出血性大肠杆菌o157:h7选择性显色培养基及其检测试纸的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种出血性大肠杆菌O157：H7选择性显色培养基，其中每1000mL培养基含有如下重量的组分：结晶紫中性红胆盐琼脂15-25g、特异性酶显色底物5-25g、二甲基甲酰胺0.05-20g、酵母粉1-5g、山梨醇1-8g、头孢克肟15-25g、鼠李糖2-8g、亚碲酸钾2-7g、水杨苷1-5g、氯化钠5-10g、月桂基硫酸钠0.1-0.3g、万古霉素0.02-0.05g、余量为水。本发明还提供了一种含有所述出血性大肠杆菌O157：H7选择性显色培养基的检测试纸。本发明在CT-SMAC培养基基础上添加水杨苷、万古霉素，进一步提高选择性和特异性，检出率高、检出时间短。
【专利说明】出血性大肠杆菌0157 :H7选择性显色培养基及其检测试纸
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种适用于出血性大肠杆菌0157 :H7的选择性显色培养基，以及采用 该选择性显色培养基的检测试纸。
【背景技术】
[0002] 产志贺毒素大肠杆菌（shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)也称为 产vero毒素大肠杆菌，是近来新出现的最重要的食源性病原菌。STEC主要引起胃肠炎和一 系列并发症，如出血性腹泻（HC)和导致儿童肾衰竭的溶血性尿毒综合征（HUs)。肠出血性 大肠杆菌（enterohaemorrhagic Escherichia coli，EHEC)0157 :H7 是其中一种。反当动 物，特别是牛、山羊和绵羊已被认定是其重要宿主。它通过被污染的未煮熟的肉类、未消毒 的牛奶和被粪便污染的蔬菜和水等传播，人-人之间的密切接触传播也有报道。大部分引 起HC和HUS的爆发和散发病例与0157 :H7有关。
[0003] 0157可以迅速的分解乳糖，因此在麦康凯琼脂培养基上无法和其他大肠杆菌相区 另IJ。然而不像大约80%的其他大肠杆菌，大部分0157经过培养后，不分解山梨醇。因此利 用这个特性建立了山梨醇-康凯琼脂（SMC)培养方法，用山梨醇取代麦康凯琼脂中的乳 糖，便可制备SMAC。已证明SMAC对分离0157是很有效的选择性培养基之一，目前被广泛用 于实验室临床诊断。然而，近几年在世界各地发现了分解山梨醇的0157菌株，因此分离过 程中应注意山梨醇发酵阳性菌株的挑取，以防漏检。
[0004] 一些非0157血清型的大肠埃希菌也不发酵山梨醇；同时一些其他种属的非发酵 山梨醇细菌也存在于人和动物的粪便中，特别是变形杆菌属和气单胞菌属细菌。基于这种 情况，这就需要发展能抑制粪便中不发酵山梨醇的细菌生长的培养基。头孢克肟能抑制变 形杆菌的生长而不抑制大肠杆菌，0157不发酵鼠李糖，而大部分不发酵山梨醇的大肠杆菌 发酵鼠李糖。于是，人们就制备了头孢克肟-鼠李糖-山梨醇麦康凯培养基（CR-SMC)。亚 碲酸钾80年前就被用于病原菌的分离，包括棒状杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧 菌和志贺氏菌。它对0157也具有选择性，于是发展了头孢克肟-亚碲酸钾-山梨醇麦康凯 培养基（CT-SMAC)。然而，仍然有某些细菌能在CT-SMAC上形成与0157相似的菌落，使得在 CT-SMAC平板上选择0157的困难增加。
【发明内容】
[0005] 本发明提供一种适用于出血性大肠杆菌0157 :H7的选择性显色培养基，以及采用 该选择性显色培养基的检测试纸，以克服现有技术存在的上述缺陷。
[0006] 本发明首先涉及一种出血性大肠杆菌0157 :H7选择性显色培养基，其中每IOOOmL 培养基含有如下重量的组分：
[0007]
【权利要求】
1. 一种出血性大肠杆菌0157 :H7选择性显色培养基，其特征在于，其中每IOOOmL培养 基含有如下重量的组分： 结晶紫中性红胆盆球脂 15_25g、 特异性酶显色底物 5-2 5g、 二曱基曱酰胺 0. 05-20g、 酵母粉 l-5g、 山梨醇 l-8g、 头孢克肟 15-25g、 鼠李糖 2-8 g、 亚碲酸钾 2-7 g、 水杨苷 l-5g、 氯化钠 5-1 Og、 月桂基石/u酸納 0. 1-0. 3g、 万古霉素 0. 02-0. 05g、 余量为水。
2. 如权利要求1所述的出血性大肠杆菌0157 :H7选择性显色培养基，其特征在于，所 述特异性酶显色底物是5-溴-4-氯-3-吲哚-a -D-葡萄糖苷。
3. -种出血性大肠杆菌0157 :Η7选择性显色培养基检测试纸，其特征在于，其中至少 含有一吸附有权利要求1或2所述出血性大肠杆菌0157 :Η7选择性显色培养基的吸水滤 纸。
【文档编号】C12Q1/10GK104372066SQ201410681195
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月24日 优先权日:2014年11月24日
【发明者】金京勋 申请人:苏州嘉禧萝生物科技有限公司