一种中草药微生物发酵制剂、制备方法及其使用方法_3

文档序号:8910511阅读:来源:国知局
发酵制剂制备方法为: (1) 将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过80目筛,按重量比混合均匀,加入350份 水, 煮沸3h,然后加入葡萄糖10. 5份、蛋白胨10. 5份、酵母粉1. 4份、磷酸氢二钾0. 7份、 硫酸镁〇. 07份、硫酸锰0. 014份、碳酸钙3. 5份、氯化钠1. 75份,混合均匀;115°C条件下高 压蒸汽灭菌15 min后,降温至25°C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,37°C条件下培养24 h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,37°C条件下静置培养20 h,至对数生长 期菌液的浓度为0. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2)液体培养的一级种子菌液混合均匀, 发酵3天,控制温度在35°C ;发酵结束后,离心将发酵液和沉淀分开; (4) 将(3)中的发酵液浓缩后进行低温喷雾干燥得到干燥粉末,经检测水分含量为 9.2%;将(3)中的沉淀与麸皮混合均匀,得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物, 经检测,产物水分含量为8.6%; (5) 将(4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀,封装,其活菌数在2. 2 X IO9 cfu/g以上。
[0036] 实施例7 : 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂,主要由以下原料按重量份组成:黄芪8. 0份、当归 4. 0份、麸皮10份;菌液以体积份数计为:粪肠球菌菌液4. 0份。
[0037] 本实施例中的畜禽用中草药微生物发酵制剂制备方法为: (1) 将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过80目筛,按重量比混合均匀,加入250份 水, 煮沸2h,然后加入葡萄糖7. 5份、蛋白胨7. 5份、酵母粉I. 0份、磷酸氢二钾0. 5份、硫 酸镁〇. 05份、硫酸锰0. 01份、碳酸钙2. 5份、氯化钠1. 25份,混合均匀;115°C条件下高压 蒸汽灭菌15 min后,降温至27 °C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,37°C条件下培养24 h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,37°C条件下静置培养20 h,至对数生长 期菌液的浓度为0. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2)液体培养的一级种子菌液混合均匀, 发酵3天,控制温度在37°C ;发酵结束后,离心将发酵液和沉淀分开; (4) 将(3)中的发酵液浓缩后进行低温喷雾干燥得到干燥粉末,经检测水分含量为 9.2%;将(3)中的沉淀与麸皮混合均匀,得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物, 经检测,产物水分含量为9.1%; (5) 将(4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀,封装,其活菌数在2. OX IO9 cfu/g以上。
[0038] 实施例8: 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂,主要由以下原料按重量份组成:黄芪12. 0份、当 归4. O份、麸皮18份;菌液以体积份数计为:粪肠球菌菌液3. O份。
[0039]本实施例中的畜禽用中草药微生物发酵制剂制备方法为: (1) 将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过80目筛,按重量比混合均匀,加入500份 水, 煮沸2. 5h,然后加入葡萄糖15份、蛋白胨15份、酵母粉2. 0份、磷酸氢二钾I. 0份、硫 酸镁〇. 1份、硫酸锰〇. 02份、碳酸钙5. 0份、氯化钠2. 5份,混合均匀;115°C条件下高压蒸 汽灭菌15 min后,降温至27 °C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,37°C条件下培养24 h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,37°C条件下静置培养20 h,至对数生长 期菌液的浓度为0. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2)液体培养的一级种子菌液混合均匀, 发酵4天,控制温度在37°C ;发酵结束后,离心将发酵液和沉淀分开; (4) 将(3)中的发酵液浓缩后进行低温喷雾干燥得到干燥粉末,经检测水分含量为 9. 1%;将(3)中的沉淀与麸皮混合均匀,得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物, 经检测,产物水分含量为8.4%; (5) 将(4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀,封装,其活菌数在2. OX IO9 cfu/g以上。
[0040] 实施例9 : 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂,主要由以下原料按重量份组成:黄芪8. 0份、当归 1份、麸皮6份;菌液以体积份数计为:粪肠球菌菌液10份。
[0041]本实施例中的畜禽用中草药微生物发酵制剂制备方法为: (1) 将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过60目筛,按重量比混合均匀,加入100份 水, 煮沸lh,然后加入葡萄糖2. 5份、蛋白胨2. 5份、酵母粉0. 35份、磷酸氢二钾0. 15份、 硫酸镁〇. 015份、硫酸锰0. 0035份、碳酸钙0. 8份、氯化钠0. 45份,混合均匀;IKTC条件下 高压蒸汽灭菌15min后,降温至28°C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,33°C条件下培养20 h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,32°C条件下静置培养18 h,至对数生长 期菌液的浓度为0. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2)液体培养的一级种子菌液混合均匀, 发酵2天,控制温度在35°C ;发酵结束后,离心将发酵液和沉淀分开; (4) 将(3)中的发酵液浓缩后进行低温喷雾干燥得到干燥粉末,经检测水分含量为 8.8%;将(3)中的沉淀与麸皮混合均匀,得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物, 经检测,产物水分含量为9 % ; (5) 将(4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀,封装,其活菌数在2. OX IO9 cfu/g以上。
[0042] 实施例10 : 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂,主要由以下原料按重量份组成:黄芪8. 3份、当归 1. 7份、麸皮15份;菌液以体积份数计为:粪肠球菌菌液5份。
[0043]本实施例中的畜禽用中草药微生物发酵制剂制备方法为: (1)将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过70目筛,按重量比混合均匀,加入300份 水, 煮沸2h,然后加入葡萄糖9. O份、蛋白胨9. O份、酵母粉I. 2份、磷酸氢二钾0. 6份、硫 酸镁〇. 06份、硫酸锰0. 012份、碳酸钙3. 0份、氯化钠1. 5份,混合均匀;115°C条件下高压 蒸汽灭菌18min后,降温至30°C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,35°C条件下培养24 h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,37°C条件下静置培养19h,至对数生长期 菌液的浓度为〇. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2)液体培养的一级种子菌液混合均匀, 发酵3天,控制温度在37°C ;发酵结束后,离心将发酵液和沉淀分开; (4) 将(3)中的发酵液浓缩后进行低温喷雾干燥得到干燥粉末,经检测水分含量为 8.9% ;将(3)中的沉淀与麸皮混合均匀,得到含有粪肠球菌菌粉及发酵液滤渣的干燥产物, 经检测,产物水分含量为9. 2% ; (5) 将(4)中的干燥粉末和干燥产物混合均匀,封装,其活菌数在2. OX IO9 cfu/g以上。
[0044] 实施例11: 一种畜禽用中草药微生物发酵制剂,主要由以下原料按重量份组成:黄芪15份、当归8 份、麸皮19份;菌液以体积份数计为:粪肠球菌菌液9份。
[0045] 本实施例中的畜禽用中草药微生物发酵制剂制备方法为: (1) 将上述中草药原料清除杂质,粉碎后过80目筛,按重量比混合均匀,加入500份 水, 煮沸3h,然后加入葡萄糖17. 5份、蛋白胨17. 5份、酵母粉2. 25份、磷酸氢二钾1.25 份、硫酸镁〇. 125份、硫酸锰0. 0225份、碳酸钙5. 5份、氯化钠2. 75份,混合均匀;120°C条 件下高压蒸汽灭菌20min后,降温至20°C,备用; (2) 将粪肠球菌先接种于斜面培养基,35°C条件下培养28h进行活化,然后将斜面培养 基上产生的悬浮液加入到种子培养基中扩大培养,42°C条件下静置培养28h,至对数生长期 菌液的浓度为〇. 7 X IO8~2. OX 10 8cfu/ml时,制备得到一级种子菌液; (3) 将上述步骤(1)灭菌降温后的原料和(2
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