专利名称：联用合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物的抗疟疗法的制作方法
技术领域：
本发明的技术领域涉及采用合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物的抗疟疗法。
背景技术：
疟疾是一种由寄生虫导致的严重、有时甚至是致命的疾病；这些寄生虫包括镰状症原虫(尸/cwwo&.ww /a/">a7^m)、间曰症原虫(尸/asmod/wm v/vax)、卵形症原虫CP/cwwod/wm (9va/e)和三日症原虫CP/asmoaf/Mm wa/an'ae)。症疾患者通常伴有高热、恶寒战栗和流感样病症，而镰状疟原虫感染如果不即时治疗可能是致命的。
疟疾一直以来都是全球范围内发生的最严重且最具破坏性的感染疾病之一。全世界超过40%人口生活在发生疟疾传播的区域(艮卩，非洲、亚洲、中东、中美洲和南美洲、伊斯帕尼奥拉岛和大洋洲部分区域)。估计每年发生3-5亿例疟疾，导致750,000-2，000,000例死亡。据估计，在非洲每30秒就有一位儿童死于疟疾。
原则上，疟疾是一种可治愈、可预防的疾病。预防措施主要集中在避免蚊虫叮咬和媒介防除措施以减少蚊虫传播。WHO推荐，治疗应在出现感染症状24小时内立即开始。可采用的药物包括氯喹、磺胺多辛-乙胺嘧啶、甲氟喹、阿托伐醌-氯胍和奎宁。因为寄生虫已对大多数可获得的治疗手段产生耐受性，使得疟疾状况处于继续恶化的过程中。
青蒿素及其衍生物是最强效的抗疟疾药物之一，特别是与其他类型的药物联用时，青蒿素及其衍生物是从青蒿或中国青蒿-黄花蒿C4Wem/w'a朋m^)提取的。察觉到疟原虫对许多强效青蒿素类药物产生耐受性的潜在威胁，WHO号召立即停止使用单一药物青蒿素疟疾药丸(参见2006年1月19日在www.who.int/mediacentre/news/release/2006/pr02发布的内容)。可获得的青蒿素衍生物的组合包括蒿甲醚和本芴醇、青蒿琥酯和阿莫地喹、青蒿琥酯和甲氟喹、青蒿琥酯和磺胺多辛/乙胺嘧啶、二氢青蒿素和磷酸哌喹。
可获得的基于青蒿素的药物来自天然来源，目前的生产能力远不能满足
其巨大需求。2004年11月，WHO宣布了青蒿素基联合用药的缺点，这种缺
陷在未来几年中仍将继续。
联合疗法被广泛接受用于治疗严重疾病，例如TB、 HIV感染和癌症。对于疟疾而言，已在1990年左右开始采用联合疗法。然而，因为单一疗法导致疟原虫对目前采用的联用药物中的某些组分产生耐药性，而导致上述战略遇到阻碍。
联合疗法的理念是， 一种药物快速杀死大多数的疟原虫，而那些存活的疟原虫则通过随后高浓度的伴随药物来杀死。因此，预计组合疗法可延迟耐药性的发生，通过降低复发率来提高效能，提供协同作用，并增加疟原虫与药物的接触。
因此，基于某些属性选择这些组合用作抗疟疗法。合成青蒿素衍生物通过与疟原虫游离血红素分子中的铁发生反应，产生导致细胞破坏的自由基而发挥作用。另一方面，双喹啉衍生物干扰疟原虫消化空泡中氯化血红素解毒成无毒疟色素，导致氯化血红素产生自由基而导致膜破坏。这两种药物的不相关作用模式将提供改良疗法和针对包括配子母细胞在内的所有寄生虫阶段的治疗。此外，由于合成青蒿素衍生物的效能和强度非常高度；它们可快速治疗症状，显示出快速恢复速率。
青蒿素类药物的单一疗法可在7天内治愈患者。然而，动物试验揭示，合成青蒿素衍生物在3天内治愈动物。合成青蒿素衍生物与双喹啉衍生物的联用可提供较短的治疗持续时间。而且，出版文献以及我们的初步研究表明，合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物之间不存在不良药理学相互作用，因而这两种药物的联用是合理的。
合成青蒿素衍生物的作用持续时间较短(11/2为数小时)而双喹啉的作用持续时间较长(tv2为数周)，因此即使接触合成青蒿素衍生物2个周期后双喹啉也将在循环系统中存在足够的浓度。这可确保杀死治疗后残留的所有寄生
虫。而且，合成青蒿素衍生物较短的tv2使其较不容易产生耐药性。在符合GLP规范的实验室根据ICH指导原则进行的动物一般毒性研究证 实，合成青蒿素衍生物在广泛剂量范围内具有耐受性。而且，动物胚胎-胎儿 评价研究揭示，合成青蒿素衍生物的风险明显低于青蒿琥酯。类似地，在符
合GLP规范的实验室根据OECD指导原则进行的动物耐受性和毒性研究证 实，双喹啉衍生物具有耐受性和广泛接受的毒性特征。而且，联用合成青蒿 素衍生物和双喹啉衍生物进行的动物毒性研究表明相加性毒性特征。因此， 联合用药时不会显著增加每种药物的毒性。
最后，合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物可在符合GLP规范的机构采用 已验证的合成方法进行制备，从而根据需求维持不间断且经济地供应大量药 物。
因此，需要开发基于合成青蒿素衍生物的新型联合疗法。
发明概述
因此， 一方面，本发明提供了联用合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物的 抗疟疗法。
另一方面，本发明提供了联用合成青蒿素衍生物和哌喹的抗疟疗法。
另一方面，本发明提供了联用/,金刚烷-2-螺-3'-8，-[[[(2，-氨基-2'甲基丙 基)氨基]羰基]甲基]r,2，，4，-三氧杂螺[4.5]癸烷和双喹啉衍生物的抗疟疗法。
另一方面，本发明提供了联用屏金刚烷-2-螺-3'-8'-[[[(2'-氨基-2'甲基丙 基)氨基]羰基]甲基]r,2，，4，-三氧杂螺[4.5]癸烷和哌喹的抗疟疗法。
基于从出版文献和临床前研究所得有前景结果整理得到的数据，合成青 蒿素衍生物和双喹啉衍生物看来能够满足理想抗疟联合疗法的标准。
合成青蒿素衍生物包括一种或多种US 2004/0186168、 US 6,486,199和 US 6,825,230公开的螺和双螺三氧戊环(trioxolane)衍生物；具体是/#-金刚烷-2-螺-3，-8，-[[[(2，-氨基-2，甲基丙基)氨基]羰基]甲基]l，，2，,4，-三氧杂螺[4.5]癸 垸。这些三氧戊环在三氧戊环杂环的至少一侧上存在相当高的空间立体位 阻，提供较好的体内活性，尤其是对口服给药而言。具体说，螺和双螺1，2,4-三氧戊环衍生物对疟原虫具有优良的强度和效能和较低的神经毒性水平。合 成青蒿素衍生物包括本文所述化合物的游离形式以及它们药学上可接受的盐、溶剂合物、酯、对映异构体、非对映异构体、多晶型物、代谢产物、前 药和类似物。
双喹啉衍生物是两个喹啉核通过脂族或芳族共价键连接的化合物。 一些 化合物被鉴定为有前景的抗疟候选化合物，包括羟基哌喹、二氯喹嗪
(dichlorquinazine)、 1,4-双(7-氯-4-喹啉基氨基)哌嗪和哌喹，尤其是哌喹。双喹 啉包括这些化合物的游离形式以及它们药学上可接受的盐、溶剂合物、酉旨、 对映异构体、非对映异构体、多晶型物、代谢产物、前药和类似物。
治疗有效量的合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物可与一种或多种药学惰 性辅料组合并加工成合适的单一或不同的药物组合物。抗疟联合疗法的实现 包括适当时在给药方案中同时或相继给予单一药物组合物或不同的药物组合 物。药物组合物的给药途径可以是一种或多种任何可能的途径，根据患者状 况和其他重要参数，这些途径包括口服、胃肠道外、直肠、阴道和经粘膜。
虽然按照具体的实施方式描述了本发明，某些改进和等价形式是本领域 技术人员所明白的，并且包括在本发明的范围内。
实施例
龎金刚烷-2-螺-3，-8，-mY2，-氨基-2，甲基丙基)氨基l羰基l甲基ir,2，,4，-三氧 杂螺[4.51癸烷氢的胚胎-胎儿研究(口服给药)
在大鼠和兔子中进行胚胎-胎儿评价研究，在符合GLP规范的实验室根 据ICH指导原则，以10、 30和90毫克/千克/天的剂量水平口服给予^MH 烷-2-螺-3，-8，-『『f(2，-氨基—2，甲基丙基)氨基]羰基甲基U',2',4'-三氧杂螺f4.51癸 逸。重复给药无蓄积作用。
雌性大鼠研究
所有大鼠存活到排定的剖腹产术，未观察到测试项目相关的临床征兆、 不适和总体改变的征兆。
在10和30毫克/千克/天的剂量水平下，观察到食物消耗、平均体重、生 殖参数和胎儿体重无变化。
在卯毫克/千克/天的剂量水平，测定食物消耗减少(与运载体对照相比下降10.7%)，体重增量减少(57g，而运载体对照为74 g)、着床后损失(10/22雌 性)、生产规模降低(每胎8.2个胎儿，而运载体对照为13.6个)和胎儿体重降 低(4.1g，运载体对照为4.8 g)。而且，观察到异常结果，即室间隔缺损(5 胎)，主动脉弓扩张(6胎)，动脉导管和/或肺动脉干狭窄(5胎)，脾脏尺寸减小 (4胎)。
在所有剂量水平下，胎儿性别比例、新鲜外部检查或骨骼检查均未观察 到测试项目相关影响。而且，重复给药后无蓄积作用。
基于这些结果，认为母体和生殖参数的NOEL(无明显影响水平)为30毫 克/千克体重/天。对胎儿而言，认为NOEL(无明显影响水平)为10毫克/千克 体重/天。
雌兔的研究
在90毫克/千克/天剂量水平，观察四只雌兔的用力呼吸，发现一只雌兔 给药后(pc)第19天死亡，食物消耗减少(与运载体对照相比下降27.3%)，平均 体重增量减少(+0.1%，运载体对照为+2.4%)，胎儿体重降低(31.5g，运载体对 照为32.7 g)。
在10和30毫克/千克/天剂量水平，无死亡/临床征兆、平均体重变化和 着床后损失。
在30毫克/千克体重/天，观察到食物消耗稍微下降。 所有剂量水平均未发现明显结果和胎儿异常。而且，重复给药后无蓄积 作用。
基于这些结果，认为母体的NOEL(无明显影响水平)为10毫克/千克体重 /天，胎儿的NOEL为30毫克/千克体重/天。
在高达90毫克/千克体重/天的剂量下(包括该剂量)，研究未揭示任何致 畸危险。
相反，用青蒿琥酯的大鼠胚胎-胎儿评价报道(Clark等，2004)揭示，低至
6毫克/千克/天的剂量下，即发生着床后损失、室间隔缺损和一些骨骼畸形， 兔子中12毫克/千克/天的剂量下，即发生着床后损失、腭裂、主动脉弓扩 张、肺动脉干扩张和一些骨骼畸形。上述研究清楚表明，/,-金刚垸-2-螺-3，-8，-[[[(2，-氨基-2，甲基丙基)氨基]羰 基甲基]l，,2，,4，-三氧杂螺[4.5]癸垸的胚胎-胎儿风险显著优于青蒿琥酯。
参考文献Clark RL， White TK， A Clode S， Gaunt I， Winstanley P和 Ward SA. (2004) ， Developmental toxicity of Artesunate and an Artesunate combination in rat and rabbit(青蒿琥酯和青蒿琥酯联合用药在大鼠和兔中的发 育毒性)，Birth defects Res BDevReprod Toxicol. Dec. 71(6); 380-394。
权利要求
1. 联用合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物的抗疟疗法。
2. 如权利要求1所述的抗疟疗法，其特征在于，所述双喹啉衍生物是哌喹。
3. 如权利要求1所述的抗疟疗法，其特征在于，所述青蒿素衍生物是顺-金刚垸-2-螺-3，-8，-[[[(2，-氨基-2，甲基丙基)氨基]羰基]甲基]l',2，，4，-三氧杂螺 [4.5]癸垸。
4. 如权利要求1所述的抗疟疗法，其特征在于，所述青蒿素衍生物是顺-金刚烷-2-螺-3，-8，-[[[(2，-氨基-2，甲基丙基)氨基]羰基]甲基]l',2，，4，-三氧杂螺 [4.5]癸烷，所述双喹啉衍生物是哌喹。
5. 如前述权利要求中任一项所述的抗疟疗法，其特征在于，抗疟联合疗 法可通过同时或相继给予单一药物组合物或不同药物组合物来实现。
6. 如权利要求5所述的抗疟疗法，其特征在于，所述药物组合物的给药 途径可以是口服、胃肠道外、直肠、阴道和经粘膜途径中的一种或多种。
全文摘要
本发明的技术领域涉及采用合成青蒿素衍生物和双喹啉衍生物的抗疟疗法。
文档编号A61K31/357GK101472582SQ200780023269
公开日2009年7月1日 申请日期2007年5月17日 优先权日2006年5月17日
发明者V·M·辛盖特格瑞, V·尤杜帕 申请人:兰贝克赛实验室有限公司