一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺方法。在金霉素发酵培养基中添加一定量的硫酸锌和三氯化铁，从而达到提高金霉素产量的目的。本发明在常规发酵培养基中添加500ppm硫酸锌和1ppm三氯化铁，发酵水平超过原工艺水平，中试效价及产量均有提高，并为下一阶段工业放大应用奠定良好基础。
【专利说明】一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种金霉素的发酵工艺优化方法，特别是一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺。
【背景技术】
[0002]金霉素的发酵生产方法，是由金色链霉菌作为出发菌株，经过纯种培养、三级发酵生成金霉素，具体工艺步骤包括砂土孢子制备、母瓶斜面孢子制备、子瓶斜面孢子制备、一级种子制备、二级种子制备、发酵制备。现有的金霉素的发酵生产只是一些比较常规的发酵生产方式，发酵单位及产量仍有提高空间。
[0003]金属离子是金霉素发酵培养基中存在的微量元素，对微生物的生长发酵具有巨大的影响。其中铁离子是菌体细胞、细胞色素氧化酶和过氧化酶的辅基，对菌丝体生长发育是必须的微量元素。锌离子是所有生物体必需的微量元素之一，是多种蛋白的辅酶并参与催化生物体内的一些重要生化反应。添加锌离子对于一些产抗菌株如脱氮假单孢菌和林可链霉菌的发酵也有着提高产量的作用。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺。本发明采用以下方式来实现:
一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺，发酵工艺为将母瓶斜面孢子接种至子瓶斜面，在温度32 土 1°C，湿度40-65%的条件下培养3-5天；取子瓶孢子接种至种子培养基，28°C，培养20-26h ;按1 2%接种量接种于发酵摇瓶中，28°C，200r/min，培养166h。本发明在发酵培养基中添加硫酸锌和三氯化铁，使发酵摇瓶或发酵罐中锌离子和铁离子的浓度分别为500ppm和lppm。
[0005]与现有技术比较，本发明既提高了发酵水平及产量，其生产成本又低，可大规模应用于生产；另外，其操作简单，在常规发酵培养基中添加一定量的金属离子，灭菌即可。所以，本发明优化了现有配方，提高了发酵水平，为工业放大应用奠定良好基础。
【专利附图】
【附图说明】
[0006]图1为本发明的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0007]以下通过实施例对本发明进行阐述，但本发明的保护范围并不局限于此。
[0008]实施例1:将母瓶斜面孢子接种至子瓶斜面，在温度32± I°C，湿度40-65%的条件下培养3-5天；取子瓶孢子接种至种子培养基，28°C，培养20-26h ;按12%接种量接种于发酵摇瓶中，28°C，200r/min，培养166h。在配制发酵培养基时，向其中添加硫酸锌和三氯化铁，使发酵摇瓶中锌离子和铁离子的浓度分别为500ppm和lppm。[0009]实施例2:将母瓶斜面孢子接种至子瓶斜面，在温度32± I°C，湿度40-65%的条件下培养3-5天；取子瓶孢子接种至种子培养基，28°C，培养20-26h ;按12%接种量接种于发酵摇瓶中，28°C，200r/min，培养166h。在配制发酵培养基时，向其中添加硫酸锌和三氯化铁，使发酵摇瓶中锌离子和铁离子的浓度分别为1000ppm和0.5ppm。
[0010]实施例3:将母瓶斜面孢子接种至子瓶斜面，在温度32± 1°C，湿度40-65%的条件下培养3-5天；取子瓶孢子接种至种子培养基，28°C，培养20-26h ;按12%接种量接种于发酵摇瓶中，28°C，200r/min，培养166h。在配制发酵培养基时，向其中添加硫酸锌和三氯化铁，使发酵摇瓶中锌离子和铁离子的浓度分别为1000ppm和lppm。
[0011]实施例4:
如实施例1的方法，将一定量的锌离子和铁离子添加到发酵培养基中，进行摇瓶发酵。
[0012]表1.锌离子和铁离子添加工艺在摇瓶上的实验结果
【权利要求】
1.一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺，其特征在于:将母瓶斜面孢子接种至子瓶斜面，在温度32±1°C，湿度40-65%的条件下培养3-5天；取子瓶孢子接种至种子培养基，28°C，培养20-26h ;按12%接种量接种于发酵摇瓶中，28°C，200r/min，培养166h ;在发酵培养基中添加硫酸锌和三氯化铁，使发酵摇瓶或发酵罐中锌离子和铁离子的浓度分别为 500ppm 和 lppm。
2.一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺，其特征在于:在发酵培养基中添加硫酸锌，使发酵摇瓶或发酵罐中锌离子浓度为500ppm。
3.一种添加金属离子提高金霉素产量的发酵工艺，其特征在于:在发酵培养基中添加三氯化铁，使发酵摇瓶或发酵罐中铁离子浓度为lppm。
【文档编号】C12R1/49GK103614446SQ201310504063
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年10月24日 优先权日:2013年3月29日
【发明者】张雪峥, 刘世民, 孙庆峰 申请人:驻马店华中正大有限公司