本发明属于功能食品和健康食品领域，具体涉及一种儿茶素卵清蛋白共价物稳定化鱼油制剂及其制备方法。
背景技术：
鱼油中富含多不饱和脂肪酸，是一种优质的动物油脂资源。多不饱和脂肪酸指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂肪酸，可分为ω-3和ω-6多不饱和脂肪酸。ω-3不饱和脂肪酸中对人体最重要的两种不饱和脂肪酸是DHA和EPA。EPA是二十碳五烯酸，具有清理血管中的垃圾(胆固醇和甘油三酯)的功能。DHA是二十二碳六烯酸，具有软化血管、健脑益智、改善视力的功效。
许多研究显示食用具有长链ω-3脂肪酸的食物与减少冠心病的风险有关。必需脂肪酸对胎儿及婴儿的生长发育极其重要，特别是脑部和视力的发育。但是鱼油中多不饱和脂肪酸，极易发生氧化，并且鱼油的水不溶性也极大的限制了其在食品中的应用。因此鱼油在食品中应用需要添加乳化剂和抗氧化剂以实现其加工和储运稳定性。
鸡蛋因其营养价值高、味道鲜美等优点成为日常生活的主要食物之一,由于蛋黄中富含卵磷脂、ω-3脂肪酸、胆碱等生物活性物质，实现了其高效利用。但人们对蛋清重视不够，甚至废弃不用。拓宽蛋清的应用范围意义重大。鸡蛋清中的主要蛋白是卵清蛋白，为鸡蛋中的贮藏蛋白，具有发泡性、凝胶性及乳化性等功能性质，是一种优良的食品乳化剂。不足之处是卵清蛋白的抗氧化性比较弱，通常需要额外添加抗氧化剂，但是二者结合效果有时不理想。因此利用我国特色茶叶资源中的天然抗氧化物质儿茶素，开发一种具有抗氧化功能的卵清蛋白获得稳定的鱼油制剂，具有重要价值。
技术实现要素：
本发明提供了一种儿茶素卵清蛋白共价物及其制备方法，该儿茶素卵清蛋白共价物可作为稳定剂，尤其可作为抗氧化剂使用，且制备方法简单，原料来源广泛易得。
本发明提供了一种儿茶素卵清蛋白共价物稳定化鱼油制剂及其制备方法，该鱼油制剂的氧化稳定性大大提高，延长了货架期，且制备方法简单，原料来源广泛易得。
一种儿茶素卵清蛋白共价物稳定化鱼油制剂的制备方法，包括以下配方和制作步骤：
(1)以儿茶素和卵清蛋白为原料通过接枝制备儿茶素卵清蛋白共价物；
(2)利用得到的儿茶素卵清蛋白共价物制备稳定化的鱼油制剂。
作为优选，所述的接枝为将儿茶素接枝到卵清蛋白上。
作为优选，所述的儿茶素通过自由基方法引发到卵清蛋白上的接枝反应。所述儿茶素通过自由基反应接枝到卵清蛋白上。
作为优选，所述的自由基通过L-抗坏血酸与过氧化氢氧化还原对产生。
作为优选，所述的L-抗坏血酸与过氧化氢氧化摩尔比为1:(5-50)，优选为1:(5-10)。
作为优选，所述的儿茶素与抗坏血酸的摩尔比为1:(1-50)，优选为1:(1-5)。
作为优选，所述的儿茶素与卵清蛋白的质量比为(0.1-5):5，优选为(0.2-2.5)：5，进一步优选为(1-1.5):5。
作为优选，步骤(1)反应完成后，得到的儿茶素卵清蛋白共价物通过透析进行精制提纯，透析选用半透膜截留分子量为12000-14000道尔顿，通过该过程脱除未接枝的儿茶素。
作为优选，儿茶素卵清蛋白共价物制备完成后，进一步用于制备鱼油制剂，包括如下步骤：
(2-1)鱼油与制备好的儿茶素卵清蛋白共价物进行高速搅拌混合，制备得到粗乳液；
(2-2)将粗乳液进行高压均质制备得到最终的稳定化鱼油制剂；
作为优选，上述步骤(2-1)中，所述儿茶素卵清蛋白共价物可以采用儿茶素卵清蛋白共价物水溶液的方式与鱼油混合，所述儿茶素卵清蛋白共价物水溶液的质量百分比浓度为0.5-5％，进一步优选为1-2％。作为优选，所述鱼油与儿茶素卵清蛋白共价物的质量比为1:(1-0.01)，优选为1:(0.5-0.05)，进一步优选为1：(0.05-0.2)。
上述步骤(2-1)中，所述高速搅拌混合可以采用机械搅拌，搅拌速度一般为8000-15000rpm。搅拌时间为10-40分钟。
作为优选，所述高压均质是在50-80MPa条件下进行。
本发明所用的鱼油可从市场上购得，比如可以是市购的70％的EPA/DHA(20/50)等。
本发明还提供了一种由上述任一方法制备得到的儿茶素卵清蛋白共价物，可作为稳定剂，比如抗氧化剂等使用。作为优选，所述得到的卵清蛋白表没食子儿茶素没食子酸酯共价物可作为鱼油抗氧化剂使用。
本发明还提供了一种由上述任一方法制备得到的儿茶素卵清蛋白共价物稳定化鱼油制剂。所述制剂一般为乳液制剂；当然也可为其他容易制得的制剂剂型，比如颗粒剂，丸剂等。
本发明的反应在室温下进行。
本发明相对于现有鱼油制剂稳定化方法具有如下优点及效果：
(1)本发明的儿茶素卵清蛋白共价物有很好的抗氧化性能。
(2)本发明的儿茶素卵清蛋白共价物能够很容易与鱼油形成稳定的乳液制剂，鱼油制剂粒径稳定性和抗氧化稳定性均明显提高；特别是粒径稳定性更是显著提高，根据实施例检测结果，本发明制得的儿茶素卵清蛋白共价物稳定化鱼油制剂的14天粒径稳定性是未改性的卵清蛋白的19倍。
(3)本发明的儿茶素、卵清蛋白，原料来源广泛、价格便宜、制作工艺简便，适用于工业化生产应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
将1克卵清蛋白溶解于100mL水中，氮气保护下加入1毫升过氧化氢(10M)和0.25克L-抗坏血酸，25摄氏度反应2小时后，加入儿茶素(0.7mmol)再反应24小时。反应结束后透析(截留分子量：12000-14000道尔顿)除去未反应的儿茶素，冷冻干燥得到儿茶素卵清蛋白共价物(收率为70％)。然后将得到的儿茶素卵清蛋白共价物配制成1％水溶液，鱼油与该水溶液以质量比1:9进行加料，在10000rpm转速下高速混合10分钟，形成粗乳液。在此基础上，进行60MPa高压均质制备得到最终鱼油乳液制剂。
所用的鱼油从市场上购得，包括70％的EPA/DHA(20/50)。
实施例2
将1克卵清蛋白溶解于100mL水中，氮气保护下加入1毫升过氧化氢(10M)和0.35克L-抗坏血酸，25摄氏度反应2小时后，加入儿茶素(0.8mmol)再反应24小时。反应结束后透析(截留分子量：12000-14000道尔顿)除去未反应的儿茶素，冷冻干燥得到儿茶素卵清蛋白共价物(收率为75％)。然后将得到的儿茶素卵清蛋白共价物配制成1.2％水溶液，鱼油与该水溶液以质量比1:9进行加料，在10000rpm转速下高速混合10分钟，形成粗乳液。在此基础上，进行60MPa高压均质制备得到最终鱼油乳液制剂。
所用的鱼油从市场上购得，包括70％的EPA/DHA(20/50)。
实施例3
将1克卵清蛋白溶解于100mL水中，氮气保护下加入1毫升过氧化氢(10M)和0.20克L-抗坏血酸，25摄氏度反应2小时后，加入儿茶素(0.7mmol)再反应24小时。反应结束后透析(截留分子量：12000-14000道尔顿)除去未反应的儿茶素，冷冻干燥得到儿茶素卵清蛋白共价物(收率为73％)。然后将得到的儿茶素卵清蛋白共价物配制成1.1％水溶液，鱼油与该水溶液以质量比1:9进行加料，在10000rpm转速下高速混合10分钟，形成粗乳液。在此基础上，进行60MPa高压均质制备得到最终鱼油乳液制剂。
所用的鱼油从市场上购得，包括70％的EPA/DHA(20/50)。
结构和性能测试：
对实施例1制备得到的儿茶素卵清蛋白共价物进行结构测定数据：质谱显示儿茶素卵清蛋白共价物分子离子峰为44988.56，相对于卵清蛋白原料44561.32有显著增加，证明了儿茶素成功接枝。
对实施例1～3制备得到的儿茶素卵清蛋白共价物进行抗氧化活性测试：使用经典ORAC方法对抗氧化活性进行测试，结果表明实施例1～3制备得到的儿茶素卵清蛋白共价物的ORAC抗氧化活性分别是未改性的卵清蛋白的6.8倍，7.1倍，6.5倍，抗氧化性能显著提高。
对实施例1～3制备得到的鱼油制剂稳定性测试：针对实施例1-3制备得到的鱼油乳液制剂，对形成鱼油制剂粒径和抗氧化稳定性等指标进行测试，结果表明儿茶素卵清蛋白共价物鱼油制剂的14天粒径稳定性分别是未改性的卵清蛋白的19倍(实施例1)，20倍(实施例2)，19倍(实施例3)，氧化稳定性分别是未修饰的卵清蛋白的2倍(实施例1)，2.5倍(实施例2)，2倍(实施例3)，制剂稳定性显著提高。