发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法
【专利说明】
一、技术领域
[0001]本发明属于中药化学里中药有效成分提取分离技术领域。
二、【背景技术】
[0002]目前从葛根中提取分离葛根素和大豆甙元，首先都是把粉粹后的葛根直接用水或者不同浓度的酒精进行提取，得到葛根总黄酮。该总黄酮里葛根素含量低，含量为10-15%之间。机械杂质和相关物质多。大豆甙元含量只有2%左右。增加了后期注射用葛根素单体的精制分离步骤，也降低了收率。相关文献有:
[0003]中国专利申请CN1726956A公开的“葛根总黄酮提取物及其制备方法和应用”，该方法包括如下步骤:取葛根药材，加4?8倍体积30?90%的乙醇溶液提取2-5次，每次0.5-1.5小时，将提取液浓缩上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用10?70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后，加乙醇使醇浓度达70-80%，滤去沉淀物，滤液浓缩，加正丁醇萃取，回收正丁醇，浓缩、干燥。
[0004]中国专利申请CN1080287A公开的“葛根有效成分提取物及制备方法和用途”，该方法包括如下步骤:将葛根原料经煎煮、过滤、滤液浓缩、酒沉、再次过滤、滤液回收乙醇得原浆，原浆经稀释或喷雾干燥制得葛根有效成分提取液(或粉)。
[0005]中国专利申请CN103059008A公开的“一种同时制备高纯度葛根素和大豆苷元的方法”，该方法包括如下步骤:将粉碎的葛根与乙醇按料液比是1: 6-1: 10混合提取，将所得混合物过滤，滤液减压浓缩至干，得到葛根提取物浸膏，将葛根提取物浸膏用适当浓度的乙醇溶液复溶后，加入盐酸溶液和氯仿回流水解萃取一定时间，静置冷却，分出氯仿，减压浓缩，浓缩物采用乙醇溶液重结晶，得到大豆苷元结晶，酸水解液加水稀释，放置48-72h可析出葛根素粗晶，将其用乙酸-甲醇重结晶，得葛根素产品。
三、
【发明内容】
[0006]为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种发酵法制备葛根素粗品和大豆甙元粗品的方法。
[0007]本发明解决其技术问题的基本思路是:依据生物体内伴生的原理，利用葛根自身含有的纤维素酶和葡萄糖甙酶，通过人工激活培养发酵的方式，转化羟基葛根素、7-木糖苷葛根素等衍生物为葛根素，从而可增加葛根素收率；转化大豆甙为大豆甙元可增加大豆甙元收率。
[0008]本发明具体是这样实现的:
[0009]一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:
[0010]将干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2-2.5倍的水拌勾成湿料；
[0011]堆积湿料并用覆盖物覆盖保温自然发酵24-48小时，发酵升温至50-55摄氏度后，揭开覆盖物让温度自然下降到25-35摄氏度发酵完成，得发酵料；
[0012]将发酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的浓度为90%以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液过滤得过滤液；
[0013]将过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇或甲醇至无酒精度的稀膏；
[0014]稀膏趁热过滤得滤饼和滤液；
[0015]滤液再经脱水得到葛根素含量为25%以上的葛根素粗品；
[0016]滤饼用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量为55%以上的大豆甙元粗品。
[0017]进一步的方案是:在干葛根原料粉粹过程中就向粗粉喷水。
[0018]进一步的方案是:所用水用酸度调节剂调节PH值至4.5-5.5。
[0019]进一步的方案是:所述的酸度调节剂是盐酸或醋酸。
[0020]进一步的方案是:采用喷雾干燥方法脱水。
[0021]本发明中:最好在原料粉粹时就加水，以便降尘；可以用行业常用酸度调节剂(如盐酸、柠檬酸，乙酸、乳酸或醋酸等)调节水的PH值；为了转运方便，最好装袋发酵，面上的覆盖物可以是塑料薄膜；行业中一般回流提取三次提取液，采用不同提取方法，也可以适当增减提取次数，只要有效成分提取率达到设定要求；滤液再经常规脱水处理如采用喷雾干燥方法脱水就得到含量较高的葛根素粗品(含量为25%以上)；滤饼用少量水洗，烘干就得到含量为55%以上的大豆甙元粗品。
[0022]再采用常规精制方法精制葛根素粗品就可以得到注射用葛根素单体，精制大豆甙元粗品就可以得到大豆甙元单体。
[0023]本发明的优点是:同时提取分离葛根中葛根素和大豆甙元，提高了葛根自身的利用价值，充分利用了中药材资源。节省操作工序和溶剂的使用量，生产成本低，得率高，葛根素含量从常规提取出来的10% -15%—下提升到25%以上，而且同时去掉了部分相关杂质，利于下一步精制葛根素单体。同时通过本方法收到了大豆甙元含量为55%以上的大豆甙元副产物，而传统方法只能得到含量为2 %左右的大豆甙元。
[0024]该方法生产的葛根提取物，对于进一步精制注射用葛根素单体，起到了先期就除掉了大部分相关物质的杂质，而且成倍提升了葛根素粗品的含量，起到了对资源的最大化利用，提高了产品收率，降低了生产成本；对环境无污染。是一种行之有效的大规模工业化提取葛根素粗品的方法。
[0025]根据液相检查结果表明:葛根素含量从14%提升到了 26% ;葛根素主峰前的羟基葛根素等衍生物全部转化成了葛根素，大豆甙全部转化成了大豆甙元。效果十分明显。
四、【具体实施方式】
[0026]下面再结合具体的实施例对本发明进一步说明。但本发明的应用范围不限于下列实施例。
[0027]实施例1:
[0028]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2倍的水拌匀成湿料，原料粉粹时加水，所用水用盐酸调节PH值至4.5。湿料堆积保温自然发酵24小时，面上用塑料薄膜覆盖；发酵升温至50摄氏度后揭开塑料薄膜，待温度自然下降到25摄氏度后，发酵完成得发酵料。将发酵料投入提取罐中，加原料重量的5倍的浓度为90%以上的乙醇，分别回流提取三次得提取液，合并三次提取液过滤得过滤液，过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇至无酒精度得稀膏；稀膏趁热过滤得滤饼和滤液，滤液再经喷雾干燥方法脱水得到含量较高的葛根素粗品(含量为25.8%);滤饼用少量水洗，烘干得到含量为55%的大豆甙元粗品。
[0029]实施例2:
[0030]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2.2倍的水拌匀成湿料，原料粉粹时加水，所用水用醋酸调节PH值至5.5。湿料堆积保温自然发酵48小时，面上用塑料薄膜覆盖；发酵升温至55摄氏度后揭开塑料薄膜，待温度自然下降到35摄氏度后，发酵完成得发酵料。将发酵料投入提取罐中，加原料重量的10倍的浓度为90%以上的甲醇，分别回流提取三次得提取液，合并三次提取液过滤得过滤液，过滤液泵入回收罐中蒸馏回收甲醇至无酒精度得稀膏；稀膏趁热过滤得滤饼和滤液，滤液再经减压烘干脱水得到含量较高的葛根素粗品(含量为28.1%);滤饼用少量水洗，烘干得到含量为60%的大豆甙元粗品。
[0031]实施例3:
[0032]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2.5倍的水拌匀成湿料，所用水用盐酸调节PH值至5.0o湿料装入编织袋中堆积保温自然发酵36小时，面上用塑料薄膜覆盖；发酵升温至53摄氏度后揭开塑料薄膜，待温度自然下降到25摄氏度后，发酵完成得发酵料。将发酵料投入提取罐中，加原料重量的8倍的浓度为90%以上的乙醇，分别回流提取三次得提取液，合并三次提取液过滤得过滤液，过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇至无酒精度得稀膏；稀膏趁热过滤得滤饼和滤液，滤液再经喷雾干燥方法脱水得到含量较高的葛根素粗品(含量为26.5%);滤饼用少量水洗，烘干得到含量为58%的大豆甙元粗品。
[0033]实施例4:
[0034]取100公斤干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2.3倍的水拌匀成湿料。湿料装入编织袋中堆积保温自然发酵30小时，面上用塑料薄膜覆盖；发酵升温至53摄氏度后揭开塑料薄膜，待温度自然下降到25摄氏度后，发酵完成得发酵料。将发酵料投入提取罐中，加原料重量的8倍的浓度为90%以上的乙醇，分别回流提取三次得提取液，合并三次提取液过滤得过滤液，过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇至无酒精度得稀膏；稀膏趁热过滤得滤饼和滤液，滤液再经喷雾干燥方法脱水得到含量较高的葛根素粗品(含量为25% );滤饼用少量水洗，烘干得到含量为55%的大豆式元粗品。
【主权项】
1.一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是: 将干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷干葛根原料重量2-2.5倍的水拌勾成湿料； 堆积湿料并用覆盖物覆盖保温自然发酵24-48小时，发酵升温至50-55摄氏度后，揭开覆盖物让温度自然下降到25-35摄氏度发酵完成，得发酵料； 将发酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的浓度为90 %以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液过滤得过滤液； 将过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇或甲醇至无酒精度的稀膏； 稀膏趁热过滤得滤饼和滤液； 滤液再经脱水得到葛根素含量为25%以上的葛根素粗品； 滤饼用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量为55%以上的大豆甙元粗品。
2.根据权利要求1所述的一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:在干葛根原料粉粹过程中就向粗粉喷水。
3.根据权利要求1或2所述的一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:所用水用酸度调节剂调节PH值至4.5-5.5。
4.根据权利要求3所述的一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:所述的酸度调节剂是盐酸或醋酸。
5.根据权利要求1所述的一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是:采用喷雾干燥方法脱水。
【专利摘要】一种发酵法制备葛根素粗品及大豆甙元粗品的方法，其特征是将干葛根原料粉粹成20-40目的粗粉，喷原料重量2-2.5倍的水拌匀成湿料；堆积湿料覆盖保温自然发酵24-48小时，发酵升温至50-55摄氏度后，让温度自然下降到25-35摄氏度发酵完成，得发酵料；将发酵料投入提取罐中回流提取三次，每次提取加干葛根原料重量5-10倍的浓度为90％以上的乙醇或甲醇，得三次提取液，合并三次提取液过滤得过滤液；将过滤液泵入回收罐中蒸馏回收乙醇或甲醇至无酒精度的稀膏；稀膏趁热过滤得滤饼和滤液；滤液再经脱水得到葛根素含量为25％以上的葛根素粗品；滤饼用清水清洗后，烘干得到大豆甙元含量为55％以上的大豆甙元粗品。本发明提取的葛根素含量可达25％，大豆甙元含量达55％。
【IPC分类】C12P17-14, C12P17-16
【公开号】CN104561176
【申请号】CN201410849402
【发明人】吴宪君, 干文冬, 吴昱隆, 吴秀英
【申请人】绵阳劲柏生物科技有限责任公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月30日