专利名称：一种制备盐酸青藤碱注射剂的方法
技术领域：
本发明涉及一种盐酸青藤碱注射剂的制备方法，具体涉及一种渗漉法提取青风藤中有效成分盐酸青藤碱制成盐酸青藤碱注射剂的方法。
背景技术：
青风藤是传统常用中药，为防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤茎，早在《本草纲目》中就有记载，现收载于《中华人民共和国药典》2010年版，具有祛风、通经络、利小便之功效，用于治疗风湿痹痛、关节肿胀、麻痹瘙痒，还有抗心率失常和降压等作用。青风藤中主要成分是生物碱，目前已发现的成分有青藤碱(Sinomenine)，异青藤碱(Igoginomenine)，华青藤碱(SinoAcutine)，短青藤次碱(Acutumidine)，尖青藤碱 (Sinaetine)及双青藤碱(Diginomenine)，乙基青藤碱(ethylsinomenine)、四氢表小檗碱 (sinactine)、四氢表小檗碱、蝙蝠葛波酚碱、蝙蝠葛宁、四氢巴马亭等。青藤碱(Sinomenine)是青风藤中提取的一种生物碱单体，是青风藤发挥镇痛、抗炎作用的主要有效成分，最早由Ishiwari等从日本青风藤中分离得到。20世纪60年代我国学者朱任宏从国产青风藤中也发现青藤碱。临床上常用其盐酸盐制剂如正清风痛宁片、 正清风痛宁缓释片、正清风痛宁注射液，用于治疗风湿性、类风湿性关节炎，治疗强直性脊椎炎、心律失常等，疗效显著。目前工业生产盐酸青藤碱多采用碱化水提取工艺，其为在青风藤中加入水及一定量熟石灰，碱化一段时间，然后加入一定量工业苯，于水浴中回流提取，最后酸化、静置、析
曰
曰曰ο目前文献有报道介绍青藤碱的提取和纯化方法，青风藤稀硫酸渗漉液，以石灰水调PH值9，苯在50°C进行逆流萃取，苯提取液以1 %盐酸进行反逆流萃取，活性炭脱色，结晶在热水中进行重结晶，得纯品。(陈玉昆《中药提取工艺学》，1992)这几种方法均使用毒性很大的苯作为提取溶剂，苯为I类有毒溶剂，对人体的毒害以血液系统和神经衰弱症候群为主，表现为血白细胞、血小板和红细胞减少、头晕、头痛、 记忆力下降、失眠等。严重者可发生再生障碍性贫血，甚至白血病、死亡，在制药行业已被禁用。而且苯的回收较为繁锁，排放难达到环保要求。因而在中药提取中用不含苯的原料取代含苯的原料是预防苯中毒的关键。
发明内容
本发明目的在于提供一种盐酸青藤碱注射剂的制备方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的，本发明盐酸青藤碱注射剂的制备方法包括如下步骤步骤一、盐酸青藤碱的制备方法A、制备盐酸青藤碱粗品1、提取青风藤粗粉100 1000重量份，用60 1000体积份的0. 1 lmol/L HCl润湿0. 5 8小时，装渗漉筒，再加入0. 1 lmol/L HCl使液面盖住药粉2cm，浸渍6 48 小时后，按2 6ml/min的速度开始渗漉，6 M小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；2、萃取将上述渗漉液加入石灰乳调pH至10. 5 12. 0,滤过，滤液加盐酸调pH 至7. 0 9. 5，用氯仿萃取2 5次；合并氯仿层用水洗至中性，加3% 6%重量倍的无水 Na2SCM脱水，减压浓缩回收氯仿；3、结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至2 4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，60°C 70°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品5 10重量份，用30 120体积份的10 95 %乙醇或纯化水加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流10 30分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱；步骤二、取原料盐酸青藤碱15 35重量份、亚硫酸氢钠0. 1 3重量份、依地酸二钠0. 1 3重量份；步骤三、注射剂的制备取注射用水，充氮，加入盐酸青藤碱搅拌使溶解；再加入亚硫酸氢钠、依地酸二钠搅拌使溶解，继续充氮，加入0. 01 0. 20%的活性炭，35 45°C保温5 15分钟，过滤除炭，补充注射用水至1000体积份，检验，精滤至澄明，充氮灌封，100 120°C灭菌20 40 分钟，即得。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤一可以优选为A、制备盐酸青藤碱粗品1、提取青风藤粗粉500重量份，用500体积份的0. 5mol/L HCl润湿2小时，装渗漉筒，再加入0. 5mol/L HCl使液面盖住药粉3cm，浸渍24小时后，按3ml/min的速度开始渗漉，15小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；2、萃取将上述渗漉液加入石灰乳调pH至11. 6，滤过，滤液加盐酸调pH至8，用氯仿萃取4次；合并氯仿层用水洗至中性，加3%重量倍的无水Na2SO4脱水，减压浓缩回收氯仿；3、结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至3，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤， 弃去滤液，65°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品7重量份，用60体积份的浓度为75 %的乙醇加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流20分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用 95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤一还可以优选为A、制备盐酸青藤碱粗品1、提取青风藤粗粉400重量份，用320体积份的0. 3mol/L HCl润湿3. 5小时，装渗漉筒，再加入0. 3mol/L HCl使液面盖住药粉如m，浸渍6小时后，按6ml/min的速度开始渗漉，8小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；2、萃取将上述渗漉液加入石灰乳调pH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至8. 5，用氯仿萃取2次；合并氯仿层用水洗至中性，加5%重量倍的无水Na2SO4脱水，减压浓缩回收氯仿；3、结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤， 弃去滤液，62°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品10重量份，用120体积份的95%乙醇加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流25分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤一还可以优选为A、制备盐酸青藤碱粗品1、提取青风藤粗粉200重量份，用900体积份的0. 2mol/L HCl润湿3. 5小时，装渗漉筒，再加入0. 8mol/L HCl使液面盖住药粉km，浸渍15小时后，按％il/min的速度开始渗漉，20小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；2、萃取将上述渗漉液加入石灰乳调pH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至9，用氯仿萃取2次；合并氯仿层用水洗至中性，加5%重量倍的无水Na2SO4脱水，减压浓缩回收氯仿；3、结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤， 弃去滤液，62°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品8重量份，用12体积份的50%乙醇或纯化水加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流25分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用 95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤一还可以优选为A、制备盐酸青藤碱粗品1、提取青风藤粗粉800重量份，用300体积份的0. 8mol/L HCl润湿1小时，装渗漉筒，再加入0. 2mol/L HCl使液面盖住药粉5cm，浸渍36小时后，按5ml/min的速度开始渗漉，8小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；2、萃取将上述渗漉液加入石灰乳调pH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至7，用氯仿萃取5次；合并氯仿层用水洗至中性，加6%重量倍的无水Na2SO4脱水，减压浓缩回收氯仿；3、结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至2，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤， 弃去滤液，68°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品6重量份，用40体积份的80 %乙醇或纯化水加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流15分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用 95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤二可以优选为盐酸青藤碱25重量份、亚硫酸氢钠1重量份、依地酸二钠0. 3重量份。本发明盐酸青藤碱注射剂制备方法中步骤三可以优选为
取盐酸青藤碱、亚硫酸氢钠、依地酸二钠；取注射用水，充氮，加入盐酸青藤碱搅拌使溶解；再加入亚硫酸氢钠、依地酸二钠搅拌使溶解，继续充氮，加入0. 的活性炭，35 45°C保温10分钟，过滤除炭，补充注射用水至1000体积份，检验，精滤至澄明，充氮灌封， 100°C灭菌30分钟，即得。上述盐酸青藤碱注射剂的制备方法中的重量份与体积份的关系为g/ml的关系。本发明提供的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，优点在于其中采用了渗漉法制备盐酸青藤碱的步骤，优点在于操作简单，提取过程不用加热，均为冷处理；收率高，母液处理简单；安全可靠，污染低，对环境保护起到积极的作用。
附图1 0. lmol/L盐酸提取2，4，6，10，12，24，观，30，48小时后的紫外荧光薄层图
谱及显色薄层图谱附图2 :0. 3mol/L盐酸提取2，4，6，10，12，24，沘，30，48小时后的紫外荧光薄层图
谱及显色薄层图谱附图3 0. 7mol/L盐酸提取2，4，6，10，12，24，28，30，48小时后的显色薄层图谱附图4 :1.0mol/L盐酸提取2，4，6，10，12，24，28，30，48小时后的显色薄层图谱附图5 0. 1,0. 3,0. 7,1. Omol/L浓度盐酸提取12小时后的显色薄层图谱附图6 渗漉时间为2，4，6，10，12，14小时的显色薄层图谱附图7 强碱液调pH为7，8，9，10，11的荧光及显色薄层图谱附图8 用氯仿萃取1次、2次、3次、4次的萃取液荧光及显色薄层色谱附图9 渗漉液、强碱液、弱碱液、萃取液、精品、母液、精品荧光及显色薄层色谱附图10 盐酸青藤碱对照品高效液相色谱图附图11 盐酸青藤碱的液相色谱图附图12 盐酸青藤碱的薄层色谱图，第1斑点为对照品，第2、3、4、5斑点分别为本发明的4个样品。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例一青风藤提取工艺研究1、试验目的通过本试验，确定本提取工艺的工艺参数，如浸渍时间、渗漉时间、萃取次数、pH调节范围等，优化工艺。2、试验材料2. 1原料陕西宝鸡提供的青风藤2. 2 仪器渗漉筒；PHS-2F PH计上海精科电子仪器厂ZF-2型三用紫外仪上海安亭电子仪器厂RE-52A旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂SHB-3循环水多用真空泵郑州杜甫仪器厂2. 3试剂盐酸株洲石英化学有限公司
氨水长沙市安泰精细化工实业有限公司氯仿国药集团化学试剂有限公司硅胶G 青岛海洋化工有限公司Ca (OH) 2、Na2S04、碘化铋钾稀溶液、乙醇等。2. 4检测方法显色薄层色谱薄层色谱条件固定相硅胶薄层板展开剂甲醇水氨水=8:1:1显色剂碘化铋钾稀溶液点样量5ul3、方法3. 1盐酸浓度及浸渍时间考察称取4份过20目的青风藤粗粉，每份50g，分别装入4个IOOml烧杯中；配制好 0. Imol/L、0. 3mol/L、0. 7mol/L、l. Omo 1/L盐酸，用40ml上述浓度的盐酸分别加入4个烧杯中润湿0. 5小时，再往每个烧杯中加入同浓度的盐酸50ml，浸渍，每2小时取样分别取样1次。判定依据1、分别按同一浓度、不同浸渍时间将样品按时间顺序点于同一薄层板上，与对照品斑点进行比较，主斑点最大的时间点为浸渍时间；2、将同一时间段、不同浓度的样品按浓度顺序点于同一薄层板上，以主斑点最大的浓度点为最佳浓度；3、若4个代表浓度的结果无显著差异时，则表明0. 1 1. Omol/L的盐酸均适合本提取。3. 2渗漉时间考察取3. 1所述确定的浓度的盐酸作为溶剂，用160ml润湿200g过20目的青藤碱粗粉0. 5小时，按上述确定的浸渍时间进行浸渍后，开始以2 3ml/min的速度进行渗漉，每2 小时进行一次取样，将样品点于同一薄层板上，当无青藤碱主斑点时，终止渗漉。确定为渗漉的终点时间。3·3ρΗ值范围考察上述3. 2得到的渗漉液用石灰水调节ρΗ值到11以上过滤后，分取5份50ml渗漉液，每份用盐酸反调至不同PH值后用16ml氯仿分别萃取，取萃取液，点于同一薄层板上，以含杂质斑点最少，主斑点最大的PH值点为最佳PH值调节范围。3. 4萃取剂用量及次数考察取上述3. 3过滤后的渗漉液，调ρΗ至3. 3确定的最佳ρΗ值，采用氯仿进行萃取， 按首次1/2渗漉液体积，以后每次1/3渗漉液体的用量进行萃取，每次萃取后取萃取液，样品点于同一薄层板上，当无青藤碱斑点时，中止萃取，确定该用量及次数为本工艺参数。3. 5指纹图谱考察按上述3. 1,3. 2,3. 3,3. 4确定好的参数进行提取青风藤粗粉200g，分别于渗漉、 碱化过滤、酸水反调、萃取、酸化析晶、精制等工艺阶段取渗漉液、强碱液、弱碱液、萃取液、粗品、母液、精品，样品点于同一薄层板上，分析。3. 6薄层色谱点板分别用5ul点样毛细管取上述试验的样品5ul，按顺序点于硅胶G薄层板上。4、结果4. 1盐酸浓度的选择及浸渍时间的确定，见表一和附图一至附图五。表一不同浓度的溶剂提取在不同时间的薄层情况
权利要求
1.一种盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤 步骤一、盐酸青藤碱的制备方法A、制备盐酸青藤碱粗品提取青风藤粗粉100 1000重量份，用60 1000体积份的0. 1 lmol/L HCl润湿 0. 5 8小时，装渗漉筒，再加入0. 1 lmol/L HCl使液面盖住药粉2cm，浸渍6 48小时后，按2 6ml/min的速度开始渗漉，6 M小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；萃取将上述渗漉液加入石灰乳调PH至10. 5 12. 0,滤过，滤液加盐酸调pH至7. 0 9. 5，用氯仿萃取2 5次；合并氯仿层用水洗至中性，加3% 6%重量倍的无水Na2S04脱水，减压浓缩回收氯仿；结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至2 4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，60°C 70°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品5 10重量份，用30 120体积份的10 95%乙醇或纯化水加热回流至完全溶解，加入4%重量倍的活性炭，保温回流10 30分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱； 步骤二、取原料盐酸青藤碱15 35重量份、亚硫酸氢钠0. 1 3重量份、依地酸二钠0. 1 3重量份；步骤三、注射剂的制备取注射用水，充氮，加入盐酸青藤碱搅拌使溶解；再加入亚硫酸氢钠、依地酸二钠搅拌使溶解，继续充氮，加入0.01 0. 20%的活性炭，35 45°C保温5 15分钟，过滤除炭，补充注射用水至1000体积份，检验，精滤至澄明，充氮灌封，100 120°C灭菌20 40分钟，即得。
2.如权利要求1所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤一为A、制备盐酸青藤碱粗品提取青风藤粗粉500重量份，用500体积份的0. 5mol/L HCl润湿2小时，装渗漉筒， 再加入0. 5mol/L HCl使液面盖住药粉3cm，浸渍M小时后，按3ml/min的速度开始渗漉，15 小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；萃取将上述渗漉液加入石灰乳调PH至11. 6，滤过，滤液加盐酸调pH至8，用氯仿萃取 4次；合并氯仿层用水洗至中性，加3%重量倍的无水Na2S04脱水，减压浓缩回收氯仿；结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至3，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，65°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品7重量份，用60体积份的浓度为75%的乙醇加热回流至完全溶解， 加入4%重量倍的活性炭，保温回流20分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95% 的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。
3.如权利要求1所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤一为Α、制备盐酸青藤碱粗品提取青风藤粗粉400重量份，用320体积份的0. 3mol/L HCl润湿3. 5小时，装渗漉筒，再加入0. 3mol/L HCl使液面盖住药粉km，浸渍6小时后，按6ml/min的速度开始渗漉， 8小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；萃取将上述渗漉液加入石灰乳调PH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至8. 5，用氯仿萃取2次；合并氯仿层用水洗至中性，加5%重量倍的无水Na2S04脱水，减压浓缩回收氯仿； 结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，62°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品； B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品10重量份，用120体积份的95%乙醇加热回流至完全溶解，加入 4%重量倍的活性炭，保温回流25分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。
4.如权利要求1所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤一为A、制备盐酸青藤碱粗品提取青风藤粗粉200重量份，用900体积份的0. 2mol/L HCl润湿3. 5小时，装渗漉筒，再加入0. 8mol/L HCl使液面盖住药粉km，浸渍15小时后，按％il/min的速度开始渗漉，20小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；萃取将上述渗漉液加入石灰乳调PH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至9，用氯仿萃取 2次；合并氯仿层用水洗至中性，加5%重量倍的无水Na2S04脱水，减压浓缩回收氯仿；结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至4，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，62°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品8重量份，用12体积份的50%乙醇或纯化水加热回流至完全溶解， 加入4%重量倍的活性炭，保温回流25分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95% 的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。
5.如权利要求1所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤一为A、制备盐酸青藤碱粗品提取青风藤粗粉800重量份，用300体积份的0. 8mol/L HCl润湿1小时，装渗漉筒， 再加入0. 2mol/L HCl使液面盖住药粉5cm，浸渍36小时后，按5ml/min的速度开始渗漉，8 小时后停止渗漉，得渗漉液，备用；萃取将上述渗漉液加入石灰乳调PH至11. 3，滤过，滤液加盐酸调pH至7，用氯仿萃取 5次；合并氯仿层用水洗至中性，加6%重量倍的无水Na2S04脱水，减压浓缩回收氯仿；结晶浓缩液滴入6mol/L HCl调pH至2，搅拌至上浮固体物分散，冷藏，抽滤，弃去滤液，68°C烘干滤饼，得黄色盐酸青藤碱粗品；B、盐酸青藤碱精制工艺取盐酸青藤碱粗品6重量份，用40体积份的80%乙醇或纯化水加热回流至完全溶解， 加入4%重量倍的活性炭，保温回流15分钟，趁热滤过，滤液浓缩，冷却、析晶，过滤，用95%的乙醇清洗滤饼至滤液无色，得盐酸青藤碱。
6.如权利要求1-5任一所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤二为盐酸青藤碱25重量份、亚硫酸氢钠1重量份、依地酸二钠0. 3重量份。
7.如权利要求1-5任一所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤三为取盐酸青藤碱、亚硫酸氢钠、依地酸二钠；取注射用水，充氮，加入盐酸青藤碱搅拌使溶解；再加入亚硫酸氢钠、依地酸二钠搅拌使溶解，继续充氮，加入0. 的活性炭，35 45°C 保温10分钟，过滤除炭，补充注射用水至1000体积份，检验，精滤至澄明，充氮灌封，IOO0C 灭菌30分钟，即得。
8.如权利要求6所述的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，其特征在于该方法中的步骤三为取盐酸青藤碱、亚硫酸氢钠、依地酸二钠；取注射用水，充氮，加入盐酸青藤碱搅拌使溶解；再加入亚硫酸氢钠、依地酸二钠搅拌使溶解，继续充氮，加入0. 的活性炭，35 45°C 保温10分钟，过滤除炭，补充注射用水至1000体积份，检验，精滤至澄明，充氮灌封，100°C 灭菌30分钟，即得。
全文摘要
本发明提供的盐酸青藤碱注射剂的制备方法，优点在于其中采用了渗漉法制备盐酸青藤碱的步骤，优点在于操作简单，提取过程不用加热，均为冷处理；收率高，母液处理简单；安全可靠，污染低，对环境保护起到积极的作用。
文档编号A61P9/06GK102552122SQ20111036089
公开日2012年7月11日 申请日期2011年11月15日 优先权日2011年11月15日
发明者仇萍, 唐顺之, 彭祖仁, 文迎艺, 滕健 申请人:湖南正清制药集团股份有限公司