专利名称：N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺的固体形式的制作方法
技术领域：
本发明涉及N-[2，4_双(1，1-二甲基乙基)-5_羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺的固态形式、其药物组合物及其方法。
背景技术：
囊性纤维化(CF)是一种隐性遗传疾病，在美国影响约30，000名儿童和成人，且在欧洲影响约30，000名儿童和成人。尽 管在治疗CF方面取得了进展，但目前还没有治愈。CF由编码负责协助各种组织中盐和水吸收和分泌的上皮细胞氯离子通道的囊性纤维化跨膜电导调节蛋白(CFTR)基因内的突变造成。已知作为增加CFTR通道开放概率的增强剂的小分子药物代表了一种潜在的治疗CF的治疗策略。具体地说，CFTR是在多种细胞类型(包括吸收性和分泌上皮细胞)中表达的cAMP/ATP-介导的阴离子通道，其中它调节通过膜的阴离子流以及其他离子通道和蛋白的活性。在上皮细胞中，CFTR的正常机能对维持遍布体内包括呼吸和消化组织的电解质运输而言是关键的。CFTR由约1480个氨基酸组成，这些氨基酸编码由跨膜结构域的串联重复单元构成的蛋白质，所述跨膜结构域各自包含六个跨膜螺旋和核苷酸结合结构域。两个跨膜结构域通过大的极性调节(R)-结构域连接，所述大的极性调节(R)-结构域具有调节通道活性和细胞运输的多个磷酸化位点。编码CFTR的基因已被鉴定和测序(参见Gregory,R.J.等人，(1990)Nature 347:382-386 ；Rich, D.P.等人，(1990)Nature 347:358-362) ； (Riordan, J.R.等人，(1989)Science 245:1066-1073)。这种基因的缺陷引起CFTR突变，导致囊性纤维化(“CF”)，这是人类最常见的致命性遗传疾病。囊性纤维化影响大约两千五百分之一的美国新生儿。在全部美国人口中，多达一千万人携带有此缺陷基因的单一拷贝，而没有明显的疾病效应。相反，带有两个拷贝的此CF相关基因的个体遭受CF的衰弱与致命性效应，包括慢性肺病。在CF患者中，在呼吸道上皮中内源性表达的CFTR内的突变引起顶端阴离子分泌减少，导致离子和体液转运的失衡。所致阴离子转运降低导致肺中粘液蓄积增强和伴随的微生物感染，最终导致CF患者死亡。除了呼吸疾病以外，CF患者通常患有胃肠问题和胰腺机能不全，如果不加治疗则导致死亡。另外，大多数患有囊性纤维化的男性是不育的，患有囊性纤维化的女性的生育力降低。与两个拷贝的CF相关基因的严重效应相反，带有单一拷贝的CF相关基因的个体表现出对腹泻所致脱水以及霍乱的抗性增加一这也许解释了人群内CF基因的相对高频率的原因。CF染色体CFTR基因的序列分析已经揭示了多种致病性突变(Cutting，G.R.等人，(1990)Nature 346:366-369 ；Dean, Μ.等人，(1990)Cell 61:863:870 ;和 Kerem，B-S.等人，(1989) Science 245:1073-1080 ；Kerem, B-S 等人，(1990) Proc.Natl.Acad.Sc1.USA87:8447-8451)。迄今已经鉴别了大于1000种致病性CF基因突变(http://www.genet,sickkids.0n.ca/cftr/app)。最常见的突变是CFTR氨基酸序列第508位中苯丙氨酸的缺失，其普遍被称为AF508-CFTR。这种突变发生在大约70%的囊性纤维化病例中，与严重的
疾病有关。AF508-CFTR中残基508的缺失阻止初生蛋白正确地折叠。这导致该突变蛋白不能排出ER并运输至质膜。其结果是，膜中存在的通道数量远远少于表达野生型CFTR的细胞中所观察到的。除了运输受损以外，该突变还导致有缺陷的通道门控。膜中通道数量减少和有缺陷的门控一起引起跨越上皮的阴离子转运减少，导致有缺陷的离子和流体转运(Quinton, P.Μ.(1990)，FASEB J.4:2709-2727)。不过，研究已经显示，膜中 ΔF508-CFTR的数量减少是功能性的，尽管少于野生型CFTR(Dalemans等人，(1991), Nature Lond.354:526-528 ；Denning 等人，见上；Pasyk 和 Foskett (1995)，J.Cell.Biochem.270:12347-50)。除了 AF508-CFTR以外，其他导致有缺陷的运输、合成和/或通道门控的致病性CFTR突变可能被增量或减量调节，以改变阴离子分泌和减缓疾病进展和/或严重性。尽管CFTR除了阴离子以外还转运多种分子，不过显然这种角色(阴离子的转运)代表跨越上皮转运离子和水的重要机理中的一种要素。其他要素包括上皮Na+通道、ENaC、Na+/2C17K+共同转运蛋白、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧膜K+通道，它们负责摄取氯化物进入细胞。这些要素一起工作，经由它们在细胞内的选择性表达和定位实现跨越上皮的定向转运。借助存在于顶端膜上的ENaC与CFTR和在细胞基底外侧表面上表达的Na+-K+-ATP酶泵与Cl离子通道的协调活性，发生氯化物的吸收。氯化物从腔侧的次级主动转运引起细胞内氯化物的蓄积，然后可以被动地经由Cl离子通道离开细胞，导致向量转运。Na+/2C17K+共同转运蛋白、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧膜K+通道在基底外侧表面上的排列和腔侧上的CFTR协调氯化物经由腔侧上CFTR的分泌。因为水自身很可能从不主动转运，它跨越上皮的流动依赖于由钠和氯化物的大量流动所生成的微小跨上皮渗透梯度。如上文所讨论，据信AF508-CFTR中残基508的缺失阻止初生蛋白正确地折叠，导致这种突变蛋白不能排出ER和运输至质膜。其结果是，存在于质膜的成熟蛋白数量不足，上皮组织内氯化物的转运显著减少。事实上，ER机制对ABC转运蛋白的这种有缺陷的ER加工的细胞现象已被显示不仅是CF疾病的基础，而且是广泛的其他孤立性与遗传性疾病的基础。N-[2，4_双(1，1-二甲基乙基)-5_羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺(化合物I)是人类CFTR的野生型和突变型(包括例如，AF508、R117H和G551D)形式的有效和选择性的CFTR增强剂。化合物I用于治疗具有囊肿性纤维化和至少一个G55ID-CFTR等位基因的成年患者。
因此，需要稳定的固体形式的CFTR活性调节剂，如化合物1，其可以用于调节哺乳动物的细胞膜中的CFTR活性。需要使用这种CFTR活性调节剂治疗CFTR介导的疾病的方法
发明内容
本发明涉及N-[2，4_双(1，1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1，4-二氢-4-氧代喹
啉-3-甲酰胺(以下称为“化合物I”)的固体形式，其具有以下结构:
Cc^0
权利要求
1.结晶N-[2，4-双(1，1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺(化合物1)，其特征在于为晶型C。
2.根据权利要求1所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约6.0至约6.4度的2-Θ值的峰。
3.根据权利要求1或2所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约7.3到约7.7度的2-Θ值的峰。
4.根据权利要求1-3中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRH)谱中的具有约8.1至约8.5度的2-Θ值的峰。
5.根据权利要求1-4中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约12.2至约12.6度的2- Θ值的峰。
6.根据权利要求1-5中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约14.4至约14.8度的2- Θ值的峰。
7.根据权利要求1-6中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约17.7至约18.1度的2- Θ值的峰。
8.根据权利要求1-7中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约20.3至约20.7度的2-Θ值的峰。
9.根据权利要求1-8中的任一项所述的晶型C，其特征在于，XRPD谱中的具有约20.7至约21.1度的2- Θ值的 峰。
10.根据权利要求1所述的晶型C，其特征在于，XRPD图中的在2-Θ标度上测量的选自以下的一个或多个峰:约6.2、约7.5、约8.3、约12.4、约14.6、约17.9、约20.5和约20.9度。
11.根据权利要求10所述的晶型C，其特征在于，XRPD图中的在2-Θ标度上测量的所有下列峰:约6.2、约7.5、约8.3、约12.4、约14.6、约17.9、约20.5和约20.9度。
12.根据权利要求1-11中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约152.0ppm 的峰。
13.根据权利要求1-12中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约135.4ppm 的峰。
14.根据权利要求1-13中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约131.8ppm 的峰。
15.根据权利要求1-14中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约117.0ppm 的峰。
16.根据权利要求1-15中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约130.2ppm 的峰。
17.根据权利要求1-16中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约124.8ppm 的峰。
18.根据权利要求1-17中的任一项所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的在约34.5ppm 的峰。
19.根据权利要求1所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的一个或多个选自以下的峰:约 152.0ppm,约 135.4ppm,约 131.8ppm,约 130.2,约 124.8ppm,约 117.0ppm 和约.34.5ppm。
20.根据权利要求1所述的晶型C，其特征在于，13CSSNMR谱中的约152.0ppm的峰、约135.4ppm的峰、约131.8ppm的峰和约117.0ppm的峰。
21.根据权利要求20所述的晶型C，进一步表征为13CSSNMR谱中的约130.2ppm的峰、约124.8ppm的峰和约34.5ppm的峰。
22.根据权利要求1所述的晶型C，其特征在于，基本上类似于图6的固态NMR光谱图。
23.根据权利要求1-22中的任一项所述的晶型C，其特征在于，被确定为具有单斜晶体系、Ρ2Λ空间群和下面的晶胞尺寸的单晶:a=12.211 埃b=5.961 埃c=32.662 埃α=90.00°β=119.62°Y=90.00°。
24.一种包含权利要求1-23中的任一项所述的晶型C和药学上可接受的辅助剂或载体的药物组合物。
25.根据权利要求24所述的药物组合物，还包括选自溶黏蛋白剂、支气管扩张药、抗生素、抗感染药、抗炎药、非晶型C的CFTR调节剂或营养剂的其他药剂。
26.根据权利要求25所述的药物组合物，其中，所述其他药剂是非晶型C的CFTR调节剂。
27.一种治疗患者的疾病或减轻其严重性的方法，其中，所述疾病选自囊性纤维化、哮喘、吸烟诱导的COPD、慢性支气管炎、鼻窦炎、便秘、胰腺炎、胰功能不全、先天性双侧输精管缺如(CBAVD)导致的男性不育、轻度肺疾病、特发性胰腺炎、过敏性支气管肺曲霉病(ΑΒΡΑ)、肝脏疾病、遗传性肺气肿、遗传性血色素沉着症、凝结-纤维蛋白溶解缺陷症例如C蛋白缺陷症、I型遗传性血管水肿、脂质加工缺陷症例如家族性高胆固醇血症、I型乳糜微粒血症、无β脂蛋白血症、溶酶体贮积病例如1-细胞疾病/假性赫尔勒病、粘多糖病、桑德霍夫/泰-萨克斯病、克-纳综合症II型、多内分泌腺病/高胰岛素血症、糖尿病、拉龙侏儒症、髓过氧化物酶缺乏症、原发性甲状旁腺机能减退症、黑色素瘤、聚糖病CDG I型、先天性甲状腺机能亢进症、成骨不全、遗传性低纤维蛋白原血症、ACT缺乏症、尿崩症(DI)、后叶激素运载蛋白性D1、肾性D1、沙-马-图综合征、佩-梅病、神经变性疾病例如阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化、进行性核上性麻痹、皮克病、若干聚谷氨酰胺神经障碍例如亨廷顿病、I型脊髓小脑性共济失调、脊髓与延髓肌肉萎缩、齿状核红核苍白球丘脑下部核萎缩和肌强直性营养不良以及海绵状脑病例如遗传性克-雅病(由于朊蛋白加工缺陷)、法布里病、施特劳斯纳综合征、COPD、干眼疾病、或舍格伦病、骨质疏松症、骨质减少、骨愈合和骨生长(包括骨修复、骨再生、减少骨再吸收和增加骨沉积)、戈汉综合征、氯离子通道病例如先天性肌强直(汤姆森和贝克尔形式)、ΠΙ型巴特综合征、Dent病、过度惊跳综合征、癫痫、过度惊跳综合征、溶酶体贮积病、安格尔曼综合征，以及原发性纤毛运动障碍(P⑶)——纤毛的结构和/或功能的遗传性疾病的术语，包括带有内脏逆位的PCD(也被称为卡塔格内综合征)、没有内脏逆位的PCD和纤毛发育不全，所述方法包括对所述患者给予有效量的权利要求1-23中的任一项所述的晶型C的步骤。
28.根据权利要求27所述的方法，其中，所述疾病是囊性纤维化。
29.根据权利要求27或28所述的方法，其中，所述患者具有一个或多个以下人类CFTR的突变:AF508、R117H 和 G551D。
30.根据权利要求29所述的方法，其中，所述方法包括治疗具有人类CFTR的ΛΡ508突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
31.根据权利要求29所述的方法，其中，所述方法包括治疗具有人类CFTR的G551D突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
32.根据权利要求30所述的方法，其中，所述方法包括治疗在至少一个等位基因上具有人类CFTR的AF508突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
33.根据权利要求30所述的方法，其中，所述方法包括治疗在两个等位基因上具有人类CFTR的AF508突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
34.根据权利要求31所述的方法，其中，所述方法包括治疗在至少一个等位基因上具有人类CFTR的G551D突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
35.根据权利要求31所述的方法，其中，所述方法包括治疗在两个等位基因上具有人类CFTR的G551D突变的患者的囊性纤维化或减轻其严重性。
36.一种试剂盒，用于体外或体内测量生物样品中CFTR或其片段的活性，包括: (i)包含权利要求1-23中的任一项所述的晶型C的组合物； ( )关于如下内容的说明书: a)使组合物与生物样品接触；和 b)测量所述CFTR或其片段的活性。
37.根据权利要求36所述的试剂盒，进一步包括关于如下内容的说明书: a)使附加化合物与生物样品接触； b)在所述附加化合物存在下测量所述CFTR或其片段的活性；和 c)比较在所述附加化合物存在下所述CFTR或其片段的活性与在包含权利要求1-23中任一项所述的晶型C的组合物存在下CFTR或其片段的活性。
38.根据权利要求37所述的试剂盒，其中，所述比较所述CFTR或其片段的活性的步骤提供了所述CFTR或其片段的密度的测量。
全文摘要
本发明涉及N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺的固态形式、其药物组合物及其方法。
文档编号A61P11/00GK103180298SQ201180014637
公开日2013年6月26日 申请日期2011年3月21日 优先权日2010年3月19日
发明者S·G·阿瑞卡尔, S·C·约翰斯顿, M·科拉维克, A·梅德克, P·穆杜努里, M·J·苏利文 申请人:沃泰克斯药物股份有限公司