专利名称：以氨基酸为稳定剂的多西他赛聚合物胶束药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及以氨基酸为稳定剂的聚合物胶束载药系统及其制备。
背景技术：
聚合物胶束是近年来发展起来的针对难溶性药物的载药系统，是有两亲性嵌段聚 合物组成，临界胶束浓度(CMC)低(< 100g/ml)，具有核-壳状结构，其中核为疏水性部 分，壳为亲水性部分。聚合物胶束可以将难溶性药物包裹于核部分达到对难溶性药物的 增溶。载药聚合物胶束往往选择生物降解性两亲高分子为材料，这类两亲性聚合物可以 是二嵌段物A-B型或三嵌段物A-B-A、B-A-B型，其结构见见参考文献Torchilin，V. P.， Structure and design of polymeric surfactant-based drug delivery systems. JControlRelease,2001. 73(2-3) :p. 137-72.嵌段共聚物具有临界胶束浓度(CMC)较低、载 药量较高的特点，其中亲水部分(壳)往往是聚乙二醇、聚维酮等，亲脂部分往往是聚酯，如 氧丙烯、乳酸、L-赖氨酸、天冬氨酸、β-苯甲酞L-天冬氨酸酯、Y-苄基-L-谷氨酸酯、己 内酮、精胺的聚合物。许多药物为疏水性药物，其成药性需要增加其溶解度得以解决。以表面活性剂胶 束增溶而增加药物溶解度的办法为常见的手段，在抗癌药物的制剂中常见，如聚山梨酯80 用于多西他赛和聚氧乙烯蓖麻油用于紫杉醇等。然而，该类增溶办法存在诸多不足，包括 (1)高过敏发生率，大多数表面活性剂具有一定的过敏性，聚山梨酯80中的油酸和聚氧乙 烯蓖麻油中的蓖麻油均具有一定的过敏性，患者在使用含表面活性剂的制剂前往往需要进 行脱敏处理，例如现在紫杉醇和多西他赛的市售制剂；(2)药物在肿瘤特异分布程度低，因 而，对正常组织的毒性较大，最大耐受量(MTD)较低，导致化疗时不能在肿瘤部位分布足够 的药物，使肿瘤耐药；(3)市售制剂不稳定，在复配注射液时，操作复杂，易产生沉淀。与常用的表面活性剂增溶剂、助溶剂(如环糊精类)和潜溶剂相比，由于聚合 物胶束载药系统选择生物降解性材料为材料，其安全性较高，无明显过敏性、溶血性和刺 激性。更重要的是，聚合物胶束具有较大的高通透性和高滞留性(enhanced permeation andretention, EPR)，可以实现对肿瘤组织和炎症组织的被动靶向，S卩(1)聚合物胶束中亲 水的壳部分具有较高的亲水性，特别是当亲水部分为高比例的聚乙二醇时(例如我们申请 的专利CN03105348，CN200610145383中的聚合物PEG均超过10%，一般为40% )，可以躲 避网状内皮系统RES和单核巨嗤细胞系统MPS的清除，赋予聚合物胶束的长循环性能；(2) 聚合物胶束具有粒径小的特点，我们申请的专利CN03105348，CN200610145383中的聚合物 胶束粒径约20nm，低粒径(一般小于IOOnm)可以增强聚合物胶束对血管渗透供应癌症的脉 管系统并导致物质更容易滞留肿瘤，即EI^R效应较强。聚合物胶束的安全性和肿瘤被动靶 向性，使其成为一种新型靶向给药系统，对抗肿瘤药和治疗炎症等具有较大的前景。目前， 注射用紫杉醇聚合物胶束已经进入临床研究，在韩国已经上市。载药聚合物胶束的制备方 法一般有物理包埋法、化学结合法、静电作用法、凝胶复溶法、乳化-溶剂蒸发法，聚合物胶 束分散于水溶液后经冷冻干燥得到聚合物胶束冻干品，也可以通过一定的吸收剂吸收、固化后使用。聚合物胶束通常用于注射给药，应进行过滤灭菌或热压灭菌，以保证制剂的无菌 符合要求。甲基聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(mPEG PDLLA)胶束最早由加拿大X. Zhang 艮道(见参考文献 Zhang, X. , etal. , Anti-tumor efficacy and biodistribution of intravenouspolymeric micellar paclitaxel. Anticancer Drugs,1997. 8(7) p. 696-701.)，由于其理想的增溶特性和EI5R行为吸引了广泛关注，并申请专利 US5877205 和 US5922754。见参考文献 Yamamoto, Y.，et al.，Long-circulating poly (ethylene glycol)-poly(D,L-lactide)block copolymer micelles with modulated surfacecharge. JControl Release, 2001. 77 C 2) :p. 27-38. Samyang 公司的 Genexol PM 是以mPEG-PDLLA为材料的紫杉醇聚合物，体外和动物体内的生物相容性较好，未见明显 毒性，紫杉醇同位素体内分布实验表明，胶束进入体内后迅速解离，释放药物，聚合物在 体内可以在15小时内降解。见参考文献Kim，S. C.，D.W. Kim，et al. (2001). In vivo evaluationof polymeric micellar paclitaxel formulation :toxicity and efficacy. J ControlRelease 72(1-3) : 191-202。然而，现有载药聚合物胶束的稳定性不高，影响其进一 步推广 Carstens,M. G. ,P. H. de Jong, et al. (2008).The effect of core compositionin biodegradable oligomeric micelles as taxane formulations. Eur J PharmBiopharm 68(3) :596-606。以紫杉醇为例当采用mPEG-PDLLA 55/45 (X/Y，X为PEG的质量，Y为聚丙交酯的质 量)制备紫杉醇聚合物胶束时，其水分散液的稳定性只有24小时，至72小时时，超过30% 的药物泄露，见专利US20030143184。目前解决载药聚合物胶束稳定性的方法主要是从聚合 物上进行选择(Du,Chen et al. 2006)。我们在中国专利CN03105348. 3中申请了一种新的 聚合物胶束，采用mPEG、PDLLA质量比小于50/50的嵌段共聚物制备聚合物胶束，这种聚合 物胶束由于增加了核的亲脂性可以提高载药量和胶束的稳定性。但我们发现通过设计和合 成新聚合物的方式解决聚合物胶束的稳定性的研究成本高、安全性挑战大、解决效果不理 想。US2007003625申请了一种以聚乳酸为疏水嵌段的聚合物载药系统，然而，该类专利关注 的增溶能力，对于聚合物胶束的稳定性无明显改善。我们考察了不同的添加剂对聚合物胶束稳定性的影响。我们发现脂质对聚合物胶 束的稳定性有一定提高，见CN200610145383。然而，该技术的稳定性对于某些药物仍然难以 满足临床需求，例如多西他赛等药物，聚合物胶束的物理稳定性只数分钟或数小时。在试验中我们意外发现，添加某些小分子氨基酸可以提高载药胶束的物理稳定 性，例如多西他赛聚合物胶束的稳定性在加入精氨酸后稳定性大大提高，可以稳定5天以 上。氨基酸(amino acid)是含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，人体所需的氨 基酸约有20种。氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋 白质的基本物质，来源易得，具有较高的安全性。实验发现氨基酸能提高载药胶束的物理稳定性，至今尚未见有相关研究的报道。为此，本发明提供一种以氨基酸为稳定剂的药物载体，所述药物载体为两亲性嵌 段共聚物和氨基酸混合组成，这种药物载体具有稳定性高的特点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种药物组合物，该组合物含有药物，两亲性嵌段共聚物 和氨基酸。本发明的药物组合物，根据需要还可含有其他药物可接受的载体。本发明的药物组合物，其中两亲性嵌段共聚物和氨基酸可以以任何重量比例配 比。优选的两者的重量配比为1-100 0.01-100，特别优选的重量配比为100 0.5-30， 最优选的重量配比为100 1-15。本发明的药物组合物，其中的两亲性嵌段共聚物属于现有技术，可以包括二嵌段 物和三嵌段物，构成两亲性嵌段共聚物亲水区包括但不限于聚乙二醇(PEG)、单甲基聚乙二 醇(mPEG)、聚维酮、壳聚糖、聚甲基丙烯酸等及其衍生物。疏水区包括但不限于聚氧丙烯、 聚苯乙烯、聚氨基酸(如聚β-苯甲酰-L-天冬氨酸、聚Y-苄基-L-谷氨酸和聚天冬氨酸 等)、聚酯(聚己内酯)，可用生物降解型高分子材料(如聚乳酸、聚羟基乙酸及其衍生物 等)作为共聚物的疏水嵌段。其中优选的两亲性嵌段共聚物是单甲基聚乙二醇_b-聚D， L-丙交醋共聚物(mPEG-PDLLA)。本发明的药物组合物，其中的氨基酸包括任何一种或多种氨基酸，常见的20种氨 基酸，具体如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰 胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色 氨酸、脯氨酸。本发明的药物组合物，可通过以下方法制备药物，氨基酸，两亲性嵌段共聚物用 有机溶剂溶解。除去有机溶剂后即得到凝胶状混合聚合物胶束。其中所述有机溶剂是指非 水溶剂，选自但不限于乙腈、短链脂肪醇、丙酮、乙醚等。本发明的药物组合物，其制备可以采用物理包埋法、化学结合法、静电作用法、凝 胶_复溶法、乳化_溶剂蒸发法等制备，凝胶_复溶法，其中优选凝胶_复溶法。聚合物胶束分散于水溶液后经冷冻干燥得到聚合物胶束冻干品，也可以通过一定 的吸收剂吸收、固化后使用。聚合物胶束复溶可以得到低于IOOnm的混合聚合物胶束(如果粒径过大可以通过 高速均质化或高压乳勻化达到低于IOOnm的状态)，该聚合物胶束可通过一定的工艺，如冷 冻干燥、喷雾干燥、旋转蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发等进一步制备成适宜制剂，如注射剂、滴 眼剂、外用制剂、口服制剂、气雾剂、粉雾剂等。聚合物胶束用于注射给药时，可进行过滤灭菌或热压灭菌，以保证制剂的无菌符 合要求。本发明的药物组合物，其中所述药物包括各种疏水性药物和亲水性药物，优选的是 疏水性药物，更优选的是以下药物紫杉醇、多西他赛、顺钼、卡钼、奥沙利钼、5-氟尿喀陡、依托泊苷、苯丙氨酸氮芥、 苯丁酸氮芥、六甲三聚氰胺、甲氨蝶呤、甲环亚硝脲、去甲长春花碱、替尼泊苷、高三尖杉酯 碱、羟喜树碱以及抗VEGF药物等；抗生素药物如氯霉素、红霉素、依托红霉素、唬乙红霉素、麦迪霉素、交沙霉素、 克拉霉素、罗他霉素、磺胺嘧啶、甲氧苄氨嘧啶、吠喃妥因、利副平、利福昔明、异丁呱利福霉 素、氨苯砜、醋氨苯砜、咪康唑、伊曲康唑、喹诺酮类抗生素等；心血管药物如硝苯地平、尼 卡地平、尼群地平、尼伐地平、桂利嗪、哌克昔林、吗多明、洋地黄毒甙、地高辛、毛花甙丙、去乙酞毛花甙、普罗帕酮、胺碘酮、硝酸甘油、戊四硝酯、环扁桃酯、烟酸生育酚酯等；抗糖尿病药物如甲苯黄丁脲、格列本脲、格列吡嗪等；非甾体抗炎药物如氯马斯汀、赛庚啶、苯噻啶、酮替芬、曲尼司等。本发明的药物组合物，在制备成注射剂、滴眼剂、外用制剂、口服制剂、气雾剂、粉 雾剂等不同制剂时，根据需要可加入适宜的药物可接受的载体，诸如粘合剂、填充剂、稀释 剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂等，这些制剂的制备都属于现有技术，可根据 现有技术的方法制备。所述药物可接受的载体选自甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸 钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA 二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸 盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木 糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维 素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面 活性剂、聚乙二醇、环糊精、环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁寸。本发明的组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日，周，月服1-3 次，每次1-20剂，如1-20支或粒或片。本发明的药物组合物，其中的两亲性嵌段共聚物的亲水区包括但不限于聚乙二醇 (PEG)、单甲基聚乙二醇(mPEG)、聚维酮、壳聚糖、聚甲基丙烯酸等及其衍生物。其中嵌段共 聚物亲水区的衍生物是指对亲水区末端采用对某些器官、组织、细胞、细胞器、分子有特异 亲和性的分子修饰得到的衍生物，包括具有组织或细胞特异性的蛋白质或多肽、生长因子、 维生素及其类似物(如叶酸)、多糖、糖肽或糖蛋白、留体及其类似物、激素、辅助因子、遗传 分子、某些药物分子。如对脑特异的含有CNSRLHLRC，CENWffGDVC, WRCVLREGPAGGCAffFNRHRL, 和CLSSRLDAC片段的多肽、蛋白质；对肾特异的含有CLPVASC和CGAREMC片段的多肽、蛋白 质；对肺特异的含有CGFECVRQCPERC，CGFELETC，CTLRDRNC和CIGEVEVC片段的多肽、蛋白质； 对皮肽特异的含有CVALCREACGEGC片段的多肽、蛋白质；对脾特异的含有SWCEPGWCR片段的 多肽、蛋白质；对小肠特异的含有YSGKWGW片段的多肽、蛋白质，对子宫特异的含有GLSGGRS 片段的多肽、蛋白质；对肾上腺特异的含有LMLPRAD片段的多肽、蛋白质；对视网膜组织特 异的含有CRDVVSVIC和CSCFRDVCC片段的多肽、蛋白质；具有抑制整合蛋白表达细胞与细 胞外基质蛋白结合作用的多肽、蛋白质，这类蛋白质或多肽含有CRGDC，CRGDCL，NGR(AHA)， DGR(AHA)，CRGDCA, RCDVVV，SLIDIP, TIRSVD, KRGD, RRGP 和 RGDL 片段；具有肿瘤特异性的抗 体；对实体瘤血管内膜特异的含有CDCRGDCFC和CNGRCVSGCAGRC片段的多肽、蛋白质；以及 其他对肿瘤细胞有特异亲和力的分子。以下通过试验数据说明本发明的有益效果1、加氨基酸和不加氨基酸的比较数据移取2ml 50mg/ml聚合物乙腈溶液至茄型瓶中，加入2ml 5mg/ml多西他赛乙腈溶 液，将茄型瓶置于旋转蒸发仪上，减压(-0. IMPa)，水浴温度50°C，转速20转/分，旋转蒸发 30分钟，加入IOml注射用水，取下茄型瓶，至涡旋仪涡旋1分钟，所得溶液经0. 22 μ m滤膜 过滤，取滤液装于IOml西林瓶中；同法制备聚合物胶束，以0. 2mg/ml精氨酸水溶液代替注 射用水，得精氨酸_聚合物胶束。分别观察两种胶束的稳定性。
结果发现精氨酸-聚合物胶束的物理外观可以稳定5天以上，而无精氨酸的聚合 物胶束只能稳定30分钟。以上试验表明加入精氨酸的聚合物胶束的稳定性更佳。2、不同共聚物和氨基酸配比的比较数据多西他赛药物组合物的制备及稳定性考察2. 1药物组合物的制备移取IOml 50mg/ml聚合物乙腈溶液至茄型瓶中，加入IOml 5mg/ml多西他赛乙腈 溶液，将茄型瓶置于旋转蒸发仪上，减压(-0. IMPa)，水浴温度50°C，转速20转/分，旋转蒸 发30分钟，加入50ml 0. 2mg/ml精氨酸水溶液旋转水化1分钟，取下茄型瓶，至涡旋仪涡旋 1分钟，所得溶液经0. 22 μ m滤膜过滤，取滤液装于IOml西林瓶中，每瓶2ml，立即冻干得白 色固体。固体加0. 9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液5ml复配制备得澄清透明略带淡 蓝色乳光的多西他赛聚合物胶束溶液。所得胶束溶液于25摄氏度静止24h，目检结果溶液澄清透明，无混浊无沉淀，西 林瓶底部无药物结晶析出.制备了不同配比的多西他赛聚合物胶束，见下表表 权利要求
一种以氨基酸为稳定剂的多西他赛聚合物胶束药物组合物，其特征在于，该组合物含有多西他赛，两亲性嵌段共聚物和氨基酸，其中两亲性嵌段共聚物和氨基酸的重量配比为100∶1 15，其中两亲性嵌段共聚物包括二嵌段物和三嵌段物，构成两亲性嵌段共聚物亲水区包括但不限于聚乙二醇、单甲基聚乙二醇、聚维酮、壳聚糖、聚甲基丙烯酸，疏水区包括但不限于聚氧丙烯、聚苯乙烯、聚氨基酸、聚酯、可用生物降解型高分子材料，其中的氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸或脯氨酸。
2.根据权利要求1的药物组合物，其特征在于，其中的两亲性嵌段共聚物是单甲基聚 乙二醇_b-聚D，L-丙交醋共聚物。
3.根据权利要求1的药物组合物，其特征在于，其中的聚合物胶束通过现有技术制备 成适宜的药物制剂。
4.根据权利要求1的药物组合物，其特征在于，所述药物制剂是注射剂、滴眼剂、外用 制剂、口服制剂、气雾剂或粉雾剂。
5.根据权利要求1的药物组合物，其特征在于所述的组合物在使用时根据病人的情况 确定用法用量，可每日，周，月服1-3次，每次1-20剂，如1-20支或粒或片。
6.根据权利要求1的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤多西他赛， 氨基酸，两亲性嵌段共聚物用有机溶剂溶解，除去有机溶剂后即得到凝胶状混合聚合物胶 束，其中所述有机溶剂选自但不限于乙腈、短链脂肪醇、丙酮、乙醚。
全文摘要
本发明涉及以氨基酸为稳定剂的多西他赛聚合物胶束药物组合物及其制备方法，该药物组合物由多西他赛，两亲性嵌段共聚物和氨基酸组成，其中的两亲性嵌段共聚物包括二嵌段物和三嵌段物，其中的氨基酸选自20种常见氨基酸，两亲性嵌段共聚物与氨基酸的配比(w/w)是100/0.01-1.00/99.99。
文档编号A61K31/337GK101972480SQ201010114289
公开日2011年2月16日 申请日期2010年1月19日 优先权日2010年1月19日
发明者吴建梅 申请人:南京泛太化工医药研究所;太极集团有限公司