本发明涉及兽药制剂领域，特别涉及一种兽用复方氟苯尼考注射液及其制备方法。
背景技术：
：近年来随着人民生活水平的提高、畜牧业的发展，畜禽的存栏量逐年增加，随之而来的各种呼吸道、消化道等畜禽疾病随之发生，对畜牧业造成巨大的损失。目前市场上还没有较为理想的具有广谱治疗作用的药物用于该类疾病的治疗。临床上一般选用硫酸庆大霉素、盐酸恩诺沙星注射液等药物治疗，但是易产生耐药性，效果不明显。氟苯尼考属于酰胺醇类广谱抗菌药，对多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及支原体等有较强的抗菌活性。用于敏感细菌所致的猪和鸡的细菌性疾病，如猪传染性胸膜肺炎、沙门氏菌引起的伤寒和副伤寒等。氟苯尼考主要是一种抑菌剂，通过与核糖体50S亚基结合，抑制细菌蛋白质的合成。体外氟苯尼考对许多微生物的抗菌活性与氯霉素、甲砜霉素相似或更强，一些因乙酰化作用对氯霉素耐药的细菌如大肠杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌等仍可能对氟苯尼考敏感。溶血性巴氏杆菌、多杀巴氏杆菌和猪胸膜肺炎放线杆菌对氟苯尼考高度敏感。氟尼辛葡甲胺是一种强效环氧化酶抑制剂，具有镇痛、解热、抗炎和抗风湿作用。镇痛作用是通过抑制外周的前列腺素或其痛觉增敏物质的合成或它们的共同作用，从而阻断痛觉冲动传导所致。外周组织的抗炎作用可能是通过抑制环氧化酶、减少前列腺素前体物质形成，以及抑制其他介质引起局部炎症反应所致。氟尼辛葡甲胺不影响马的胃肠道蠕动，但可能能改善败血性休克动物的血液动力学。近几年市场上的氟苯尼考类注射液多为单方制剂，效果差、用量大、残留高、生物利用率很低，而且几乎所有的氟苯尼考类注射液溶媒全部为有机溶媒，皮下注射刺激性大，通针性不好，使用时还需配合局部镇痛药物。技术实现要素：为了达到上述目的，本发明提供了一种兽用复方氟苯尼考注射液及其制备方法。为了达到上述目的，本发明提供了一种兽用复方氟苯尼考注射液，其中，每1L复方氟苯尼考注射液中包括氟苯尼考50～300g，氟尼辛葡甲胺5～30g，肉豆蔻酸异丙酯300～600ml，聚乙二醇硬脂酸酯-15为150～450ml，无水亚硫酸钠0.5～3g，注射用水50～200ml。优选的，所述复方氟苯尼考注射液为每1L中包括200g氟苯尼考，20g氟尼辛葡甲胺，450ml肉豆蔻酸异丙酯，300ml聚乙二醇硬脂酸酯-15，1g无水亚硫酸钠，100ml注射用水。其中，所述聚乙二醇为聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600中的一种。优选的，所述聚乙二醇为聚乙二醇400。其中，所述吡咯烷酮为N-甲基-2-吡咯烷酮。为了上述目的，本发明还提供了所述的兽用复方氟苯尼考注射液的制备方法，包括：第一步、将氟苯尼考加入肉豆蔻酸异丙酯中，45-50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；第二步、将氟尼辛葡甲胺、无水亚硫酸钠加入注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；第三步、将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；第四步、半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在100-105℃温度下灭菌25-30min，即得复方氟苯尼考注射液。本发明的有益效果是：本发明制得的复方氟苯尼考注射液主要成分为氟苯尼考及氟尼辛葡甲胺，其中氟苯尼考用于敏感细菌所致的细菌性疾病，如猪传染性胸膜肺炎、沙门氏菌引起的伤寒和副伤寒等；氟尼辛葡甲胺是一种强效环氧化酶抑制剂，具有解热、镇痛、抗炎和抗风湿的作用；两者联用较常规的氟苯尼考注射液单方制剂效果好、用量小、残留低，药效显著增强，能达到更高的生物利用度；制备工艺简单，稳定性好，成本低，适合规模化工业生产，对畜牧业的可持续发展具有重大意义；用注射用水代替了部分有机溶媒，所选有机溶媒为目前市场上新颖的、安全的、刺激性小的有机溶媒，无需加入局部镇痛剂，流动性好，具有更好的通针性，注射时减少刺激性。具体实施方式为了进一步说明，列举具体实施例进行说明。实施例一将50g氟苯尼考加入300ml肉豆蔻酸异丙酯中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将5g氟尼辛葡甲胺、0.5g无水亚硫酸钠加入50ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例二将100g氟苯尼考加入350ml肉豆蔻酸异丙酯中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将10g氟尼辛葡甲胺、1g无水亚硫酸钠加入75ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例三将150g氟苯尼考加入400ml肉豆蔻酸异丙酯中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将15g氟尼辛葡甲胺、1.5g无水亚硫酸钠加入100ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例四将200g氟苯尼考加入450ml肉豆蔻酸异丙酯中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将20g氟尼辛葡甲胺、1g无水亚硫酸钠加入100ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例五将300g氟苯尼考加入500ml肉豆蔻酸异丙酯中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将30g氟尼辛葡甲胺、2g无水亚硫酸钠加入150ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，搅拌均匀，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例六将100g氟苯尼考加入350ml聚乙二醇400中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将10g氟尼辛葡甲胺、1g无水亚硫酸钠加入50ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的N-甲基-2-吡咯烷酮，搅拌均匀，最后用N-甲基-2-吡咯烷酮定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例七将200g氟苯尼考加入450ml聚乙二醇400中，50℃加热，搅拌溶解，放冷备用，得到溶液①；将20g氟尼辛葡甲胺、1.5g无水亚硫酸钠加入100ml注射用水中，搅拌溶解，得到溶液②；将上述两种溶液①和②混合，搅拌均匀，然后向其中加入处方量的N-甲基-2-吡咯烷酮，搅拌均匀，最后用N-甲基-2-吡咯烷酮定容至1L，过滤，备用；半成品请验，检验合格后，充氮气灌封，在105℃温度下灭菌30min，即得复方氟苯尼考注射液。实施例一至实施例七之一所述各组分用量按照相同比例增加或减少，所得各组分的重量份数关系均属于本发明的保护范围。实施例八稳定性试验试验样品为实施例一、实施例二、实施例三制得的一种兽用复方氟苯尼考注射液；检测项目包括性状、pH值、有关物质、含量。加速试验将实施例一、实施例二、实施例三制得的三批样品在40±2℃、相对湿度65±5％条件下放置六个月，于第0、1、2、3、6月末取样，考察性状、pH值、水分、有关物质、含量等项目，与0天的检测结果对比，结果见下表1。长期试验将实施例一、实施例二、实施例三制得的三批样品在25±2℃、相对湿度60±10％条件下放置，于第0、3、6、9、12、18、24月取样，考察性状、pH值、水分、有关物质、含量等项目，与0天的检测结果对比，结果见下表2。表1三批样品加速试验结果表2三批样品长期试验结果由加速试验及长期试验结果可知，由实施例一、实施例二、实施例三制得的三批样品在40±2℃、RH65±5％条件下放置6个月以及在25±2℃、RH60±10％条件下放置18个月，样品的外观色泽变化不明显，pH、有关物质均符合规定，含量变化不显著，表明该发明制得的一种复方氟苯尼考注射液质量稳定。实施例九刺激性试验皮肤刺激性试验试验样品为实施例一制得的一种兽用复方氟苯尼考注射液；阳性对照为市售复方氟苯尼考注射液；试验动物为雌雄各半的健康家兔8只，体重2～2.5kg。取健康家兔8只，平均分成两组，每组雌雄各2只，采用同体左右对比法，设溶剂对照。试验前24h对背部进行剪毛处理，剪毛范围左右各3cm×3cm，左侧涂抹本发明药物及阳性对照药物，右侧涂抹空白溶剂，均为0.5mL；然后用2层纱布(2.5cm×2.5cm)和1层玻璃纸覆盖，再用无刺激性胶布加以固定；贴敷4h时，用温热至38℃的温水清洁给药部位，在去除药物后0.5、1、24、48、72h，分别肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿情况，按照皮肤刺激反应评分标准(表3)进行评分，然后再按皮肤刺激强度评价标准(表4)进行评价。表3皮肤刺激反应与评分标准表4皮肤刺激强度评价标准分值评价0～0.49无刺激0.5～2.99轻度刺激3～5.99中度刺激6～8强度刺激试验结果按照皮肤刺激反应评分标准，对皮肤刺激的各时间点进行评分，本发明制剂所有时间点反应积分的平均值为0.32，阳性对照制剂所有时间点反应积分的平均值为1.37，溶剂对照为0.23，这表明本发明的一种复方氟苯尼考注射液对皮肤有轻度刺激性，但与市售复方氟苯尼考注射液相比对皮肤的刺激性更小。肌肉刺激性试验试验样品为实施例一制得的一种兽用复方氟苯尼考注射液；阳性对照为市售复方氟苯尼考注射液；试验动物为雌雄各半的健康家兔8只，体重2～2.5kg。方法及标准8只兔子随机分成四组，每组雌雄各1只。刺激性反应评价标准见表5。第一组、第二组的1、2、5、6号健康家兔，以无菌操作的方法，分别在其左右两腿股四头肌内各注射实施例一样品及阳性对照样品各1mL，并对注射部位进行标记。注射后48h处死该动物，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位局部刺激反应。第三组、第四组3、4、7、8号的健康家兔，以无菌操作的方法，分别在其左右两腿股四头肌内各注射实施例一样品及阳性对照样品各1mL，并对注射部位进行标记。注射后7d处死该动物，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位局部刺激反应病变的消退情况。表5肌肉刺激性反应评价标准结果评定方法每组计算出4块肌肉反应级的总和。如果各股四头肌反应的最高与最低组之差大于2时，则应另取两只家兔重新试验。在初试或重试的2只家兔的4块股四头肌反应级之和小于10时，则认为供试品的局部刺激试验符合规定。试验结果试验结果见下表6～9。表6第一组肌肉刺激反应结果(48h后)表7第二组肌肉刺激反应结果(48h后)表8第三组肌肉刺激反应病变的消退情况的结果(7d)类别刺激病变情况反应级别3号兔右腿基本无出血，无肌肉坏死、变性现象，恢复较好。03号兔左腿轻度出血，范围在0.3cm左右，无肌肉变性、坏死现象。14号兔右腿基本无出血，无肌肉坏死、变性现象，恢复较好。04号兔左腿基本无出血，无肌肉坏死、变性现象，恢复较好。0反应总和1表9第四组肌肉刺激反应病变的消退情况的结果(7d)类别刺激病变情况反应级别7号兔右腿基本无出血，无肌肉坏死、变性现象，恢复较好。07号兔左腿轻度出血，范围在0.3cm左右，无肌肉变性、坏死现象。18号兔右腿轻度出血，范围在0.2cm左右，无肌肉变性、坏死现象。18号兔左腿轻度出血，范围在0.4cm左右，无肌肉变性、坏死现象。1反应总和3第一组2只家兔肌肉注射实施例一样品48h后解剖结果显示，一块股四头肌注射部位无出血现象，无肌肉坏死及变性现象，另三块股四头肌注射部位有轻度出血，范围在0.5cm以下，但无肌肉变性、坏死现象。反应级别在0～1级，总和为3。四块股四头肌反应级别之和小于10，且最高与最低组级别之差小于2，表明本发明的复方氟苯尼考注射液局部肌内注射试验对动物肌肉的刺激性较弱，符合安全性试验标准。第三组2只家兔肌内注射实施例一样品7d后解剖结果显示，三块股四头肌基本无出血现象，无肌肉坏死、变性现象，恢复较好，另一块股四头肌有轻度出血，大约在0.3cm左右，但无肌肉变性、坏死现象，反应级别为0～1级，总和为1，小于10级，并且最高与最低组的级别差小于2，表明本发明的复方氟苯尼考注射液局部试验对动物肌肉的刺激性基本完全恢复，可逆性良好，符合安全性试验标准。通过第一组与第二组以及第三组与第四组之间的比较可以看出，本发明制备的复方氟苯尼考注射液比市售复方氟苯尼考注射液产品的肌肉刺激性更小，恢复更迅速，可安全用于临床。通过刺激性试验表明，该发明制备的一种复方氟苯尼考注射液临床刺激性小、安全性高。实施例一至实施例七之一以及实施例一至实施例七之一所述各组分用量按照相同比例增加或减少所得到的组合，所做的肌内刺激性试验以及结果均属于本发明的保护范围。以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页1 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