专利名称：阿尔茨海默氏病的治疗方法
技术领域：
本发明涉及一种用于治疗和/或预防与淀粉样沉积物的存在相关的疾病的方法，该疾病包括阿尔茨海默氏病。
背景技术：
关于生物化学现象和代谢现象的一些事实是已知的，这些现象与阿尔茨海默氏病(AD)的存在是相关的。在患有AD的患者脑中观察到的两种结构和组织病理学的改变是神经纤维的缠结(NFT)和淀粉样沉积物。虽然神经元内神经纤维的缠结还出现在其它的神经退行性疾病中，但是淀粉样沉积物在神经元内空间(神经炎斑块)以及接近于微脉管系统(脉管斑块)处均存在，这似乎是AD的特征。其中，神经炎斑块似乎最常见(Price，D.L.及同事，DrugDevelopment Research(1985)559-68)。
这些淀粉样斑块的主要成分是命名为淀粉样肽Aβ4的40-42个氨基酸的肽。
这些淀粉样肽Aβ4是一种源于被命名为淀粉样肽Aβ4的前体蛋白(βAPP)的膜糖蛋白的蛋白分解的多肽。这些蛋白(淀粉样肽的前体)包括695到770个氨基酸，它们全部由同一基因转录。
已经鉴定出了淀粉样肽Aβ4的两种主要变体，肽Aβ40和Aβ42，分别包含40和42个氨基酸，这些变体在生理和病理条件下均存在，但组织分布不同。42个氨基酸的变体是位于患有AD的患者的脑中的淀粉样斑块中的主要形式。
到目前为止，已经提出了不同的可能解决方案，以便提供对抗AD的可能的疫苗。
在EP526511中，建议将顺势疗法剂量的Aβ用于预先确认患有AD的患者。然而，由于所用的剂量，在血浆内循环的内源性Aβ的水平几乎没有变化，因而不会预想到具有治疗性的益处。
Schenk等人(Nature，1999；400173-177)描述了具有Aβ42的转基因小鼠PDAPP的免疫作用，其过度表达人类突变体APP，因而可以防止淀粉样斑块、神经炎性营养不良和星形神经胶质增生的形成。
在WO9927944(Schenk D.)中，描述了通过给患者施用Aβ42来治疗AD。
在4个欧洲国家和美国的360名诊断有中等到中度AD的患者的III期临床试验中，其中将淀粉样肽Aβ42用作抗原，在一些患者中报导有脑炎后停止(Scrip Daily Online，2002年2月25日，S007455320，The Scientist 16[7]22，2002年4月1日)。
利用内源性蛋白质作为疫苗(或者将天然存在于动物中的蛋白质作为疫苗接种)的问题(肽Aβ42通常就是如此)是有机体通过产生对抗Aβ42的抗体和对抗也许还具有至今尚为未知的生理功能的较小部分的抗体来应答，在一些可能的问题中，我们能够提及的是由于对抗内源性蛋白质的抗体的产生而导致自身免疫性疾病的可能的发展；由于免疫系统不能识别内源性抗原而导致对于产生免疫应答的困难；以及急性炎性反应的可能的发展。
本发明是通过施用一种肽、与蛋白质结合的Aβ的C-末端部分针对阿尔茨海默氏病以及其它淀粉样蛋白病变的治疗，在本发明的优选具体实施例中所述蛋白质是匙孔血蓝蛋白。
发明内容
本发明涉及用于预防和/或治疗阿尔茨海默氏病以及其它相关的淀粉样蛋白病变的疫苗。
根据本发明的优选具体实施例，提供了一种用于预防和/或治疗阿尔茨海默氏病以及其它相关疾病的疫苗，其克服了与利用肽、蛋白质或内源性免疫原相关的缺点。
以淀粉样沉积物为特征的其他疾病的实例是岛状(islandic)遗传性综合症、多发性骨髓瘤、以及海绵状脑炎，包括克-雅氏病。
免疫应答的介入可以是主动的，如当施用免疫原用以诱导产生与患者体内的Aβ进行反应的抗体时，或者是被动的，如当施用的抗体自动与患者体内的Aβ进行反应。
出于本发明的目的，对下面的术语定义如下术语“相关的淀粉样蛋白疾病”包括与淀粉样蛋白的累积有关的疾病，其可以局限于一个器官(局部的淀粉样变性)或者遍及多个器官(全身性淀粉样变性)。继发性淀粉样变性可以与以下病变有关慢性感染(如，结核病)或慢性炎症(如，类风湿性关节炎)、家族性地中海热(FMF)以及在长期的血液透析治疗的患者中发现的其它类型的全身淀粉样变性。淀粉样变性的局部类型包括，但不限于II型糖尿病和与之相关的任何其它疾病、伴有瘙痒症的神经退行性疾病、牛海绵状脑炎、克-雅氏病、阿尔茨海默氏病、脑淀粉样血管病。
所使用的术语“被动免疫”是指将抗体或其部分施用于个体，其意图是给予该个体免疫力。
第一方面，本发明提供了用作免疫原或用作抗体的肽在制备用于预防和/或治疗以淀粉样沉积物为特征的疾病的药物中的应用。所述方法包括诱导可以对抗患者体内的淀粉样沉积物的肽成分的免疫反应(应答)。所述诱导可以是主动的(通过施用免疫原)或者是被动的(通过施用抗体或抗体的活性部分或抗体的衍生物)。
在本发明的优选具体实施例中，该疾病是阿尔茨海默氏病。
所得到的药物可以用于无症状的患者，也可以用于那些显示出所述疾病症状的患者。
根据本发明，能够引起直接对抗淀粉样斑块的某些成分的免疫反应的组合物对于治疗或预防与淀粉样沉积物相关的疾病是有效的。特别是，根据本发明的一个方面，当将得自其中的免疫刺激剂量的肽或抗体施用于患者时，可以防止该患者的淀粉样蛋白的发展、减少淀粉样蛋白的症状和/或减少淀粉样蛋白的沉积过程。
根据本发明的一方面，该抗体借助作为免疫原的与蛋白质(共轭)结合的肽，通过免疫哺乳动物或禽类而得到。
根据本发明的优选具体实施例，用于免疫的哺乳动物可以是反刍动物、马科动物、兔类动物、食肉动物、灵长类动物、或任何其它允许从其中提取足够量的血清用于(得到)抗体的动物。在用于免疫的禽类中，我们可以提及，但决不限于鸡形目、雁形目和鸽形目，连同其它。
根据本发明的优选具体实施例，其提供了用作免疫原用以产生能够特异性识别β淀粉样肽Aβ40和Aβ42的任何主要变体的抗体与蛋白(共轭)结合的肽在制备用于预防和/或治疗以患者脑中淀粉样沉积物的累积为特征的疾病中的应用，。
根据本发明的最优选具体实施例，用于与所述肽结合的蛋白质是匙孔血蓝蛋白。
根据本发明的更优选具体实施例，该肽选自由以下肽组成的组中序列号为SEQ ID No 1的肽、序列号为SEQ ID No 2的肽、序列号为SEQ ID No 3的肽、序列号为SEQ ID No 4的肽、通过(切割)消除序列号为1的肽(SEQ ID No 1)、序列号为2的肽(SEQ IDNo 2)、序列号为3的肽(SEQ ID No 3)或序列号为4的肽(SEQ IDNo 4)的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的肽、以及通过将(适合于与所述蛋白质结合的)残基添加到序列号为1的肽(SEQID No 1)、序列号为2的肽(SEQ ID No 2)、序列号为3的肽(SEQID No 3)或序列号为4的肽(SEQ ID No 4)的任意肽上而产生的加长的肽。
根据另一优选的具体实施例，该肽选自由以下肽组成的组中序列号为1的肽(SEQ ID No 1)、具有通过消除序列号为1的肽(SEQID No 1)的N-末端和/或C-末端氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列而产生的肽。
在本发明的另一优选具体实施例中，该肽选自由以下肽组成的组中序列号为2的肽(SEQ ID No 2)、具有通过消除序列号为2的肽(SEQ ID No 2)的N-末端和/或C-末端氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所必需的氨基酸残基加入到任何上述序列而产生的肽。
在本发明的另一优选的具体实施例中，所述肽选自由以下肽组成的组中序列号为3的肽(SEQ ID No 3)、具有通过消除序列号为3的肽(SEQ ID No 3)的N-末端和/或C-末端氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列而产生的肽。
在本发明的另一优选具体实施例中，所述肽选自由以下肽组成的组中序列号为4的肽(SEQ ID No 4)、具有通过消除序列号为4的肽(SEQ ID No 4)的N-末端和/或C-末端氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列而产生的肽。
根据本发明的另一具体实施例，其提供了可以特异性识别β淀粉样肽的任何主要变体Aβ40和Aβ42的抗体或抗体活性部分或抗体衍生物在制备用于预防和/或治疗以患者脑中淀粉样沉积物的累积为特征的疾病的药物中的应用。
根据本发明的优选具体实施例，可以特异性识别肽Aβ的任何主要变体的抗体或抗体活性部分或抗体衍生物得自由以下肽组成的组中序列号为1的肽(SEQ ID No 1)、序列号为2的肽(SEQ IDNo 2)、序列号为3的肽(SEQ ID No 3)、序列号为4的肽(SEQ IDNo 4)、可选通过除去N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而缩短的肽，以及可选通过添加适合于与蛋白质结合的氨基酸残基而加长的肽。
在另一更优选的实施例中，所述抗体或抗体活性部分或抗体衍生物通过利用肽免疫哺乳动物或禽类而得到，所述肽选自由以下肽组成的组序列号为1的肽(SEQ ID No 1)、具有通过消除序列号为1的肽(SEQ ID No 1)的N-末端和C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
在另一更优选的实施例中，所述抗体或抗体活性部分或抗体衍生物通过利用肽免疫哺乳动物或禽类而得到，所述肽选自由以下肽组成的组序列号为2的肽(SEQ ID No 2)、具有通过消除序列号为2的肽(SEQ ID No 2)的N-末端和C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
在另一更优选的实施例中，所述抗体或抗体活性部分或抗体衍生物通过利用肽免疫哺乳动物或禽类而得到，所述肽选自以下肽组成的组序列号为3的肽(SEQ ID No 3)、具有通过消除序列号为3的肽(SEQ ID No 3)的N-末端和C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
在另一更优选的实施例中，所述抗体或抗体活性部分或抗体衍生物通过利用肽免疫哺乳动物或禽类而得到，所述肽选自以下肽组成的组序列号为4的肽(SEQ ID No 4)、具有通过消除序列号为4的肽(SEQ ID No 4)的N-末端和C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽、以及通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
在本申请中，利用本领域可以接受的单字母的符号简写氨基酸，如下所示
A＝Ala＝丙氨酸C＝Cys＝半胱氨酸D＝Asp＝天冬氨酸E＝Glu＝谷氨酸F＝Phe＝苯丙氨酸G＝Gly＝甘氨酸H＝His＝组氨酸I＝Ile＝异亮氨酸K＝Lys＝赖氨酸L＝Leu＝亮氨酸M＝Met＝蛋氨酸N＝Asn＝天冬酰胺P＝Pro＝脯氨酸Q＝Gln＝谷胺酰胺R＝Arg＝精氨酸S＝Ser＝丝氨酸T＝Thr＝苏氨酸V＝Val＝缬氨酸W＝Trp＝色氨酸Y＝Tyr＝酪氨酸在本发明中前述的序列，和确认为序列号为1(SEQ ID no 1)、序列号为2(SEQ ID no 2)、序列号为3(SEQ ID no 3)、序列号为4(SEQ ID no 4)的序列，对应于下面的氨基酸序列
序列号为1(SEQ ID No 1) LVFFAEDV序列号为2(SEQ ID No 2) GLMVGGVV序列号为3(SEQ ID No 3) GLMVGGVVIA序列号为4(SEQ ID No 4) RHDSGYEVHHQK得自前面的肽的抗体用代码SAR-1、SAR-2、SAR-3以及SAR-4表示，对应的那些肽如下所示序列号为1(SEQ ID No 1)SAR-2序列号为2(SEQ ID No 2)SAR-3序列号为3(SEQ ID No 3)SAR-4序列号为4(SEQ ID No 4)SAR-1本发明中所述的涉及肽序列的识别信息，其以计算机可读格式随同本申请文件以序列表示出，并与本文件一起提交。
图1具有抗体SAR-1、SAR-2、SAR-3和SAR-4的阿尔茨海默氏病的患者脑中的淀粉样斑块。
图2 Western Blot(蛋白质印迹)示出了抗体的特异性。SAR-3特异性检测40个氨基酸的淀粉样蛋白(Aβ40)，SAR-4特异性检测42个氨基酸的淀粉样蛋白(Aβ42)，而SAR-1检测两种同种型，但是对于据推测神经毒性更大的Aβ42具有更大的亲和力。在每个泳道(lane)，所示的肽已被加载了纳克级(10、100、200或500)的特定量的(Aβ40或Aβ42)。在Western Blot中，还可以看到抗体SAR-3和SAR-4检测到相应肽的单体(量很大)和二聚体。
具体实施例方式
实施例借助下面的实施例举例说明本发明。
实施例1.多克隆抗体的产生。
对抗与KLH(共轭)结合的四种肽(其用作免疫原)的四种多克隆抗体通过在新西兰白兔中免疫产生。
将每种免疫原注入到两只兔中，每只兔中注入五次第一次皮下注入在PBS中的肽-KLH(共轭)结合物和乳化的完全弗氏佐剂，以及四次更多的肌肉注射，作为在第14天、第28天、第49天和第80天的辅助剂量，肌肉注射的是在PBS中同样的肽-KLH共轭结合物，但是这次是乳化的不完全弗氏佐剂，并且在第90天时进行放血，用以检测抗体的存在。
收集血液后，将血清分离并且通过脱盐来预纯化，随后通过在基质中的亲和力来纯化抗体，该基质包括1.5ml的EMD-环氧活化的物质(Merck)，以及加入其中的5mg的相应的肽。该纯化部分装在0.1％的BSA(Sigma)中，并贮存在4℃，并且可以加入20-50％的甘油作为低温防护剂。
实施例2.对Aβ进行的Western-Blot1.电泳利用Current Protocols in Molecular Biology，John Wileyand Sons，New York，1998，modified by improve the separation of small peptides中所述的Laemmli方法。
所用的装置是来自Bio-Rad的Miniprotean 3。
利用15％的丙烯酰胺凝胶，与下面的成分混合
利用1mg/ml的肽Aβ40和Aβ42的初始储存溶液(溶解在PBS中)。取这些溶液的必需量用于每一个样品，并且用SBLT(SBL+2M的Tris碱)将每一样品补足至20μl。随后将所述样品煮沸5分钟，以便使肽变性并除去可能的蛋白酶。
小杯的中心充满阴极缓冲液，而外部充满阳极缓冲液，这些缓冲液的组成如下阳极缓冲液24.2g的Tris碱(最终浓度为0.2M)用H2O稀释到1升用浓HCl将pH调到8.9在4℃下贮存直到1个月阴极缓冲液12.11g的Tris碱(最终浓度为0.1M)17.92g的tricine(三(羟甲基)甲基甘氨酸)(最终浓度为0.1M)1g的SDS(最终浓度为0.1％)
用H2O稀释到1升不调pH在4℃下贮存直到1个月最后，将该样品加到孔中20μl/孔。利用来自Bio-Rad的Polypeptide Standard Kaleidoscope作为标记物，在低压下(30V)开始迁移，接着在将近1小时的电泳之后，将电压提高到100V。
2.膜转移通过电印迹将在该凝胶中分离出的蛋白转移到PVDF膜上。在转移小册子中，如下放置黑面-海绵-3Whatmann纸(或滤纸)-凝胶-膜-3Whatmann纸-海绵-透明面。
随后将小杯中充满电印迹缓冲液38nM的甘氨酸50mM的Tris碱40％的甲醇该转移在200mA下进行2小时。在转移期间，用磁力搅拌器不断搅拌缓冲液。
3.与抗体孵育将抗体和奶粉(powder milk)溶解在PBS-t(PBS+0.5％的吐温20)中，也用PBS-T进行冲洗。
转移后，在室温(RT)下将该膜的表面用5％的奶粉溶液封闭1小时，并不断搅拌。
此后，在室温下将该膜冲洗2×5分钟。
随后，在室温下将它与初级抗体(SAR-1、SAR-2、SAR-3或SAR-4)共同孵育1小时，所述抗体在PBS-T中至少按1∶500稀释。
在室温下将该膜冲洗3×10分钟。随后，将它与次级抗体山羊抗-兔-HRP在室温下共同孵育1小时(在所有的情况下都为1∶10,000)。
在室温下将该膜再重复冲洗一次3×10分钟。
4.显影在最后冲洗之后，将所述膜与化学发光试剂盒的溶液利用来自Pharmacia的ECL试剂盒+Plus共同孵育。
将所述膜包在玻璃纸中并将其暴露于双重乳剂膜(来自Amersham的Hyperfilm MP)，持续介于30秒至2分钟之间的不同时间。
实施例3.利用人类脑组织中的抗体SAR-1、SAR-2、SAR-3和SAR-4的免疫组织化学。
按照以下步骤将组织的切片固定在石蜡中a)在10％的中性甲醛中固定；b)在浓度递增的醇中通过连续步骤脱水；
c)通过二甲苯和石蜡，此后一步骤是在60-62℃的烘箱中进行的；d)进行石蜡封闭，将其切成4微米并固定在载波片中。
随后将所述切片通过下面的溶液而脱蜡100％的二甲苯 10分钟100％的二甲苯 10分钟100％的乙醇 5分钟100％的乙醇 5分钟96％的乙醇 5分钟90％的乙醇 5分钟70％的乙醇 5分钟PBS 5分钟×3次然后，将它们以下面的方式处理a)置于在通风橱内的96％的甲酸中3分钟，并且不断搅拌b)用水迅速冲洗c)在PBS中冲洗2×5分钟d)将内源性过氧化物酶在一种溶液中封闭15分钟，该溶液由70ml的PBS、30ml的甲醇和1ml的H2O2制成e)在PBS中冲洗3×5分钟f)在PBS/T(在PBS中的0.5％的Triton或吐温-20)中冲洗3×5分钟
g)将与山羊血清(正常山羊血清)的非特异性结合封闭2小时，该血清在PBS/T中按10∶100稀释h)将初级抗体在4℃的潮湿容器内孵育整晚Sar-1...在PBS中按1∶150稀释Sar-2...在PBS中按1∶1500稀释Sar-3...在PBS中按1∶1500稀释Sar-4...在PBS中按1∶2000稀释i)在PBS/T中冲洗3×5分钟j)在次级抗体(抗-兔山羊)中孵育45分钟，该抗体在PBS中按1∶200稀释k)在PBS中冲洗4×5分钟l)将Vector Labs的ABC(抗生物素蛋白-生物素复合物)在PBS/T中按1∶100稀释，并在黑暗中孵育45分钟，保持这些条件直到显影完成m)在PBS中冲洗3×5分钟n)在二氨基联苯胺(DAB)中显影在立体显微镜下凭经验控制时间。对此，首先，在0.5M的tris-HCl溶液中进行冲洗并摇动10分钟，随后继续与在0.05M的tris-HCl中稀释的二氨基联苯胺基质共同孵育，并且在4℃将0.5μl/ml的H2O2加入到其中。一旦反应完成，在4℃的PBS中冲洗三次，每次持续5分钟，随后在70％、90％和100％的乙醇中进行脱水，每次持续2分钟，通过二甲苯4分钟，并且进一步通过二甲苯2分钟，直到将它们用Eukitt固定，用于在显微镜下观察。
序列表序列数目4序列1的信息序列的特征长度8类型氨基酸分子类型肽来源化学合成序列描述SEQ ID NO 1Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val1 5序列2的信息序列的特征长度8类型氨基酸分子类型肽来源化学合成序列描述SEQ ID NO 2Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val1 5
序列3的信息序列的特征长度10类型氨基酸分子类型肽来源化学合成序列描述SEQ ID NO 3Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala1 5 10序列4的信息序列的特征长度12类型氨基酸分子类型肽来源化学合成序列描述SEQ ID NO 4Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys1 5 10
序列表<110>萨拉戈萨大学(Universidad de Zaragoza)<120>阿尔茨海默氏病的治疗方法<130>PCT/ES2004/000194<140>PCT/ES2004/000194<141>2004-05-03<150>P200301054<151>2003-05-08<160>4<170>PatentIn version 3.2<210>1<211>8<212>PRT<213>Artificial<220>
<223>化学合成<400>1Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val1 5<210>2<211>8<212>PRT<213>Artificial<220>
<223>化学合成<400>2Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val1 5<210>3<211>10<212>PRT<213>Artificial<220>
<223>化学合成<400>3Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala1 5 10<210>4<211>12<212>PRT<213>Artificial<220>
<223>化学合成<400>4Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys1 5 10
权利要求
1.一种可以用作免疫原以产生能够特异性识别β淀粉样肽Aβ40和Aβ42的任何主要变体的抗体的与蛋白质结合的肽在制备用于预防和/或治疗以患者脑中淀粉样沉积物的累积为特征的疾病的药物中的应用。
2.根据前述权利要求1所述的应用，其特征在于所述疾病是阿尔茨海默氏病。
3.根据前述权利要求1所述的应用，其特征在于所述蛋白质是匙孔血蓝蛋白。
4.根据前述权利要求1到3任一项所述的应用，其特征在于所述肽选自由以下肽组成的组-序列号为SEQ ID No 1的肽、序列号为SEQ ID No 2的肽、序列号为SEQ ID No 3的肽、序列号为SEQ ID No 4的肽；-通过消除所述序列号为SEQ ID No 1、序列号为SEQ IDNo 2、序列号为SEQ ID No 3或序列号为SEQ ID No 4的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的缩短的肽；-以及通过将适合于与所述蛋白质结合的氨基酸残基添加到所述序列号为SEQ ID No 1、序列号为SEQ ID No 2、序列号为SEQ ID No 3或序列号为SEQ ID No 4的肽的任意肽上而产生的加长的肽。
5.根据前述权利要求4所述的应用，其特征在于所述肽选自由以下肽组成的组-所述序列号为SEQ ID No 11的肽；-所述通过消除所述序列号为SEQ ID No 1的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基产生的缩短的肽；-以及所述通过添加对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基而产生的加长的肽。
6.根据前述权利要求4所述的应用，其特征在于所述肽选自由以下的肽组成的组-所述序列号为SEQ ID No 2的肽；-所述通过消除序列号为SEQ ID No 2的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的缩短的肽；-以及所述通过添加对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基而产生的加长的肽。
7.根据前述权利要求4所述的应用，其特征在于所述肽选自由以下的肽组成的组-所述序列号为SEQ ID No 3的肽；-所述通过消除序列号为SEQ ID No 3的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的缩短的肽；-以及所述通过添加对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基而产生的加长的肽。
8.根据前述权利要求4所述的应用，其特征在于所述肽选自由以下的肽组成的组-所述序列号为SEQ ID No 4的肽；-所述通过消除序列号为SEQ ID No 4的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的缩短的肽；-以及所述通过添加对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基而产生的加长的肽。
9.可以特异性识别β淀粉样肽Aβ40和Aβ42的任何主要变体的抗体或抗体活性片断或抗体衍生物在制备用于预防和/或治疗以患者脑中淀粉样沉积物的累积为特征的疾病的药物中的应用。
10.根据前述权利要求9所述的应用，其特征在于所述疾病是阿尔茨海默氏病。
11.根据前述权利要求9到10中任一项所述的应用，其特征在于所述可以特异性识别所述肽Aβ的任何主要变体的抗体或抗体活性片断或抗体衍生物是由选自以下组中的肽得到的序列号为SEQ ID No 1的肽、序列号为SEQ ID No 2的肽、序列号为SEQ ID No 3的肽、序列号为SEQ ID No 4的肽，可选地通过除去N-末端和/或C-末端的氨基酸残基将其缩短的肽，以及可选地通过添加适合于与所述蛋白质结合的氨基酸残基将其加长的肽。
12.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述抗体或抗体活性片断或抗体衍生物是通过用肽免疫哺乳动物或者禽类得到的，所述肽选自以下的组-所述序列号为SEQ ID No 1的肽；-所述具有通过消除序列号为SEQ ID No 1的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽；-以及所述通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
13.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述抗体或抗体活性片断或抗体衍生物是通过用肽免疫哺乳动物或者禽类得到的，所述肽选自以下的组-所述序列号为SEQ ID No 2的肽；-所述具有通过消除序列号为SEQ ID No 2的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽；-以及所述通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
14.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述抗体或抗体活性片断或抗体衍生物是通过用肽免疫哺乳动物或者禽类得到的，该肽选自以下的组-所述序列号为SEQ ID No 3的肽；-所述具有通过消除序列号为SEQ ID No 3的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽；-以及所述通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
15.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述抗体或抗体活性片断或抗体衍生物是通过用肽免疫哺乳动物或者禽类得到的，该肽选自以下的组-所述序列号为SEQ ID No 4的肽；-所述具有通过消除序列号为SEQ ID No 4的肽的N-末端和/或C-末端的氨基酸残基而产生的序列的肽；-以及所述通过将对于与蛋白质结合所需要的氨基酸残基加入到任何上述序列中而产生的肽。
全文摘要
本发明涉及用于制备治疗阿尔茨海默氏病的药物的抗体。更具体地说，本发明涉及抗体在用于制备预防和/或治疗阿尔茨海默氏病的药物中的应用，该抗体可以特异性识别淀粉样β肽Aβ40和Aβ42的任何一种主要变体。
文档编号A61K39/00GK1784240SQ200480012534
公开日2006年6月7日 申请日期2004年5月3日 优先权日2003年5月8日
发明者曼努埃尔·萨拉萨巴里奥 申请人:萨拉戈萨大学