专利名称：一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法
技术领域：
本发明属于天然产物提取领域，特别是一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质 的方法。
背景技术：
淡豆豉又名香豉、淡豉、大豆豉，是豆科植物大豆(G/_yd"ewa;c(L.)Merr.) 的成熟种子与青蒿、桑叶蒸罨、发酵加工而成的制品，发源于中国，是中华人民 的传统食品，也是我国卫生部确定的第一批药食兼用品种之一。作为常用中药， 历版《中国药典》均有记载。因炮制方法的不同，有的性寒，有的微热，它具有 解肌发表、宣郁除烦、解毒清热、透疹解毒的功效，适用于风热头疼，胸闷呕吐， 痰多虚烦等症。淡豆豉富含异黄酮及皂苷类化合物。
自由基对细胞和组织的损伤是其致病的基础，由于人体是由各种各样不同功 能的细胞组成，因而自由基对不同细胞的损伤可导致表面看起来毫无关连的疾 病。如自由基摧毁细胞膜，导致细胞膜发生变性，使得细胞不能从外部吸收营 养，也排泄不出细胞内的代谢废物，并丧失了对细菌和病毒的抵御能力；自由基 攻击正在复制中的基因，造成基因突变，诱发癌症发生，自由基激活人体免疫系 统，使人体表现出过敏反应，或出现如红斑狼疮等自体免疫疾病；自由基作用于 人体内酶系统，导致胶原蛋白酶和硬弹性蛋白酶的释放，这些酶作用于皮肤中的 胶原蛋白和硬弹性蛋白并使这两种蛋白产生过度交联并降解，结果使皮肤失去弹 性出现皱纹及囊泡；类似的作用使体内毛细血管脆性增加，使血管容易破裂，这 可导致静脉曲张、水肿等与血管通透性升高有关疾病的发生；自由基侵蚀机体组 织，可激发人体释放各种炎症因子，导致各种非菌类炎症；自由基侵蚀脑细胞， 使人得早老性痴呆的疾病；自由基氧化血液中的脂蛋白造成胆固醇向血管壁的沉 积，引起心脏病和中风；自由基引起关节膜及关节滑液的降解，从而导致关节炎； 自由基侵蚀眼睛晶状体组织引起白内障；自由基侵蚀胰脏细胞引起糖尿病。总之， 自由基可破坏胶原蛋白及其它结缔组织，干扰重要的生理过程，引起细胞DNA 突变。而食用含黄酮等抗氧化剂食物可降低患心脑血管疾病的几率。
淡豆豉应用广泛，但对其抗氧化物的提取及体外抗氧化活性尚缺乏研究。目 前，未见淡豆豉抗氧化物质提取工艺研究报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法。采用该方 法能有效提高淡豆豉的抗氧化效率，减少服用量。该方法具有提取效率高，工艺 流程简单，设备投入小，生产成本低，易于产业化的优点。
本发明是通过以下技术方案来实现的
一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法，其提取方法的步骤如下
(1) 将淡豆豉粉碎，过10 50目筛，制成淡豆豉粗粉；
(2) 将淡豆豉粉置提取容器中，加入10 30倍浓度为50 95%的乙醇溶液进 行提取，提取温度50 85。C，提取时间为2 4h，重复浸提2 4次，使淡豆豉 中有效成分充分提取，滤出溶液待用；
(3) 将提取液浓縮至淡豆豉重量的2 10倍体积，然后上聚酰胺柱进行纯化；
(4) 采用6 12倍柱床体积的清水洗脱，除去水溶性杂质；
(5) 采用3 8倍柱床体积的60 95%浓度的乙醇溶液洗脱，洗脱液经浓縮、 冷冻干燥得到抗氧化活性物质。
而且，纯化采用的聚酰胺为50 400目，上样方式采用动态上样方式。 本发明的优点和有益效果是
本发明采用常用发酵类中药-淡豆豉为原料制备强抗氧化活性物质，淡豆豉 在我国年产量巨大，提取原料容易获得，制备过程中溶剂为水和乙醇，避免了有 毒有机溶剂的使用，这样能最大程度保持最终产品的安全性，使所得纯化物无有 机溶剂残留。所用乙醇和聚酰胺都可回收重复使用，工艺流程及设备简单适合于 大规模生产，并为进一歩开发为抗氧化功能食品奠定了基础。所制备的淡豆豉抗 氧化活性物质产品适用于医药及保健品、食品抗氧化剂、化妆品等行业，提取物 残渣经加工后可作为饲料、肥料，实现综合利用。
具体实施例方式
本发明通过以下实施例进一歩详述，但本实施例所叙述的技术内容是说明性 的，而不是限定性的，不应以此来局限本发明的保护范围。
本发明所涉及的从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法步骤如下
(1) 将淡豆豉粉碎，过50目筛，形成淡豆豉粗粉；
(2) 称取100克淡豆豉粗粉，在该淡豆豉粉中加入1500mL浓度为75%的乙 醇溶液，75'C提取时间为3h，重复浸提3次，提取液合并并浓缩至200mL。
(3) 后上聚酰胺柱进行纯化，聚酰胺采用100 200目，采用动态上样方式； 以UV (紫外色谱)在0.01mol/LNaOH水溶液中于273nm监测流出液，至开始泄漏时停止上样；
(3) 采用IO倍柱床体积的蒸馏水洗脱，以除去水溶性杂质；
(4) 采用5倍柱床体积、浓度为75%的乙醇溶液洗脱，合并后的洗脱液经浓 縮、冷冻干燥得到抗氧化活性物质。
将此抗氧化粉末产品用甲醇配制成100ug/mL溶液，以同浓度的Vc (维生素 c)和BHT (2，4-二叔丁基甲基苯酚)为阳性对照，做DPPH自由基清除试验和 FRAP法抗氧化能力测试。结果见表1和表2所示。
表1 100ug/mL样品DPPH自由基清除率
样品(100ug/mL)BHT Vc淡豆豉抗氧化物质
清除率(o/0)57.53±1.08 97.85±0.97*90.53±0.89*
*表示各样品之间存在显著性差异(P <0.01)
表2 100ug/mL样品FRAP法抗氧化能力样品(100ug/mL)BHT Vc淡豆豉抗氧化物质
A593 0.402±0.035 0.621士0.0K0.594±0.037*
*表示各样品之间存在显著性差异(P <0.01)
权利要求
1. 一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法，其特征在于该方法包括如下步骤(1)将淡豆豉粉碎，过10～50目筛，制成淡豆豉粗粉；(2)将淡豆豉粉置提取容器中，加入10～30倍浓度为50～95％的乙醇溶液进行提取，提取温度50～85℃，提取时间为2～4h，重复浸提2～4次，使淡豆豉中有效成分充分提取，滤出溶液待用；(3)将提取液浓缩至淡豆豉重量的2～10倍体积，然后上聚酰胺柱进行纯化；(4)采用6～12倍柱床体积的清水洗脱，除去水溶性杂质；(5)采用3～8倍柱床体积的60～95％浓度的乙醇溶液洗脱，洗脱液经浓缩、冷冻干燥得到抗氧化活性物质。
2. 根据权利要求1所述的一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法，其 特征在于纯化采用的聚酰胺为50 400目，上样方式采用动态上样。
全文摘要
本发明涉及一种从淡豆豉中提取抗氧化活性物质的方法。是通过以下步骤实现的采用乙醇提取、聚酰胺纯化、洗脱液浓缩、干燥，最终得到具有强抗氧化活性提取物，属于天然产物提取领域。本发明采用淡豆豉为原料制备强抗氧化活性物质，工艺简单，投资较少及设备简单适合于大规模生产，为进一步开发为抗氧化功能食品奠定了基础。所制备的淡豆豉抗氧化活性物质产品适用于医药及保健品、食品抗氧化剂、化妆品等行业。
文档编号A61K36/48GK101530455SQ20091011913
公开日2009年9月16日 申请日期2009年3月4日 优先权日2009年3月4日
发明者崔力剑, 李云鹏, 牛丽颖, 王永利, 王鑫国, 窦玉红, 芸 黄 申请人:河北医科大学