碳酸氢钠在葛根素注射剂中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及碳酸氢钠在葛根素注射剂中的应用，该注射剂将碳酸氢钠与葛根素相使配伍制成含葛根素的注射剂，或者碳酸氢钠注射剂与葛根素注射剂联合应用，有效克服了含有葛根素注射剂的偶发性溶血不良反应，提高了葛根素注射给药的安全性。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及碳酸氢钠的医药新用途，具体涉及在葛根素注射剂中的应用。 碳酸氢钠在葛根素注射剂中的应用
【背景技术】
[0002] 碳酸氢钠又名小苏打，分子式NaHC03，分子量84,是临床上常用的碱性药，临床应 用较广。随着医药事业的发展，碳酸氢钠的临床新用途越来越多，包括以下方面：治疗血栓 性疾病。碳酸氢钠静注后可在体内释放C0 2，提高血液中C02浓度，反射性地扩张血管、增加 血流，故用来治疗血栓性疾病。治疗哮喘持续状态和喘憋性肺炎。对4例经用综合治疗未 能奏效的严重哮喘持续状态患者，经碳酸氢钠治疗后，均取得显著效果。哮喘持续状态大多 合并有酸中毒，此时气管对肾上腺素反应性受到抑制，增加过敏反应介质的释放，致使过敏 个体的哮喘加剧，而碳酸氢钠能解除这种抑制作用，使机体恢复对支气管扩张药物的反应 性，达到解除支气管痉挛的作用。治疗腰腿痛、顽固性、血管性头痛。一般认为血管性头痛 与脑组织轻微瘀血、乏氧、酸性代谢产物增多，脑血管舒缩功能失调有关，碳酸氢钠既能使 处于舒张状态的脑血管收缩，亦能使处于痉挛状态的颅内血管扩张，维持血管舒缩功能平 衡。治疗霉菌性肠炎。有人报道霉菌在酸性环境下生长和繁殖活跃，而在碱性环境中则抑 制其生长繁值。治疗难治性慢性肾炎。碳酸氢钠静脉滴注治序对激素等不敏感的各型慢性 肾炎18例。结果基本缓解12例；部分缓解5例。治疗眩晕症，治疗链霉素对颅神经的损 害。链霉素中毒所致第八对脑神经损害的报告颇多，主要症状有头痛、眩晕、耳鸣、恶心、听 力减退、耳胀、共济失调等。应用碳酸氢钠静注治疗后，结果7例均在用药后眩晕、耳鸣、恶 心等症状全部消失（见刘加升撰写的《碳酸氢钠的临床新用途》，中国医院药学杂志，1989， 9(9) :395-397 页）。
[0003] 碳酸氢钠还有其它很多用途，如延缓衰老、碱化尿液，防止磺胺在尿中结晶析出， 治疗代谢性酸中毒、休克、高血钾症，心肺复苏、心力衰竭、肺水肿、高碳酸血症等（见介新 撰写的《碳酸氢钠的临床新用途》，国外医学（医院管理分册），2002, 3 :28页）。
[0004] 葛根素是从豆科植物野葛的干燥根中提取的单体一异黄酮化合物，4'，7 -二羟 基-8-i3_D葡萄糖基异黄酮。临床上广泛用于心血管疾病的治疗。目前应用于临床的含有 葛根素的药物制剂主要是注射剂。随着葛根素的广泛使用，近年来有关葛根素不良反应的 报道也越来越多，引起医药界广泛关注。通过分析近20年中药不良反应，葛根素注射液位 列第18位。国家药品不良反应监测中心曾在2003年1月第3期《药品不良反应信息通报》 中通报了葛根素注射液的不良反应。大多数研究者认为，葛根素注射液是以50%丙二醇为 溶媒配制而成，不可避免因提取工艺、技术等方面的差异产生纯度不够，引入杂质而导致各 种反应（见徐向辉撰写的《对临床使用葛根素注射液出现不良反应的分析》，上海中医药杂 志，2006,40(8) :71-72 ;和徐世国撰写的《葛根素的临床应用及不良反应》，时珍国医国药， 2005,16 (12) :1307-1308)。在对2000-2004年国内主要医药期刊报道的63例葛根素不良 反应进行分析后发现，男40例，女23例；年龄34?81 (57. 5±23. 5)岁。所有病例均为静 脉滴注给药。给药剂量为0. 4?0. 6g，药品稀释液均为5%葡萄糖液、生理盐水、5%葡萄糖 盐水等。反应发生时间最快者为3min，最慢者为13d，均发生在给药过程中。首次给药出现 反应者47例，重复给药出现反应者16例。统计显示，常见不良反应有变态反应（发热、颤 抖等，24例）、过敏性休克（4例）、溶血性贫血（13例）、肝损害、肾损害（7例）、药物热（10 例）、死亡（5例）。所有病例均无过敏史，反应发生后停药经对症处理均恢复（死亡病例 除外）。用药剂量及所用稀释液在药品说明书提示范围内，所有反应均肯定为葛根素所致。 不良反应的发生与所患疾病无关，与年龄、性别无关，与药物稀释液无多大联系。与患者体 质差异有关，特别是年老体弱者易发生。反应发生时间的长短与中药制剂起效缓慢程度有 关（见全心荣撰写的《葛根素不良反应63例文献分析》，现代中西医结合杂志，2005,14 (1): 140)。一患者静滴葛根素约lOmin，即出现为急性肾功能不全，溶血性贫血（见关铭华撰写 的《葛根素致溶血性贫血》，药物不良反应杂志，2003, 5 :291)。因此，葛根素引起的溶血性贫 血是葛根素本身所致。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供碳酸氢钠的医药新用途，即碳酸氢钠在葛根素注射剂中的 应用，碳酸氢钠可有效防治葛根素诱发的血管内溶血不良反应。
[0006] 实际上，本发明涉及碳酸氢钠在制备葛根素注射用复方制剂时的应用，也可以和 葛根素注射剂以注射和输液的方式临时配合应用，或者在以注射和输液的方式应用碳酸氢 钠后再接着应用葛根素注射剂。
[0007] 为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：碳酸氢钠在制备葛根素注射剂的新 用途。碳酸氢钠和葛根素注射剂以注射和输液的方式临时配合应用。在以注射和输液的方 式应用碳酸氢钠后再接着应用葛根素注射剂。
[0008] 上述技术方案中的有关内容解释如下：
[0009] 1、上述方案中，所述的注射剂，含有以下重量份药物：碳酸氢钠1?100份，葛根素 1?100份。
[0010] 2、上述方案中，所述的注射剂，还含有辅料1?50重量份，注射用水1?10000重 量份。所述的辅料为葡萄糖液、丙二醇液、葡萄糖盐水、氯化钠注射液或生理盐水。
[0011] 3、上述方案中，所述的注射剂可以是临床上可接受的注射液、粉针或输液。
[0012] 4、上述方案中，所述的注射剂的制备方法如下所述：
[0013] 所述的粉针，由碳酸氢钠和葛根素混合、灭菌制得；或者由碳酸氢钠、葛根素和氯 化钠混合，加注射用水溶解，再用盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至5. 0-8. 5,过滤，滤液灭 菌后灌封在粉状安瓿中再次灭菌制得；
[0014] 所述的注射液。由碳酸氢钠、葛根素和氯化钠混合，加注射用水溶解，再用盐酸或 氢氧化钠溶液调整pH值5. 0-8. 5,过滤，滤液灌封在安瓿中灭菌制得。或碳酸氢钠由5%葡 萄糖液，5%葡萄糖盐水，丙二醇液（由丙二醇与生理盐水按体积比（1 : 1)配置而成，内含 丙二醇0. 5mL/mL)，氯化钠注射液或生理盐水溶解，再与葛根素注射剂混合，过滤，滤液灌封 在安瓿中灭菌制得。
[0015] 所述的输液，由碳酸氢钠、葛根素和氯化钠混合，加注射用水溶解，再用盐酸或氢 氧化钠溶液调整pH值5. 0-8. 5,溶解，过滤，滤液灌封在盐水玻璃瓶中灭菌制得。或碳酸氢 钠由5%葡萄糖液，5%葡萄糖盐水，丙二醇液（由丙二醇与生理盐水按体积比（1 : 1)配 置而成，内含丙二醇0. 5mL/mL)，氯化钠注射液或生理盐水溶解，再与葛根素注射剂混合，过 滤，滤液灌封在安瓿中灭菌制得。
[0016] 5、上述方案中，所述的临时配合应用是指在医院，在应用葛根素注射剂的同时与 碳酸氢钠混合一同输液或注射。
[0017] 6、上述方案中，所述的在以注射和输液的方式应用碳酸氢钠后再接着应用葛根素 注射剂，是指在医院，以注射和输液的方式应用碳酸氢钠后，再接着以注射和输液的方式应 用葛根素注射剂。
[0018] 葛根素具有有扩张冠状动脉和脑血管、降低心肌耗氧量，改善微循环和抗血小板 聚集的作用。临床上用于辅助治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、视网膜动静脉阻塞、突发性耳 聋及缺血性脑血管病、小儿病毒性心肌炎、糖尿病等。葛根素还可以与碳酸氢钠配伍制成复 方葛根素注射剂用于防治多种疾病，如用于防治糖尿病周围神经病变、高血压合并糖尿病、 糖尿病肾病、急性脑梗死、稳定型心绞痛、下肢深部静脉血栓形成以及椎基底动脉供血不足 性眩晕等。但是，含葛根素注射剂中的葛根素极易引起血管内溶血。碳酸氢钠具有广泛的 生物学效应，本
【发明者】经过研究证实碳酸氢钠还具有拮抗由葛根素诱发的血管内溶血不良 反应，提高葛根素注射给药的安全性。
[0019] 下面结合一些试验进一步来说明本发明的目的和所能达到的效果。
[0020] 本实验参考《中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》对溶血试验进 行预试验，发现8mM葛根素能够引起1 %的绵羊红细胞溶血10 %，体外溶血试验发生概率为 100%，溶血试验结果均得到重现，说明方法可重复。该方法可用于发现注射剂的潜在的偶 发溶血现象，是进行注射剂新药开发判断是否存在偶发性溶血的可行试验方法，有利于减 少不良反应的发生，提高注射剂的安全性。
[0021] 一、碳酸氢钠拮抗含有葛根素的注射剂溶血不良反应的作用及效果
[0022] (一）葛根素注射剂溶血试验
[0023] 研究碳酸氢钠与葛根素合用对绵羊红细胞的影响。取10只小尾寒羊的红细胞，分 别加入一定剂量的碳酸氢钠与葛根素，l〇min后，观察红细胞的状态和溶血发生率，用X2检 验统计分析实验结果，探寻碳酸氢钠对葛根素注射剂偶发性溶血的对抗作用。现将结果报 告如下：
[0024] 1实验材料
[0025] 1. 1受试药物
[0026] 碳酸氢钠注射剂①，碳酸氢钠由天津市科密欧化学试剂有限公司提供，用电子天 平准确称取碳酸氢钠3. 36g，溶于生理盐水溶液，用10mL容量瓶将碳酸氢钠溶液定容至 10mL，此为注射剂①，浓度为4mol · L'用微孔滤膜（0. 22μπι)过滤除菌，4°C保存备用。
[0027] 注射剂②：用灭菌生理盐水将注射剂①稀释至2mol · L_\ 10mL，4°C保存备用。
[0028] 注射剂③：用灭菌生理盐水将注射剂①稀释至lmol · ΙΛ 10mL，4°C保存备用。
[0029] 葛根素注射剂④：由浙江康恩贝制药股份有限公司提供，2mL，产品批号090501， 每mL注射剂含葛根素50mg。
[0030] 葛根素注射剂（250mM)⑤：用电子天平精确称取葛根素粉末（购自江苏天晟药品 有限公司）l.〇41g，用40%二甲基亚砜（DMS0，DZ0231，AMRESC0)溶解，超声助溶，生理盐水 溶液稀释至9mL，容量瓶定容至10mL，溶液颜色呈无色（配置环境：超净工作台中进行）。溶 剂为40% DMSO溶液。用微孔滤膜（0. 22μπι)过滤除菌，4°C保存。
[0031] 复方葛根素注射剂⑥：取注射剂①0. 04mL，注射剂④0. 27mL，混匀，共0. 31mL，组 成注射剂⑥。每mL注射剂含葛根素43. 55mg、碳酸氢钠43. 35mg。
[0032] 复方葛根素注射剂⑦：取注射剂②0. 04mL，注射剂④0. 27mL，混匀，共0. 31mL，组 成注射剂⑦。每mL注射剂含葛根素43. 55mg、碳酸氢钠21. 68mg。
[0033] 复方葛根素注射剂⑧：取注射剂③0. 04mL，注射剂④0. 27mL，混匀，共0. 31mL，组 成注射剂⑧。每mL注射剂含葛根素43. 55mg、碳酸氢钠10. 84mg。
[0034] 复方葛根素注射剂⑨：取注射剂①0. 04mL，注射剂⑤0. 13mL，混匀，共0. 17mL，组 成注射剂⑨。每mL注射剂含葛根素79. 61mg、碳酸氢钠79. 06mg。
[0035] 复方葛根素注射剂⑩：取注射剂②0. 04mL，注射剂⑤0. 13mL，混匀，共0. 17mL，组 成注射剂⑩。每mL注射剂含葛根素79. 61mg、碳酸氢钠39. 53mg。
[0036] 复方葛根素注射剂G :取注射剂③0. 04mL，注射剂⑤0. 13mL，混匀，共0. 17mL，组 成注射剂〇。每mL注射剂含葛根素79. 61mg、碳酸氢钠19. 76mg。
[0037] 1. 2实验动物
[0038] 小尾寒羊10只（20?30Kg)，由西北农林科技大学动物实验中心提供。在室温 15?25°C，相对湿度50%条件下饲养。
[0039] 1.3试剂、仪器
[0040] 氯化钠注射剂，批号：31213042402,石药银湖制药有限公司生产；注射用水，自 制；TGL-16B高速离心机，湖南星科科学仪器有限公司；HPY-01B生化培养箱，黄石恒丰医疗 器械有限公司；BI0-RAD680酶标仪；酶标条购由江苏海门三和兴亚医疗器械厂生产，购自 陕西省杨凌宝鑫器材有限公司。
[0041] 2 方法
[0042] 2. 1红细胞悬浮液的制备
[0043] 小尾寒羊10只，分别进行溶血实验。每只绵羊采颈静脉血10ml，肝素钠（江苏万 邦生化医药股份有限公司）160IU抗凝后，置于刻度离心管内，以2000转/分钟离心10分 钟，弃去血浆，加入适量的氯化钠注射剂洗涤，离心弃去上清液及白细胞层。再加适量生理 盐水摇匀、离心，如此反复洗涤3次，至离心后上清液呈无色透明为止。将所得压积红细胞 用生理盐水稀释成11% (体积比）的红细胞悬液。至此，红细胞悬液准备完毕。
[0044] 2. 2葛根素溶液体外溶血实验设计
[0045] 设葛根素溶液作用于红细胞的浓度为8mM(0. 00333g ^171)。设阴性对照组，溶剂 对照组（用DMS0代替葛根素溶液作用于红细胞），药物处理组及阳性对照组。用METTLER TOLEDO台式pH计测定葛根素溶液的pH值为7. 16。
[0046] 按照下表1中所示，分别往试管里加入相应成分，注意加样顺序。每加完一种成分 后，都轻轻摇匀。等体系中所有成分都加入体系中后，轻轻震荡混匀，放置37°C的生化培养 箱温育。lOmin后观察溶血和凝聚反应。凝聚反应判定方法：若溶液中有红棕色或棕红色 絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝集发生，若凝聚物振摇后又能均匀分散，则为假 凝集，若凝聚物不被摇散者则为真凝集。接着各管按照5000rpm/min条件离心，肉眼观察上 清液颜色。取上清液，于540nm波长处检测光吸收值（0D值）。根据2005年《中药、天然药 物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》，按公式计算各组各管的溶血率:
[0047] 溶血率（％ )=(药物处理组0D值-阴性对照组0D值）八阳性对照管组0D值-阴 性对照组0D值）
[0048] 参考评价标准：溶血率> 5%表明有溶血现象发生，并进行统计学处理。
[0049] 表1葛根素溶液与碳酸氢钠体外溶血实验分组设计
[0050]
【权利要求】
1. 碳酸氢钠在葛根素注射剂中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：碳酸氢钠可以和葛根素注射剂做成复方 注射剂使用，也可以和葛根素注射剂以注射和输液的方式临时配合同时使用，或者在以注 射和输液的方式应用碳酸氢钠后再接着应用葛根素注射剂。
3. 根据权利要求2所述的同时应用，其特征在于：葛根素注射剂和碳酸氢钠注射剂在 为患者应用前混匀，再以注射和输液的方式应用。
4. 根据权利要求2所述的以注射和输液的方式应用碳酸氢钠后再接着应用葛根素注 射剂，其特征在于：先为患者应用碳酸氢钠注射剂结束后，再接着应用葛根素注射剂。
5. 根据权利要求1、2、3、4所述的注射剂和注射剂的应用，其特征在于：含有以下重量 份药物：碳酸氢钠1?100份，葛根素1?100份。
6. 根据权利要求1、2、3、4、5所述的注射剂和注射剂的应用，其特征在于：可以含有辅 料1?50重量份、注射用水1?10000重量份。
7. 根据权利要求1、2、3、4、5、6所述的注射剂和注射剂的应用，其特征在于：所述的辅 料可以为葡萄糖液、葡萄糖盐水、丙二醇液、氯化钠注射液或生理盐水注射液。
8. 根据权利要求1、2、3、4、5、6或7所述的注射剂和注射剂的应用，其特征在于：所述 的注射剂和注射剂的应用可以是临床上可接受的注射液、粉针或输液。
【文档编号】A61P9/10GK104042625SQ201410248192
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年5月28日 优先权日:2014年5月28日
【发明者】李新平, 周博, 宁利华, 曹统 申请人:西北农林科技大学