专利名称：通过反义寡核苷酸来调制髓样分化初级应答基因88(MyD88)表达的制作方法
技术领域：
本发明涉及髓样分化初级应答基因88 (MyD88)。具体而言，本发明涉及反义寡核苷酸及其在治疗或预防与MyD88有关的或者可受益于调制MyD88表达的疾病中的用途，所述反义寡核苷酸与编码MyD88的核酸特异性杂交，从而调制MyD88表达和活性。相关技术的概述Toll样受体(TLR)存在于免疫系统的许多细胞上，而且已经被证明涉及先天性免疫应答(Hornung, V.等，(2002) J. Immunol. 168 =4531-4537) TLR 是哺乳动物识别外来分子并发动对外来分子的免疫应答的关键手段，而且还提供了联系先天性和适应性免疫应答
(Akira,S^ (2001) Nature Immunol. 2 675-680 ；Medzhitov, R. (2001) Nature Rev. Immunol. 1 :135-145)。在脊椎动物中，此家族由称作TLRl至TLRll的至少11种蛋白质组成，已知所述蛋白质识别来自细菌、真菌、寄生物和病毒的病原体相关分子样式(PAMP)，并诱导由许多转录因子介导的免疫应答。一些TLR位于细胞表面上以检测胞外病原体并启动对胞外病原体的应答，而其它 TLR位于细胞内部以检测胞内病原体并启动对胞内病原体的应答。表1列出了 TLR、其已知的激动剂和已知含有TLR的细胞类型(Diebold，S. S.等(2004) Science 303 :1529_1531 ； Liew, F.等(2005)Nature 5 446-458 ；Hemmi H 等(2002)Nat Immunol 3 196-200 ； Jurk M 等，(2002) Nat Immunol3 499 ；Lee J 等(2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100 6646-6651) ； (Alexopoulou, L. (2001)Nature 413:732-738)。表权利要求
1.与MyD88mRNA(SEQID NO 153)互补的长度为20至50个核苷酸的合成的反义寡核苷酸，其中所述反义寡核苷酸具有包含SEQ ID NO :4、10、21、29、31、39、46、48、63、66、70、 71、72、76、85、116或142的序列，且其中所述寡核苷酸与人MyD88特异性杂交，并且抑制人 MyD88的表达。
2.权利要求1的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸具有至少一个修饰的核苷间联接， 其选自下组烃基膦酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯和甲基膦酸酯。
3.权利要求2的反义寡核苷酸，其中所述核苷间联接是硫代磷酸酯核苷酸间连接。
4.权利要求1的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或其组合。
5.权利要求4的反义寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一个2’-0_取代的核糖核苷酸。
6.一种组合物，其包含依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸和生理学可接受载体。
7.一种用于抑制MyD88表达的方法，该方法包括施用依照权利要求1_5中任一项的合成的反义寡核苷酸。
8.一种用于抑制MyD88表达的方法，该方法包括施用依照权利要求6的组合物。
9.一种用于抑制哺乳动物中MyD88表达的方法，该方法包括对所述哺乳动物施用依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸。
10.一种用于抑制哺乳动物中MyD88表达的方法，该方法包括对所述哺乳动物施用依照权利要求6的组合物。
11.一种用于抑制哺乳动物中MyD88介导的免疫应答的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸。
12.一种用于抑制哺乳动物中MyD88介导的免疫应答的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求6的组合物。
13.一种用于治疗性处理患有由MyD88介导的疾病的哺乳动物的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸。
14.一种用于治疗性处理患有由MyD88介导的疾病的哺乳动物的方法，该方法包括以药学有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求6的组合物。
15.一种用于在患有由MyD88介导的疾病或病症的哺乳动物中预防疾病或病症的方法，该方法包括以预防有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸。
16.一种用于在患有由MyD88介导的疾病或病症的哺乳动物中预防疾病或病症的方法，该方法包括以预防有效量对所述哺乳动物施用依照权利要求6的组合物。
17.一种用于下调MyD88表达从而阻止由可激活MyD88的化合物导致的不期望的由 MyD88介导的免疫刺激的方法，该方法包括将依照权利要求1-5中任一项的合成的反义寡核苷酸与一种或多种包含免疫刺激性基序的化合物组合施用，所述免疫刺激性基序若无所述反义寡核苷酸的存在则会激活MyD88介导的免疫应答。
18.一种用于下调MyD88表达从而阻止由可激活MyD88的化合物导致的不期望的由 MyD88介导的免疫刺激的方法，该方法包括将权利要求6的组合物与一种或多种包含免疫刺激性基序的化合物组合施用，所述免疫刺激性基序若无所述组合物的存在则会激活 MyD88介导的免疫应答。
19.依照权利要求9-16中任一项的方法，其中所述哺乳动物是人。
20.依照权利要求13-16中任一项的方法，其中所述疾病选自癌症、自身免疫性病症、 气道炎症、炎性病症、感染性疾病、疟疾、莱姆病、眼部感染、结膜炎、皮肤病症、银屑病、硬皮病、心血管疾病、动脉粥样硬化、慢性疲乏综合征、结节病、移植排斥、变态反应、哮喘或由病原体引起的疾病。
21.依照权利要求20的方法，其中所述自身免疫性病症选自红斑狼疮、多发性硬化、 I型糖尿病、肠易激综合征、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、感染性休克、普秃、急性播散性脑脊髓炎、阿狄森氏综合征、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、大疱性类天疱疮、查加斯病、慢性阻塞性肺病、腹部疾病、皮肌炎、子宫内膜异位症、肺出血肾炎综合征、格雷夫斯氏病、格-巴二氏综合征、桥本氏病、化脓性汗腺炎、特发性血小板减少性紫癜、间质性膀胱炎、硬斑病、重症肌无力、发作性睡病、神经性肌强直、 天疱疮、恶性贫血、多肌炎、原发性胆汁性肝硬化、精神分裂症、斯耶格伦氏综合征、颞动脉炎(“巨细胞动脉炎”)、血管炎、白癜风、外阴痛和韦格纳氏肉芽肿病。
22.依照权利要求20的方法，其中所述炎性病症选自气道炎症、哮喘、自身免疫性疾病、慢性炎症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、贝切特氏病、超敏感性、炎性肠病、再灌注损伤、 类风湿性关节炎、移植排斥、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、结膜炎和血管炎。
23.依照权利要求17或18的方法，其中所述化合物是一种或多种包含原本会激活 MyD88介导的免疫应答的免疫刺激性基序的非MyD88反义寡核苷酸。
24.依照权利要求7-18中任一项的方法，其中施用路径选自胃肠外、肌肉内、皮下、腹膜内、静脉内、粘膜投递、口服、舌下、经皮、局部、吸入、鼻内、气雾剂、眼内、气管内、直肠内、 阴道、基因枪、皮肤贴片、滴眼剂或漱口剂。
25.依照权利要求7-18中任一项的方法，包括进一步施用一种或多种疫苗、抗原、抗体、细胞毒剂、变应原、抗生素、反义寡核苷酸、TLR激动剂、TLR拮抗剂、siRNA、miRNA、反义寡核苷酸、适体、蛋白质、基因疗法载体、DNA疫苗、佐剂、共刺激分子或其组合。
26.—种抑制哺乳动物中MyD88表达和活性的方法，包括对所述哺乳动物施用与 MyD88mRNA互补的反义寡核苷酸和MyD88蛋白的拮抗剂。
27.依照权利要求沈的方法，其中所述MyD88拮抗剂选自下组抗MyD88抗体或其结合片段或肽模拟物、基于RNA的化合物、基于寡核苷酸的化合物、和MyD88活性的小分子抑制剂。
28.—种抑制哺乳动物中MyD88表达和活性的方法，包括对所述哺乳动物施用与 MyD88mRNA互补的反义寡核苷酸和TLR 2、4、5、6、7、8或9蛋白拮抗剂。
29.依照权利要求观的方法，其中所述TLR拮抗剂选自下组TLR抗体或其结合片段或肽模拟物、基于RNA的化合物、基于寡核苷酸的化合物、和TLR活性的小分子抑制剂。
30.一种抑制哺乳动物中MyD88表达和细胞信号传导活性的方法，包括对所述哺乳动物施用与MyDSSmRNA互补的反义寡核苷酸和细胞信号传导的抑制剂。
31.依照权利要求30的方法，其中所述细胞信号传导拮抗剂选自激酶抑制剂和STAT蛋白抑制剂。
全文摘要
提供了用于下调MyD88表达的反义寡核苷酸化合物、组合物和方法。所述组合物包含靶向编码MyD88的核酸的反义寡核苷酸。所述组合物还可以包含与其它治疗性和/或预防性化合物和/或组合物组合的靶向编码MyD88的核酸的反义寡核苷酸。提供了使用这些化合物和组合物来下调MyD88表达以及预防或治疗可受益于调制MyD88表达的疾病的方法。
文档编号A61K31/7088GK102171235SQ200980139341
公开日2011年8月31日 申请日期2009年8月7日 优先权日2008年8月8日
发明者埃坎巴·坎迪玛拉, 拉克什米·巴加特, 王大庆, 苏德希尔·阿格拉沃尔, 郁东, 马利卡尔朱纳·帕塔 申请人:艾德拉药物股份有限公司