一种测定药剂对水稻纹枯病菌毒力的方法
【专利摘要】本发明公开一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法，其包括以下步骤：1）将杀菌剂加入PSA培养基中制成含药培养基，杀菌剂设置高、低2个质量浓度处理，每个处理重复3次；2）用5mm打孔器打取生长3d的水稻纹枯病菌菌饼，分别接种于含药培养基上，28℃培养42h至对照菌落长至全皿；3）当菌落长满培养皿时观察培养皿内有无菌核形成。本方法只需要制作1-2浓度含药PSA平皿，与传统的菌丝生长抑制法具有省时省力的优点。
【专利说明】一种测定药剂对水稻纹枯病菌毒力的方法 【技术领域】
[〇〇〇1] 本发明涉及一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法。 【背景技术】
[0002] 水稻纹枯病是水稻的三大病害之一，在我国各稻区均有发生。植株受害后，一 般造成减产10?30%，严重时可减产60%以上。引起水稻纹枯病病原菌为立枯丝核菌 (Rhizoctonia solani)，属半知菌亚门丝核属。植物病原菌菌丝在PDA培养基上生长速度 快，在适宜温湿度条件下，3-4天左右菌丝即可布满直径为7厘米的PDA平皿，并开始形成黑 褐色菌核。
[0003] 常规药剂对纹枯病菌毒力测定采用菌丝生长速率抑制法，即根据菌丝在含有药剂 的PDA培养基中生长速度，计算出各种药剂的不同浓度对菌丝生长的抑制率，评价药剂对 纹枯病菌的毒力。
[0004] 杀菌剂种类不同，作用机制千差万别。有的杀菌剂对水稻纹枯病菌丝生长抑制强 烈，但田间防效很差，如咪鲜胺。而有的杀菌剂虽然室内毒力测定对菌丝生长抑制弱，但田 间对水稻纹枯病防效优秀，如井R霉素。因此，单纯依靠能否有效抑制菌丝生长来判断一个 杀菌剂的药效，对筛选纹枯病防治药剂存在一定的缺陷。
【发明内容】
[0005] 发明目的：针对现有技术的不足，本发明针对水稻纹枯病菌的药剂室内毒力测定 提供一种有别于"菌丝生长抑制"的毒力评价方法。具体是通过水稻纹枯病菌丝是否在含 有杀菌剂的培养基上形成菌核来判断药剂对纹枯病菌的毒力。该方法不需要采用系列浓度 的含药培养基进行菌丝生长测定，而只要1-2个药剂浓度即可判断药剂是否对水稻纹枯病 菌具有毒力，具有省时省力的优点。而且这种毒力测定结果与田间试验效果相符合。
[0006] 技术方案：为了解决上述问题，本发明提供了一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒 力的方法，包括以下步骤：
[0007] 1)将杀菌剂加入PSA培养基中制成含药培养基，杀菌剂设置2个质量浓度处理，每 个处理重复3次；
[0008] 2)用5mm打孔器打取生长3d的水稻纹枯病菌菌饼，分别接种于含药培养基上， 28°C培养42h至对照菌落长至全皿；
[0009] 3)当菌落长满培养皿时观察培养皿内有无菌核形成。
[〇〇1〇] 其中，上述杀菌剂为嘧菌酯或咪鲜胺。
[〇〇11] 当杀菌剂为嘧菌酯时，所述2个质量浓度分别为0. 5 μ g/mL和100 μ g/mL。
[0012] 当杀菌剂为咪鲜胺时，所述2个质量浓度分别为0. 5 μ g/mL和200 μ g/mL。
[0013] 有益效果：本发明是一种评价杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法。该方法有别于 常规的菌丝生长抑制法，是通过检测药剂是否能有效抑制菌核形成而判断对水稻纹枯病菌 毒力，本方法只需要制作1-2浓度含药PSA平皿，与传统的菌丝生长抑制法具有省时省力的 优点。本发明的水稻纹枯病菌毒力评价效果与田间药效高度吻合。本发明不用计算，只需 通过观察菌核直径来判断杀菌剂的药效。 【具体实施方式】
[0014] 下面结合【具体实施方式】，进一步阐述本发明。
[0015] 实施例1 :
[〇〇16] 将嘧菌酯加入PSA培养基中制成系列浓度平皿，将嘧菌酯原药设置2个质量浓度 处理：0. 5μ g/mL和100μ g/mL ;井R霉素用PSA培养基稀释配制成浓度为0. 5μ g/mL和 200 μ g/mL ;无药PSA培养基平板为对照；每个处理重复3次；用5mm打孔器打取生长3d的 水稻纹枯病菌菌饼置于各浓度含药培养基上和无药PSA培养基上，28°C培养42h至对照菌 落长至全皿时，观察培养皿内有无菌核形成。
[0017] 实验结果表明，含有嘧菌酯的PSA平皿的结果：两个浓度培养皿中虽然长满了菌 丝，但两个浓度无菌核形成。含井R霉素 PSA平皿的结果：虽然长满了菌丝，但各浓度均无 纹枯病菌核的形成。对照不含有药剂的培养皿的结果：菌丝长满培养皿而且其中形成大量 的菌核。
[0018] 实施例2
[〇〇19] 将咪鲜胺加入PSA培养基中制成系列浓度平皿，将咪鲜胺原药设置2个质量浓度 处理：0. 5μ g/mL和200μ g/mL ;井R霉素用PSA培养基稀释配制成浓度为0. 5μ g/mL和 200 μ g/mL ;无药PSA培养基平板为对照；每个处理重复3次；用5mm打孔器打取生长3d的 水稻纹枯病菌菌饼接种于各浓度含药培养基上，28°C培养42h至对照菌落长至全皿时，测 量处理菌落直径并观察培养皿内有无菌核形成。
[0020] 实验结果表明，含咪鲜胺2浓度PSA平皿的结果：均无菌丝生长，更无菌核形成。 含井R霉素 PSA平皿的结果：培养皿长满了菌丝，但各浓度均无纹枯病菌菌核形成。而对照 不含有井R霉素的培养皿的结果：菌丝长满培养皿而且其中形成大量的菌核。
[0021] 应用实例：
[0022] 在田间水稻纹枯病发生时期，按照实施例1、实施例2中的药剂种类和最高浓度 (嘧菌酯100 μ g/mL，咪鲜胺200 μ g/mL)喷雾进行水稻纹枯病田间小区药剂防治试验。试 验结果表明，在平皿中完全抑制菌丝生长的药剂咪鲜胺对水稻纹枯病几乎没有防效，而嘧 菌酯虽然不能抑制菌丝生长，但田间对水稻纹枯病防效优秀。
[0023] 对照不施药：结果见表1。
[0024] 表1、嘧菌酯、咪鲜胺对水稻纹枯病田间防效
[0025]
【权利要求】
1. 一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 将杀菌剂加入PSA培养基中制成含药培养基，杀菌剂设置2个质量浓度处理，每个处 理重复3次； 2) 用5 mm打孔器打取生长3 d的水稻纹枯病菌菌饼，分别接种于含药培养基上，28°C 培养42 h至对照菌落长至全皿； 3) 当菌落长满培养皿时观察培养皿内有无菌核形成。
2. 根据权利要求1所述的一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法，其特征在于， 所述杀菌剂为嘧菌酯或咪鲜胺。
3. 根据权利要求2所述的一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法，其特征在于， 当杀菌剂为嘧菌酯时，所述2个质量浓度分别为0. 5 μ g/mL和100 μ g/mL。
4. 根据权利要求2所述的一种测定杀菌剂对水稻纹枯病菌毒力的方法，其特征在于， 当杀菌剂为咪鲜胺时，所述2个质量浓度分别为0. 5 μ g/mL和200 μ g/mL。
【文档编号】C12R1/645GK104087651SQ201410324026
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月8日 优先权日:2014年7月8日
【发明者】杨红福, 姚克兵, 束兆林, 吉沐祥, 缪康, 赵来成, 费子华, 吴祥, 陈源, 王莉莉, 张建华, 龚帮东, 朱成刚, 邵春, 王健 申请人:江苏省绿盾植保农药实验有限公司