专利名称：一种苦木生物碱的高效分离方法
技术领域：
本发明涉及一种植物中有效成分的分离纯化方法，特别是涉及一种苦木生物碱的分离纯化方法。
背景技术：
苦木为苦木科苦木属植物Picrasmaquassioides (D. Dom) Benn.的地上部分，中药大辞典、中国药典(2000版)有收载，又名土樗子、苦楝树，系苦木科苦木属植物。主要分布于河北、山西、河南、山东、江苏、江西、湖南、陕西、甘肃、四川、云南、广东和广西等省。以其树皮、根皮及茎木入药，我国民间主要用于清热燥湿、解毒杀虫、抗菌消炎、治疗菌痢、胃肠炎、 胆道感染、急性化脓性感染、疥癣、湿疹、毒蛇咬伤等疾患。因其味极苦，国外亦用作苦味健胃剂。中国医学科学院药物研究所于70年代中期组织科研小分队，深入到粤北山区时， 发现该植物在民间广泛用于治疗疾病。为发掘祖国医药学遗产，对其进行比较深入的药物资源学、化学成分、药理学、毒理学、制剂工艺学和药品质量控制等方面的研究，证明生物碱是其有效成分之一。中国医学科学院药物研究所在对苦木生物碱的抗菌消炎研究中发现， 苦木具有抗真菌活性，体外抗真菌实验发现苦木总碱对溶血性乙型链球菌816、金黄色葡萄球菌209P、宋内氏痢疾杆菌51334、枯草杆菌6633和八叠球菌有抑菌作用。苦木生物碱包括铁屎米酮类生物碱、二聚体生物碱、β -carboline生物碱。目前苦木生物碱的提纯多是采用热回流提取，有机溶剂萃取，柱色谱纯化等方法， 该方法能耗大，有机溶剂用量大。尚未见采用超临界萃取技术结合超临界流体逆向萃取结晶技术对苦木生物碱进行提取、纯化的报道。
发明内容
本发明是针对现有制备高含量苦木生物碱的方法所存在的缺陷而进行的研究，旨在提供一种工艺简单、效率高、可工业化实现的分离纯化方法。一种苦木生物碱的高效分离方法，其具体步骤如下取苦木原料粉碎，采用超临界 CO2作溶剂，乙酸乙酯作夹带剂，提取压力25-40MPa，提取温度40_60°C，静态浸泡1_3小时， 动态提取60-180min，经解析得萃取物，解析压力为6_15MPa，解析温度15_20°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂中，置于结晶釜中，通入CO2至结晶釜中达到预定温度和压力，保持6(Tl20min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化广3次，干燥即得苦木生物碱产品。所述的夹带剂加入量为原料量的10-20%，CO2流量2-5ml/g生药/min。所述的正己烷-丙酮混合溶剂体积比为5-7:3。所述的结晶釜温度为3(T60°C，压力为l(T25MPa。本发明具有分离纯化时间短，分离效率高，工艺简单，相较于上柱色谱等复杂、耗能、耗时的工艺，具有工业化意义。
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超临界CO2作溶剂，(X)2流量3ml/g生药/min，通入原料量的13%的乙酸乙酯作夹带剂，在提取压力^MPa,提取温度45°C的条件下，静态浸泡1.5 小时，动态提取80min，经解析得萃取物，解析压力为12MPa，解析温度15°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂(7:3)中，配成10mg/ml的样品溶液；
(2)将上述样品溶液置于结晶釜中，打开超临界装置中CO2气瓶，向结晶釜中通入0)2达到预定温度40°C和压力15MPa，关闭气瓶，打开调压阀控制压力平衡，保持80min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化3次，收集产品31g，生物碱含量不低于60%。实施例2:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超临界(X)2作溶剂，CO2流量2ml/g生药/min，通入原料量的10%的乙酸乙酯作夹带剂，在提取压力40MPa，提取温度60°C的条件下，静态浸泡1 小时，动态提取60min，经解析得萃取物，解析压力为6MPa，解析温度20°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂(5:3)中，配成10mg/ml的样品溶液；
(2)将上述样品溶液置于结晶釜中，打开超临界装置中CO2气瓶，向结晶釜中通入0)2达到预定温度60°C和压力25MPa，关闭气瓶，打开调压阀控制压力平衡，保持60min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化2次，收集产品^g，生物碱含量不低于60%。实施例3:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超临界CO2作溶剂，(X)2流量5ml/g生药/min，通入原料量的20%的乙酸乙酯作夹带剂，在提取压力25MPa，提取温度40°C的条件下，静态浸泡3小时，动态提取180min，经解析得萃取物，解析压力为15MPa，解析温度18°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂(7:3)中，配成10mg/ml的样品溶液；
(2)将上述样品溶液置于结晶釜中，打开超临界装置中CO2气瓶，向结晶釜中通入0)2达到预定温度30°C和压力lOMPa，关闭气瓶，打开调压阀控制压力平衡，保持120min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化2次，收集产品34g，生物碱含量不低于60%。实施例4:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超临界CO2作溶剂，(X)2流量3ml/g生药/min，通入原料量的18%的乙酸乙酯作夹带剂，在提取压力32MPa，提取温度48°C的条件下，静态浸泡2. 5 小时，动态提取120min，经解析得萃取物，解析压力为8MPa，解析温度18°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂(6:3)中，配成10mg/ml的样品溶液；
(2)将上述样品溶液置于结晶釜中，打开超临界装置中CO2气瓶，向结晶釜中通入0)2达到预定温度45°C和压力18MPa，关闭气瓶，打开调压阀控制压力平衡，保持85min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化3次，收集产品33g，含量不低于60%。实施例5:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超临界(X)2作溶剂，(X)2流量2. 5ml/g生药/min，通入原料量的17%的乙酸乙酯作夹带剂，在提取压力34MPa，提取温度55°C的条件下，静态浸泡1. 5小时，动态提取llOmin，经解析得萃取物，解析压力为14MPa，解析温度17°C，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂(5:3)中，配成10mg/ml的样品溶液；
(2)将上述样品溶液置于结晶釜中，打开超临界装置中CO2气瓶，向结晶釜中通入0)2达到预定温度43°C和压力16MPa，关闭气瓶，打开调压阀控制压力平衡，保持lOOmin，使苦木生物碱从溶剂中析出，，收集产品^g，生物碱含量不低于60%。
权利要求
1.一种苦木生物碱的高效分离方法，其特征在于具体步骤如下取苦木原料粉碎，采用超临界(X)2作溶剂，乙酸乙酯作夹带剂，提取压力25-40MPa，提取温度40_60°C，静态浸泡1-3小时，解析压力为6-15MPa，解析温度15_20°C，动态提取60-180min，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂中，置于结晶釜中，通入CO2至结晶釜中达到预定温度和压力，保持 6(Tl20min，使苦木生物碱从溶剂中析出，依此方法纯化广3次，干燥即得苦木生物碱产品。
2.如权利要求1所述的一种苦木生物碱的高效分离方法，其特征在于所述的夹带剂加入量为原料量的10-20%，CO2流量2-5ml/g生药/min。
3.如权利要求1所述的一种苦木生物碱的高效分离方法，其特征在于所述的结晶釜温度为3(T60°C，压力为10 25MPa。
全文摘要
本发明涉及一种苦木生物碱的高效分离方法，具体是涉及一种采用超临界萃取技术结合超临界流体逆向萃取结晶技术对苦木生物碱进行提取、纯化的方法，步骤包括取苦木原料粉碎，采用超临界CO2作溶剂，乙酸乙酯作夹带剂，提取压力25-40MPa，提取温度40-60℃，静态浸泡1-3小时，解析压力为6-15MPa，解析温度50-60℃，动态提取60-180min，萃取物溶于环己烷-丙酮混合溶剂中，置于结晶釜中，向结晶釜中通入CO2，控制结晶参数在预定压力、温度范围内保持一段时间，纯化1~3次可得到含量不低于60%苦木生物碱。本发明工艺合理、操作简单、低成本且产品清洁，CO2可重复利用。
文档编号A61P1/00GK102327303SQ20111030462
公开日2012年1月25日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司