一种缓解体力疲劳的中药组合物及其制备方法与应用与流程

本发明涉及中药领域，具体涉及一种缓解体力疲劳的中药组合物及其制备方法与应用。

背景技术：

疲劳是一种涉及许多生理生化因素的综合性生理过程，是人体活动到一定阶段时必然出现的一种正常生理现象。它既标志着机体原有工作能力的暂时下降，又可能是机体发展到伤病状态的一个先兆。关于疲劳的定义曾有很多，目前比较认可的是1982年第五届国际运动生化会议上所下的定义，该会议将疲劳定义为“机体生理过程不能将其机能维持在一特定水平上和/或不能维持预定的运动强度的一种生理现象”。

从传统中医理论分析，“疲劳”属于中医“虚”、“虚劳”、“虚损”等范畴，在《黄帝内经》中，疲劳多称为“倦”、“解堕”、“困薄”、“身重”、“体重”等。《内经》记载了“五劳所伤”、“精气夺则虚”、“阳虚则生外寒”、“阴虚则生内热”，阐明疲劳或者劳倦内伤，耗损精气，以致内外虚损的发生机理。疲劳与形体、精气损伤，以及肺、脾、肾等脏腑功能不足的密切相关。《素问·示从容论篇》中指出“肝虚、肾虚、脾虚，皆令人体重烦冤”，根据中医藏象学说，疲劳与五脏均有关系，但主要责之于脾、肝、肾，亦与心、肺有关，脾为后天之本，气血生化之源，脾之运化能将水谷中的精微物质转化为气血，以充养人体；肝主藏血，肝所贮藏之血使人能耐受疲劳；肾为先天之本，主藏精，而精为生命之本，肾所藏之精能化生气血，正所谓“精能生血”。除此之外，心还能生血、肺主气；肺脾肾三脏共同调节水液代谢，产生津液。体力的产生以血、阴、津、液为物质基础，以气、阳的功能为外在表现。疲劳的产生与气、血、阴、阳的损耗有密切的关系。另外，运动或多度运动，亦可以使人汗出或大汗淋漓，从而伤津耗液，因其津能载气，故而甚或导致气阴两伤，可见疲劳也耗伤气血津液。总之，中医认为疲劳主要是由各种原因导致脾、肝、肾三脏功能异常，心、肺受累及气血阴阳失调而造成的。在《素问·举痛论》中言“劳则气耗”，疲劳亦症，以气虚为主，兼以血虚，其证型常为气血两虚，其治法立足于“气血双补”。

现代医学认为疲劳是机体过用(超限)而引起的功能降低并出现不适的状态，主要表现为疲劳困倦，可出现头晕、健忘、睡眠质量下降等伴随症状。疲劳的产生与能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等因素关系密切。

技术实现要素：

本发明的目的之一是提供一种缓解体力疲劳的中药组合物。

本发明所提供的缓解体力疲劳的中药组合物，由以下重量份的组分制成：

人参提取物 1-5份；

红景天提取物 0.5-3份；

玛咖粉 5-20份。

其中，所述人参提取物是以70％乙醇(体积比)为溶剂对人参的干燥根和根茎进行提取得到的，其工艺流程如图1所示。

所述红景天提取物是以70％乙醇(体积比)为溶剂对红景天的干燥根和根茎进行提取得到的，其工艺流程如图2所示。

所述玛咖粉是以玛咖(根茎)为原料，经切片、干燥、粉碎、灭菌等步骤制成。

优选地，上述缓解体力疲劳的中药组合物可由以下重量份的组分制成：

人参提取物 2-4份；

红景天提取物 0.75-2.5份；

玛咖粉 7-15份。

具体地，上述缓解体力疲劳的中药组合物可由以下重量份的组分制成：

人参提取物 2.5份；

红景天提取物 1份；

玛咖粉 10份。

上述缓解体力疲劳的中药组合物可制成各种形式的口服制剂，包括：胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸剂、缓控释制剂、口服液、合剂和糖浆剂。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

当所述剂型为片剂时，所述药用辅料具体可为甘露醇和硬脂酸镁。

本发明的另一目的是提供一种缓解体力疲劳的中药组合物的片剂，所述片剂由以下重量份的组分制成：

具体地，所述片剂由以下重量份的组分制成：

本发明所提供的缓解体力疲劳的中药组合物的片剂通过包括下述步骤的方法制备得到：

1)将人参提取物、红景天提取物、玛咖粉和甘露醇混合，得到混合粉；

2)将80％乙醇加入到所述混合粉中，制粒，将制得的湿颗粒干燥，得到干燥后颗粒；

3)向所述干燥的颗粒中加入配方量的硬脂酸镁，混合，得到总混物；

4)将所述总混物压片，得到片剂。

上述方法步骤1)中，所述人参提取物、红景天提取物、玛咖粉、甘露醇和硬脂酸镁分别为质量检验合格的人参提取物、红景天提取物、玛咖粉、甘露醇和硬脂酸镁。

所述人参提取物、红景天提取物、玛咖粉和甘露醇在混合前均经过80目筛筛分。

所述混合的时间为20-60分钟。

上述方法步骤2)中，所述80％乙醇(体积比)是通过向乙醇中加入纯化水配制的。

80％乙醇的加入量为适量。

所述制粒为通过18目筛制粒。

所述干燥的工艺条件为：50℃-60℃干燥约1.5小时。

在干燥操作之前，还可包括对制得的湿颗粒室温下放置自然挥散掉乙醇的操作。

所述干燥后颗粒的水分控制在≤3％。

所述干燥后颗粒还经过16目筛整粒。

上述方法步骤3)中，所述混合的时间为10-60min。

上述方法步骤4)中，所述片剂的克重为0.75g/片。

上述方法还可包括对所述片剂进行包装、检验、入库的操作。

所述包装的具体操作为：将合格片剂装入口服固体药用高密度聚乙烯瓶中，60片/瓶。

上述缓解体力疲劳的中药组合物在制备缓解体力疲劳的药物/保健品中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明还提供一种药物/保健品，所述药物/保健品包含上述缓解体力疲劳的中药组合物。

经缓解体力疲劳功能动物实验证实，本发明的中药组合物，中剂量可显著延长负重小鼠游泳时间；高剂量可明显降低小鼠血清尿素氮含量；高剂量、中剂量和低剂量均可显著提高小鼠肝糖原含量；高剂量可明显减小小鼠血乳酸曲线下面积，因此本发明的中药组合物有缓解体力疲劳功能。

附图说明

图1为本发明中人参提取物的制备工艺流程图。

图2为本发明中红景天提取物的制备工艺流程图。

图3为本发明中药组合物片剂的生产工艺简图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中所使用的人参提取物和红景天提取物分别按照图1和图2所示的工艺流程制备得到。

实施例1制备缓解体力疲劳的中药组合物的片剂

1.原辅料检验

由公司质量检验部门对人参提取物、红景天提取物、玛咖粉、甘露醇、硬脂酸镁等原辅料进行质量检验，检验合格后备用。

2. 80％乙醇的制备

取乙醇，加纯化水配制成80％乙醇溶液，备用。

乙醇：应符合GB10343-2008《食用酒精》项下的规定。

纯化水：应符合《中国药典》2015年版二部中“纯化水”规定。

3.过筛、称量

将人参提取物、红景天提取物、玛咖粉、甘露醇、硬脂酸镁分别过80目筛，分别按配方量称取各物料，人参提取物250g、红景天提取物100g、玛咖粉1000g、甘露醇142.5g、硬脂酸镁7.5g。

4.混合

将过筛后的人参提取物、红景天提取物、玛咖粉、甘露醇置混合机中，混合30分钟，混合均匀，得混合粉。

5.制粒

将80％乙醇适量加入混合粉中，18目筛制粒，将制得的湿颗粒自然挥散乙醇后，50℃-60℃干燥约1.5小时，控制颗粒水分≤3％，16目筛整粒，备用。

6.总混

将颗粒加入硬脂酸镁7.5g，混合15min，得到总混物，备用。

7.压片

将总混物压片，0.75g/片。

8.包装

将合格片剂装入口服固体药用高密度聚乙烯瓶中，60片/瓶。口服固体药用高密度聚乙烯瓶符合YBB00122002的规定。

9.检验、入库

成品按本品规定的各项质量指标分别逐项检验，检验合格后入库。

实施例2

以人参提取物100g、红景天提取物300g、玛咖粉200g、甘露醇80g、硬脂酸镁1.5g为原料按照实施例1的方法制备中药组合物的片剂2。

实施例3

以人参提取物500g、红景天提取物50g、玛咖粉500g、甘露醇200g、硬脂酸镁3g为原料按照实施例1的方法制备中药组合物的片剂3。

实施例4、对实施例1得到的中药组合物的片剂进行缓解体力疲劳功能动物实验。

1.材料与方法

1.1受试样品及配制方法

受试样品：实施例1制备得到的中药组合物片剂，土褐色，保存条件：常温、避光、密闭、干燥。人体推荐摄入量：4.5g/日，即4.5g/60kgbw＝0.075g/kgbw。

配制方法：

(1)、高剂量：取中药组合物片剂30片，0.75g/片，合计22.5g，加蒸馏水研匀并稀释至300ml，配制成7.5％(g/ml)浓度的混悬液。

(2)、中剂量：用量筒量取高剂量混悬液150ml，加蒸馏水至300ml，配制成3.75％(g/ml)浓度的混悬液。

(3)、低剂量：用量筒量取中剂量混悬液150ml，再加蒸馏水至300ml，配制成1.875％(g/ml)浓度的混悬液。

置4℃冰箱保存备用，每4天同法配制一次。

1.2实验动物及环境

ICR种小白鼠，雄性，体重18±2.0g，购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司，动物合格证号：SCXK(吉)2011—0004。实验动物使用许可证号：SYXK(吉)2015-0009。动物饲养室温度为20-24℃，相对湿度为40-70％。辐照灭菌饲料购自北京科澳协力饲料有限公司，饲料生产许可证号：京饲证(2014)06054。

1.3主要仪器与试剂

1.3.1主要仪器：T-200型动物电子天平,常熟市双杰测试仪器厂；JA1003B型电子天平,上海越平科学仪器有限公司；DT5-3型低速台式离心机，北京时代北利离心机有限公司；GT16-3型高速台式离心机，北京时代北利离心机有限公司；UV-5100B紫外可见分光光度计，上海元析仪器有限公司；游泳箱(规格50*50*40cm)，自制；SBA-40E型生物传感分析仪,山东省科学院生物研究所；秒表，深圳凯狮龙体育秒表厂；SHZ-88A型水浴恒温振荡器，太仓市实验设备厂。

1.3.2主要试剂：尿素氮测定试剂盒，批号：20151028；肝/肌糖原试剂盒,批号：20160502，以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。葡萄糖血乳酸标准液，批号：20160125；缓冲剂，批号：20160423；血乳酸溶血剂，批号：20160519；乳酸酶膜，批号：20160510，以上试剂均购自山东省科学院生物研究所。浓硫酸，批号：20130822，北京化工厂。

1.4剂量设计、分组及受试样品给予方式：

实验共设四个组：高、中、低剂量组，空白对照组，必要时设模型对照组。

高剂量组：1.5g/kgbw(相当于人体推荐摄入量20倍)

中剂量组：0.75g/kgbw(相当于人体推荐摄入量10倍)

低剂量组：0.375g/kgbw(相当于人体推荐摄入量5倍)

空白对照组：蒸馏水

模型对照组：蒸馏水+末次给受试样品后制备模型

灌胃受试样品，每日1次，连续30日，体积均为20ml/kgbw。

1.5实验方法

1.5.1小鼠负重游泳实验

取雄性ICR种成年小鼠100只，于清洁级观察室内适应环境3天。先进行游泳筛选，以负重游泳时间约在5min以上者视为合格动物，筛选出合格小鼠59只。

于筛选第2天选取合格ICR小鼠56只，随机等分为四组，每组14只，第一组为空白对照组，第二、三、四组分别为中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、低剂量0.375g/kgbw组。灌胃给予受试样品，每日1次，连续30日，体积均为20ml/kgbw，空白对照组给予相同体积的蒸馏水。实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品量。于末次给予受试样品30min后，将小鼠鼠尾根部负荷5％体重的铅丝，置于游泳箱(规格50*50*40cm)中游泳。水深30cm，水温25℃±1.0℃。记录小鼠自放入水中至沉入水底再无力浮起时间，作为小鼠负重游泳时间。

1.5.2小鼠血清尿素氮实验方法

取雄性ICR种成年小鼠80只，于清洁级观察室内适应环境3天。选取75只随机等分为五组，每组15只，第一组为空白对照组，第二组为模型对照组、第三、四、五组分别为中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、低剂量0.375g/kgbw组。灌胃给予受试样品，每日1次，连续30日，体积均为20ml/kgbw，空白对照组和模型对照组给予相同体积的蒸馏水。实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品量。高尿素模型的建立及标本制备：于末次给受试样品30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后小鼠摘除眼球采全血约0.5mL(不加抗凝剂)，血凝固后以2000prn/min离心15min，分离血清备用。采用试剂盒法，于UV-5100B型紫外可见分光光度计测定血清尿素氮含量。

1.5.3小鼠肝糖原实验方法

取雄性ICR种成年小鼠60只，于清洁级观察室内适应环境3天。随机等分为四组，每组15只，第一组为空白对照组，第二、三、四组分别为中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、低剂量0.375g/kgbw组。灌胃给予受试样品，每日1次，连续30日，体积均为20ml/kgbw，空白对照组给予相同体积的蒸馏水。实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品量。于末次给予受试样品30min后，脱臼处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后，用滤纸吸干，称取肝脏约90mg，加入约270μl碱溶液，沸水浴煮20min，流水冷却，加双蒸馏水约8.6ml(制成糖原检测液)。采用试剂盒法，于UV-5100B型紫外可见分光光度计测定肝糖原含量。

1.5.4小鼠血乳酸实验方法

取雄性ICR种成年小鼠85只，于清洁级观察室内适应环境3天。选取75只随机等分为五组，每组15只，第一组为空白对照组，第二为模型对照组，第三、四、五组分别为中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、低剂量0.375g/kgbw组。灌胃给予受试样品，每日1次，连续30日，体积均为20ml/kgbw。实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品量。分别于末次给予受试样品30min后采血一次，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后立即采血一次，游泳后休息20min再采血一次，每次采血均为20μl，再加入40μl破膜液中，立即充分振荡破碎细胞。采用SBA-40E型生物传感分析仪测定血乳酸含量，并计算血乳酸曲线下面积。

1.6实验数据统计:

采用SPSS17.0统计学软件对各实验原始数据进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据资料，用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理；对非正态分布或方差不齐的数据资料进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换所得的数据进行统计处理。

1.7检测指标

1.7.1小鼠体重

1.7.2负重游泳时间

1.7.3血清尿素氮含量

1.7.4肝糖原含量

1.7.5血乳酸含量

1.8结果判断标准

负重游泳实验结果阳性，血乳酸、血清尿素、肝糖元/肌糖元三项生化指标中任二项指标阳性，可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能。

2.实验结果

2.1小鼠负重游泳实验

2.1.1对负重游泳实验小鼠体重的影响

实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品剂量。结果见表1。

表1.连续灌胃受试物30日对负重游泳实验小鼠体重的影响(n＝14)

由表1结果可见，与空白对照组比较，连续灌胃中药组合物片剂30日，各剂量组对小鼠体重均无明显影响，与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

2.1.2负重游泳时间测定

于末次给予受试样品30min后，将小鼠鼠尾根部负荷5％体重的铅丝，置于游泳箱(规格50*50*40cm)中游泳。水深30cm，水温25℃±1.0℃。记录小鼠自放入水中至沉入水底再无力浮起时间，作为小鼠负重游泳时间，结果见表2。

表2.连续灌胃受试物30日对小鼠负重游泳时间的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001

由表2结果可见，中药组合物片剂中剂量0.75g/kgbw可显著延长负重小鼠游泳时间，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；高剂量1.5g/kgbw对小鼠负重游泳时间虽有一定的延长作用，但与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，低剂量0.375g/kgbw对小鼠负重游泳时间则无影响。(为啥高剂量和低剂量没有效果，中剂量有效果呢，为了证明本发明组合物有效果，是不是必须所有剂量都有效果呢)

据判断标准该项试验结果为阳性。

2.2小鼠血清尿素氮实验

2.2.1对血清尿素氮实验小鼠体重的影响

实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品剂量。结果见表3。

表3.连续灌胃受试物30日对血清尿素氮实验小鼠体重的影响(n＝15)

由表3结果可见，与空白对照组比较，连续灌胃中药组合物片剂30日，各剂量组对小鼠体重均无明显影响，与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

2.2.2血清尿素氮含量测定

高尿素模型的建立及标本制备：于末次给受试样品30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后小鼠摘除眼球采全血约0.5mL(不加抗凝剂)，血凝固后，以2000prn/min离心15min，分离血清备用。采用试剂盒法，于UV-5100B紫外可见分光光度计测定血清尿素氮含量。结果见表4。

表4对小鼠血清尿素氮含量的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较▲p＜0.05；▲▲p＜0.01；▲▲▲p＜0.001

与模型对照组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001

由表4结果可见，模型对照组血清尿素氮含量明显升高，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.001)，表明高尿素氮模型建立成功。中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw可明显降低小鼠血清尿素氮含量，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.001)，中剂量0.75g/kgbw和低剂量0.375g/kgbw血清尿素氮含量虽有一定的降低作用，但与模型对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

据判断标准该项试验结果为阳性。

2.3小鼠肝糖原实验

2.3.1对肝糖原实验小鼠体重的影响

实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品剂量。结果见表5。

表5对肝糖原实验小鼠体重的影响(n＝15)

由表5结果可见，与空白对照组比较，连续灌胃中药组合物片剂30日，各剂量组对小鼠体重均无明显影响，与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

2.3.2对肝糖原含量的影响

于末次给予受试样品30min后，脱臼处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后，用滤纸吸干，称取肝脏约100mg，加入约300μl碱溶液，沸水浴煮20min，流水冷却，加双蒸馏水约9.6ml(制成糖原检测液)。采用试剂盒法，于UV-5100B紫外可见分光光度计测定肝糖原含量。结果见表6。

表6对小鼠肝糖原含量的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001

由表6结果可见，与空白对照组比较，中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、低剂量0.375g/kgbw均可明显升高小鼠肝糖原含量，与空白对照组比较有显著性差异(P值分别为P＜0.05、P＜0.001、P＜0.01)。

据判断标准该项试验结果为阳性。

2.4小鼠血乳酸实验

2.4.1对血乳酸实验小鼠体重的影响

实验期间每周称量体重2次，并适时调整给予受试样品剂量。结果见表7。

表7对血乳酸实验小鼠体重的影响(n＝15)

由表7结果可见，与空白对照组比较，连续灌胃中药组合物片剂30日，各剂量组对小鼠体重均无明显影响，与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

2.4.2对血乳酸含量的影响

分别于末次给予受试样品30min后采血一次，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后立即采血一次，游泳后休息20min再采血一次，每次采血均为20μl，再加入40μl破膜液中，立即充分振荡破碎细胞。采用SBA-40E型生物传感分析仪测定血乳酸含量，并计算血乳酸曲线下面积。结果见表8。

表8.对小鼠血乳酸含量的影响(n＝15)

注：与空白对照组比较▲p＜0.05；▲▲p＜0.01；▲▲▲p＜0.001

与模型对照组比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001

由表8结果可见，模型对照组血乳酸曲线下面积明显增加，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.001)，表明高血乳酸模型建立成功。中药组合物片剂高剂量1.5g/kgbw可明显减小小鼠血乳酸曲线下面积，与模型对照组比较有显著差异(P＜0.05)；中剂量0.5g/kgbw、低剂量0.25g/kgbw对小鼠血乳酸曲线下面积虽有一定的减小作用，但与模型对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

据判断标准该项试验结果为阳性。

3、结论：

经口给予小鼠中药组合物片剂，低剂量0.375g/kgbw、中剂量0.75g/kgbw、高剂量1.5g/kgbw(分别相当于成人推荐摄入量的5、10、20倍)，每日1次，连续30天后检测相关指标。实验数据比较各剂量组与空白对照组或模型对照组间差异显著性，实验结果以P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001判断为显著性差异。

结果显示：

3.1、中药组合物片剂中剂量可显著延长负重小鼠游泳时间，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；高剂量对小鼠负重游泳时间虽有一定的延长作用，但与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，低剂量对小鼠负重游泳时间则无影响。该项实验结果为阳性。

3.2、中药组合物片剂高剂量可明显降低小鼠血清尿素氮含量，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.001)，中剂量和低剂量血清尿素氮含量虽有一定的降低作用，但与模型对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。该项实验结果为阳性。

3.3、中药组合物片剂高剂量、中剂量、低剂量均可明显升高小鼠肝糖原含量，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05、P＜0.001、P＜0.01)。该项实验结果为阳性。

3.4、中药组合物片剂高剂量可明显减小小鼠血乳酸曲线下面积，与模型对照组比较有显著差异(P＜0.05)；中剂量、低剂量对小鼠血乳酸曲线下面积虽有一定的减小作用，但与模型对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。该项实验结果为阳性。

综上可见，本发明的中药组合物片剂负重游泳实验结果阳性，血清尿素、肝糖元、血乳酸三项生化指标均为阳性。据《保健食品检验与评价技术规范》对缓解体力疲劳功能动物实验结果判定标准，判定在本实验条件下本发明的中药组合物片剂有缓解体力疲劳功能。

对实施例2和3制备得到的片剂按照实施例4中的方法进行实验，结果显示其同样具有缓解体力疲劳的功能。