专利名称：：一种治疗糖尿病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物,具体地是一种用于治疗糖尿病的药物组合物。
背景技术：
：1-脱氧野尻霉素(l-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-l，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagoraine)是桑科植物的枝、叶、皮或蚕沙中含有的含氮生物碱成分。1-脱氧野尻霉素(l-deoxynojirimycin)化学名称为3，4，5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶。该化合物己经商品化，可以从市场上购得，有非常多的厂家提供该化合物，例如上海融未医药科技发展有限公司。1,2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)现今没有公开销售的商品，文献报道日本北陆大学的NaokiAsano等人通过提取、反复柱层析、重结晶的办法获得([".CarbohydrateResearch,253(1994)235-245)。国内外的研究和报道表明，桑科植物的生物碱提取物具有抑制血糖升高和提高葡萄糖耐受量的作用，其中l-deoxynojirimycin能和小肠中的麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶等a-糖苷酶结合，使双糖不能进一步分解，从而抑制餐后血糖急剧升高；Fagomine除具有糖苷酶抑制剂作用外，还可能通过增加胰岛素的释放而引起血糖降低。降糖的化学药品，磺脲类如格列本脲、格列齐特等，双胍类如二甲双胍等，噻唑烷二酮类如曲格列酮、罗格列酮等，均已经商品化应用于临床；桑叶黄酮提取物、银杏叶提取物化合物、苦瓜提取物、茶多酚提取物等在市场上均有销售，如湖南今汉生物医药技术有限公司、韶关市居民制药有限公司等多家医药和提取物生产厂家均可供应。
发明内容本发明的目的是要提供一种效果更好的降低血糖的药物组合物。本发明组合物中含有1-脱氧野尻霉素(l-deoxynojirimycin)和1,2，5-三脱氧_1,5_亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中l-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.55:1。其中优选的比例是l-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为25:1。本发明首次对含有不同配比1-deoxynojirimycin和Fagomine的组合物降低血糖的作用进行了研究，发现两者在一定的比例范围内有很好的协同降糖作用。根据本发明的实施例，选择了协同降糖作用较好的配比。本发明还研究了上述组合物与其他降血糖化合物联合使用的协同降血糖作用。l-deoxynojirimycin和Fagomine组合物和其他降血糖物质联合应用比其他降血糖物质或上述两者组合单独应用更有效的降低高血糖大鼠灌胃蔗糖后的血糖值。上述含有l-deoxynojirimycin和Fagomine的药物组合物可以制成各种制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂、口服液等。制备的方法可以采用常规的辅料和方法。研究结果表明，本发明涉及的药物组合物较单一降糖化合物效果更好，可用于治疗和预防糖尿病及其并发症。具体实施方案实施例1l-deoxynojirimycin和Fagomine配伍对a-D-葡萄糖苷酶抑制活性的测定1、药物-l-deoxynojirimycin，Fagomine,自制。2、试剂磷酸二氢钾，氢氧化钠，碳酸氢钠，对硝基苯基葡萄糖苷(PNPG)，还原型谷胱甘肽，a-D-葡萄糖苷酶蔗糖。3、仪器TU-1901紫外可见光分光光度计。4、试验方法与结果(1)磷酸钾缓冲液配制磷酸二氢钾0.68120g溶于25mL蒸馏水中得贮备液1，NaOH0.2g溶于25mL蒸馏水中得贮备液2，吸取贮备液1(25mL)加入贮备液2(11.8mL)，摇匀，稀释至100mL即得磷酸钾缓冲液。(2)Na2C03终止液Na2CO310.6g—100mL蒸馏水(lmol/L)(3)PNPG:17.47mg—2mL蒸馏水(0.029mol/L)(4)还原型谷胱甘肽2.10mg—2mL蒸馏水(1.05mg/mL)(5k-D-葡萄糖苷酶0.5mg—lmL蒸馏水(0.5mg/mL)(6)l-deoxynojirimycin贮备液3.24mg—lmL蒸馏水(20^unol/mL)(7)Fagomine贝亡备液3.00mg—lmL蒸馏水(20nmol/mL)(8)糖苷酶抑制剂样品溶液配制l-deoxynojirimycin贮备液250pL，蒸馏水稀释至lmL，贮备液l。Fagomine贮备液250pL，蒸馏水稀释至lmL，贮备液2。贮备液1、2按表2中比例进行配伍(9)a-D-葡萄糖苷酶抑制活性的测定反应按表1顺序添加试剂反应，测定吸光度值，按以下公式计算样品的(x-糖苷酶抑制率。样品管吸光度一空白管吸光度01-糖苷酶抑制率％=-X100%标准管吸光度一空白管吸光度表1a-糖苷酶抑制率测定试验设计<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注表中1-deoxynojiriraycin简称DNJ，Fagomine简和〈Fag。5、结论试验结果表明，Fagomine对1-deoxynojirimycin抑制a-糖苷酶有协同作用(1-deoxynojirimycin禾口Fagomine的总量不变)，在1-deoxynojirimycin:Fagomine配比在0.55:1时，可较好的抑制a-糖苷酶，其中配比在25:1时明显明显优于单独使用同浓度1-deoxynojirimycin的效果。实施例2不同剂量组合物对自发性高血糖小鼠血糖及血清胰岛素的影响1、药物l-deoxynojirimycin，Fagomine,自制，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度(组合物中1-deoxynojirimycin和Fagominc的浓度总和与单独配制Fagomine或l-deoxynojirimycin的浓度相同)。格列本脲，湖南洞庭药业股份有限公司。2、动物N0D小鼠，体重25—35g，由北京大学医学部实验动物中心。试验前测定血糖，选择血糖值高于11.lmmol/L的动物进行试验。3、测定仪器怡成血糖测试仪，北京怡成生物电子技术有限公司研制。4、主要试剂1251_胰岛素放射免疫分析盒，中国原子能科学院同位素研究所生产。5、试验方法与结果(l)对小鼠血糖的影响NOD小鼠，空腹6h后，测定血糖，选择血糖值高于11.lmmol/L的动物70只，随机分为7组，分别灌胃给予下列药物①对照组(蒸馏水)；②格列本脲组(50mg/kg);③-⑤不同配比的组合物(20mg/kg，药物比例不同，总量不变)。连续给药14天，第14天给药前空腹6h，给药后lh动物取血，用恰成血糖测试仪测定动物血糖值，用放射免疫法测定血清胰岛素。结果见表3-4。表3药物组合物对自发性高血糖小鼠血糖的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注1、与模型对照组比较承P〈0.05,**P<0.01(t检验)。2、表中1-deoxynojirimycin简称DNJ，Fagomine简称Fag。表4药物组合物对自发性高血糖小鼠血清胰岛素的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注1、与模型对照组比较承P〈0.05，林P〈0.01(t检验)。2、表中l-deoxynojirimycin简称DNJ，Fagomine简称Fag。6、结论l-deoxynojirimycin单独应用可显著降低NOD小鼠血糖，且优于Fagomine单独应用降低血糖的效果；l-deoxynojirimycin单独应用NOD小鼠的血清胰岛素影响不大，Fagomine单独应用可显著提高血清胰岛素水平；其中1-deoxynojirimycin与Fagomine配比为25:1的组合物既能提高NOD小鼠的血清胰岛素水平，又可显著降低NOD小鼠血糖，降血糖效果明显优于同浓度l-deoxynojirimycin或Fagomine的单独应用，说明二者组合应用具有协同作用。此外，根据此药效试验结果，l-deoxynojirimycin与Fagomine组合物的有效剂量约相当于人日服用120mg组合物，每次服用约40mg，以优选比例25:1计算，其中每次服用时含1-deoxynojirimycin最少约25mg以上，从方便病患服用和减少服用量出发，采用片剂或胶囊，最多每次服用5片或5粒胶囊(总重最多以2500mg计)，因此l-deoxynojirimycin的含量在药物混合物中，含量以大于1%为宜。实施例3与其他降血糖物质联合应用试验1、药物1-deoxynojirimycin和Fagomine混合物(2:1)，自制，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度；拜糖平，拜尔医药保健有限公司；儿茶素，银杏叶提取物，桑叶黄酮，湖南今汉生物医药技术有限公司。2、动物动物SD大鼠，体重180—220g，雌雄各半，由湖南医药工业研究所提供。造模方法大鼠禁食24h后，小剂量静脉注射链脲霉素25mg/kg，每周一次，同时加高热量饲料喂养诱发II型糖尿病，于第2次注射后1周测定血糖，选择空腹血糖大于7.8mmol/L的动物进行试验。3、试剂链脲霉素，美国Sigma公司产品。造模前用柠檬酸缓冲液(PH=4.0)，于低温下配制；蔗糖，分析纯。4、仪器稳步倍加型血糖监测仪。5、试验方法与结果SD大鼠，禁食不禁水24h后，静脉注射链脲霉素25mg/kg，每周一次，同时加高热量词料喂养诱发II型糖尿病，于第2次注射后1周测定血糖，选择空腹血糖大于7.8mraol/L大鼠90只，进行试验。随机分为9组(n=10)，第一组为对照组，等体积蒸馏水灌胃，第二组为拜糖平组；其余各组为1-deoxynojirimycin和Fagomine混合物(混合物比例为2:1，表内以DF表示)和其他不同降血糖物质的组合；按以上剂量灌胃给予试验药物，连续14天，第14天给药前空腹6h，按以上剂量给药的同时均灌胃蔗糖5.0g/kg，测定给糖前及给糖后1.0小时大鼠的血糖，实验室温度20°C25°C。试验结果见表5。表5组合物对链脲霉素诱发高血糖大鼠灌胃蔗糖后血糖值的影响^药物剂量~~高血糖大鼠血糖值(mmol/L)_ff^_(mg/kg)给药前给药后模型对照组等体积蒸馏^C8.45±0.8215.56±2.54拜糖平组10.08.24±0.9312.21±1.84**608,97±1.0112.47±2.03林儿茶素609.17±0.8914.10±1.50DF:银杏叶提取物(l:2)608.31±0.9412.54±1,61林-银杏叶提取物608,56±1.1113.82±1.72DF:桑叶黄酮(1:2)607,96±1.0712,04±1.91林桑叶黄酮608.72±1.2213.65±2.12*DF208.37±1.0512.88±1.55承*注与对照组给药后比较*P<0.05;**P<0.016、结论l-deoxynojirimycin和Fagomine组合物和其他降血糖物质联合应用比其他降血糖物质或DF组合单独应用更有效的降低高血糖大鼠灌胃蔗糖后的血糖值。权利要求1.一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.5～5∶1。2.根据权利要求1中所述的药物组合物，含有1-脱氧野尻霉素的重量百分比大于1%。3.根据权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于1-脱氧野尻霉素(l-deoxynojirimycin)和1,2,5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)的优选重量比例为25:1。4.根据权利要求1至3之一中所述的治疗糖尿病药物组合物，其特征在于可以含有其他有降血糖活性的化合物或提取物。5.根据权利要求4所述的治疗糖尿病药物组合物，其特征在于所说的其他有降血糖活性的化合物可以是选自磺脲类、双胍类、噻唑烷二酮类化学药品，提取物可以是选自从桑科植物分离纯化的桑叶黄酮类成分、银杏叶提取物、苦瓜提取物，以及茶多酚提取物。全文摘要本发明涉及一种药物组合物，具体地是一种用于治疗糖尿病的药物组合物。本发明组合物中含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin)和1，2，5-三脱氧-1，5-亚胺基-D-阿拉伯糖醇(Fagomine)，其中1-deoxynojirimycin和Fagomine的重量比例为0.5～5∶1。本发明涉及的药物组合物较单一降糖化合物效果更好，可用于治疗和预防糖尿病及其并发症。文档编号A61P3/10GK101606936SQ20081003154公开日2009年12月23日申请日期2008年6月20日优先权日2008年6月20日发明者周应军,曾光尧,蒋梅香申请人:中南大学