本发明涉及中药组合物领域，具体涉及一种防治链球菌病的组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
罗非鱼是世界范围内广泛引种养殖的鱼类，目前，全世界有85个国家和地区养殖罗非鱼。我国大陆罗非鱼的养殖经过长达半个世纪的发展，产量的增长速度在淡水鱼中最高。近十年来，产量以每年14.75％左右的速度递增，稳居世界首位。广东罗非鱼年产量约60万吨，约占全国总产量的50％，广州市有4万多亩淡水鱼养殖，其中罗非鱼养殖占70～80％。
罗非鱼的引种和养殖给人类带来了较大利益，但是近年来爆发的链球菌病给整个养殖业的健康发展造成严重的威胁，经济损失严重，甚至不少养殖场破产倒闭，已引起全社会关注。每年4～10月期间，挥之不去的链球菌重创了整个罗非鱼养殖行业；而11月份后，又开始出现寄生虫和细菌感染，同时伴随出现赤皮、烂腮等症状。受病害的影响，罗非鱼的价格起伏不定，渔民收成不尽人意。
目前市场上的鱼药有南方、北方的鱼虾药五百多种，包括消毒剂、环境改良剂、抗微生物药品、杀虫剂、驱虫剂等，但没有一种药物可彻底根治鱼病。渔民甚至违规使用抗生素，也没达到预期的效果。而长期滥用抗生素，引发一系列水域生态环境和水产食品安全问题，随着抗药性的产生，鱼病不断恶性循环。农业部研究发现中草药在水产行业有相应的作用与前景，提倡大量发掘能对抗水产病害的中草药。因此，为了使水产养殖业健康、可持续地发展，研究开发出一种毒副作用小、无残留、病原体不易产生耐药性的中草药成为当前抗罗非鱼感染性疾病药物研究刻不容缓的任务。
技术实现要素：
有鉴于此，有必要针对上述的问题，提供一种防治链球菌病的组合物及其制备方法和应用。
本发明上述目的通过以下技术予以实现：
一种防治链球菌病的组合物，其有效成分包含下述重量份的下述组分：黄药子200～300重量份、大黄200～300重量份和x200～600重量份，其中x为黄芪、博落回花、蛇莓、乌桕中的一种或多种。
优选地，所述组合物还包含辅料100～700重量份，辅料为鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉、糊精、葡萄糖、矿物质中的一种或多种。
优选地，所述组合物包含下述重量份的下述组分：黄药子240～260重量份、大黄240～260重量份、x400～700重量份和辅料200～500重量份。
本发明所述组合物的制备方法，包括如下步骤：
s1、将黄药子、大黄混合，以8～18倍药材原料重量的弱酸性水提取1～3次，每次1～2小时，滤过；合并滤液，50～80℃减压浓缩成第一稠膏，，加入生石灰，调ph至8.5～9.5，静置过夜，取上清液滤过，50～80℃减压浓缩成第二稠膏；快速搅拌下向第二稠膏内加入乙醇使其体积含量为60～80％，静置过夜，取上清液滤过，滤液在50～80℃减压回收乙醇、浓缩成第三稠膏；
s2、将x混合后以8～10倍药材原料重量的85～95％乙醇、50～70％乙醇各提取1～2次，每次1～2小时，滤过；合并滤液，50～80℃减压回收乙醇、浓缩成第四稠膏；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；
s3、将稠膏混合物与辅料配制成防治链球菌病的组合物。
优选地，步骤s3中稠膏混合物与辅料采用如下之一方法配制成防治链球菌病的组合物：
方法a、取水加热至80～90℃，加入葡萄糖、矿物质，快速搅拌至完全溶解，加入稠膏混合物，45～60℃保温搅匀，得到防治链球菌病组合物液体剂；
方法b：取鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉混匀，加入稠膏混合物，搅匀制粒烘干得到防治链球菌病组合物颗粒剂；
方法c：取水加热至80～90℃，加入糊精、葡萄糖、矿物质，快速搅拌至完全溶解，加入稠膏混合物，45～60℃保温搅匀，得到防治链球菌病组合物膏剂。
优选地，方法a和方法c中水的用量为稠膏混合物重量的15～30％。
优选地，方法a和方法c中在50℃保温搅匀。
优选地，方法a、方法b和方法c中添加防腐剂搅拌均匀。防腐剂用量优选为组合物重量的0.01～0.05％，防腐剂可以抑制微生物生长，防止组合物腐败变质，延长组合物的保质期。
优选地，稠膏混合物与总药材原料的重量比为1.2～1.6:5。
优选地，稠膏混合物与总药材原料的重量比为1.5:5。
更优选地，第一稠膏与其药材原料的重量比为1～2:1，第二稠膏与其药材原料的重量比为0.5～1:2，第三稠膏与其药材原料的重量比为0.5～1:3，第四稠膏与其药材原料的重量比为0.5～1:4。
优选地，弱酸性的水的ph值为6.0～6.5。优选用盐酸调节水的ph至弱酸性。
上述组合物在制备用于防治球菌病的药物中的应用。
优选地，所述链球菌病为罗非鱼链球菌病。
本发明处方配伍既有中医的清热解毒、驱虫之功，又有现代医学的抗菌抗病毒、杀虫、调节免疫功能之效，又有现代医学的抗菌抗病毒、杀虫、调节免疫功能之效，是防治罗非鱼感染性疾病的良方。其中黄药子味苦、性寒，消痰散结、清热解毒；大黄味苦、性寒，泻火解毒；博落回味辛苦、性温，解毒、杀虫；黄芪性甘，微温，能增强机体免疫功能，具有保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用；蛇莓性微寒，味甘，清热解毒，凉血消肿，可增强免疫功能，具有抗菌作用；乌桕性微温，味苦，解毒，杀虫。大黄中蒽醌类化合物既可以抑制细菌及真菌，又可以抗病毒；佐以黄芪抗菌、提高机体免疫力功能。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明组合物采用黄药子、大黄等中草药作为有效成分，对链球菌病的防治效果好，还具有抗原虫、增强机体免疫力的作用。本发明组合物毒副作用小，无残留，病原体不易产生耐药性。本发明组合物的原料来源广泛，成本低，可以制成多种剂型，应用更灵活。
本发明的制备方法是发明人根据不同组分的特点而设计的，使各组分的有效成分被提取出来。黄药子、大黄先用水提再用醇提，充分提取药物中溶于水和醇的有效成分，使用生石灰不仅可以调节稠膏的ph值，使杂质在碱性环境中沉淀，ca+还可以促进杂质絮凝沉淀。本发明中x组分使用不同浓度的乙醇进行醇提，85～95％乙醇可以提取药材中的非极性、弱极性的有效成分，50～70％乙醇可以提取药物中的中极性的有效成分，不同浓度乙醇分别提取，保证x组分中的有效成分被完全提取出来。
具体实施方式
为了更好的说明本发明，下面结合具体实施方式做进一步说明。本发明中所用试剂或仪器均可由市场购得，使用的检测方法等都是本领域所熟知的，在此不再赘述。本发明中水提、醇提等操作及条件，除特别说明外，采用现有技术。
实施例1
一种防治链球菌病的组合物，其是由黄药子、博落回花、黄芪、蛇莓、大黄、葡萄糖、矿物质按下述重量份配比制备而成的药剂：
以下详细说明上述组合物的制备方法：
s1、将黄药子、大黄混合，以12倍药材原料重量的ph6.5的弱酸性水提取2次，每次1.5小时，滤过；合并滤液，65℃减压浓缩成第一稠膏，第一稠膏与药材原料的重量比为1:1；向第一稠膏内加入生石灰，调ph至9.0，静置过夜，取上清液滤过，65℃减压浓缩成第二稠膏，第二稠膏与药材原料的重量比为0.7:1；快速搅拌下向第二稠膏内加入乙醇，使乙醇含量为70％，静置过夜，取上清液滤过，滤液在65℃减压回收乙醇、浓缩成第三稠膏，第三稠膏与药材原料的重量比为1:3；
s2、将黄芪、蛇莓、博落回花混合后以10倍量90％乙醇、60％乙醇各提取1次，每次1.5小时，滤过；合并滤液，65℃减压回收乙醇、浓缩成第四稠膏，第四稠膏与药材原料的重量比为1:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；
s3、取稠膏混合物重量20％的水加热至80～90℃，加入葡萄糖、矿物质，快速搅拌至完全溶解，再加入稠膏混合物，50℃保温搅匀，加入防腐剂，防腐剂用量为组合物重量的0.05％，搅匀得到混合药液放冷后置于灌装机中灌装、封口，即得防治链球菌病组合物液体剂。
实施例2
一种防治链球菌病的组合物，其是由黄药子、黄芪、大黄、乌桕、鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉按下述重量份配比制备而成的药剂：
以下详细说明上述组合物的制备方法：
s1、将黄药子、大黄混合，以8倍药材原料重量的ph6.0的弱酸性水提取2次，每次2小时，滤过；合并滤液，50℃减压浓缩成第一稠膏，第一稠膏与药材原料的重量比为0.8:1；向第一稠膏内加入生石灰，调ph至9.5，静置过夜，取上清液滤过，50℃减压浓缩成第二稠膏，第二稠膏与药材原料的重量比为0.5:2；快速搅拌下向第二稠膏内加入乙醇，使乙醇含量为80％，静置过夜，取上清液滤过，滤液在50℃减压回收乙醇、浓缩成第三稠膏，第三稠膏与药材原料的重量比为0.75:3；
s2、将黄芪、乌桕混合后以8～10倍量85％乙醇、50％乙醇各提取1次，每次2小时，滤过；合并滤液，50℃减压回收乙醇、浓缩成第四稠膏，第四稠膏与药材原料的重量比为1:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；
s3、取鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉混匀，加入稠膏混合物搅匀，加入防腐剂，防腐剂用量为组合物重量的0.01％，搅匀，制成颗粒，70℃烘干，分装，封口，即得防治链球菌病组合物颗粒剂。
实施例3
一种防治链球菌病的组合物，其是由黄药子、博落回花、蛇莓、大黄、糊精、葡萄糖、矿物质按下述重量份配比制备而成的药剂：
以下详细说明上述组合物的制备方法：
s1、将黄药子、大黄混合，以18倍药材原料重量的ph6.0的弱酸性水提取2次，每次1小时，滤过；合并滤液，80℃减压浓缩成第一稠膏，第一稠膏与药材原料的重量比为1.2:1；向第一稠膏内加入生石灰，调ph至8.5，静置过夜，取上清液滤过，80℃减压浓缩成第二稠膏，第二稠膏与药材原料的重量比为1:2；快速搅拌下向第二稠膏加入乙醇，使乙醇含量为60％，静置过夜，取上清液滤过，滤液在80℃减压回收乙醇、浓缩成第三稠膏，第三稠膏与药材原料的重量比为0.5:3；
s2、将博落回花、蛇莓混合后以10倍量95％乙醇、70％乙醇各提取1次，每次1小时，滤过；合并滤液，80℃减压回收乙醇、浓缩成第四稠膏，第四稠膏与药材原料的重量比为0.75:4；合并第三稠膏和第四稠膏得到稠膏混合物；
s3、取稠膏混合物重量20％的水加热至80～90℃，加入糊精、葡萄糖、矿物质，快速搅拌至完全溶解，加入稠膏混合物50℃保温搅匀，加入防腐剂，防腐剂用量为组合物重量的0.03％，搅匀，放冷置灌装机中，灌装，封口，即得防治链球菌病组合物膏剂。
实施例4
为了验证本发明防治链球菌病的组合物的效果，发明人对不同地域的不同罗非鱼养殖场进行了实验。
(1)珠海罗非鱼养殖场
在2016年7月15日～30日，珠海某罗非鱼养殖场有5个塘罗非鱼同程度链球菌发病。对其中3个塘的罗非鱼常规用药作为对照组，另外2个塘的罗非鱼用本发明防治链球菌病的组合物进行治疗作为实验组。治疗期间，每餐投料量减半，2餐/天，早上、下午各一餐。按10公斤饲料拌2公斤常规用药或本发明防治链球菌病的组合物，连用15天。对照组每日死鱼达80多条，多者过100条；实验组用药第1天死鱼70多条，第2天死鱼18条，第3天死鱼8条，第4天开始，偶见1条死鱼，链球菌病情得到很好控制。
(2)湛江罗非鱼养殖场
在2016年6月10日～20日，湛江某罗非鱼养殖场罗非鱼养殖塘不同程度链球菌发病。未发病的2个塘(每天偶见2～5条死鱼)用本发明防治链球菌病的组合物进行治疗作为预防组。发病较严重2个塘(每天死鱼数达200条以上)用本发明防治链球菌病的组合物进行治疗作为实验组。发病程度较轻的2个塘(每天死鱼数100条左右)常规用药作为对照组。治疗期间，每餐投料量减半，2餐/天，早上、下午各一餐。按10公斤饲料拌2公斤常规用药或本发明防治链球菌病的组合物，连用11天。治疗期间，对照组每日死鱼达90多条，多者过100条；实验组用药第1天死鱼80多条，第2天死鱼28条，第3天死鱼7条，第4天开始，偶见1条死鱼，链球菌病情得到很好控制；预防组自用药第3天起，无死鱼现象。本发明防治链球菌病的组合物不仅对链球菌病具有良好的治疗效果，还具有良好的防治效果。
(3)广东省罗非鱼良种场
在2016年9月初广东省罗非鱼良种场16号塘和14号塘每天死鱼分别有100多斤和50多斤。死鱼均有凸眼、出血等症状，镜检无寄生虫，结合中山大学菌检结果，判断为链球菌病。2016年9月6日开始每餐投料量减半，2餐/天，早上、下午各一餐。16号塘按10公斤饲料拌2公斤种防治鱼病组合物，连用3天。14号塘按10公斤饲料拌3公斤种防治鱼病组合物，连用2天。
16号塘给药第3天，死鱼明显减少，减至30斤；停药后，每天死鱼逐渐减少，第5天降至2～3斤。14号塘给药第2天，死鱼已有减少，第3天减至30斤；停药后，每天死鱼逐渐减少，第3天降至1斤左右。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。