用于治疗癌症的组合物和方法

专利名称：用于治疗癌症的组合物和方法
用于治疗癌症的组合物和方法相关申请的交叉参考本申请要求于2007年11月2日提交的美国临时申请号US60/985，196的利益，该 文献整体引入作为参考。
背景技术：
宫颈癌是女性中占第二位最常见的癌症诊断，当今与高危人型乳头瘤病毒感染 99. 7%相关。例如，在2007年，国家癌症研究所(National Cancer Institute)报道估计 3，670例死亡归因于这种类型的癌症，并且在美国女性中诊断出约11，150例新病例。此外， 全世界每年有大约400，000例宫颈癌和接近200，000例死亡。人型乳头瘤病毒(HPVs)是世 界上最常见的性传播疾病病因之一。总体上，50-75%的性活跃男性和女性在其生命的某个 时间点感染生殖器HPV感染。据估计，仅在美国每年有550万人感染HPV，目前至少有2000 万人被感染。根据它们与宫颈癌或与良性宫颈损害或结构不良的联系，已经将超过100种 不同的HPV分离物大概地细分为高危和低危亚型。许多证据意味着HPV感染是宫颈癌的病原。20世纪80年代的多项研究报道了在宫 颈结构不良(cervical dysplasias)、癌症和来源于宫颈癌的细胞系中存在HPV变体。其它 研究证实来自致癌HPV 18的基因组的E6-E7区在宫颈癌细胞中被选择性地保留(这提示 HPV感染可以是病因)，并且E6-E7区的连续表达是维持无限增殖化或癌性状态所必需的。 下一年，Sedman等人证实来自HPV 16的E6-E7基因足以使培养物中的人角质形成细胞无 限增殖。Barbosa等人证实尽管来自高危HPVs的E6-E7基因可以转化细胞系，但是来自 低危或非致癌变体如HPV 6和HPV 11的E6-E7区不能转化人角质形成细胞。后来，Pillai 等人在623份处于肿瘤发展各阶段的宫颈组织样品中通过原位杂交检查了 HPV16和18感 染以及通过免疫细胞化学检查了 E6蛋白表达，发现组织异常和HPV感染之间存在显著相关 性。迄今为止所表征的人型乳头瘤病毒与限于皮肤上皮层或口腔、咽、呼吸道和最重 要的是肛门生殖区粘膜的损害相关。特定的人型乳头瘤病毒类型(包括HPV 6和11)通常 引起良性粘膜损害，而其它类型如HPV 16、18和许多其它病毒株主要在高级别损害和癌症 中发现。感染粘膜表面的各类型的人型乳头瘤病毒(HPV)已经在宫颈癌、肛门癌、阴茎癌、 喉癌和口腔癌、偶发的甲周癌(periimgal carcinomas)以及良性肛门生殖器疣中作为致病 因素被牵涉。对具体HPV类型的鉴别用于鉴别具有癌前损害的患者，这些患者处于发展为 恶性病的危险中。尽管在一些感染了人型乳头瘤病毒的人中存在看得见的肛门生殖器损 害，但是大部分具有HPV生殖道感染的个体没有临床上明显的疾病，但是分析宫颈涂片中 存在的细胞形态学特征可以用于检测HPV感染。巴帕尼科拉乌试验(Papanicolaou test) 是一种有价值的筛选工具，但是它们由于不合宜的假阳性和假阴性试验结果而遗漏了大比 例的感染HPV的人。此外，它们不适合在全世界测试，因为对结果的解释需要受过训练的病 理学家。由于巴帕尼科拉乌试验的应用和成功率有限，所以很多感染HPV的个体不能接受 及时的诊断，这一问题阻碍了在出现临床症状前给予治疗的努力。对于早期和准确地诊断 致癌HPV感染以及对于针对病因性HPV感染的治疗(通过较早地干预疾病进程来预防宫颈癌发展)而言存在明显未得到满足的需求。因为治疗通常在临床症状发作后施用，所以目前的治疗模式聚焦于实际的宫颈 结构不良而不是潜在的HPV感染。每年，女性由临床医师进行宫颈结构不良筛选，用表面 切除技术(superficial ablative techniques)、包括低温外科手术、激光切除(laser ablation)和割除进行治疗。当疾病发展时，治疗选择变得更具有侵害性，包括次全子宫切 除术或子宫根治术、放射或化疗法。所有这些治疗都是侵害性的，并且可能导致或肯定导致 永久性不育。此外，手术除去组织由于如下事实不能保证所有被感染的细胞已经被清除一 些转化细胞可能还没有呈现出与HPV感染有关的形态学改变。所要求保护的发明的概述本发明提供了符合下文所述通式的化合物。该化合物优选抑制HPVE6蛋白与多肽 的结合，所述多肽包含来自MAGI-I的第一 PDZ结构域的氨基酸序列。本发明还提供了包含该化合物的药物组合物。该组合物优选在GMP条件下制备。 优选以至少99%纯的形式提供本发明的化合物。本发明还提供了治疗致癌人型乳头瘤病毒感染或对其进行预防的方法，该方法包 括给患有HPV感染或处于HPV感染危险中的受治疗者施用前述权利要求任一项的化合物的 有效方案，其中所述化合物治疗感染或其后遗症或对它们进行预防。在一些方法中，受治疗者感染了 HPV。在一些方法中，受治疗者患有宫颈癌。在一 些方法中，受治疗者患有宫颈结构不良。在一些方法中，受治疗者处于HPV感染危险中。本发明还提供了治疗癌症或对其进行预防的方法。该方法要求给患有癌症或处于 癌症危险中的受治疗者施用权利要求1-14任一项的化合物的有效方案，其中所述化合物 治疗癌症或对其进行预防。在一些这类方法中，受治疗者感染了致癌人型乳头瘤病毒。在一 些这类方法中，癌症是宫颈癌、阴道癌、肛门癌或头颈癌。在一些这类方法中，癌症是乳癌、 卵巢癌、脑癌、白血病或淋巴瘤。本发明还提供了治疗宫颈癌的方法。该方法要求给患有宫颈癌的受治疗者施用本 文所述的化合物的有效方案，其中所述化合物治疗宫颈癌。附图简述

图1显示了化合物7291-0042对细胞迁移的作用。图2A显示了化合物7291-0042对3YlpBlast E6-16 (野生型)细胞的细胞增殖的作用。图2B显示了化合物7291-0042对3YlpBlast E6-16 Δ PL细胞的细胞增殖的作用。图2C显示了化合物7291-0042对3YlpBlast细胞的细胞增殖的作用。图3显示了化合物7291-0042对E6宫颈癌细胞C33a、HeLa和SiHa的细胞毒性作用。图4A和4B显示了用化合物7291-0042处理的和未用化合物处理的HeLa细胞中 的E6蛋白表达。图5显示了用化合物7291-0042处理的和未用化合物处理的HeLa细胞中的p53 肿瘤抑制蛋白表达。图6A显示了 7291-0042-型药物的其它二聚体。图6B显示了具有COOH模拟物或首基的7291-0042药物的变体。如果主要骨架保持不变，则可以使用多种首基、包括7291-0042中-0-CH2-C00-。图7显示了 7291-0042选择性诱导HPV-阳性宫颈癌细胞中的细胞凋亡，如在用 7291-0042处理48小时后通过TUNEL分析在HeLa和C33A细胞中所测定的那样。术语“人型乳头瘤病毒”或“HPV”指不同组的基于DNA的病毒，它们是世界上最常 见的性传播疾病原因之一。宫颈癌被鉴定为由HPV引起。根据它们与宫颈癌或与良性宫颈 损害或结构不良的联系，已经将超过100种不同的HPV分离物大概地细分为高危和低危亚 型。这些HPV分离物有时称为HPV株或型，通常仅以编号或“HPV#”来指定或称呼，其中“#” 是致癌或导致癌的基因型的编号。“致癌HPV株”是如国家癌症研究所(NCI，2001)确定的已知导致宫颈癌的HPV株。 示例性的致癌株有HPV16、HPV33、HPV35、HPV52、HPV58和HPV66。可以从美国国家生物技术 信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)的世界范围网上找 到本文未具体列举的HPV致癌株。“致癌E6蛋白”、“E6”或“E6癌蛋白”可互换使用，是由上述致癌HPV株如高危HPV 16型和18型(例如分别参见NCBI Taxonomy Ids 333760和333761)编码的E6蛋白。E6 是用于病毒复制以及宿主细胞无限增殖和转化的蛋白质。E6与具有PDZ-结构域的蛋白质 如MAGUK(膜相关鸟苷酸激酶家族)蛋白(下述)结合。这些蛋白质包括MAGI-l、MAGI-2 和MAGI-3。当E6与MAGI蛋白上的PDZ结构域复合时，复合物使DLG蛋白的形状扭曲，由此 妨碍其功能。E6还结合p53，p53是一种负性调节细胞周期进程、细胞生长和分裂的肿瘤抑 制蛋白。E6与p53的结合导致p53蛋白遍在化和最终降解，该过程涉及另一种称为“E6-相 关蛋白”的细胞蛋白。结果，表达E6的细胞将具有降低的基线水平的p53。术语“PDZ结构域”指以与脑突触蛋白PSD-95、果蝇(Drosophila)分隔连接蛋白 Discs-Large(DLG)和上皮紧密连接蛋白ZOl (ZOl)同源为特征的少于约90个氨基酸(即 约80-90、约70-80、约60-70或约50-60个氨基酸)的蛋白质序列(即模块蛋白结构域)。 PDZ结构域也称为Discs-Large同源重复(“DHRs”)和GLGF重复。PDZ结构域通常显示保 持核心共有序列(Doyle 1996，Cell85 1067-76)。PDZ结构域在不同的膜相关蛋白中发现，包括鸟苷酸激酶同系物的MAGM家族成 员、数种蛋白磷酸酶和激酶、神经元氧化氮合酶、肿瘤抑制蛋白和数种肌营养蛋白结合蛋白 (统称为肌养蛋白结合蛋白)。术语“PDZ结构域”还包括序列的变体(例如天然发生的变体)(例如多态变体、具 有保守取代的变体等)和来自供选种属(例如小鼠、大鼠)的结构域。通常，PDZ结构域与 美国专利申请US09/724553中所示的那些基本相同，例如当就最大相应性比较和比对时至 少约70%、至少约80%或至少约90%的氨基酸残基同一性。PDZ结构域可以突变以得到能 够加强或弱化结合的氨基酸变化和改变特异性，然而它们仍保留了 PDZ结构域(Schneider 等人，1998，Nat. Biotech. 17 170-5)。对特定PDZ结构域(例如MAGI-I结构域2)的称谓 意欲囊括该特定PDZ结构域及其HPV E6-结合变体，另有指示除外。换言之，如果提到特定 PDZ结构域，该称谓也囊括如下文所述的与HPV的致癌E6蛋白结合的该PDZ结构域的变体。 在此方面需要注意的是，蛋白质中的PDZ结构域的编号可以改变。术语“PDZ蛋白”指含有PDZ结构域的天然存在的蛋白质。示例性的PDZ蛋白包括 CASK、MPP1、DLGl、DLG2、PSD95、NeDLG, TIP-33、SYNla、TIP-43、LDP、LIM、LIMKl、LIMK2、 MPP2、N0Sl、AF6、PTN-4、prIL 16,41. 8kD、KIAA0559、RGS12、KIAA0316、DVLl、TIP_40、TIAMl、 MINTl、MAGI-I、MAGI-2、MAGI-3、KIAA0303、CBP, MINT3、TIP-2、KIAA0561 和 TIP-1。术语“PDZ-结构域多肽”指含有PDZ结构域的多肽，例如包括PDZ结构域序列的 融合蛋白、天然存在的PDZ蛋白或分离的PDZ结构域肽。因此，PDZ-结构域多肽的长度可 以是约60个或更多氨基酸、约70个或更多氨基酸、约80个或更多氨基酸、约90个或更多 氨基酸、约100个或更多氨基酸、约200个或更多氨基酸、约300个或更多氨基酸、约500个 或更多氨基酸、约800个或更多氨基酸、约1000个或更多氨基酸、通常至多约2000个或更 多氨基酸。PDZ结构域肽通常不超过约100个氨基酸(例如50-60个氨基酸、60-70个氨基 酸、80-90个氨基酸或90-100个氨基酸)，并且编码PDZ结构域。术语“PL蛋白”或“PDZ配体蛋白”指与PDZ-结构域形成分子复合物的、可以是天 然存在或非天然存在的肽的多肽，或者指其羧基端当与全长蛋白质分开表达时(例如作为 4-25个残基如8、10、12、14或16个残基的肽)形成这类分子复合物的蛋白质。"MAGI-r'^^^IItB^^if SIifBI 1"(membrane-associated guanylate kinase inverted 1) ,MAGil或“含Wff和PDZ结构域的膜相关鸟苷酸激酶1 "(membrane associated guanylate kinase, Wff and PDZdomain containing 1) 1月莫才百 # H Sl if _ 胃 iH · (MAGUK)家族成员。MAGW(蛋白参与细胞与细胞接触区域的质膜内表面上的多蛋白复合物 的装配。这种基因的产物在细胞与细胞的连接中可以作为支架蛋白起作用。或者，已经鉴定 了编码不同同工型的剪接转录物变体。MAGI-I也称为萎缩蛋白-1-相互作用蛋白3 (AIP3)； BAIl-相关蛋白1 (BAP1或BAIAP1)；含Wff结构域的蛋白3 (WWP3)；含三核苷酸重复的基因 19 蛋白(TNRC 19)。参见 Shiratsuchi T 等人(1998) Biochem. Biophys. Res. Commun. 247 597-604。术语“特异性结合”指特征如下的两种分子(例如配体和受体)之间的结合分子 (配体)与另一种特定分子(受体)即使在很多其它不同分子的存在下也能结合，即，在分 子的异质混合物中能显示出一种分子与另一种分子的优先结合。配体与受体的特定结合还 通过在过量未标记配体的存在下(即结合竞争性实验)可检测的标记配体与受体的结合降 低得以证实。化合物通常基本上不含有不期望的污染物。这意味着活性剂通常是至少约50% w/w(重量/重量)纯的，并且基本上不含干扰污染物，例如在其合成中未反应的试剂或副产 物。有时，化合物是至少约80% w/w纯的，更优选至少90或约95%或99% w/w纯的。术语受治疗者包括患有癌症的人、动物受治疗者，特别是家养动物和实验动物。发明详述I.概要与癌发生相关的人型乳头瘤病毒(HPV)和与癌发生不相关的HPV株的不同之处在 于与癌发生相关的HPV株的E6蛋白具有与细胞PDZ蛋白质、包括MAGI-I相互作用的PL 区。本发明人已经发现了抑制该相互作用的化合物。所述化合物可用于治疗HPV感染、包 括其后遗症、特别是宫颈结构不良和宫颈癌或对它们进行预防。无论是否有HPV感染，所述 化合物还增强了肿瘤抑制蛋白P53的表达，因此可用于治疗和预防其它类型的癌症。II.本发明的化合物
本发明提供了式I化合物及其盐、水合物、溶剂合物、二聚体和异构体 其中X各自是具有5-10个环原子的杂芳基环系，其中1-4个环原子是各自独立地选自 N、0和S的杂原子，其中所述杂芳基环系被0-6个R1基团取代；R1各自独立地选自H、CV6烷基、C2_6链烯基、C2_6炔基、Cp6烷氧基、卤素、C^6卤代 烷基、-C。_6 烷基-ORla, -NRlaRlb, -CN、-C(O) Rla, -C(O) ORla, -OC(O) Rla, -C(O)NRlaRlb, -N(Rla) C (0) Rlb、-OC (0) NRlaRlb、-N (Rla) C (0) ORlb、-NRlaC (0) NRlbRlc、-NO2、-CQ_6 烷基-芳基、杂芳基、环 烷基和杂环烷基；Rla、Rlb和Rlc各自独立地选自H和C1^6烷基；Y是选自CH禾口 N的成员；Z 是选自-OR2、-NR2aR2c、-Cp6 烷基-C (0) OR2a、-C (0) R2a、-C (0) OR2a、-OC (0) R2a、-C (0) NR2aR2b、-N (R2a) C (0) R2b、-OC (0) NR2aR2b、-N (R2a) C (0) OR2b、-NR2aC (0) NR2bR2c、-NR2aS (0) 2R2b、_C0_6 烷基-S(0)2NR2bR2。的成员；R2各自独立地选自H、CV6烷基、C2_6链烯基、C2_6炔基、-C1^6烷基-C (0) OR2a ；R2\ R2b和R2e各自独立地选自H、C1^6烷基，或者R2b和R2e —起形成杂环烷基；R3各自独立地是选自H、CV6烷基和-CH (C (0) O-C1^6烷基)2的成员；R4各自独立地是选自H、Cp6烷基、C2_6链烯基、C2_6炔基、Cp6烷氧基、卤素和C1^卤 代烷基的成员；下标η和ο各自独立地是1或2，以便ο和ρ之和是3 ；下标 ρ 是 0-4。优选的化合物以式IA描述 其中 X各自独立地选自具有5-10个环原子的杂芳基环系，其中1-4个环原子是各自独 立地选自Ν、0和S的杂原子，其中至少一个环原子是N，并且其中所述杂芳基环系被0-4个 R1基团取代。优选X各自独立地选自 任选每个X是相同的,最优选X各自是
Z 优选是选自-OR2、-NR2aR2。、-C (0) 0R2a、-NR2aS (0) 2R2b 和-CQ_6 烷基-S (0) 2NR2bR2c;的
成员。更优选Z是选自-OH、-O-C1,烷基-C00H、-O-C1,烷基、-0-C2_6链烯基、-NH6烷
基)2、-NHSO2CH3 和
N^的成员。最优选Z是-O-CV6烷基-COOHc l^NH
特别优选的化合物包括下列化合物
最优选的化合物(7291-0042)具有下式 在一些化合物中，Z包括羧酸。当Z包括羧酸时，本发明的化合物可以彼此相互作 用形成二聚体，即两个相同分子通过共价键或氢键等连接在一起的复合物。在本发明中，二 聚体通过羧酸经氢键形成，例如如下所示 构。
其它官能团也能够形成本发明的化合物的二聚体。图6A显示了其它二聚体的结
Z还可以是模拟羧酸基团的基团。在科学文献中已经描述了很多也称为首基的这 类基团。图6B中显示了一些这类基团。如果主要骨架保持不变，则可以使用多种首基、包 括 7291-0042 中-0-CH2-C00-。在所有上述化合物的描述中，对化合物的称谓包括其盐、水合物、溶剂合物、二聚 体和异构体，除非上下文有明显说明。III.筛诜系统实施例中描述了证明化合物7291-0042活性的筛选系统。可以使用相同和另外的 筛选方法来证实其它化合物的活性。一些筛选方法包括在适宜的结合条件下使(i)已知与 致癌HPV E6PL肽结合的PDZ-结构域多肽(例如MAGI-1)和(ii) PL肽在受试化合物的存 在下接触。然后检测是否存在复合物。在受试化合物存在下的复合物存在水平在统计学上 显著高于没有受试化合物存在下的存在水平表明该受试化合物是激动剂，而在受试化合物 存在下的复合物存在水平在统计学上显著低于没有受试化合物存在下的存在水平表明该 受试化合物是拮抗剂或抑制剂。这类分析的详情在例如美国公开号US 2007/0099199中 有描述。对于细胞中PDZ与PL之间结合的抑制进行了类似的试验(例如参见美国专利US 5，569，608 ；6, 297，020 ；和6，403，383)。拮抗剂优选使PDZ-PL结合减少了至少约40%、优 选至少约50%、通常至少约70%、甚至多达至少约90%。还测试了化合物在抑制癌细胞和癌症动物模型中增殖的活性。通过使用标准技术 如皮下注射、尾静脉注射、脾移植、腹膜内植入、肾囊下植入或orthopin植入将肿瘤细胞导 入同系小鼠，例如将宫颈癌细胞植入宫颈组织中，可以产生动物模型。免疫缺陷小鼠、特别 是裸鼠可特别用于该试验(例如参见The Nude Mouse in Oncology Research，Ε. Boven和 B. Winograd编辑，CRC出版有限公司，1991)。导入该动物的细胞可以来源于已知的宫颈癌 细胞系如HeLa、SiHa细胞系或其它癌症的细胞系。肿瘤或癌细胞样品可以采用标准条件、 包括在液氮中冷冻和贮存从进行手术的患者获得。可以使用转基因小鼠研究来检查化合物对宫颈结构不良和癌发生的活性。已经制 备了在不同启动子控制下的“高危”E6-E7小鼠的大量转基因品系。这些模型中的一些产 生了与在子宫颈上皮内瘤形成(CIN)中观察到的恶变前改变相似的损害。一些转基因小鼠 品系表达肿瘤发生前增殖性的难以分化的上皮损害；一些不形成新生物肿瘤，但是在上皮 中形成增生改变(Griep 等人，1993，J Virol 67 1373-1384 ；Greenhalgh 等人，1994，Cell Growth and Differentiation, 19945 (6) :667_75)。其它癌类型的转基因小鼠模型包括敲 除肿瘤抑制基因的小鼠和具有插入的其它癌基因的小鼠。可以通过测定用受试化合物处理前后肿瘤的大小来确定受试化合物对动物模型 的肿瘤的效力。所植入肿瘤的大小可以用游标卡尺在2或3个方向测定，并采用数学公式 转化为相应的体积。IV. i舌合于治疗的警治疗者适合于治疗的受治疗者包括癌症受治疗者和尚未患有癌症、但处于发生癌症危险 中的受治疗者。可通过该方法治疗的癌症实例包括肾癌、乳癌、脑肿瘤、慢性或急性白血病、 包括急性髓样白血病、慢性髓样白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、淋巴 瘤(例如霍奇金和非霍奇金淋巴瘤、淋巴细胞淋巴瘤、原发性CNS淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤) 和鼻咽癌(nasopharangeal carcinomas)、黑素瘤(例如转移性恶性黑素瘤)、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠 癌、肛门区癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、食道 癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、 儿童实体瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、肿瘤血管发生、脊 柱肿瘤(spinal axis tumor)、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细 胞癌、环境诱发的癌症、包括石棉诱发的癌症如间皮瘤和所述癌症的组合。处于发生癌症危险中的受治疗者包括如通过遗传性变体或患有该疾病的亲属所 显示的那样具有已知的癌症遗传危险的受治疗者。处危受治疗者还包括具有癌前细胞或患 有使他们易患癌症的感染的受治疗者。处危受治疗者还包括已经或即将接受带来癌症发生 危险的操作或经历的个体。所述受治疗者包括接受用于不同类型癌症的治疗，其中放射和 很多形式的化学治疗本身是致癌的。所述受治疗者还包括已经接触放射或致癌化学物质的 那些。本发明的方法尤其可用于感染了 HPV的致癌株或处于这种感染危险中的受治疗 者。感染了致癌HPV的受治疗者是具有含致癌HPV的细胞的受治疗者。致癌株的实例包括 16、18、31、33和35。细胞中的HPV可能不显示任何其它表型(即感染了 HPV的细胞不一定 是癌性的)。换言之，感染了 HPV的细胞在其它方面可以是正常细胞、癌前期(宫颈结构不 良)细胞或癌细胞。与HPV感染相关的癌症包括宫颈癌以及肛门癌、外阴癌、阴道癌、阴茎 癌和一些类型的头颈癌。宫颈癌是宫颈恶性癌症。几乎所有的宫颈癌受治疗者都感染了致癌HPV。但是，感 染致癌HPV不一定导致宫颈癌。感染HPV的细胞可以是并且可以保持是癌前期的。例如， 子宫颈上皮内瘤形成或CIN是宫颈中癌前细胞的异常生长。大多数CIN病例都保持稳定或 者未经多年的干预而被患者的免疫系统消除。但是，小百分比的病例发展为宫颈癌。宫颈 癌的病理类型包括(i)子宫颈上皮内瘤形成，它是宫颈癌的前体；(ii)癌性恶性病，例如 鳞状细胞癌、腺癌、腺鳞状癌、小细胞癌、神经内分泌癌；和(iii)非癌性恶性病，例如黑素 瘤和淋巴瘤。宫颈癌前期和早期癌症通常不显示症状。处于致癌HPV感染危险中的受治疗者包括早期具有性经验的受治疗者，具有多个 性伴侣的受治疗者，与具有多个性伴侣的伴侣发生性关系的受治疗者，吸烟者，有许多孩 子、长期使用避孕丸或具有HIV感染或衣原体属(Chlamydia)感染的受治疗者。处于已知的宫颈癌遗传危险的受治疗者包括有女性亲属已经经历了该疾病的那 些和通过基因或生物化学标记分析确定了其危险的那些。宫颈癌危险的基因标记可以包括 P53基因中的突变。具体而言，在密码子72上具有精氨酸的p53蛋白显示比在密码子72 上具有脯氨酸的P53更容易出现E6-诱导的体内降解，并且精氨酸编码的等位基因编码的 纯合性在患有HPV-相关的宫颈鳞癌的个体种系中比在对照群体中以显著较高的频率被发 现。对于P53的精氨酸编码的等位基因而言纯合的受治疗者对HPV-相关的宫颈肿瘤发生 的易感性比杂合子高7倍(参见Storey等人，1998，Nature 393:229-234)。还包括具有弱 免疫系统的受治疗者，他们抗击HPV感染的能力比其它人低。目前正患有宫颈癌的受治疗者可以从宫颈癌测试中识别，例如巴帕尼科拉乌 (Pap)试验、盆腔检查、HPV DNA试验、阴道镜检查或宫颈活检以及上述危险因素的存在。肛门癌是来源于肛门、即胃肠道远端开口的一类癌症。肛门癌通常是在接近鳞状柱状上皮接合处出现的鳞状细胞癌。肛门癌的危险因素与宫颈癌类似，并且与宫颈一样， 肛管含有可以被HPV感染、导致损害发生的变性带。HPV感染被视为是肛门癌的可能前体 而不是必然原因，因为它是对宫颈癌而言的(Gagne等人，2005，J Acquir Immune Defic Syndr· 40 182-189. ；Frisch 等人，1999，Cancer Res. 59 :753_757)。在与男性发生性关系 的性活跃男性中还已经报道了肛门鳞状上皮损害、即肛门癌前体的高发生率，这可能反映 正在接触 HPV (Chin-Hong 等人，2005，J Acquir ImmuneDefic Syndr. 40 :463_471)。阴茎癌是在阴茎皮肤上或组织中发现的恶性生长，通常起源于阴茎头和/或包 皮。与宫颈癌一样，在阴茎癌中常发现HPV 16 (Salazar等人，2005，Arch. Androl. 51: 327-334)。该类受治疗者包括具有可导致阴茎癌的致癌HPV感染的受治疗者、吸烟受治疗 者和未进行环切的受治疗者。阴茎癌的病理学包括(i)癌前皮肤损害；(ii)原位癌(鲍恩 病、凯拉特增殖性红斑)；和(iii)阴茎的侵袭癌。外阴癌是一种在外阴(女性外生殖器)中的恶性侵袭性生长，占所有妇科癌症的 约4%并且通常影响女性的晚年生活。HPV 16感染使发生外阴癌和侵袭前外阴损害的危险 增加了约4. 5倍。HPV 18感染与发生侵袭前损害之间的相关性也已经得到证实(Bjorge等 人，1997，BMJ 315:646-649)。外阴癌的病理学类型包括鳞状细胞癌、黑素瘤、基底细胞癌、 腺癌和肉瘤。阴道癌是在阴道组织中形成的一类癌。阴道从宫颈(子宫开口)通向身体外部。阴 道癌类型包括鳞状细胞癌和腺癌。危险因素包括其母亲使用己烯雌酚(DES)来预防流产或 先兆流产的女性受治疗者。HPV 16被证明与发生阴道癌和发生侵袭前阴道损害危险增加相 关。HPV 18感染增加了发生侵袭前损害的危险(Bj0rge等人，1997，BMJ 315:646-649)。术语“头颈癌”指一组来源于上呼吸消化道、包括唇、口腔(口)、鼻腔、鼻旁窦、咽 和喉的在生物学上相似的癌症。大部分头颈癌是来源于这些区域的粘膜内层(上皮)的鳞 状细胞癌。头颈癌通常扩散至颈淋巴结，这是该疾病在诊断时的第一(有时是唯一的)表 现。头颈癌与一些环境和生活方式危险因素紧密相关，包括吸烟、饮酒和一些HPV株。一些头颈癌与HPV感染的相关性远比头颈其它区域的癌症密切。在口腔和扁桃体 癌的组织中已经检测到HPV DNA。口咽鳞状细胞癌被证明与HPV感染相关(D' Souza等人， 2007，N. Engl. J.Med. 356 1944-1956)。还证明了食管癌与 HPV 感染、特别是 HPV 16 相关 (Bj0rge等人，1997，Cancer Res. 57 :3989_3992)。V.治疗方法和药物组合物本发明的化合物可以用于癌症、例如上文所述任意类型的癌症的治疗或预防方 法。在预防应用中，给处于发生疾病或紊乱危险的个体以有效抑制、延迟或降低发生该疾病 或紊乱危险的方案(即施用剂量、频率和途径)施用本发明的化合物。例如，对于预防癌症， 给处于发生癌症危险的个体以有效抑制、延迟或降低发生该癌症危险的方案施用化合物。 对于预防致癌HPV感染，给处于HPV感染危险的个体以有效抑制、延迟或降低HPV感染危险 的方案施用化合物。在治疗应用中，给怀疑患有或已知患有疾病的个体以有效降低、消除或 抑制该疾病或其后遗症的至少一种征候或症状的进一步发展的方案施用化合物。例如，对 于治疗癌症，以有效降低或消除癌症或至少抑制患者状况由于癌症进一步恶化的方案施用 化合物。对于治疗HPV感染，以有效降低或消除感染或至少抑制感染及其后遗症的进一步 恶化、例如发生宫颈结构不良、然后发生宫颈癌的方案施用化合物。在预防和治疗方案中，通常分数个剂量施用化合物，例如每日，直到已经达到足够的响应。但是，在预防和治疗方 案中，可以以单剂量施用活性化合物。通常，对治疗进行监测，并且可以给予重复剂量。施用于受治疗者的本发明组合物的实际剂量可以由临床医师和生理因素如体 重、病症严重性、所治疗疾病的类型、在先或并行的治疗干预、受治疗者的特发病以及施用 方式和/或途径来确定。本发明化合物的治疗有效剂量可以提供治疗益处而没有导致明 显的毒性。可以通过标准药学方法在细胞培养物或实验动物中测定化合物的毒性，例如 通过测定LD5tl(50%群体致死的剂量)或LD1CICI(100%群体致死的剂量)。毒性与治疗效果 之间的剂量比是治疗指数(例如参见Fingl等人，1975 :The Pharmacological Basis of Therapeutics,第 1 章，第 1 段)。示例性的剂量包括每次施用约1微克/kg/体重、约5微克/kg/体重、约10微克 /kg/体重、约50微克/kg/体重、约100微克/kg/体重、约200微克/kg/体重、约350微 克/kg/体重、约500微克/kg/体重、约1毫克/kg/体重、约5毫克/kg/体重、约10毫克/ kg/体重、约50毫克/kg/体重、约100毫克/kg/体重、约200毫克/kg/体重、约350毫克 /kg/体k重、约500毫克/kg/体重至1000mg/kg/体重或以上和其中可推导的任意范围。 示例性的范围，在来自本文所列数字的可推导范围的非限制性实例中，根据上文所述数字 可以施用约5mg/kg/体重至约100mg/kg/体重、约5微克/kg/体重至约500毫克/kg/体 重的范围。 在症状可检测或者甚至是不可检测时可以间歇地重复治疗。治疗可以被单独提供 或者与有效治疗HPV感染或癌症或对其进行预防的其它药物(如化疗、放射或手术)组合 地被提供。本发明的化合物可以单独或以药物组合物的形式施用于受治疗者。药物组合物优 选是适于施用于人的形式，包括在FDA或相似主体的GMP规范下制备。用于胃肠道外施用 的组合物优选是基本上等渗的、无菌的和基本上无热原的，等等。可以通过常规的混合、溶 解、制粒、制锭、研磨、乳化、包囊、捕获或冷冻干燥方法制备包含本发明化合物的药物组合 物。可以采用一种或多种生理学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或辅助剂(帮助将活性肽 或肽类似物加工成可以在药学上使用的制备物)以常规方法配制药物组合物。适当的制剂 取决于所选的施用途径。就局部施用而言，可以将本发明的化合物配制成溶液、凝胶、软膏剂、霜剂、混悬剂寸。全身用制剂包括为通过注射如皮下、静脉内、肌内、鞘内或腹膜内注射施用而设计 的制剂和为透皮、透粘膜、口服施用或肺施用而设计的制剂。对于注射，可以将本发明的化合物配制成水溶液，优选在生理可接受的缓冲液如 Hanks溶液、Ringer溶液或生理盐水缓冲液中。溶液可以含有配制剂如助悬剂、稳定剂和/ 或分散剂。或者，化合物可以是用于在使用前用适宜的溶媒如无菌无热原的水重构的粉末形 式。对于透粘膜施用，在制剂中使用适于欲渗透屏障的渗透剂。该施用途径可用于将 化合物递送至鼻腔。对于口服施用，通过将活性肽或肽类似物与可药用载体合并可以容易地配制化合物。所述载体能够将本发明的化合物配制成片剂、丸剂、锭剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆剂、膏 齐U、混悬剂等，用于由所治疗患者口服摄入。就口服固体制剂如粉末、胶囊和片剂而言，适宜 的赋形剂包括填充剂，例如糖，如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；纤维素制品，例如玉米淀粉、 小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤 维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；制粒剂；和粘合剂。如果需要的话，可以加入崩解剂 如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐如海藻酸钠。如果需要的话，固体剂型可以采用标准技术包糖衣或包肠溶衣。就口服液体制剂如混悬液、酏剂和溶液而言，适宜的载体、赋形剂或稀释剂包括 水、二醇、油、醇。另外，可以加入矫味剂、防腐剂、着色剂等。对于含服施用，化合物可以采取以常规方式配制的片剂、锭剂等形式。对于吸入施用，根据本发明使用的化合物可以方便地使用适宜抛射剂以来自加压 药包和喷雾器的气雾剂形式递送，所述抛射剂例如有二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟 乙烷、二氧化碳或其它适宜气体。就加压气雾剂而言，剂量单位可以通过提供递送确定量的 阀门来确定。可以制备用于吸入器或吹入器的例如明胶胶囊和药筒，它们含有化合物和适 宜粉末基质如乳糖和淀粉的粉末混合物。还可以将化合物配制成直肠或阴道用组合物如栓剂或滞留型灌肠剂，例如它们含 有常规的栓剂基质如可可脂或其它甘油酯。局部用组合物和含药载体(例如含药“棉塞”) 也可用于这种施用途径。除上述制剂外，还可以将化合物配制成贮库制剂。这种长效制剂可以通过植入 (例如皮下或肌内)或通过肌注射施用。因此，例如，可以使用适宜的聚合材料或疏水性材 料(例如配制成在可接受油中的乳剂)或离子交换树脂配制化合物或者配制成略溶性衍生 物如略溶性盐。或者，可以使用其它药物递送系统。脂质体和乳剂是熟知的可用于递送本发明的 肽和肽类似物的递送载体实例。还可以使用一些有机溶剂如二甲亚砜，虽然通常以较大毒 性为代价。另外，可以使用缓释系统如含有治疗剂的固体聚合物的半透性基质来递送化合 物。已经确立了多种缓释材料，它们是本领域技术人员所熟知的。缓释胶囊根据其化学性 质可以释放化合物达数周至100天以上。根据治疗剂的化学性质和生物稳定性，可以使用 另外的用于稳定蛋白质的策略。本发明的药物组合物可以包含例如至少约0. 的活性化合物。活性化合物可以 占单位的例如约2%至约75%重量或约25%至约60%以及其中可推导的任意范围。P.药盒还提供了用于实施一种或多种上述方法的药盒。该药盒含有本发明的化合物以及 使用该活性剂来治疗或预防致癌HPV病毒感染的说明书。
实施例实施例1.破坏HPV E6蛋白与MAGI-1PDZ结构域1之间相互作用的化合物的鉴定将MAGI-1PDZ结构域1用作推理性药物设计的靶标以鉴定用于治疗HPV的化合 物。本实验以如下发现为前提HPV的致癌性基于体内HPVE6PL与PDZ蛋白之间的相互作 用。特异性破坏这种相互作用的化合物可以提供比目前使用的那些更有效和侵害性更小的治疗。进行了采用MAGI-1PDZ结构域1结构的分子模型化，以鉴定能够破坏HPV E6蛋白 与MAGI-1PDZ1之间相互作用的候选化合物。使用具有Accelrys软件(Accelrys，圣地亚 哥，加利福尼亚)的In silico筛选来构造和停靠具有MAGI-I蛋白的PDZl结构域的分子 文库(ChemDiv，圣地亚哥，加利福尼亚；Blanca Pharmaceuticals, Mountain View，加利福 尼亚)。分子模型化基于发现具有与MAGI-1PDZ1经由静电作用、氢键和疏水相互作用发生 相互作用的能力的化合物。将In silico筛选的最佳目标进行矩阵/阵列竞争性分析形式(即在如别处所述 的小分子竞争剂的存在和不存在下评估配体向融合蛋白中固相PDZ结构域的停靠的分析) 的筛选。筛选出抑制PDZ/PL相互作用的化合物。根据分析的OD45tl读数，小分子被视为目标。然后，该分析中目标的最佳者进行滴 定结合研究，即逐渐增加相同竞争性分析中的化合物以评估IC5tl值。这些筛选的结构示于 表1。表1 根据In silico筛选，鉴定出各种破坏PDZ/PL相互作用的化合物。如表1所示， 化合物7291-0042以最大的特异性破坏了 HPV E6蛋白与MAGI-1PDZ1之间的相互作用。实施例2.化合物7291-0042对细胞迁移的作用在三种不同细胞系3YlpBlast、3YlpBlast-E6_16 和 3YlpBlast E6-16 Δ PL 上测定 了化合物7291-0042对细胞迁移速率和增殖的作用。采用载体pBlast(InvivoGen，Toulouse,法国)生成 HPV E6_16(野生型)和 HPV E6-16 Δ PL的质粒构建体。通过本领域已知的重组DNA克隆法生成重组质粒。使用LipofectAMINETM2000 试剂(Invitrogen 目录号11668-027)和伴随的方案 将这些构建体转染入大鼠3Y1初级细胞中。将不含插入物的pBlast进行转染作为阴性对 照。将细胞于37°C在含有非必需氨基酸、10% FBS和lug/mL G418的RPMI培养基中孵育直 至汇合(约4天)。
将三种转染的细胞系各自在具有供料盘和盖的96-孔滤板上在具有0. 5 %至10 % FBS梯度和非必需氨基酸的RPMI培养基中接种。将三种不同处理施加于细胞系。将细胞用 40 μ M或60 μ M化合物7291-0042或DMSO处理。滤器插入物各自具有8 μ M孔的聚碳酸酯 膜。保持滤器底面未包被。侵害性和迁移细胞响应于化学诱导物通过滤器的孔迁移，紧贴 至聚碳酸酯膜的底部。通过膜的细胞迁移通过用比色染料(colorometric dye)将粘附至 膜底侧的细胞染色24小时后用微量板读数器于OD56tl进行定量。迁移试验的结果显示用化合物7291-0042处理恢复了基线细胞迁移。换言之，表 达野生型E6蛋白的3YlpBlast-E6-16细胞显示出细胞迁移增加(参见图1，DMSO对照)。 但是，当用40 μ M化合物7291-0042处理这些细胞时，细胞迁移速率与缺少E6PL基元的 3YlpBlast E6-16APL相似。参见图1。已经显示HPV E6-16细胞的细胞迁移是PL依赖性 的，正如E6野生型细胞迁移快于Δ PL细胞所证实的那样。结果显示，化合物7291-0042破 坏了 PL基元与PDZ结构域结合的能力和由此将细胞迁移速率恢复至Δ PL细胞的细胞迁移 速率。实施例3.化合物7291-0042对细胞增殖的作用通过细胞增殖试验进一步分析了化合物7291-0042阻断细胞中发生其它癌性特 征的能力。将实施例2中所述的三种细胞系接种在12-孔板上，使其粘附和在含有10% FBS和非必需氨基酸的EMEM培养基中生长至汇合(约24小时)。将0 μ Μ、20 μ Μ、40 μ M和 80 μ M浓度的100 μ 1化合物7291-0042应用于细胞。在添加化合物后24、48、72和96小时 测定细胞。细胞增殖试验的结果显示，用化合物7291-0042处理恢复了基线细胞增殖速率。 在未添加化合物7291-0042的情况下，表达野生型Ε6蛋白的3YlpBlast-E6-16细胞显示 细胞增殖增加。但是，当用40 μ M化合物7291-0042处理这些细胞时，细胞增殖速率与 3YlpBlast E6-16 Δ PL 和 3YlpBlast 相似。参见图 2A、2B 和 2C。因此，根据实施例2和3的这些结果，来自HPV致癌株的E6蛋白上的PL基元是发 生癌性特征如细胞迁移和细胞增殖所必需的。结果证实，化合物7291-0042能够破坏E6PL 基元与PDZ结构域的结合和由此阻断细胞中这类癌性特征的发生。实施例4.化合物7291-0042在细胞中的药物毒性研究为了测定化合物7291-0042的细胞毒性，在HPV-阳性(E6转化的)宫颈癌细胞系 SiHa和HeLa以及HPV-阴性宫颈癌细胞系C33a中进行了药物毒性研究。将C33a和SiHa 细胞接种在12-孔板上，使其粘附和生长至10，000个细胞/孔。接种HeLa细胞，使其粘附 和生长至5，000个细胞/孔。铺板后24小时向细胞中加入60 μ M浓度的100 μ 1化合物 7291-0042或DMS0。通过WST-I比色测试评估了细胞的细胞毒性。简言之，比色测定以四 唑鐺盐WST-I通过活细胞中的线粒体琥珀酸盐-四唑鐺盐还原酶裂解为甲A替类染料为基 础。当细胞增殖时，更多WST-I被转化成甲月替产物。甲月替染料的量与代谢活性细胞的数量 成正比，并且可以通过在多孔板读数器上于420-480nm(Amax450nm)测定吸光度进行定量。结果显示当用化合物7291-0042处理时，选择性地杀死了 E6转化宫颈癌细胞系 SiHa和HeLa细胞，而HPV-阴性C33a细胞保持存活。在DMSO对照组中，所有细胞保持存 活。参见图3。结果表明化合物7291-0042对E6宫颈癌细胞具有选择性毒性，这提供了化 合物7291-0042可用作治疗宫颈癌的药物的证据。
实施例5.化合物7291-0042对E6癌蛋白质表汰的作用为了确定化合物7291-0042是否对E6蛋白表达有作用，使用了宫颈癌细胞系 HeLa。接种HeLa细胞，使其粘附和生长至0. 5X IO6个细胞/孔。铺板后24小时向细胞中 加入60 μ Μ、80 μ Μ、100 μ Μ、120 μ M浓度的化合物7291-0042或DMSO,孵育24小时。未经处 理的细胞用作另外的对照。进行蛋白质印迹以测定不同样品中存在的Ε6蛋白的相对量。简 言之，在裂解缓冲液中勻化细胞，用SDS-PAGE分离蛋白质样品并转移至膜上用于检测。将 膜与抗-HPV18-E6抗体一起孵育，用二次抗体_酶缀合物标记，检测。为了确保每一样品加 载的蛋白质的量相似，剥离膜并用识别编码管家基因的蛋白质的抗体进行标记。就本实验 而言，使用对抗3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的抗体。对蛋白质印迹中检测的信号进行定量。结果显示当用化合物7291-0042处理 HeLa细胞时，Ε6癌蛋白的量与DMSO对照和未经处理的细胞相比减少(参见图4Α和4Β)。实施例6.化合物7291-0042对d53肿瘤抑制蛋白表汰的作用为了确定化合物7291-0042是否对p53蛋白质表达具有作用，使用了宫颈癌细胞 系HeLa。接种HeLa细胞，使其粘附和生长至0. 5 X IO6个细胞/孔。铺板后24小时向细胞中 加入80 μ Μ、100 μ Μ、120 μ M浓度的Iml化合物7291-0042或DMS0，孵育24小时。使用抗-p53 单克隆抗体进行免疫细胞化学测定以测定不同细胞样品中存在的P53蛋白的相对量。结果显示当用化合物7291-0042处理HeLa细胞时，p53肿瘤抑制蛋白的量比 DMSO对照细胞相比增加(参见图5)。用化合物处理后的细胞的细胞学显示出伴有细胞皱 缩的形态学改变。实施例7.化合物7291-0042选择性地诱导HPV-阳性宫颈癌细胞中的细胞凋亡为了确定化合物7291-0042是否诱导HPV-阳性宫颈癌细胞系中的细胞凋亡，使用 了 HeLa细胞和HPV-阴性细胞系C33A。将HeLa和C33A细胞以1-2 X IO6接种在10-cm平 皿中，使其粘附和生长至80-90%汇合。铺板后24小时向细胞中加入60 μ Μ、80 μ Μ、100 μ Μ、 120 μ M浓度的化合物7291-0042或DMS0，孵育48小时。采用来自普洛麦格(Promega)公 司(Madison，WI)的DeadEnd Fluorometric TUNEL系统进行TUNEL试验以便对细胞群内的 凋亡细胞进行具体定量。简言之，通过胰蛋白酶消化收集细胞，在PBS中洗涤。然后将细胞 在4%福尔马林中固定，在含有核苷酸和rTdT酶的缓冲液中于37°C孵育1小时。添加EDTA 终止反应后，将细胞用PBS洗涤，用Triton X_100进行渗透化处理，加入碘化丙啶以染色所 有细胞。然后通过流式细胞术分析细胞。通过在520士20nm测定荧光素-12-dUTP的绿色 荧光和在> 620nm测定碘化丙啶的红色荧光对细胞凋亡信号进行定量。如图7所示，7291-0042在120M在20%的HeLa细胞中诱导了细胞凋亡，而在该浓 度下仅4%的C33A细胞发生细胞凋亡。该结果证实7291-0042选择性地诱导HPV-阳性癌 细胞的细胞凋亡。尽管已经为清楚理解的目的详细描述了上述本发明，但是显而易见可以在所附权 利要求的范围内实施一些变通。本文引用的所有出版物和专利文件以如同各自单独表示的 那样相同的程度整体引入本文作为所有目的的参考。本发明的任意实施方案、元素、特征或 步骤可以与任意其它实施方案、元素、特征或步骤组合使用，上下文明显地指出除外。由上 文显而易见的是，本发明提供了多种用途。例如，本发明提供了任意上述化合物在治疗、预 防或诊断疾病、特别是癌症和/或HPV感染及其后遗症中的用途。
权利要求
治疗致癌人型乳头瘤病毒(HPV)感染或对其进行预防的方法，该方法包括给具有HPV感染或处于HPV感染危险中的受治疗者施用治疗该感染或其后遗症或对其进行预防的化合物及其盐、水合物、溶剂合物、二聚体和异构体的有效方案，所述化合物具有式I结构其中X各自是具有5 10个环原子的杂芳基环系，其中1 4个环原子是各自独立地选自N、O和S的杂原子，其中所述杂芳基环系被0 6个R1基团取代；R1各自独立地选自H、C1 6烷基、C2 6链烯基、C2 6炔基、C1 6烷氧基、卤素、C1 6卤代烷基、 C0 6烷基 OR1a、 NR1aR1b、 CN、 C(O)R1a、 C(O)OR1a、 OC(O)R1a、 C(O)NR1aR1b、 N(R1a)C(O)R1b、 OC(O)NR1aR1b、 N(R1a)C(O)OR1b、 NR1aC(O)NR1bR1c、 NO2、 C0 6烷基 芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基；R1a、R1b和R1c各自独立地选自H和C1 6烷基；Y是选自CH和N的成员；Z是选自 OR2、 NR2aR2c、 C1 6烷基 C(O)OR2a、 C(O)R2a、 C(O)OR2a、 OC(O)R2a、 C(O)NR2aR2b、 N(R2a)C(O)R2b、 OC(O)NR2aR2b、 N(R2a)C(O)OR2b、 NR2aC(O)NR2bR2c、 NR2aS(O)2R2b、 C0 6烷基 S(O)2NR2bR2c的成员；R2各自独立地选自H、C1 6烷基、C2 6链烯基、C2 6炔基、 C1 6烷基 C(O)OR2a；R2a、R2b和R2c各自独立地选自H、C1 6烷基，或者R2b和R2c一起形成杂环烷基；R3各自独立地是选自H、C1 6烷基和 CH(C(O)O C1 6烷基)2的成员；R4各自独立地是选自H、C1 6烷基、C2 6链烯基、C2 6炔基、C1 6烷氧基、卤素和C1 6卤代烷基的成员；下标n和o各自独立地是1或2，以便o和p之和是3；下标p是0 4。FPA00001176822200011.tif
2.权利要求1的方法，其中化合物具有式IA结构其中 X各自独立地选自具有5-10个环原子的杂芳基环系，其中1-4个环原子是各自独立地 选自Ν、0和S的杂原子，其中至少一个环原子是N，并且其中所述杂芳基环系被0-4个R1基 团取代。
3.权利要求2的方法，其中X各自独立地选自
4.权利要求3的方法，其中每个X是相同的<
5.权利要求3的方法，其中X各自是
6.权利要求1 的方法，其中 Z 是选自-OR2、-NR2aR2。、-C (0) 0R2a、-NR2aS (0) 2R2b 和 _CQ_6 烧 基-S(0)2NR2bR2。的成员。
7.权利要求6的方法，其中Z是选自-OH、-O-CV6烷基-C00H、-O-C1^6烷基、_0_C2_6链烯基、-N (-C1^6 烷基)2、-NHSO2CH3 和 的成员
8.权利要求7的方法，其中Z是-O-Cp6烷基-COOHc
9.权利要求1的方法，其中化合物选自
10.权利要求1的方法，其中化合物具有下式结构
11.前述权利要求任一项的方法，其中所述化合物抑制HPVE6蛋白与多肽的结合，所 述多肽包含来自MAGI-I的第一 PDZ结构域的氨基酸序列。
12.前述权利要求任一项的方法，其中受治疗者感染了HPV。
13.前述权利要求任一项的方法，其中受治疗者患有宫颈癌。
14.前述权利要求任一项的方法，其中受治疗者患有宫颈结构不良。
15.前述权利要求任一项的方法，其中受治疗者处于HPV感染危险中。
16.前述权利要求任一项的方法，该方法包括给患有癌症或处于癌症危险中的受治疗 者施用化合物的有效方案，由此所述化合物治疗癌症或对其进行预防。
17.权利要求16的方法，其中受治疗者感染了致癌人型乳头瘤病毒。
18.权利要求16的方法，其中所述癌症是宫颈癌、阴道癌、肛门癌或头颈癌。
19.权利要求16的方法，其中所述癌症是乳癌、卵巢癌、脑癌、白血病或淋巴瘤。
20.权利要求16的方法，其中所述癌症是宫颈癌。
21.前述权利要求任一项的化合物。
22.用于治疗癌症或对其进行预防的权利要求21的化合物。
23.用于治疗HPV感染或对其进行预防的权利要求21的化合物。
24.权利要求21的化合物在制备治疗癌症或对其进行预防的药物中的用途。
25.权利要求21的化合物在制备治疗HPV感染或对其进行预防的药物中的用途。全文摘要
本发明提供了可用于治疗癌症、特别是宫颈癌或对其进行预防的化合物。
文档编号A61K31/405GK101909620SQ200880123670
公开日2010年12月8日 申请日期2008年10月31日 优先权日2007年11月2日
发明者A·A·范塔耶, J·施维泽, M·P·贝尔马里斯, P·S·卢, 王晶晶 申请人:阿尔伯维塔公司