内完成。将播种后的无菌水培装置置于人工气候箱中培养。
[0052](C)、每6?10天在超净台中更换一次水培液，更换无氮MS水培液时将玻璃杯I底部锥形橡胶塞9取出使水培液5经换液口流出，待无氮MS水培液全部流出后重新使用锥形橡胶塞9密封换液口，打开上部封口膜4沿内侧壁加入新的无氮MS水培液，新加入无氮MS水培液的液面高度随着苜蓿苗根的生长逐渐降低，最终液面高度低于培养基质3表面30?50mmo
[0053](D)、经根瘤菌接菌水培30天以上的苜蓿苗可用于结瘤效果的观察评价。
[0054]实施例4
[0055]采用本发明实施例1或实施例2所述的植物无菌水培装置进行水培苜蓿的根瘤菌接菌及结瘤效果的评价方法，包括如下步骤:
[0056](a)、准备工作:将装有培养基质3的滤网2与玻璃杯I组合，配制Hogland水培液和无氮MS水培液；将所述Hogland水培液沿所述玻璃杯I的内侧壁加入到所述玻璃杯I内，液面高度低于培养基质表面3高度，用封口膜4将所述玻璃杯I的上口密封，形成植物无菌水培装置，在121°C下湿热灭菌30min后放入超净台备用；
[0057](b)、打开所述植物无菌水培装置的所述封口膜4，选取发芽5天生长健壮的无菌苜蓿幼苗，将无菌苜蓿幼苗放入所述滤网2中的培养基质表面3，然后用所述封口膜4将所述玻璃杯I 口密封，上述操作均在超净工作台内完成；将移栽无菌苗的所述植物无菌水培装置置于人工气候箱中培养；
[0058](c)、每6?10天在超净台中更换一次水培液5，更换Hogl