一种葛根素的生产方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药品及保健品技术领域，涉及一种葛根素的生产方法。
【背景技术】
[0002]葛根是豆科葛属植物野葛(Pueraria lobata(Wilid.)Ohwi)的根。葛属在我国，除新疆、西藏、青海外，各省均有分布。葛根从根、藤、花到叶所含化学成分不尽相同。葛根中除含有优质淀粉、人体必需氨基酸(赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸等)和微量元素(砸、锌、锰、锗等)外，还含有定量的黄酮类物质，主要活性成分为黄豆苷元(daldzein)、黄豆苷(daidziun)、葛根素(puerarin)、葛根素-7-木糖苷(puerarin-7-xy-loside)等物质。
[0003]研宄表明，葛根素具有降低血压、减慢心率、扩张冠状血管、改善微循环、抑制动脉硬化、抗心律失常、改善脑循环等心脑血管系统作用、抗血小板聚集、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗缺氧与抗氧化、收缩和舒张平滑肌、益智、解热、解酒与解毒等方面的功效。此外，葛根素能显著抑制酪氨酸酶的催化活性，中断黑色素氧化过程，抑制黑色素的发生与形成，从而防止黄褐斑、日晒斑等色素沉积。
[0004]目前从葛根中提取分离葛根素大都采用水煮提或酒精热回流提取技术，一方面由于葛根植物细胞壁的存在妨碍了有效成分的浸出，致使提取率不高，另一方面由于葛根中大量淀粉的存在，在采用水煮提或酒精热回流提取时由于过高的温度致使淀粉糊化，造成过滤困难，严重影响葛根素的生产。目前也有采用纤维素酶预先水解葛根，然后在提取分离葛根素的生产工艺，但由于采用纤维素酶大大增加了生产成本，在实际生产中应用受到一定限制。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种葛根素的生产方法，通过微生物发酵预处理产生的纤维素酶、果胶酶、葡萄糖苷酶等作用于鲜葛根原料，一方面以较温和方式分解植物细胞壁，加速有效成分浸出，另一方面能够部分分解去除影响提取液进一步分离的杂质如淀粉、蛋白质、果胶等，促进某些极性低的脂溶成分转化为易溶于水的糖苷类而有利于提取；同时采用具有利用超声空化现象破坏细胞壁，低温提取不破坏有效成分的超声提取技术，进一步加速有效成分的浸出，提高了葛根素的提取效率；在分离中采用优化的LX-80G大孔吸附树脂，获得吸附量大，纯度高的特点。本工艺采用微生物发酵预处理和超声提取技术相结合克服了现有技术提取中诸多的缺点，在分离中采用优化的LX-80G大孔吸附树脂，大大提高了葛根素生产的提取率和纯度。其具体技术方案为:
[0006]一种葛根素的生产方法，包括以下步骤:鲜葛根切块放入拌料池中，加辅料:原料量2%葡萄糖，3-5%云河复合肥料SROl及20-30%的水后用拌料机拌料，在接入5-10%的菌曲后拌匀，用带式输送机输送到发酵池中压实、覆盖，于25-35?保温发酵培养，期间用翻料机进行适当翻料，3-5天后加水至料面，25-35°C保温水解2-3天，将葛根及水解液一同装入超声提取罐中，在加水至葛根:水=I: 10，50-60 °C超声提取0.5h，粗滤，放出提取液，残渣在加水至葛根:水=I: 8，50-60°C超声提取0.5h，粗滤，提取液在经板框细滤后上LX-80G大孔吸附树脂柱，先经水洗涤，在用75%乙醇洗脱，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，在用水饱和正丁醇溶液萃取5次，萃取比为洗脱液:水饱和正丁醇溶液=5: 1，将正丁醇萃取液浓缩至小体积，用冰醋酸调节PH后在析晶罐中放置析晶，离心获得葛根素结晶物，经重结晶，烘干。
[0007]优选地，所述的菌曲用黑曲霉XD-8制备，所述黑曲霉XD-8为西北大学生命科学学院西北植物资源利用研发中心专为鲜葛根细粉发酵水解筛选的菌种；
[0008]XD-8黑曲霉母种扩繁方法:用马铃薯-葡萄糖-琼脂(PPA)培养基。配制方法如下:称取去皮马铃薯200g，切成Icm3小块，加水1000ml，煮沸30分钟，用四层纱布滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml，加琼脂15g溶化，然后再加葡萄糖20g搅匀溶解，将培养基分装于6个250ml三角瓶中，121°C灭菌30分钟。取一瓶培养基，融化倒10支试管，每支1ml左右，121°C灭菌30分钟后铺成斜面，其余5瓶低温保存待用。试管斜面冷却后，在无菌室中转接XD-6黑曲霉，于30°C培养箱中培养3天。菌种经转接后找其菌丝健壮，孢子颜色数量正常，即可直接用于实际生产。
[0009]XD-8黑曲霉菌曲制作:取干葛根量2%葡萄糖，5%云河复合肥料(SROl)，用水溶解，拌入含10%麸皮的葛根细粉中，加水至含水量为50-60%，充分拌匀，放入培养盘中，压实、覆盖，于121°C灭菌60分钟，于无菌室中接入活化后的XD-8黑曲霉，35°C温箱中培养3-5天，45°C下烘干备用。
[0010]与现有技术相比，本发明的有益效果为:
[0011]1、鲜葛根通过黑曲霉固体发酵和水解技术为提高葛根素提取率创造条件；
[0012]2、使用的菌曲用黑曲霉XD-8制备，所述黑曲霉XD-8为西北大学生命科学学院西北植物资源利用研发中心专为鲜葛根细粉发酵水解筛选的菌种用原料量2%葡萄糖，3-5%云河复合肥料(SROl)为发酵辅料，具有染菌率低、发酵成本低、水解效率高的优点。
[0013]3、将黑曲霉固体发酵和水解技术与超声提取技术相结合，使葛根素提取率得到很大的提尚。
[0014]4、在分离中采用优化的LX-80G大孔吸附树脂，获得吸附量大，分离纯度高的产品O
【具体实施方式】
[0015]下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
[0016]本发明中发酵辅料:原料量2%葡萄糖，3-5%云河复合肥料(SROl)。
[0017]所述的菌曲用黑曲霉XD_8(西北大学生命科学学院西北植物资源利用研发中心)制备；XD-8黑曲霉母种扩繁方法:用马铃薯-葡萄糖-琼脂(PPA)培养基。配制方法如下:称取去皮马铃薯200g，切成Icm3小块，加水1000ml，煮沸30分钟，用四层纱布滤去马铃薯块，将滤液补足至1000ml，加琼脂15g溶化，然后再加葡萄糖20g搅匀溶解，将培养基分装于6个250ml三角瓶中，121 °C灭菌30分钟。取一瓶培养基，融化倒10支试管，每支1ml左右，121°C灭菌30分钟后铺成斜面，其余5瓶低温保存待用。试管斜面冷却后，在无菌室中转接XD-6黑曲霉，于30°C培养箱中培养3天。菌种经转接后找其菌丝健壮，孢子颜色数量正常，即可直接用于实际生产。
[0018]XD-8黑曲霉菌曲制作:取干葛根量2%葡萄糖，5%云河复合肥料(SR01)，用水溶解，拌入含10%麸皮的葛