抗her2抗体-药物偶联物和化疗剂的组合,及使用方法

专利名称：抗her2抗体-药物偶联物和化疗剂的组合,及使用方法
抗HER2抗体-药物偶联物和化疗剂的组合，及使用方法
对相关申请的交叉引用
依据37CFR § 1. 53(b)提交的此非临时申请依据35USC § 119(e)要求2008年3月 18日提交的美国临时申请流水号61/037，410(通过述及完整收入本文)的权益。发明领域
本发明一般涉及具有针对高增殖性病症诸如癌症的活性的化合物的药物组合。本 发明还涉及使用所述化合物组合体外，原位，和体内诊断或治疗哺乳动物细胞，或有关病理 状况的方法。
发明背景
HER2 (ErbB2)受体酪氨酸是表皮生长因子受体(EGFR)跨膜受体家族的一个成员。 在大约20%的人乳腺癌中观察到HER2的过表达，而且HER2的过表达涉及与这些肿瘤有关 的侵入性生长和不良临床结果(Slamon等(1987) Science 235:177-182)。
trastuzumab (CAS 180288-69-1，HERCEPTIN ，huMAb4D5_8，rhuMAbHER2， Genentech)是鼠HER2抗体的一种重组DNA衍生人源化，IgGl κ，单克隆抗体型式，其在 基于细胞的测定法中以高亲和力(Kd = 5ηΜ)选择性结合人表皮生长因子受体2蛋白， HER2 (ErbB2)的细胞外结构域(US5677171 ;US 5821337 ；US 6054297 ；US 6165464 ；US 6339142 ；US 6407213 ；US 6639055 ；US 6719971 ；US 6800738 ；US 7074404 ；Coussens 等 (1985) Science 230 :1132-9 ；Slamon 等(1989)kience 244 :707-12 ；Slamon 等 O001)New Engl. J. Med. 344 :783-792)。trastuzumab含有人框架区及结合HER2的鼠抗体0D5)的互 补决定区。trastuzumab结合HER2抗原，由此抑制癌性细胞的生长。已经在体外测定法中 和在动物中显示了 trastuzumab抑制过表达HER2的人肿瘤细胞的增殖(Hudziak等(1989) Mol Cell Biol 9 :1165-72 ；Lewis 等(1993)Cancer Immunol Immunother ；37 :255-63 ； Baselga 等(1998) Cancer Res. 58 J825-2831)。trastuzumab 是抗体依赖性细胞的细胞毒 性，ADCC的介导物(Lewis等(1993)Cancer ImmunolImmunother 37(4) :255-263 ；Hotaling 等(1996)[abstract]. Proc. Annual Meeting Am Assoc Cancer Res ；37 :471 ；Pegram MD等 (1997)[abstract]. Proc Am Assoc Cancer Res ；38 602 ；Sliwkowski ^ (1999)Seminars in Oncology 26(4)，Suppl 12 :60-70 ；Yarden Y.禾口 Sliwkowski，Μ· (2001)Nature Reviews :Molecular Cell Biology, Macmillan Magazines, Ltd. , Vol. 2 :127-137)。
HERCEPTIN 在1998年被批准用于治疗已经接受广泛在先抗癌疗法，具有过 表达ErbB2的转移性乳腺癌的患者(Baselga等，(1996) J. Clin. Oncol. 14 :737-744)，而且 已经在超过 300，000 名患者中使用(Slamon DJ 等，N Engl J Med2001 ；344 :783-92 ；Vogel CL 等，J Clin Oncol 2002 ；20 :719-26 ；Marty M 等，J Clin Oncol 2005；23 :4265-74 ； Romond EH 等，T N EnglJ Med 2005 ；353 :1673-84 ；Piccart-Gebhart MJ 等，N Engl J Med 2005 ；353 :1659-72 ；Slamon D 等，[abstract]. Breast Cancer Res Treat 2006， 100 (Suppll) 52)。在 2006 年，FDA 批准了 HERCEPTIN (trastuzumab，Genentech Inc.)作为含有多柔比星，环磷酰胺和帕利他塞的治疗方案的一部分用于具有HER2阳性，4结节阳性乳腺癌的患者的辅助治疗。虽然HERCEPTIN 的开发给具有HER2阳性肿 瘤的患者提供了比单独的化疗显著要好的结果，但是实质上所有HER2阳性，转移性乳腺 癌(MBC)患者最终会在已有疗法上进展。仍有机会来改善具有MBC的患者的后果。尽管 trastuzumab的多样作用机制，许多用trastuzumab治疗的患者不显示响应或在一段时间 的治疗受益后停止响应。有些HER2+(HER2阳性)肿瘤没有响应HERCEPTIN ，而且肿瘤 有响应的患者大多数最终有发展。临床上显著需要为对HERCEPTIN 治疗不响应或响 应不足，具有过表达HER2的肿瘤或其它与HER2表达有关的疾病的患者开发别的针对HER2 的癌症疗法。
抗体靶向疗法的一种替代办法是利用抗体来特异性递送细胞毒性药物至表达 抗原的癌细胞。美登木素生物碱类，即抗有丝分裂药物美登素的衍生物，以与长春花生 物碱类药物相似的方式结合微管(Issell BF等(1978)Cancer Treat. Rev. 5 =199-207 ； Cabanillas F 等(1979)Cancer Treat Rep,63 :507-9) 由美登木素生物碱类 DMl 连接 至trastuzumab构成的抗体-药物偶联物(ADC)在过表达HER2的trastuzumab敏感性 和trastuzumab抗性肿瘤细胞系，和人乳腺癌的异种移植物模型中显示有力的抗肿瘤活 性。美登木素生物碱类经MCC接头连接至抗HER2鼠乳腺癌抗体TA. 1的偶联物比相应的 具有二硫化物接头的偶联物效力低200倍(Chari等(1992)Cancer Res. 127-133)。由美 登木素生物碱类DMl连接至trastuzumab构成的抗体-药物偶联物(ADC)在过表达HER2 的trastuzumab敏感性和抗性肿瘤细胞系和人癌症的异种移植物模型中显示有力的抗肿 瘤活性。trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)当前正在其疾病对HER2定向疗法不应的患者中在 II 期临床试验中进行评估(Beeram 等 Q007) “A phase I study of trastuzumab-MCC-DM 1(T-DM 1)，a first-in-class HER2antibody-drug conjugate (ADC), in patients (pts) with HER2+metastatic breast cancer (BC)，，，American Society of Clinical Oncology 43rd : June 02 (Abs 1042 ；Krop 等，European Cancer Conference ECC0, Poster 2118, September 23-27，2007，Barcelona ;US 7097840 ；US 2005/0276812 ；US 2005/0166993)。
以一些剂量给药方案或施药形式一起使用两种或更多种药物的组合疗法通常具 有下述一项或多项目的(i)通过组合具有最小交叉耐药性的药物来降低发生获得性耐 药性的频率，(ii)降低具有非交叠毒性和相似治疗特性的药物的剂量以实现功效及较少 的副作用，即提高治疗指数，(iii)通过使用一种药物，诸如改变细胞周期阶段或生长特性 使细胞对另一种药物的作用敏感，和(iv)通过探索两种药物在生物学活性中的加和效应 (additivity)，或大于加和效应的效应来实现增强的效力(Pegram，Μ.等(1999) Oncogene 18 :2241-2251 ；Konecny, G.等(2001)Breast Cancer Res. and Treatment 67:223-233; Pegram, M.等(2004)J. ofthe Nat. Cancer Inst. 96(10) :739-749 ；Fitzgerald ^ (2006) Nature Chem. Biol. 2 (9) :458-466 ；Borisy ^ (2003) Proc. Natl. Acad. Sci 100(13) 7977-7982)。
Loewe 加和效应(Chou, Τ. C.和 Talalay，P. (1977) J. Biol. Chem. 252 :6438-6442 ； Chou, Τ. C.禾口 Talalay，P. (1984) Adv. Enzyme Regul. 22 :27-55 ；Berenbaum, Μ. C. (1989) Pharmacol. Rev. 41 :93-141)和 Bliss 独立性 / 协同性(Bliss, C. I. (1956)Bacteriol. Rev. 20 :243-258 ；Greco 等(1995)Pharmacol. Rev. 47 :331-385)是基于参数诸如 IC50,即 实现50%目标抑制需要的，在最简单的情况中等于Ki的药物剂量，与单一疗法相比为组合疗法计算预期剂量-响应关系的方法。
已经报告了 HER2 二聚化抑制剂抗体和EGFR抑制剂用于针对癌症的组合疗法(US 2007/0020261)。trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)和 pertuzumab 已经分别在 MBC 患者中展示 了活性，而且pertuzumab和trastuzumab的组合已经显示了在HER阳性MBC患者中有活性 (Baselga J 等,“A Phase II trial of trastuzumab and pertuzumab in patients with HER2-positive metastatic breast cancer that had progressed during trastuzumab therapy :full response data", European Society of Medical Oncology, Stockholm, Sweden, September 12-16,2008)。
发明概述
本发明一般涉及与一种或多种化疗剂组合施用以抑制癌细胞生长的抗HER2抗 体-药物偶联物，trastuzumab-MCC-DMl。trastuzumab-MCC-DMl和化疗剂的某些组合在体 外和在体内在抑制癌细胞生长中显示协同效应。本发明的组合和方法可用于治疗高增殖性 病症诸如癌症。所述组合可抑制哺乳动物中的肿瘤生长，而且可用于治疗人癌症患者。
一方面，本发明包括一种用于治疗高增殖性病症的方法，包括以组合配制剂 形式或交替地对哺乳动物施用治疗剂组合，其中所述治疗剂组合包含治疗有效量的 trastuzumab-MCC-DMl，和治疗有效量的选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体，5-FU， 卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390 的化疗剂。
所述治疗有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治疗有效量的化疗剂可以以组 合配制剂形式或交替地施用。
本发明还涉及使用所述组合物体外，原位，和体内诊断或治疗哺乳动物细胞，生物 体，或有关病理状况的方法。
本发明还涉及其中所述治疗剂组合的施用导致协同效应的方法。
本发明的另一个方面是药物组合物，其包含trastuzumab-MCC-DMl，选自HER2 二 聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体，5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，⑶C-0941，和 GNE-390的化疗剂；和一种或多种药学可接受载体，助流剂，稀释剂，或赋形剂。
本发明的另一个方面提供治疗高增殖性疾病或病症的方法，包括对需要此类治疗 的哺乳动物施用有效量的trastuzumab-MCC-DMl和化疗剂。trastuzumab-MCC-DMl和化疗 剂可以共配制，供作为药物配制剂组合施用，或者它们可以作为治疗剂组合交替地(交替， 序贯给药)分开施用。在一个实施方案中，T-DMl是通过输注递送的，而化疗剂是口服递送 的。
本发明的另一个方面提供为体内功效预测有效药物组合的方法，其中所述组合包 括trastuzumab-MCC-DMl和抗癌标准化疗剂。定性和定量分析来自体外细胞增殖和体内肿 瘤异种移植物实验的功效数据。定量分析方法可基于Chou和Talalay的中位效应(median effect)和等效线图解法，生成组合指数(Combination Index, Cl)值来表示协同，拮抗，或 加和，或者基于Bliss独立性带状图偏离。
本发明的另一个方面是一种使用本发明的治疗剂组合来治疗哺乳动物中的疾病 或状况(诸如癌症，包括受HER2或KDR9 (VEGF受体1)调控的)的方法。
本发明的另一个方面是本发明的治疗剂组合在制备用于治疗哺乳动物中疾病或 状况(诸如癌症，包括受HER2或KDR9 (VEGF受体1)调控的)的药物中的用途。6
本发明的另一个方面包括制品或试剂盒，其包含trastuzumab-MCC-DMl，化疗剂， 容器，和任选的指示治疗方法的包装插页或标签。
本发明的另一个方面包括一种用于为癌症治疗确定要组合使用的化合物的方法， 包括a)对体外肿瘤细胞系施用trastuzumab-MCC-DMl，和选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗 VEGF 抗体，5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390 的化疗剂的治 疗剂组合，并b)测量协同或非协同效应。
本发明的另外的优点和新颖的特征部分在下面的说明中列出，部分在检查下面的 说明书后对于本领域技术人员是显而易见的或可以通过本发明的实践而学会。凭借所附权 利要求中特别指出的手段/工具，组合，组合物，和方法可以认识和获得本发明的优点。
附图简述


图1显示3天SK-BR-3体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的trastuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM 1)，和 trastuzumab 和 T-DM 1 组合的图。
图2显示3天BT-474EEI体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的trastuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM1)，和 trastuzumab 和 T-DM1 组合的图。
图3显示5天MDA-MB-175体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和 pertuzumab 和 T-DM1 组合的图。
图3a显示5天MDA-MB-175体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和 pertuzumab 和 T-DM1 组合的图。
图4显示5天BT-474体外细胞生存力相对于各种各种固定剂量的pertuzumab联 合trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和单独的各种剂量的T-DMl的剂量响应的图。
图5显示5天BT-474体外细胞生存力相对于各种固定剂量的 trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)联合 pertuzumab，和单独的各种剂量的 pertuzumab 的剂量 响应的图。
图6显示5天BT-474体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的pertuzumab， trastuzumab-MCC-DM 1 (T-DM 1)，和 pertuzumab 和 T-DM 1 组合的图。
图7显示3天SK-BR-3体外细胞生存力相对于不同剂量的T-DMl联合固定剂量的 lapatinib (4. 5nM，14nM，41nM，123nM)，和单独的不同剂量的 T-DM1 (0-1000ng/ml)的图。
图7a显示3天SK-BR-3体外细胞生存力相对于T-DM1，lapatinib，和固定剂量比 例的T-DMl和lapatinib组合的图。
图8a显示3天BT-474体外细胞生存力相对于T-DM1，lapatinib，和固定剂量比 例的T-DMl和lapatinib组合的图。
图8显示3天BT-474体外细胞生存力相对于不同剂量的T-DMl联合固定剂量的 lapatinib (1. 5nM, 4. 5nM, 14nM, 41nM, 123nM)，和单独的不同剂量的 T-DMl (0-1000ng/ml) 的图。
图9显示3天BT-474-EEI体外细胞生存力相对于不同剂量的T-DMl联合固定剂量 的 lapatinib (14nM，41nM，123nM，370nM，IlllnM)，和单独的不同剂量的 T-DMl (O-IOOOng/ ml)的图。
图10显示如下给药后接种入SCID米色小鼠乳房脂肪垫的KPL-4肿瘤的体内 肿瘤体积均值随时间变化的图(每只小鼠Matrigel中3百万个细胞)=(I)ADC缓冲液，(2)pertuzumab 15mg/kg, (3)T-DM10. 3mg/kg，(4)T-DMllmg/kg, (5)T_DM13mg/kg，(6) pertuzumab 15mg/kg+T-DM10. 3mg, (7)pertuzumab 15mg/kg+T-DMllmg/kg, (8)pertuzumab 15mg/kg+T-DMi;3mg/kg。ADC 缓冲液和 T-DMl 第 O 天给药一次。pertuzumab 第 0，7，和 14 天给药。
图11显示如下给药后接种入SCID米色小鼠乳房脂肪垫的KPL-4肿瘤的体内 肿瘤体积均值随时间变化的图(每只小鼠Matrigel中3百万个细胞)=(I)ADC缓冲液， (2) 5-FU 100mg/kg, (3) pertuzumab 40mg/kg,第一剂 pertuzumab (第 5，7，禾口 9 组)为 2x 加载剂量，(4)B20-4. l，5mg/kg，(5) T-DM1，5mg/kg，(6) 5-FU，100mg/kg+T-DMl，5mg，(7) pertuzumab 40mg/kg+T_DMl，5mg/kg，(8)B20_4. 1，5mg/kg+T_DMl，5mg/kg，(9)B20-4.1, 5mg/kg+pertuzumab，40mg/kg。ADC缓冲液和T-DMl通过单次iv注射第0天给药一次。 pertuzumab 第 0，7，14，21 天给药(qwk x4)。5-FU 第 0，7 和 14 天给药(qwkx3)。B20-4. 1 第 0，3，7，10，14，17，21 和 24 天给药(2X/wk，总共 8 次)。
图12显示如下给药后接种入CRL nu/nu小鼠乳房脂肪垫的MMTV_HER2Fo5转基 因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介(ADC缓冲液)，(2)B20-4. 1， 5mg/kg, (3)T-DMl，3mg/kg，(4)T-DMl，5mg/kg，(5)T-DMl，10mg/kg，(6) B20-4. 1，5mg/ kg+T-DM13mg/kg, (7)Β20_4· 1，5mg/kg+T_DM15mg/kg，⑶B20-4. 1，5mg/kg+T_DMl，10mg/kg。 ADC缓冲液和T-DMl第0和21天给药。B20-4. 1第0，3，7，10，14，17，21和24天给药(2X/ wk x4,总共8次)。
图13显示如下给药后接种入CRL nu/nu小鼠乳房脂肪垫的MMTV_HER2Fo5转 基因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介(ADC缓冲液)，(2)T-DMl 10mg/kg, (3) 5-FU 100mg/kg, (4)吉西他滨 120mg/kg, (5)卡钼 100mg/kg, (6) 5-FU IOOmg/ kg+T-DM110mg/kg, (7)吉西他滨 l20mg/kg+T-DM110mg/kg，(8)卡钼 100mg/kg+T-DM110mg/ kg。ADC缓冲液，T-DMl和卡钼第0天给药；单次注射。5-FU第0，7和14天给药(qwk x3)。 吉西他滨第0，3，6和9天给药(q3d x4)。
图14显示如下给药后接种入Harlan无胸腺裸小鼠乳房脂肪垫的MMTV-Her2Fo5 转基因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介(PBS缓冲液)iv，qwk x4, (2)lapatinib 101mg/kg, po, bid x21, (3)pertuzumab 40mg/kg, iv, qwk x4, (4) B20-4. 15mg/kg, ip,2x/wk x4, (5) T-DM115mg/kg, iv,(6) lapatinib IOlmg/ kg, po, bid x21 +T-DM115mg/kg, iv, q3wk 至 结 束，(7)pertuzumab 40mg/kg, iv, qwk x4+T-DM115mg/kg, iv, q3wk 至结束，⑶ B20-4. 15mg/kg, ip,2x/wk x4+T_DM115mg/kg，iv, q3wk至结束。
图15显示如下给药后接种入Harlan无胸腺裸小鼠乳房脂肪垫的MMTV_Her2 Fo5 转基因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介(PBS缓冲液)po，bid x21, (2)T-DM1，7. 5mg/kg，iv，qd xl,(3)T-DM1，15mg/kg，iv，qd xl, (4)ABT-869，5mg/kg，po，bid x21, (5)ABT-869,15mg/kg, po, bid x21, (6)T-DM1,7. 5mg/kg, iv, qd χ1+ABT-869,5mg/kg, po，bid x21, (7)T-DM17. 5mg/kg, iv,qd xl+ABT—869，15mg/kg，po，bidx21，(8)T-DMl,15mg/ kg,iv,qd xl+ABT-869,5mg/kg, po,bid x21,(9)T-DM1,15mg/kg,iv,qd χ1+ABT-869,15mg/ kg, po,bid x21ο
图16显示如下给药后接种入Harlan无胸腺裸小鼠乳房脂肪垫的MMTV-Her2Fo5转基因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图⑴媒介，i V, qwk x3, (2)T-DMl, 7. 5mg/kg, iv, q3wk x2, (3) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2, (4) ^Hftll^, 30mg/kg, iv, qwk x3, (5)T-DM1,7. 5mg/kg, iv, q3wk x2+多胃，30mg/kg，iv, qwk x3, (6) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2+ 多西他赛，30mg/kg, iv, qwk x3
图17显示如下给药后种接入Harlan无胸腺裸小鼠乳房脂肪垫的MMTV-Her2Fo5 转基因乳腺肿瘤的体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介，po，qd x21, (2)T-DMl, 7. 5mg/kg, iv, q3wk x2, (3) T-DMl, 15mg/kg, iv, q3wk x2, (4) lapatinib, lOOmg/kg, po, bid x21, (5)T-DMl，7. 5mg/kg,iv,q3wk x2+lapatinib,lOOmg/kg,po,bid x21, (6)T-DMl,15mg/ kg, iv, q3wk x2+lapatinib, lOOmg/kg, po, bid x21。
图18显示3天SK-BR-3体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的5-FU， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和固定剂量比例的5-FU和T-DM1组合的图。
图19显示3天BT-474体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的5_FU， trastuzumab-MCC-DMl (T-DM1)，和固定剂量比例的5-FU和T-DM1组合的图。
图20显示3天SK-BR-3体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的吉西他滨， trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和固定剂量比例的吉西他滨和T-DMl组合的图。
图21显示3天MDA-MD-361体外细胞生存力相对于IC50倍数浓度的吉西他滨， trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，和固定剂量比例的吉西他滨和T-DMl组合的图。
图22显示以IC50倍数浓度0. 2 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定剂量 比例的T-DMl和GDC-0941 (62. 5nM至1 μ Μ)组合处理后3天KPL4体外细胞生存力(增殖) 的图。加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图 23 显示以 IC50 倍数浓度 0. 0625x 至 16x 用 T-DMl，GDC-0941，和 1 25 固定 剂量比例的 T-DMl (1. 25 至 80ng/ml)和 GDC-0941 (31. 25nM 至 2 μ Μ)组合处理后 3 天 KPL4 体外细胞生存力(增殖)的图。加和效应加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图24显示以IC50倍数浓度0至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定剂量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941组合处理后3天Her2扩增的、HERCEPTIN 耐药性 的、PIK3CA(H1047R)突变的KPL-4细胞体外细胞生存力(增殖)的图。
图25显示以T-DMl浓度高至160ng/ml用T-DM1，⑶C-0941，和固定剂量比例的 T-DMl和⑶C-0941组合处理后M小时KPL4胱天蛋白酶3/7体外细胞生存力(增殖)的 图。
图26显示以T-DMl浓度0至200ng/ml用T-DMl，GDC-0941，和固定剂量比例的 T-DMl和⑶C-0941组合处理后3天KPL4体外细胞生存力(增殖)的图。
图27显示以IC50倍数浓度0. 12 至8x用T-DM1，GDC-0941，和1 20固定剂量比 例的 T-DMl (3. 125 至 50ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM 至 1 μ Μ)组合处理后 3 天MDA-0MB-361 体外细胞生存力(增殖)的图。加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图洲显示以IC50倍数浓度0. 12 至8x用T-DM1，GDC-0941，和1 20固定剂量比 例的 T-DMl (3. 125 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM至 2 μ Μ)组合处理后 3 天MDA-0MB-361 体外细胞生存力(增殖)的图。加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图四显示以IC50倍数浓度0. 12 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定剂量 比例的 T-DMl (3. 125 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (31. 25nM 至 1 μ Μ)组合处理后 3 天 ΒΤ-474体外细胞生存力(增殖)的图。加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图30显示以IC50倍数浓度0. 2 至4x用T-DM1，GDC-0941，和1 10固定剂量 比例的 T-DMl (6. 25 至 100ng/ml)和 GDC-0941 (62. 5nM 至 1 μ Μ)组合处理后 3 天 ΒΤ-474 体 外细胞生存力(增殖)的图。加和效应的Bliss预测以虚线绘图。
图31显示以IC50倍数浓度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定剂量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941组合处理后3天Her2扩增的，非PI3K突变的，AU565 细胞体外细胞生存力(增殖)的图。
图32显示以IC50倍数浓度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定剂量比例 的 T-DM1+PI103，和 T-DM1+GDC-0941 组合处理后 3 天 Her2 扩增的，PIK3CA (C420R)突变的， EFM192A细胞体外细胞生存力(增殖)的图。
图33显示以IC50倍数浓度O至16x用T_DM1，PI103，GDC_0941，和固定剂量比例 的T-DM1+PI103，和T-DM1+GDC-0941组合处理后Her2扩增的，HERCEPTIN 耐药性的， PIK3CA(H1047R)突变的，HCCl卯4细胞体外细胞生存力(增殖)的图。
图34显示如下给药后接种入CRL nu/nu小鼠的MMTV_Her2Fo5转基因乳腺肿瘤的 体内肿瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介，po, qd x21, (2)T_DMl，10mg/kg，iv, q3wk, (3) 5-FU, lOOmg/kg, po, qwk x2, (4) T-DM1，5mg/kg，iv, q3wk+5-FU, lOOmg/kg, po, qwk x2。
图35显示如下给药后接种入CRL nu/nu小鼠的MMTV-Her2Fo5转基因乳腺肿瘤的 体内肿瘤体积均值随时间变化的图⑴媒介，po，qd x21, (2)T-DMl,5mg/kg, iv, qd xl, (3)GDC-0941,lOOmg/kg,po,qd x21, (4)GDC-0152,50mg/kg, po,qwk x3, (5)T-DM1，5mg/kg， iv, qd xl+⑶C-0941，100mg/kg，po，qd x21, (6) T-DM1, 5mg/kg, iv, qd xl+⑶C-0152，50mg/ kg, po, qwk x30
图36显示如下给药后接种入CRLnu/nu小鼠的MDA_MB_361. 1乳腺肿瘤的体内肿 瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介，po，qd x21, (2)⑶C-0941，25mg/kg，po，qd x21, (3) GDC-0941，50mg/kg， po, qd x21, (4)GDC-0941,lOOmg/kg, po, qd x21, (5)T-DM1,3mg/kg, iv, qd xl, (6) T-DMl, lOmg/kg, iv, qd xl, (7)GDC-0941, 25mg/kg, po, qd x21+T_DMl，3mg/ kg, iv, qd xl, (8)GDC-0941,50mg/kg,po, qd x21+T_DMl，3mg/kg，iv,qd xl, (9)GDC-0941, 100mg/kg，po，qd x21+T_DMl，3mg/kg，iv，qd xl,(10)GDC-0941,25mg/kg,po,qd x21+T_DMl， lOmg/kg, iv, qd xl, (11)GDC-0941,50mg/kg, po, qd x21+T_DMl，10mg/kg，iv, qd xl, (12) GDC-0941,lOOmg/kg, po, qd x21+T_DMl，lOmg/kg, iv, qd xl
图37显示如下给药后接种入CRL nu/nu小鼠的MDA_MB_361. 1乳腺肿瘤的体内肿 瘤体积均值随时间变化的图(1)媒介[MCT (0. 5%甲基纤维素/0. 2% TffEEN 80 ) +琥珀酸 盐缓冲液(IOOmM 琥珀酸钠，100mg/ml 海藻糖，0. 1% TffEEN 80，pH 5. 0) ]，po+IV，qd x21 禾口 qd, (2)GNE-390,1. Omg/kg, po, qd x21, (3)GNE-390，2. 5mg/kg, po, qd x21, (4)T-DM1，3mg/ kg, iv, qd, (5)GNE-390,1. Omg/kg, po, qd x21+T-DMl,3mg/kg, iv, qd, (6)GNE-390,2. 5mg/ kg, po, qd x21+T_DMl, 3mg/kg, iv, qd。
发明详述
现在将会详细地述及本发明的某些实施方案，所附结构和公式中例示了它们的例 子。虽然将会连同所列举的实施方案来描述本发明，应当理解它们并非意图将本发明限于 那些实施方案。相反，本发明旨在涵盖所有备选方案，修改，和等同方案，其可以包括在权利要求所限定的本发明范围内。本领域技术人员会领会与本文中所描述的方法和材料相似的 或等同的许多方法和材料可用于实施本发明。本发明绝非限于所描述的方法和材料。倘若 所收入的文献，专利，和相似的材料与本申请不同或矛盾，包括但不限于所定义的术语，术 语的用法，所描述的技术，诸如此类，以本申请为准。
定义
词语“包含”，“含有”，“包括”和“具有”在用于本说明书和权利要求书时旨在说明 所述特征，整数，成分，或步骤的存在，但是它们不排除一种或多种其它特征，整数，成分，步 骤，或其组合的存在或增加。
术语“治疗”或“处理”指治疗性处理及预防性或防范性措施二者，其中目标是预 防或减缓(减轻)不想要的生理学变化或病症，诸如高增殖性状况诸如癌症的生长，形成或 传播。为了本发明，有利或期望的临床结果包括但不限于缓解症状，削弱疾病的程度，疾病 状态稳定(即不恶化)，延迟或减缓疾病发展，改善或减轻疾病状态，及康复(无论是部分的 还是完全的)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”或“处理”还可以指与不接受治疗 的预期存活相比延长存活。需要治疗的受试者包括早就患有疾病或病症的受试者以及倾向 于患上疾病或病症的受试者或者要预防状况或病症的受试者。
短语“治疗有效量”指本发明化合物的量，其(i)治疗本文所述特定疾病，状况，或 病症，(ii)减轻，改善，或消除特定疾病，状况，或病症的一种或多种症状，或(iii)预防或 延迟特定疾病，状况，或病症的一种或多种症状的发作。在癌症的情况中，药物的治疗有效 量可减少癌细胞数；缩小肿瘤体积；抑制(即一定程度的减缓，优选停止)癌细胞浸润到周 围器官中；抑制(即一定程度的减缓，优选停止)肿瘤转移；一定程度的抑制肿瘤生长；和 /或一定程度的减轻与癌症有关的一种或多种症状。就药物可预防癌细胞生长和/或杀死 现有癌细胞的程度而言，它可以是抑制细胞的和/或毒害细胞的。对于癌症疗法，可以例如 通过评价距疾病发展的时间(TTP)和/或测定响应率(RR)来测量功效。
“高增殖性病症”指肿瘤，癌症，和新生物组织，包括恶变前和非新生物阶段，而且 还包括银屑病，子宫内膜异位症，息肉和纤维腺瘤。
术语“癌症”和“癌性”指向或描述哺乳动物中特征通常为细胞生长不受调节的生 理状况。“肿瘤”包括一个或多个癌性细胞。癌症的例子包括但不限于癌，淋巴瘤，母细胞 瘤，肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤。此类癌症的更具体例子包括鳞状细胞癌(例如上皮 鳞状细胞癌)，肺癌(包括小细胞肺癌，非小细胞肺癌(“NSCLC”)，肺的腺癌，和肺的鳞癌)， 腹膜癌，肝细胞癌，胃癌(包括胃肠癌)，胰腺癌，成胶质细胞瘤，宫颈癌，卵巢癌，肝癌，膀胱 癌，肝瘤，乳腺癌，结肠癌，直肠癌，结肠直肠癌，子宫内膜癌或子宫癌，唾液腺癌，肾癌，前列 腺癌，外阴癌，甲状腺癌，肝癌，肛门癌，阴茎癌，以及头颈癌。
“化疗剂”指可用于治疗癌症的化学化合物，不管作用机制。化疗剂的类别包 括但不限于烷化剂类(alkyating agents)，抗代谢物类(antimetabolites)，纺锤体 毒植物生物碱类(spindle poison plant alkaloids)，细胞毒性/抗肿瘤抗生素类 (cytoxic/antitumor antibiotics)，拓扑异构酶抑制剂类(topoisomeraseinhibitors)， 抗体类(antibodies)，光敏剂类(photosensitizers)，和激酶抑制剂类(kinase inhibitors) 0化疗剂包括在“靶向疗法”和常规化疗中使用的化合物。化疗剂的例 子包括erlotinib( TARCEVA , Genentech/OSI Pharm.)，多西他塞(docetaxel)(TAXOTERE ,Sanofi-Aventis)，5-FU(氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，CAS No. 51-21-8)，吉西 他滨(gemcitabine) ( GEMZAR , Lilly)，PD-0325901 (CAS No. 391210-10-9，Pfizer)， 顺钼(cisplatin)(顺式-二胺，二氯钼(II)，CAS No. 15663-27-1)，卡钼(carboplatin) (CAS No. 41575-94-4)，帕利他塞(paclitaxel) ( TAXOL , Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N. J.),曲妥单抗(trastuzumab) ( HERCEPTIN , Genentech)， 替莫唑胺(temozolomide) G-甲基 _5_ 氧 _2，3，4，6，8-五氮双环 W. 3. 0]九-2，7， 9-三烯-9-羧酰胺，CAS No. 85622-93-1，TEMODAR , TEMODAL , Schering Plough)，他莫昔芬(tamoxifen) ((Z)-244-(l，2-二苯基丁-1-烯基)苯氧基]-N，N 二 甲基-乙胺，NOLVADEX ,ISTUBAL ,VALODEX )，和多柔比星(doxorubicin) (ADRIAMYCIN )，Akti-1/2，HPPD,和雷帕霉素(rapamycin)。
化疗剂的更多例子包括化疗剂的更多例子包括奥沙利钼(oxaliplatin) (ELOXATIN , Sanof i) , bortezomib ( VELCADE , Millennium Pharm.), sutent ( SUNITINIB , SU 11248，Pfizer)，来曲唑(Ietrozole) ( FEMARA , Novart is),甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate) ( GLEEVEC ，Novartis)， XL-518(MEK 抑制剂，Exelixis，WO 2007/044515)，ARRY-886 (Mek 抑制剂，AZD6244， ArrayBioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (PI3K 抑制剂，Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235(PI3K 抑制剂，Novartis)，XL-147 (PI3K 抑制剂，Exelixis)，PTK787/ ZK222584 (Novartis),氟维司群(fulvestrant) ( FASLODEX ，AstraZeneca)，亚 叶酸(leucovorin, folinic acid)，雷中白霄素(rapamycin)(西罗莫司(sirolimus)， RAPAMUNE ，Wyeth)，lapatinib ( TYKERB , GSK572016, Glaxo SmithKline), lonafarnib (SARASAR , SCH 66336, Schering Plough) , sorafenib ( NEXAVAR , BAY43-9006, Bayer Labs)，gefitinib ( IRESSA , AstraZeneca)，伊立替康 (irinotecan) ( CAMPTOSAR , CPT — ll， Pfizer) , tipifarnib (ZARNESTRA , Johnson&Johnson)，ABRAXANE 不含克列莫佛(Cremophor)，清蛋白改造纳米颗粒 齐Ll M 中白禾1J ftk S (paclitaxel) (AmericanPharmaceutical Partners, Schaumberg, II)， vandetanib(rINN, ZD6474, ZACTIMA , AstraZeneca) , chloranmbuci 1, AG 1478, AG1571 (SU 5 271 ； Sugen) , terns iro 1 imus ( TORISEL , ffyeth), pazopanib (GlaxoSmithKline)，canfosfamide ( TELCYTA , Telik)， 塞替派 (thiotepa)和环磷酰胺(cyclophosphamide) ( CYTOXAN , NEOSAR )；磺酸 烷基酯类(alkylsulfonates)，诸如白消安(busulfan)，英丙舒凡(improsulfan)和 哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类(aziridines)，诸如苯佐替派(benzocbpa)，卡 波醌(carboquone)，美妥替派(meturecbpa)和乌瑞替派(urecbpa)；乙撑亚胺类 (ethylenimines)禾口甲基蜜胺类(methylamelamines),包括六甲蜜胺(altretamine),三 乙撑蜜胺(triethylenemelamine)，三乙撑磷酰胺(triethylen印hosphoramide)，三乙撑 硫代磷酉先胺(triethylenethiophosphoramide)禾口三轻甲蜜胺(trimethylomelamine)； 番荔枝内酯类(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮 (bullatacinone))；喜树碱(camptothecin)(包括合成类似物托泊替康(topotecan))； 苔藓抑素(bryostatin) ；callystatin ;CC_1065 (包括其阿多来新(adozelesin)，卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；隐藻素类(cryptophycins) (特别是隐藻素1和隐藻素8)；多拉司他汀(dolastatin) ；duocarmycin (包括合 成类似物，KW-2189 和 CB1-TM1)；艾槽塞洛素(eleutherobin) ；pancratistatin ； sarcodictyin ；海绵抑素(spongistatin)；氮芥类(nitrogen mustards),诸如苯丁酸氮 芥(chlorambucil),萘氮芥(chlornaphazine),胆磷酉先胺(chlorophosphamide),雌莫 司汀(estramustine),异环磷酉先胺(ifosfamide),双氯乙基甲胺(mechlorethamine), 盐酸氧氮芥(mechlorethamineoxide hydrochloride)，美法仓(melphalan)，新氮芥 (novembichin),苯芥胆留酉享(phenesterine),拨尼莫司汀(prednimustine),曲磷胺 (trofosfamide),尿啼唆氮芥(uracil mustard)；亚硝脲类(nitrosoureas),诸如卡莫 司汀(carmustine),氯脲菌素(chlorozotocin)，福莫司汀(fotemustine)，洛莫司汀 (Iomustine)，尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimustine)；抗生素类，诸如烯二炔 类抗生素(enediyne)(例如加利车霉素(calicheamicin)，加利车霉素γ II，加利车霉 素 ω Il (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. , (1994)33 :183-186)；蒽环类抗生素(dynemicin), dynemicin A ； 二膦酸盐类(bisphosphonates)，诸如氯膦酸盐(clodronate)；埃斯 波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白烯 二炔类抗生素发色团)，阿克拉霉素(aclacinomycin)，放线菌素(actinomycin)，氨 茴霉素(anthramycin)，偶氮丝氨酸(azaserine)，博来霉素(bleomycin)，放线菌素 C(cactinomycin), carabicin, 7^^1 (carminomycin), ^miSMM (carzinophilin), 霉素(chromomycin),方文线菌素D (dactinomycin),柔红霉素(daunorubicin),地托比星 (detorubicin)，6- 二氮-5-氧-L-正亮氨酸，吗啉代多柔比星，氰基吗啉代多柔比星，2-吡 咯代多柔比星和脱氧多柔比星)，表柔比星(印irubicin)，依索比星(esorubicin)，伊达 比星(idarubicin)，麻西罗霉素(marcellomycin)，丝裂霉素类(mitomycins)诸如丝裂霉 素 C,霉酚酸(mycophenolic acid),诺拉霉素(nogalamycin),橄榄霉素(olivomycin), 培洛霉素(ρ印lomycin)，泊非霉素(porf iromycin)，嘌呤霉素(puromycin)，三铁 阿霉素(quelamycin)，罗多比星(rodorubicin)，链黑菌素(str印tonigrin)，链佐 M (streptozocin)， ^ ^ ^M M M (tubercidin), 4 ￥ ^ ] (ubenimex), W] ftk T (zinostatin)，佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物类，诸如甲氨蝶呤(methotrexate)和5_氟 尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)，甲氨蝶呤(methotrexate)，蝶罗 呤(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)， 6-巯基嘌呤(mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶 类似物，诸如安西他滨(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6_氮尿苷(azauridine)， 卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，双脱氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿 苷(doxifluridine)，依诺他滨(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)；雄激素类，诸 如卡鲁睾酮(calusterone),丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate),表硫雄醇 (印itiostanol)，美雄烷(mepitiostane)，睾内酯(testolactone)；抗肾上腺类，诸如氨鲁 米特(aminoglutethimide)，米托坦(mitotane)，曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸 如亚叶酸(folinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酉先丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿啼唆(eniluracil)；安 口丫 唆(amsacrine) ；bestrabucil ；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酉先月安(defosfamide)；地美可辛(demecolcine)；地口丫酉昆(diaziquone) ；elfomithine ； Hc 利醋铵(elliptinium acetate)；埃坡霉素(印othilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝 酸镓；羟脲(hydroxyurea)；香菇多糖(Ientinan)；氯尼达明(Ionidamine)；美登木素 生物喊类(maytansinoids),诸如美登素(maytansine)禾口安丝菌素(ansamitocin)； 米ft月瓜月宗(mitoguazone)；米托惠酉昆(mitoxantrone)；莫口；！达酉享(mopidamol) ； 二月安 硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星 (pirarubicin)；洛索惠酉昆(Iosoxantrone)；鬼白酸(podophyllinic acid) ；2-乙基 酰胼(ethylhydrazide)；丙卡巴胼(procartazine) ；PSK 多糖复合物(JHS Natural Products, Eugene, OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐口南(sizofiran)；螺 方 错(spirogermanium)；细交链 包菌丽酸(tenuazonic acid)；三亚月安酉昆(triaziquone)； 2,2 ‘，2 〃 -三氯三乙胺；单端孢菌素类(trichothecenes) (T_2毒素，疣孢菌素 (verrucarin)A，杆抱菌素(roridin) A 禾口蛇 亍菌素(anguidin))；乌拉坦(urethan)；长春 地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine) ；二溴甘露酉享 (mitobronitol) ；二漠卫矛酉享(mitolactol)；喊泊漠烧(pipobroman) ；gacytosine ；阿糖 胞苷(arabinoside) (Ara-C)；环磷酰胺(cyclophosphamide)；塞替派(thiot印a) ；6-硫 鸟嘌呤(thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；钼类 似物，诸如顺钼(cisplatin)和卡钼(carboplatin)；长春碱(vinblastine)；依托泊苷 (etoposide) (VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱 (vincri stine)；长春瑞滨(vinorelbine) ( NAVELBINE )；能灭瘤(novantrone)； 替尼泊苷(teniposide)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶 呤(aminopterin)；卡培他滨(capecitabine) ( XELODA ，Roche)；伊本膦酸盐 (ibandronate) ；CPT-11 ；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000 ；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄酸 类(retinoids)，诸如视黄酸(retinoic acid)；及任何上述物质的药剂学可接受的盐，酸 和衍生物。
“化疗剂”的定义中还包括(i)抗激素剂，其作用是调节或抑制激素对肿瘤 的作用，诸如抗雌激素类和选择性雌激素受体调节剂类(SERM)，包括例如他莫昔芬 (tamoxifen) ( NOLVADEX ；柠檬酸他莫昔芬)，雷洛昔芬(raloxifene)，屈洛昔 芬(droloxifene)，4_羟基他莫昔芬，曲沃昔芬(trioxifene)，那洛昔芬(keoxifene)， LY117018，奥那司酮(onapristone)，和FARESTON (柠檬酸托瑞米芬(toremifene citrate)) ； (ii)芳香酶抑制剂，其抑制在肾上腺中调节雌激素生成的芳香酶，诸如例如 4(5)-咪唑，氨鲁米特(aminoglutethimide)，MEGASE (醋酸甲地孕酮(megestrol acetate))，AROMASIN (依西美坦(exemestane) ；Pfizer),福美坦(formestane)， 法倔唑(fadrozole)，RIVISOR (伏罗唑(vorozole))，FEMARA (来曲唑 (Ietrozole) ;Novartis),fPARJMIDEX (阿那曲唾(anastrozole) ；AstraZeneca)； (iii)抗雄激素类，诸如氟他米特(flutamide)，尼鲁米特(nilutamide)，比卡米特 (bicalutamide)，亮丙瑞林(Ieuprolide)，和戈舍瑞林(goserelin)；以及曲沙他滨 (troxacitabine) (1，3_ 二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白质激酶抑制剂，诸如MEK 抑制剂(W02007/0445M) ； (ν)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制牵涉异常 (aberrant)细胞增殖的信号传导途经中的基因表达的反义寡核苷酸，例如HiC-α，Raf和Mas，诸如 oblimersen (GENASENSE , Genta Inc.) ； (vii)核酶，诸如 VEGF 表达抑制 剂(例如ANGIOZYME )和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，诸如基因疗法疫苗，例如 ALLOVECTIN ,LEUVECTIN ,和VAXID ;PROLEUKIN rlL-2 ；拓扑异构酶 1抑制剂，诸如LURTOTECAN ；ABARELIX rmRH ； (ix)抗血管发生剂，诸如贝伐单 抗(bevacizumab) (AVASTIN ,Genentech)；及任何上述物质的药学可接受盐，酸和衍生 物。
“化疗剂”的定义中还包括治疗性抗体，诸如阿伦单抗(alemtuzumab) (Campath)， 贝伐单抗(bevacizumab) ( AVASTIN , Genentech)，西妥昔单抗(cetuximab) (ERBITUX ,Imclone)，panitumumab(VECTIBIX ,Amgen)，利妥昔单抗(rituximab) (RITUXAN , Genentech/Biogen Idee)，pertuzumab (OMNITARGTM, 2C4, Genentech), 曲妥单抗(trastuzumab) ( HERCEPTIN ，Genentech),托西莫单抗(tositumomab) (Bexxar, Corixia)，及抗体药物偶联物，吉姆单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin) (MYLOTARG , ffyeth)。
作为化疗剂联合trastuzumab-MCC-DMl具有治疗潜力的人源化单克隆抗体包 括alemtuzumab, apolizumab, aselizumab, atlizumab, bapineuzumab, bevacizumab, bivatuzumab mertansine, cantuzumab mertansine, cedelizumab, certolizumab pegol, cidfusituzumab, cidtuzumab, daclizumab, eculizumab, efalizumab, epratuzumab, erlizumab, felvizumab, fonto 1izumab, gemtuzumabozogamicin, inotuzumab ozogamicin, ipilimumab, labetuzumab, 1intuzumab, matuzumab, mepolizumab, motavizumab, motovizumab, natalizumab, nimotuzumab, nolovizumab, numavizumab, ocrelizumab, omaIizumab, palivizumab, pascolizumab, pecfusituzumab, pectuzumab, pertuzumab, pexelizumab, ralivizumab, ranibizumab, reslivizumab, resIizumab, resyvizumab, rovelizumab, rupIizumab, sibrotuzumab, siplizumab, sontuzumab, tacatuzumabtetraxetan, tadocizumab, talizumab, tefibazumab, tocilizumab, toralizumab, trastuzumab, tucotuzumab celmoleukin, tucusituzumab, umavizumab, urtoxazumab，和 visiIizumab0
“代谢物”指特定化合物或其盐在身体中经由代谢生成的产物。化合物的代谢物可 以使用本领域已知的常规技术来鉴定，而且它们的活性可以使用诸如本文中所描述的测试 来测定。此类产物可能源自例如所施用化合物的氧化，还原，水解，酰胺化，脱酰胺，酯化，脱 酯，酶促切割，等等。因而，本发明包括本发明化合物的代谢物，包括通过如下过程生成的化 合物，所述过程包括使本发明的化合物接触哺乳动物一段时间，该段时间足以生成其代谢 产物。
术语“包装插页”用于指通常包括在治疗用产品的商业包装中的说明书，它们包含 有关涉及此类治疗用产品应用的适应征，用法，剂量，施用，禁忌症，和/或警告的信息。
短语“药学可接受盐”在用于本文时指本发明化合物的药学可接受的有机或无机 盐。例示性的盐包括但不限于硫酸盐，柠檬酸盐，乙酸盐，草酸盐，氯化物，溴化物，碘化物， 硝酸盐，硫酸氢盐，磷酸盐，酸式磷酸盐，异烟酸盐，乳酸盐，水杨酸盐，酸式柠檬酸盐，酒石 酸盐，油酸盐，丹宁酸盐，泛酸盐，酒石酸氢盐，抗坏血酸盐，琥珀酸盐，马来酸盐，龙胆酸盐， 富马酸盐，葡糖酸盐，葡糖醛酸盐，糖酸盐，甲酸盐，苯甲酸盐，谷氨酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，苯磺酸盐，对甲苯磺酸盐和扑酸盐(即1，1’_亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐))。药 学可接受盐可能牵涉包含另一种分子，诸如乙酸盐离子，琥珀酸盐离子或其它抗衡离子。抗 衡离子可以是稳定母体化合物电荷的任何有机或无机部分。另外，药学可接受盐可以在其 结构中具有超过一种带电荷原子。在多种带电荷原子作为药学可接受盐的组成部分的情况 中可以具有多种抗衡离子。因此，药学可接受盐可具有一种或多种带电荷原子和/或一种 或多种抗衡离子。
如果本发明的化合物是碱，那么期望的药学可接受的盐可以通过本领域可得的 任何合适方法来制备，例如用无机酸(诸如氢氯酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，甲磺酸，磷酸等 等)或用有机酸(诸如乙酸，马来酸，琥珀酸，扁桃酸，富马酸/延胡索酸，丙二酸，丙酮 酸，草酸，乙醇酸，水杨酸，吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(诸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛 酸)，α羟酸(诸如柠檬酸或酒石酸)，氨基酸(诸如天冬氨酸或谷氨酸)，芳香酸(诸如 苯甲酸或肉桂酸)，磺酸(诸如对甲苯磺酸或乙磺酸)，等等)处理游离碱。文献中讨论 了一般认为适合于自碱性药学化合物形成药学有用或可接受的盐的酸，例如p. Mahl等， Camille G.(编)Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002)Zurich :ffiley-VCH ；S.Berge 等，Journal of PharmaceuticalSciences(1977)66 (1)119 ；P. Gould, International J. of Pharmaceutics(1986)33201217 ；Anderson 等， The Practice ofMedicinal Chemistry(1996), AcademicPress, New York ；Remington' s Pharmaceutical Sciences,第 18 片反，(1995)Mack Publishing Co.，Easton PA ；禾口 The Orange Book(Food&DrugAdministration,Washington,D. C.,它们的网站)。通过述及将这 些公开内容收入本文。
如果本发明的化合物是酸，那么期望的药学可接受的盐可以通过任何合适方法来 制备，例如用无机或有机碱(诸如胺(伯，仲或叔))，碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物， 等等处理游离酸。合适的盐的例示性例子包括但不限于自氨基酸(诸如甘氨酸和精氨酸)， 铵，伯/仲/叔胺，和环胺(诸如哌啶，吗啉和哌嗪)衍生的有机盐，和自钠，钙，钾，镁，锰， 铁，铜，锌，铝和锂衍生的无机盐。
短语“药学可接受的”指明该物质或组合物必须是在化学和/或毒理学方面与构 成配制剂的其它成分和/或用它治疗的哺乳动物相容的。
“溶剂合物”指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的物理缔合物或复合物。本 发明的化合物可以以未溶剂化的以及溶剂化的形式存在。形成溶剂合物的溶剂的例子包 括但不限于水，异丙醇，乙醇，甲醇，DMS0,乙酸乙酯，乙酸，和乙醇胺。术语“水合物”指其 中的溶剂分子是水的复合物。这种物理缔合涉及不同程度的离子和共价键合，包括氢键 合。在某些情况中，溶剂合物会能够分离，例如当结晶固体的晶格中掺入一个或多个溶剂分 子时。溶剂合物的制备是普遍知道的，例如M. Caira等，J. Pharmaceutical Sci. ,93(3), 601611 0004)。溶剂合物，半溶剂合物，水合物等等的类似制备记载于Ε. C. van Tonder 等，AAPS PharmSciTech. ,5(1), article 12(2004)；和 A. L. Bingham 等，Chem. Commun.， 60360乂2001)。一种典型的非限制性工艺涉及在比环境高的温度在期望量的期望溶剂(有 机的或水或其混合物)中溶解本发明化合物，并以足以形成晶体的速率冷却溶液，然后通 过标准方法分离晶体。分析技术诸如例如I. R.光谱术显示作为溶剂合物(或水合物)的 晶体中溶剂(或水)的存在。16
如本文中所使用的，术语“协同的”指比两种或更多种单一药剂的加和效果更有效 的治疗剂组合。trastuzumab-MCC-DMl，和一种或多种化疗剂之间的协同相互作用的确定可 以基于自本文所述测定法获得的结果。用CalcuSyn软件使用Chou和Talalay组合法和剂 量-效果分析来分析这些测定法的结果以获得组合指数“Cl” (Chou和Talalay (1984)Adv. Enzyme Regul. 22 :27-55)。已经在数种测定系统中评估了本发明提供的组合，而且可以利 用标准程序来分析数据以量化抗癌药间的协同、加和和拮抗效应。优选利用的程序是Chou 禾口 Talalay，“New Avenues in Developmental Cancer Chemotherapy，，，AcademicPress， 1987，第2章中所记载的。组合指数(Cl)小于0. 8的值指示协同，大于1. 2的值指示拮抗， 而介于0. 8至1. 2之间的值指示加和效应。组合疗法可提供“协同性”和证明是“协同的”， 即一起使用活性成分时所实现的效果大于分开使用所致效果的和。当活性成分如下所述时 可获得协同效应(1)以组合的单位剂量配制剂共配制和同时施用或递送；(2)作为分开的 配制剂交替递送；或C3)提供一些其它方案。当在交替疗法中递送时，当化合物序贯施用或 递送时(例如通过分开的注射器中的不同注射)可获得协同效应。一般而言，在交替疗法 期间，序贯地(即时间上连续地)施用有效剂量的每种活性成分。TRASTUZUMAB-MCC-DM1
本发明包括治疗剂组合，其包含trastuzumab-MCC-DMl (T-DMl)，即一种具有如下 结构的抗体-药物偶联物(CAS Reg. No. 139504-50-0)
CH3O。 CH3O
其中Tr指trastuzumab，其经由接头部分MCC连接至美登木素生物碱类药物部 分 DMl (US 5208020 ；US 6441163)。药物对抗体比或药物载荷在 trastuzumab-MCC-DMl 的上述结构中用P表示，而且范围为1至约8的整数值。药物载荷值ρ为1至8。 trastuzumab-MCC-DMl包括各种加载和附着的抗体-药物偶联物的所有混合物，其中1，2， 3，4，5，6，7，和 8 个药物部分共价附着至抗体 trastuzumab (US 7097840 ；US 2005/0276812 ； US 2005/0166993)。trastuzumab-MCC-DMl 可以依照实施例 1 来制备。
trastuzumab是由哺乳动物细胞(中国仓鼠卵巢，CH0)悬浮培养物生产的。 HER2(或c-erbB》原癌基因编码一种185kDa跨膜受体蛋白，其在结构上与表皮生长因 子受体相关。在25% -30%的原发性乳腺癌中观察到HER2蛋白质过表达，而且能使用 对固定肿瘤块的基于免疫组织化学的评估来确定(Press MF等(1993)Cancer Res 53: 4960-70。trastuzumab是一种具有鼠4D5抗体(ATCC CRL 10463，依据布达佩斯条约于 1990年5月24日保藏于美国典型培养物保藏中心，12301Parklawn Drive, Rockville,Md. 20852)的或自鼠4D5抗体衍生的抗原结合残基的抗体。例示性的人源化4D5抗体包括 huMAb4D5-l, huMAb4D5_2，huMAb4D5_3，huMAb4D5_4，huMAb4D5_5，huMAb4D5_6，huMAb4D5_7 和 huMAb4D5-8 ( HERCEPTIN )，如 US 5821337 中的。
在I期研究中，每3周通过IV输注施用T-DMl的最大耐受剂量(MTD)为3. 6mg/ kg。DLT(剂量限制毒性)包括用4. 8mg/kg处理的3名患者的2名中的4级血小板减少。 3. 6mg/kg的相关> 2级不良事件罕见且易掌控。如先前所述，这种治疗时间表耐受较好且 与显著的临床活性有关。II期研究已经显示每3周施用3. 6mg/kg剂量水平有相似的耐受 性，只有小百分比的患者(112名患者中的3名)需要降低剂量。如此，基于下述各点在这 项研究中为测试选择每3周施用3. 6mg/kgT-DMl剂量1)已证明的每3周3. 6mg/kg T-DMl 的功效和安全性，和2)3周方案对这个患者群的方便。
化疗剂
某些化疗剂已经在体外和在体内联合trastuzumab-MCC-DMl在抑制细胞增殖中 展示了令人惊讶和出乎意料的特性。此类化疗剂包括HER2 二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗 体，5-FU，卡钼，lapatinib, ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390。
pertuzumab (CAS Reg. No. 380610-27-5, OMNITARG , 2C4, Genentech)是一 种抑制HER2 二聚化的重组，人源化单克隆抗体(US 6054297 ；US6407213 ；US 6800738 ；US 6627196，US 6949245 ；US 7041292)。pertuzumab 和 trastuzumab 靴向 HER-2 酪氨酸激酶 受体的不同胞外区(Nahta 等 Q004)Cancer Res. 64 :2；343-2；346)。表达 2C4(pertuzumab) 的杂交瘤细胞系于1999年4月8日作为ATCC HB-12697保藏于美国典型培养物保藏中心 (ATCC), 10801University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209, USA。 pertuzumab 阻断 HER2受体其它HER受体家族成员，即HER1/EGFR，HER3，和HER4合作的能力(Agus等Q002) Cancer Cell 2 :127-37 Jackson 等 U004)Cancer Res 64 :2601-9 ；Takai 等 U005) Cancer 104 :2701-8 ；US 6949M5)。在癌细胞中，干扰HER2与其它HER家族受体合作的能 力阻断细胞信号传导，而且最终可导致癌细胞生长抑制和癌细胞死亡。由于它们独特的作 用模式，HDI具有在广泛的肿瘤中运转的潜力，包括那些不过表达HER2的肿瘤(Mullen等 (2007)Molecular Cancer Therapeutics 6:93-100)。
pertuzumab基于人IgGl(K)框架序列。它由两条重链和两条轻链组成。像 trastuzumab 一样，pertuzumab针对HER2的细胞外结构域。然而,它与trastuzumab的区 别在于轻链和重链的表位结合区。因此，pertuzumab结合已知是HER2的亚结构域2内的表 位，而 trastuzumab 的表位位于亚结构域 4 (Cho 等 2003 ；Franklin 等 2004)。Pertuzumab 是通过阻断HER2与其它HER家族成员，包括HERl (表皮生长因子受体；EGFR)，HER3，和HER4 的结合来起作用的。这种结合是在存在配体下及经MAP-激酶和PI3-激酶发信号所需要的。 因此，pertuzumab抑制配体启动的细胞内信号传导。抑制这些信号传导途径分别能导致生 长阻滞和凋亡(Hanahan 和 Weinberg 2000)。因为 pertuzumab 和 trastuzumab 结合HER2 受 体上的不同表位，所以配体活化的下游信号传导受pertuzumab阻断，但不受trastuzumab 阻断。因此，pertuzumab发挥其作为抗肿瘤剂的活性可能不需要HER2过表达。另外，由于 它们互补的作用模式，pertuzumab和T-DMl组合在过表达HER2的疾病中可具有潜在作用。
pertuzumab已经在五项II期研究中作为单一药剂进行了评估，这五项II期研 究是在各种癌症类型中进行的，包括表达低水平HER2的MBC，非小细胞肺癌，激素不应性前列腺癌，和卵巢癌。一项II期试验在具有正常HER2表达的转移性乳腺癌(MBC)患者 的二线或三线治疗中作为单一药剂评估pertuzumab (Cortes等Q005)J. Clin. Oncol. 23 3068)。已经在两项II期研究中联合trastuzumab评估了 pertuzumab (Baselga J等，“A Phase II trial of trastuzumab and pertuzumab in patients with HER2-positive metastatic breast cancer that had progressed during trastuzumab therapy :full response data，，,European Society of Medical Oncology,Stockholm,Sweden,September 12-16,2008 ;Gelmon 等(2008) J. Clin. Oncol. 26 :1026) 第一项研究登记了 11 名先前 接受多至三种在先含trastuzumab方案，具有HER2阳性MBC的患者(Portera等2007)。 Bevacizumab (CAS Reg. No. 216974-75-3，AVASTIN , Genentech)是抗 VEGF 单克隆 抗体，其针对血管内皮生长因子(US 7227004 ；US 6884879 ；US 7060269 ；US 7169901 ；US 7297334)，在癌症治疗中使用，其中它通过阻断新血管形成来抑制肿瘤生长。bevacizumab 是美国第一种临床可用的血管发生抑制剂，2004年被FDA批准联合标准化疗用于治疗转移 性结肠癌和大多数形式的转移性非小细胞肺癌。数项晚期临床研究正在测定它对具有下述 癌症的患者的安全性和有效性佐剂/非转移性结肠癌，转移性乳腺癌，转移性肾细胞癌， 转移性多形性成胶质细胞瘤，转移性卵巢癌，转移性激素不应性前列腺癌，和转移的或不能 切除的局部晚期的胰腺癌。
抗VEGF抗体通常不会结合其它VEGF同系物，诸如VEGF-B或VEGF-C，也不会 结合其它生长因子，诸如P1GF，PDGF或bFGF。优选的抗VEGF抗体包括与由杂交瘤ATCC HB 10709生成的单克隆抗VEGF抗体A4. 6. 1结合相同表位的单克隆抗体；依照I^resta 等(1997)Cancer Res. 57 :4593-4599生成的重组人源化抗VEGF单克隆抗体，包括但不限 于bevacizumab。bevacizumab包括突变的人IgGl框架区和来自阻断人VEGF结合其受 体的鼠抗hVEGF单克隆抗体A.4.6. 1的抗原结合互补决定区。bevacizumab大约93 %的 氨基酸序列(包括大部分框架区)衍生自人IgGl，而约7%的序列衍生自鼠抗体A4. 6.1。 bevacizumab具有约149，000道尔顿的分子量，而且是糖基化的。bevacizumab和其它人源 化抗VEGF抗体进一步记载于US 6884879。别的抗VEGF抗体包括G6或B20系列抗体(例 如G6-31，B20-4. 1)，如W02005/012359图27- 任一所示。在一个实施方案中，B20系列抗 体结合人 VEGF 上包含残基 F17，M18，D19，Y21，Y25，Q89，191，K101，E103，和 C104 的功能性 表位。
表达A 4. 6. 1 (ATCC HB 10709)和 B 2. 6. 2 (ATCC HB 10710)抗 VEGF 的杂交瘤细 胞系已经在美国典型培养物保藏中心(ATCC)，10801UniversityBoulevard，Manassas, VA 20110-2209USA保藏和维持。表达由鉴别为DNA^101_1276的ATCC保藏物的核苷酸序列插 入物编码的VEGF-E多肽的克隆(US 6391311)于1998年3月5日保藏于美国典型培养物保 藏中心，10801University Boulevard,Manassas, Va. 20110-2209，USA，并作为 ATCC 209653 维持。
5-FU (氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，CAS Reg. No. 51-21-8)是一种胸苷酸合酶抑制剂， 而且已经用于癌症(包括结肠直肠癌和胰腺癌)数十年(US^02005，US 2885396 ；Barton 等(1972) Jour. Org. Chem. 37 :329 ；Hansen, R. Μ. (1991) Cancer Invest. 9 :637-642)。5-FU的名称是5-氟-IH-嘧啶-2，4- 二酮，而且具有如下结构
权利要求
1.一种用于治疗高增殖性病症的方法，包括以组合配制剂形式或交替地对哺乳动物 施用治疗剂组合，其中所述组合包含治疗有效量的trastuzumab-MCC-DMl，和治疗有效量 的选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体，5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛， GDC-0941，和 GNE-390 的化疗剂。
2.权利要求1的方法，其中所述HER2二聚化抑制剂抗体是pertuzumab。
3.权利要求1的方法，其中所述抗VEGF抗体是bevacizumab。
4.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是5-FU。
5.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是卡钼。
6.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是lapatinib。
7.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是ABT-869。
8.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是多西他赛。
9.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是⑶C-0941。
10.权利要求1的方法，其中所述化疗剂是GNE-390。
11.权利要求1的方法，其中所述治疗有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治疗有效 量的化疗剂是以组合配制剂形式施用的。
12.权利要求1的方法，其中所述治疗有效量的trastuzumab-MCC-DMl和所述治疗有效 量的化疗剂是交替地施用的。
13.权利要求12的方法，其中对所述哺乳动物施用所述化疗剂，随后施用 trastuzumab-MCC-DMl。
14.权利要求12的方法，其中所述治疗剂组合是以约3周间隔对具有高增殖性病症的 人施用的。
15.权利要求12的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl是以约1周至3周的间隔对具有 高增殖性病症的人施用的。
16.权利要求1的方法，其中所述治疗剂组合的施用导致协同效应。
17.权利要求1的方法，其中所述高增殖性病症是癌症。
18.权利要求17的方法，其中所述高增殖性病症是表达EAB2的癌症。
19.权利要求17的方法，其中所述癌症是乳腺癌，卵巢癌，宫颈癌，前列腺癌，睾丸癌， 生殖泌尿道癌，食管癌，喉癌，成胶质细胞瘤，成神经细胞瘤，胃癌，皮肤癌，角化棘皮瘤，肺 癌，表皮样癌，大细胞癌，非小细胞肺癌(NSCLC)，小细胞癌，肺的腺癌，骨癌，结肠癌，腺瘤， 胰腺癌，腺癌，甲状腺癌，滤泡性癌，未分化的癌，乳头状癌，精原细胞瘤，黑素瘤，肉瘤，膀胱 癌，肝癌和胆管癌，肾癌，胰腺癌，髓样病症，淋巴瘤，毛细胞癌，口腔癌，鼻咽癌，咽癌，唇癌， 舌癌，口癌，小肠癌，结肠-直肠癌，大肠癌，直肠癌，脑和中枢神经系统癌，何杰金氏病或白 血病。
20.权利要求1的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化疗剂的量各自是约Img至 约 1OOOmg。
21.权利要求1的方法，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化疗剂的量的重量比是约 1 10 至约 10 1。
22.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是HER2阳性患者。
23.权利要求1的方法，其中所述HER2阳性患者已经接受trastuzumab或lapatinib疗法。
24.—种药物组合物，其包含trastuzumab-MCC-DMl，选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗 VEGF 抗体，5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390 的化疗剂；和 一种或多种药学可接受载体，助流剂，稀释剂，或赋形剂。
25.权利要求M的药物组合物，其包含选自二氧化硅，粉状纤维素，微晶纤维素， 金属硬脂酸盐，铝硅酸钠，苯甲酸钠，碳酸钙，硅酸钙，玉米淀粉，碳酸镁，无石棉的滑石， stearowet C，淀粉，淀粉1500，月桂硫酸镁，氧化镁，及其组合的药学可接受助流剂。
26.权利要求M的药物组合物，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化疗剂的量各自以 约Img至约IOOOmg存在。
27.权利要求对的药物组合物，其中trastuzumab-MCC-DMl的量和化疗剂的量以重量 比约1 10至约10 1存在。
28.治疗剂组合在制造用于治疗选自乳腺癌，卵巢癌，宫颈癌，前列腺癌，睾丸癌，生殖 泌尿道癌，食管癌，喉癌，成胶质细胞瘤，成神经细胞瘤，胃癌，皮肤癌，角化棘皮瘤，肺癌，表 皮样癌，大细胞癌，非小细胞肺癌(NSCLC)，小细胞癌，肺的腺癌，骨癌，结肠癌，腺瘤，胰腺 癌，腺癌，甲状腺癌，滤泡性癌，未分化的癌，乳头状癌，精原细胞瘤，黑素瘤，肉瘤，膀胱癌， 肝癌和胆管癌，肾癌，胰腺癌，髓样病症，淋巴瘤，毛细胞癌，口腔癌，鼻咽癌，咽癌，唇癌，舌 癌，口癌，小肠癌，结肠-直肠癌，大肠癌，直肠癌，脑和中枢神经系统癌，何杰金氏病或白血 病的癌症的药物中的用途，其中以组合配制剂形式或交替地对哺乳动物施用所述治疗剂组 合，所述治疗剂组合包含治疗有效量的trastuzumab-MCC-DMl，和治疗有效量的选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体，5-FU，卡钼，lapatinib, ABT-869，多西他赛，⑶C-0941，和 GNE-390的化疗剂。
29.一种用于治疗高增殖性病症的制品，其包含(a)治疗剂组合，其以组合配制剂形式或交替地对哺乳动物施用，且其包含治疗有效 量的trastuzumab-MCC-DMl，和治疗有效量的选自HER2 二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体， 5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390 的化疗剂；禾口(b)使用说明。
30.一种用于为癌症治疗确定要组合使用的化合物的方法，包括(a)对HER2扩增的乳腺癌细胞施用trastuzumab-MCC-DMl和选自HER2二聚化抑制剂 抗体，抗 VEGF 抗体，5-FU，卡钼，lapatinib，ABT-869，多西他赛，GDC-0941，和 GNE-390 的化 疗剂的治疗剂组合，并(b)测量对细胞增殖的抑制，其中通过细胞生存力来区分非恶性和恶性乳房细胞。
31.权利要求30的方法，其中所述HER2扩增的乳腺癌细胞是BT-474。
32.一种用于为癌症治疗确定要使用的治疗剂组合的方法，包括(a)用trastuzumab-MCC-DMl，和选自HER2二聚化抑制剂抗体，抗VEGF抗体，5-FU，卡 钼，lapatinib, ABT-869,多西他赛，⑶C-0941，和GNE-390的化疗剂的治疗剂组合处理体外 肿瘤细胞系，并(b)测量协同或非协同效应；由此为癌症治疗确定协同治疗剂组合。
全文摘要
抗体-药物偶联物trastuzumab-MCC-DM1和化疗剂(包括其立体异构体，几何异构体，互变体，溶剂化物，代谢物和药学可接受盐)的组合对于抑制肿瘤细胞生长，及对于治疗由HER2和KDR(VEGFR受体1)介导的病症诸如癌症是有用的。公开了用于哺乳动物细胞中此类病症，或有关病理状况的体外，原位，和体内诊断，预防或治疗，使用此类组合的方法。
文档编号A61K31/416GK102036660SQ200980117906
公开日2011年4月27日 申请日期2009年3月10日 优先权日2008年3月18日
发明者利安娜·贝里, 盖尔·L·菲利普斯, 马克·X·斯利夫科斯基 申请人:健泰科生物技术公司