1.一种蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
制备醇提物:取蛹虫草,加入体积百分浓度为80-100%的乙醇水溶液作为提取溶剂,加热提取,然后去除固体不溶物,得醇提液,回收所述醇提液中的溶剂,得醇提物,即为蛹虫草提取物。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,所述制备醇提物步骤中,每次按照每克蛹虫草加入10mL-20mL提取溶剂的量加入体积百分浓度为90%-100%的乙醇水溶液,加热提取1次-5次,每次30min-120min。
3.根据权利要求1所述的蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:
制备环己烷溶解物:取所述醇提物,加入环己烷,搅拌使所述醇提物充分溶解,然后分离固体不溶物与溶液,分别得环己烷残渣和环己烷溶液,回收所述环己烷溶液中的溶剂,得环己烷溶解物;
制备乙酸乙酯溶解物:取所述环己烷残渣,加入乙酸乙酯,搅拌使所述环己烷残渣充分溶解,然后分离固体不溶物与溶液,分别得乙酸乙酯残渣和乙酸乙酯溶液,回收所述乙酸乙酯溶液中的溶剂,得乙酸乙酯溶解物;
制备乙酸乙酯萃取物:取所述乙酸乙酯残渣,加入乙醇,搅拌使所述乙酸乙酯残渣充分溶解,然后分离固体不溶物与溶液,得到乙醇溶液,回收所述乙醇溶液中的溶剂,得乙醇溶解物;将所述乙醇溶解物加水溶解,随后再加入乙酸乙酯萃取,取乙酸乙酯层,回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物;
所述环己烷溶解物、乙酸乙酯溶解物和乙酸乙酯萃取物中的至少一种即为所述蛹虫草提取物。
4.根据权利要求3所述的蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,所述制备环己烷溶解物步骤中,每次按照每克醇提物加入50mL-100mL环己烷的量加入环己烷,搅拌使所述醇提物充分溶解2次-6次;
所述制备乙酸乙酯溶解物步骤中,每次按照每克环己烷残渣加入50mL-100mL乙酸乙酯的量加入乙酸乙酯,搅拌使所述环己烷残渣充分溶解2次-6次;
所述制备乙酸乙酯萃取物步骤中,按照每克乙醇溶解物加入10mL-60mL水的量加入水溶解得水溶液,随后每次按照0.5-3倍水溶液体积的量加入乙酸乙酯,萃取2次-5次。
5.根据权利要求3或4所述的蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:
取所述环己烷溶解物,以正相硅胶色谱柱为固定相,以体积百分比为200∶1~10∶1的环己烷-乙酸乙酯混合溶液为流动相进行洗脱,以TLC薄层色谱检测洗脱液,合并相同组份,分离得到组份3、组份4、组份5、组份6、组份7,所述组份3、组份4、组份5、组份6、组份7的极性依次由小至大;
所述TLC薄层色谱检测的条件为:固定相为正相硅胶,展开剂分别为170∶1和80∶1的环己烷-乙酸乙酯混合溶液,显色剂为10%的硫酸水溶液,于日光下检视;
所述组份3、组份4、组份5、乙酸乙酯溶解物和乙酸乙酯萃取物中的至少一种即为所述蛹虫草提取物。
6.根据权利要求5所述的蛹虫草提取物的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:
取所述组份4,以反相C18硅胶色谱柱进行分离纯化,具体条件如下:
固定相:C18反相硅胶柱,柱直径为7.8mm,柱长度为100mm;
流动相:甲醇-水梯度洗脱,具体为:0至15min,水相体积百分数由80%降至50%,15至30min,水相体积百分数由50%降至15%,30至90min,水相体积百分数由15%降至0%;
流速:3mL/min;
检测波长:190nm和/或254nm;
收集第66min和第69min色谱峰的洗脱液,回收溶剂,分别得到单体化合物1和单体化合物2;
所述单体化合物1的结构如下:
所述单体化合物2的结构如下:
所述组份3、单体化合物1、单体化合物2、组份5、乙酸乙酯溶解物和乙酸乙酯萃取物中的至少一种即为所述蛹虫草提取物。
7.权利要求1-6任一项所述的蛹虫草提取物的制备方法制备得到的蛹虫草提取物。
8.权利要求6所述的单体化合物1和/或单体化合物2。
9.权利要求7所述的蛹虫草提取物、权利要求8所述的单体化合物1和单体化合物2中的至少一种在作为抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B的抑制剂和/或作为胰岛素增敏剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述蛋白酪氨酸磷酸酶1B的抑制剂,和/或所述胰岛素增敏剂在制备用于预防和治疗糖尿病、肥胖症及其并发症的保健食品或药物中应用。