专利名称：一种羊肚菌多糖的制备方法
技术领域：
本发明属于食用菌资源开发技术领域，具体地说是从液体发酵获得的羊肚菌菌丝体中提取羊肚菌多糖的方法。
背景技术：
羊肚菌的营养相当丰富，据测定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38. 1%，还含有多种氨基酸，特别是谷氨酸含量高达I. 76 %。因此，被认为是“十分好的蛋白质来源”，并有“素中之晕”的美称。人体中的蛋白质是由2 0种氨基酸搭配而组成的，而羊肚菌就含有I 8种，其中8种氨基酸是人体不能制造的，但在人体营养上显得格外重要，所以被称之为“必需氨基酸”。另外，据测定羊肚菌至少含有8种维生素维生素B工、维生素B
2、维生素B 12、烟酸、泛酸、吡卩岁醇、生物素、叶酸等。羊肚菌的营养成份，可与牛乳、肉和鱼粉相当。因此，国际上常称它为“健康食品”之一。羊肚菌除了味道鲜美、营养丰富之外，还具有补肾、壮阳、补脑、提神的功能，主治肾亏损、阳萎不举、性欲冷淡，对头晕失眠、肠胃炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不振有良好的治疗作用，同时也可防癌、抗癌、预防感冒，增强人体免疫力的效果，在医学上有重要的价值。羊肚菌的研究历史已将近100年，内容较多，它的人工驯化栽培一直是国内外菌物学家致力研究探索的课题之一。近几年，国内对羊肚菌的研究也有多篇报道，主要限于资源考察、菌种分离鉴定及菌核发生条件的试验等初级工作。国内外虽有报道称已实现羊肚菌的人工栽培，但目前人工栽培技术仍未成熟，迄今为止未见商品化人工栽培羊肚菌成功的报道。在羊肚菌的人工栽培过程中，仍有一些技术难题没有彻底解决。由于人工培养羊肚菌的菌丝体相对容易，并且菌丝体和子实体的营养成分是十分接近的，所以可以利用羊肚菌菌丝体提取羊肚菌的主要功效成分——羊肚菌多糖，实现羊肚菌资源的可持续利用。
发明内容
本发明的目的在于针对野生羊肚菌资源不足、采集困难的现状，提供一种低成本、高质量的羊肚菌多糖的制备方法。本发明的目的是这样实现的称取黄豆芽200克、切成5 —10毫米厚薄片的苹果100克，加1500毫升水煮沸30分钟，用纱布过滤，在滤液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁I克，PH自然，用水定容至2000毫升。搅拌均匀，121°C灭菌30分钟，冷却至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面种子，15—20°C，旋转摇床150rpm，培养7天。培养结束后过滤发酵液得羊肚菌菌丝体，然后将羊肚菌菌丝体在50— 60°C条件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌丝体。将羊肚菌干菌丝体粉碎至20目，加入20倍水，1%的纤维素酶(10000u/g)保持温度50— 55 V，反应时间为40— 50 min水解菌丝体细胞壁，然后提温到85— 90°C灭酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降温到65°C，用0.3% — 0.5%的活性炭保温65 °C脱色40—50分钟，离心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇终体积分数为75%，离心取沉淀，在50— 60°C条件下干燥至含水10%以下，SP得羊肚菌多糖粗品。(四)、具体实施方案
称取黄豆芽200克、切成5 —10毫米厚薄片的苹果100克，加1500毫升水煮沸30分钟，用纱布过滤，在滤液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁I克，PH自然，用水定容至2000毫升。搅拌均匀，121°C灭菌30分钟，冷却至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面种子，180C，旋转摇床150rpm，培养7天。培养结束后过滤发酵液得羊肚菌菌丝体，然后将羊肚菌菌丝体在55°C条件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌丝体。将羊肚菌干菌丝体粉碎至20目，称取羊肚菌菌丝体干粉10克，加入200ml水，0. Ig的纤维素酶(10000u/g)保持温度55 0C ,反应时间为45 min，然后提温到90°C灭酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降温到65°C，加0. Sg的活性炭保温65 °C脱色45分钟，离心除去
沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇终体积分数为75%，离心取沉淀，在55°C条件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
权利要求
1.一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是称取黄豆芽200克、切成5-10毫米厚薄片的苹果100克，加1500毫升水煮沸30分钟，用纱布过滤，在滤液中加入白砂糖40克、蛋白胨2克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁I克，PH自然，用水定容至2000毫升。搅拌均匀，121°C灭菌30分钟，冷却至20°C，接入粗柄羊肚菌As5. 382斜面种子，15-20°C，旋转摇床150rpm，培养7天。培养结束后过滤发酵液得羊肚菌菌丝体，然后将羊肚菌菌丝体在50-60°C条件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌干菌丝体。将羊肚菌干菌丝体粉碎至20目，加入20倍水，I %的纤维素酶(10000u/g)保持温度50-55°C，反应时间为40-50min水解菌丝体细胞壁，然后提温到85-900C灭酶并保持90min浸提羊肚菌多糖，然后降温到65°C，用0. 3 % -0. 5 %的活性炭保温65°C脱色40-50分钟，离心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇终体积分数为75%，离心取沉淀，在50-60°C条件下干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
2.根据权利要求I所述的一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是将羊肚菌干菌丝体粉碎至20目，加入20倍水，I %的纤维素酶(10000u/g)保持温度50-55°C，反应时间为40-50min水解菌丝体细胞壁。
3.根据权利要求I所述的一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是水解细胞壁后，提温到85-90°C灭酶并保持90min浸提羊肚菌多糖。
4.根据权利要求I所述的一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是水浸提后的溶液需用0. 3-0. 5%活性炭保温65°C脱色40-50分钟。
5.根据权利要求I所述的一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是脱色后的水溶液离心除去沉淀，上清液中加入95%乙醇，使乙醇终体积分数为75%，离心取沉淀。
6.根据权利要求I所述的一种羊肚菌多糖的制备方法，其特征是醇沉后的离心沉淀，在50-60°C条件下干燥至含水10%以下，即为羊肚菌多糖粗品。
全文摘要
一种羊肚菌多糖的制备方法属于食用菌资源开发技术领域，具体地说是从液体发酵获得的羊肚菌菌丝体中提取羊肚菌多糖的方法。配制羊肚菌液体培养基，121℃灭菌30分钟，冷却至20℃，接入粗柄羊肚菌As5.382斜面种子，15—20℃，旋转摇床150rpm,培养7天。培养结束后过滤发酵液得羊肚菌菌丝体，然后将羊肚菌菌丝体在50—60℃条件下干燥至含水10%以下并粉碎至20目,加入20倍水,1%的纤维素酶(10000u/g)保持温度50—55℃,反应时间为40—50min，然后提温到85—90℃灭酶并保持90min浸提羊肚菌多糖,然后用活性炭脱色、离心除去沉淀,上清液中加入95%乙醇、离心取沉淀，将沉淀物干燥至含水10%以下，即得羊肚菌多糖粗品。
文档编号C12R1/645GK102808009SQ201110143720
公开日2012年12月5日 申请日期2011年5月31日 优先权日2011年5月31日
发明者吕伟民, 宋殿峰, 张劲松 申请人:黑龙江省麒麟工贸公司