抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和铂类药物联合在制备治疗非小细胞肺癌的药物中的用途。
背景技术：
：在世界范围内，肺癌已成为癌症死亡的主要原因。在中国，不论是癌症发生率还是死亡率，肺癌都占据了首位。尽管在过去20年内推出了更新的几代细胞毒性药物和靶向治疗，但是晚期肺癌患者、特别是没有已知的驱动突变基因的患者生存预后仍很差，晚期或转移性肺癌仍是一种有大量医疗需求未被满足的致死性疾病。非小细胞肺癌(nsclc)约占所有肺癌的85％，约75％的nsclc患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。对于晚期或转移性nsclc患者选择合适的系统性治疗方式仍在临床上存在很大的需求。nsclc又可分为鳞状细胞癌与非鳞状细胞癌。非鳞状细胞癌包括腺癌、大细胞癌及其他亚型细胞癌。。非鳞状细胞癌患者再按照有无驱动突变基因(egfr突变或alk基因重排)进一步分类。对于egfr/alk基因野生型的晚期nsclc患者，通常采用以铂类药物为主的含铂双药系统性治疗方案。已获批用于治疗晚期/转移性非小细胞肺癌的药物包括铂类药物(例如顺铂、卡铂)、紫杉烷类药物(例如紫杉醇、白蛋白结合的紫杉醇以及多西他赛)、长春瑞滨、长春碱、依托泊苷、培美曲塞、吉西他滨等。使用这些药物的组合可获得30％至40％的1年生存率，优于单药。pd-1抑制剂是当前备受瞩目的新一类肿瘤免疫治疗药物，目前有多家跨国制药公司在研发针对pd-1/pd-l1信号通路的单克隆抗体，本发明提供的抗pd-1抗体，wo2017054646a公开了该抗体的序列和制备方法，该抗pd-1抗体已处于临床ⅲ期，安全性良好，已报到的临床研究结果已经显示出其具有一定的抗肿瘤作用([j].journalofclinicaloncology35(2017):e15572-e15572)。目前已有pd-1联合化疗药物用于治疗非小细胞肺癌的临床研究正在开展中，初步证实临床获益及安全性，但有待大规模临床试验进一步确证，并进一步优化联合治疗方案以期进一步改善临床获益及安全性，因此治疗领域仍需要进一步探索合适的抗pd-1抗体与化疗药物联合治疗非小细胞肺癌。技术实现要素：本发明提供一种抗pd-1抗体联合培美曲塞加铂类药物在制备治疗非小细胞肺癌的药物中的用途，其中所述pd-1抗体或其抗原结合片段的轻链可变区包含分别如seqidno:4、seqidno:5和seqidno:6所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；重链可变区包含分别如seqidno:1、seqidno:2和seqidno:3所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；其中所述铂类药物选自：卡铂、顺铂、奥沙利铂、奈达铂(nedaplatin)、乐铂(lobaplatin)、沙铂(satraplatin)、环铂(cycloplatin)、米铂(miboplatin)、enloplatin、iproplatin、dicycloplatin，优选卡铂和顺铂。本发明提供一种抗pd-1抗体联合培美曲塞加卡铂在制备治疗非小细胞肺癌的药物中的用途，其中所述pd-1抗体或其抗原结合片段的轻链可变区包含分别如seqidno:4、seqidno:5和seqidno:6所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；重链可变区包含分别如seqidno:1、seqidno:2和seqidno:3所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3。本发明还提供一种抗pd-1抗体在制备治疗非小细胞肺癌的药物中的用途，其中所述pd-1抗体或其抗原结合片段的轻链可变区包含分别如seqidno:4、seqidno:5和seqidno:6所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；重链可变区包含分别如seqidno:1、seqidno:2和seqidno:3所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3。其中，前面所述的各cdr序列如下表所示：名称序列编号hcdr1symmsseqidno：1hcdr2tisgggantyypdsvkgseqidno：2hcdr3qlyyfdyseqidno：3lcdr1lasqtigtwltseqidno：4lcdr2tatsladseqidno：5lcdr3qqvysipwtseqidno：6优选的，所述的抗pd-1抗体或其抗原结合片段为抗pd-1人源化抗体。优选的，人源化抗体轻链可变区序列为如seqidno:10所示的序列或其变体；所述的变体优选在轻链可变区有0-10的氨基酸变化；更优选为a43s的氨基酸变化。所述人源化抗体重链可变区序列为如seqidno:9所示的序列或其变体；所述变体优选在重链可变区有0-10的氨基酸变化；更优选为g44r的氨基酸变化。前述的人源化抗体重、轻链的可变区序列如下所示：重链可变区evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfssymmswvrqapgkglewvatisgggantyypdsvkgrftisrdnaknslylqmnslraedtavyycarqlyyfdywgqgttvtvssseqidno：9轻链可变区diqmtqspsslsasvgdrvtitclasqtigtwltwyqqkpgkapklliytatsladgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqvysipwtfgggtkveikseqidno：10优选的，人源化抗体轻链序列为如seqidno:8所示的序列或其变体；所述的变体优选在轻链可变区有0-10的氨基酸变化；更优选为a43s的氨基酸变化。所述人源化抗体重链序列为如seqidno:7所示的序列或其变体；所述变体优选在重链可变区有0-10的氨基酸变化；更优选为g44r的氨基酸变化。在本发明一个优选的实施方案中，人源化抗体轻链序列为如seqidno:8所示的序列，重链序列为如seqidno:7所示的序列。前述的人源化抗体重、轻链的序列如下所示：重链evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfssymmswvrqapgkglewvatisgggantyypdsvkgrftisrdnaknslylqmnslraedtavyycarqlyyfdywgqgttvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgkseqidno：7轻链diqmtqspsslsasvgdrvtitclasqtigtwltwyqqkpgkapklliytatsladgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqvysipwtfgggtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgecseqidno：8在本发明一个优选的实施方案中，所述非小细胞肺癌为晚期或转移性非鳞癌非小细胞肺癌。在本发明一个优选的实施方案中，所述非小细胞肺癌选自egfr/alk基因野生型晚期或转移性非鳞癌非小细胞肺癌。在本发明一个优选的实施方案中，所述的抗pd-1抗体或其抗原结合片段剂量选自1-10mg/kg，优选自1mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、10mg/kg，最优选3mg/kg。在本发明一个优选的实施方案中，所述的抗pd-1抗体或其抗原结合片段剂量选自50-600mg，优选自60mg、100mg、200mg、400mg、600mg，最优选200mg。在本发明一个优选的实施方案中，所述培美曲塞剂量选自200-700mg/m2，优选自200mg/m2、300mg/m2、400mg/m2、500mg/m2、600mg/m2、700mg/m2，最优选500mg/m2。在本发明一个优选的实施方案中，所述卡铂给药剂量以曲线下面积(auc)计算，选自1-10mg/ml/min，优选自3mg/ml/min、4mg/ml/min、5mg/ml/min、6mg/ml/min、7mg/ml/min、8mg/ml/min，最优选5mg/ml/min。在本发明一个优选的实施方案中，所述卡铂剂量选自200-400mg/m2，每三至四周给药一次，优选自200mg/m2、300mg/m2、400mg/m2。在本发明一个优选的实施方案中，所述卡铂剂量选自50mg/m2，每一日给药一次。在本发明中，其中所述的抗pd-1抗体或其抗原结合片段的给药频次为一周一次、二周一次、三周一次、一月一次，优选三周一次。在本发明中，其中所述培美曲塞的给药频次为一周一次、二周一次、三周一次、一月一次，优选三周一次。在本发明中，其中所述卡铂的给药频次为一周一次、二周一次、三周一次、一月一次，优选三周一次。在本发明中，抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂联合用于非小细胞肺癌的治疗，三者的给药次序为先给予抗pd-1抗体，再给与培美曲塞，最后给予卡铂。在本发明的一个优选的实施方案中，抗pd-1抗体或其抗原结合片段的给药频次为三周一次、培美曲塞的给药频次为三周一次、卡铂的给药频次为三周一次，联合给药顺序：每个周期第1天按顺序给予药物治疗，先给予抗pd-1抗体静脉滴注，再给予培美曲塞静脉滴注，再给予卡铂静脉滴注。在本发明中，抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂联合用于非小细胞肺癌的治疗，三者可在同一个给药周期给药，也可以在不同的给药周期给药。所述治疗周期可为1周、2周、3周(21天)、3-4周(21-28天)、4周(28天)，优选治疗周期为3周。在本发明中，使用抗pd-1抗体、培美曲塞和卡铂联合治疗持续4-6周期后，可以选择使用抗pd-1抗体和培美曲塞维持治疗。在本发明中，抗pd-1抗体或其抗原结合片段还可以和其他基于铂类药物的含铂双药化疗方案联合使用。例如pd-1抗体+培美曲塞+顺铂、pd-1抗体+紫杉醇+卡铂、pd-1抗体+紫杉醇+顺铂、pd-1抗体+吉西他滨+顺铂、pd-1抗体+多西他赛+顺铂、pd-1+长春瑞滨+顺铂。在本发明优选的实施方案中，所述的抗pd-1抗体或其抗原结合片段以注射的方式给药，例如皮下或静脉注射，注射前需将抗pd-1抗体或其抗原结合片段配制成可注射的形式。特别优选的抗pd-1抗体或其抗原结合片段的可注射形式是注射液或冻干粉针，其包含抗pd-1抗体或其抗原结合片段、缓冲剂、稳定剂，任选地还含有表面活性剂。缓冲剂可选自醋酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、以及磷酸盐中的一种或几种。稳定剂可选自糖或氨基酸，优选二糖，例如蔗糖、乳糖、海藻糖、麦芽糖。表面活性剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯，优选所述聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯为聚山梨酯20、40、60或80，最优选聚山梨酯20。最为优选的抗pd-1抗体或其抗原结合片段的可注射形式包含抗pd-1抗体或其抗原结合片段、醋酸盐缓冲剂、海藻糖和聚山梨酯20。在本发明中，所谓“联合”是一种给药方式，其包括三种药物先后，或同时给药的各种情况，此处所谓“同时”是指在同一给药周期给予抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂，例如在1周内、2周内、3周内、4周内给予三种药物。所谓“先后”给药，则包括在不同给药周期内分别给予抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂。这些给药方式，均属于本发明所述的联合给药。本发明所述联合的给药途径选自经口给药、胃肠外给药、经皮给药，所述胃肠外给药包括但不限于静脉注射、皮下注射、肌肉注射。在本发明还提供了一种治疗的办法，包括向患者施用前述的有效量的抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂。本发明还提供了一种药物套组，或者一种药物包装盒，其中含有前述的有效量的抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂。本发明还提供了一种药物组合物，包含前述的有效量的抗pd-1抗体或其抗原结合片段、培美曲塞和卡铂，以及一种或多种可药用的赋型剂、稀释剂或载体。发明详述一、术语为了更容易理解本发明，以下具体定义了某些技术和科学术语。除显而易见在本文件中的它处另有明确定义，否则本文使用的所有其它技术和科学术语都具有本发明所属领域的一般技术人员通常理解的含义。术语“人源化抗体(humanizedantibody)”，也称为cdr移植抗体(cdr-graftedantibody)，是指将小鼠的cdr序列移植到人的抗体可变区框架，即不同类型的人种系抗体构架序列中产生的抗体。可以克服嵌合抗体由于携带大量小鼠蛋白成分，从而诱导的强烈的抗体可变抗体反应。此类构架序列可以从包括种系抗体基因序列的公共dna数据库或公开的参考文献获得。如人重链和轻链可变区基因的种系dna序列可以在“vbase”人种系序列数据库(在因特网www.mrccpe.com.ac.uk/vbase可获得)，以及在kabat，e.a.等人，1991sequencesofproteinsofimmunologicalinterest，第5版中找到。在本发明一个优选的实施方案中，所述的pd-1人源化抗体小鼠的cdr序列选自seqidno:1，2，3，4，5，6。术语“抗原结合片段”，指具有抗原结合活性的fab片段，fab‘片段，f(ab’)2片段，以及与人pd-1结合的fv片段sfv片段；包含本发明所述抗体的选自seqidno:1至seqidno:6中的一个或多个cdr区。fv片段含有抗体重链可变区和轻链可变区，但没有恒定区，并具有全部抗原结合位点的最小抗体片段。一般地，fv抗体还包含在vh和vl结构域之间的多肽接头，且能够形成抗原结合所需的结构。也可以用不同的连接物将两个抗体可变区连接成一条多肽链，称为单链抗体(singlechainantibody)或单链fv(sfv)。本发明的术语“与pd-1结合”，指能与人pd-1相互作用。本发明的术语“抗原结合位点”指抗原上不连续的，由本发明抗体或抗原结合片段识别的三维空间位点。具体实施方式以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制本发明的范围。实施例11、受试抗体和化合物抗pd-1抗体其重、轻链的序列如本发明中seqidno：7和seqidno：8。200mg/支，配成20mg/ml备用。培美曲塞购自江苏豪森药业集团有限公司，卡铂购自齐鲁制药有限公司。2、入组受试者标准(1)组织学或细胞学诊断为晚期或转移性非鳞癌非小细胞肺癌(nsclc)。(2)未接受过针对晚期/转移性nsclc的全身系统性药物治疗。(3)egfr突变和alk异位为阴性。(4)ecog评分0-1分。3、给药方法抗pd-1抗体：每三周为一个给药周期，每周期第一天给予患者200mg抗pd-1抗体，静脉滴注，时间约20-60分钟。允许延迟给药，延迟时间最长12周，自上一次给药时间计算，否则终止治疗。注射用培美曲塞：每三周为一个给药周期，每周期第一天给予患者500mg/m2培美曲塞，静脉滴注，时间在10分钟以上。允许延迟给药，延迟时间最长9周，自上一次给药时间计算，否则终止治疗。注射用卡铂：每三周为一个给药周期，每周期第一天给予患者auc5卡铂，静脉滴注，时间在30分钟以上。允许延迟给药，延迟时间最长9周，自上一次给药时间计算，否则终止治疗。联合给药顺序：每个周期第1天按顺序给予药物治疗，先给予抗pd-1抗体静脉滴注，间隔至少30min后，再给予培美曲塞静脉滴注，间隔至少30min后，再给予卡铂静脉滴注。给药时间窗可±3天，但每次给药前72h内，受试者必须完成包括各项临床需要的检查以评估继续用药的耐受性。试验组：抗pd-1抗体+培美曲塞+卡铂联合治疗可持续4-6个周期，之后可选择进行抗pd-1抗体+培美曲塞维持治疗。对照组：培美曲塞+卡铂联合治疗可持续4-6个周期，之后可选择进行培美曲塞单药维持治疗。4、临床试验结果截止2017年11月14日，共入组121例患者，其中66例患者进行过至少一次治疗后肿瘤评估。其中试验组14例患者病情部分缓解，21例患者疾病稳定，2例患者疾病发生进展。疾病控制率(dcr)为94.6％，客观缓解率(orr)为37.8％。对照组10例患者病情部分缓解，21例患者疾病稳定，5例患者疾病发生进展。疾病控制率(dcr)为86.1％，客观缓解率(orr)为27.8％。初步分析客观缓解率结果表明，抗pd-1抗体联合含铂双药化疗方案相比于含铂双药化疗方案显示出良好的抗肿瘤疗效。随着入组患者数据的增加，试验组的orr有较大提升。试验组和对照组两组不良事件发生率基本相当。序列表<110>江苏恒瑞医药股份有限公司苏州盛迪亚生物医药有限公司<120>抗pd-1抗体、培美曲塞和铂类药物联合治疗非小细胞肺癌的用途<160>10<170>siposequencelisting1.0<210>1<211>5<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>1sertyrmetmetser15<210>2<211>17<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>2thrileserglyglyglyalaasnthrtyrtyrproaspservallys151015gly<210>3<211>7<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>3glnleutyrtyrpheasptyr15<210>4<211>11<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>4leualaserglnthrileglythrtrpleuthr1510<210>5<211>7<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>5thralathrserleualaasp15<210>6<211>9<212>prt<213>鼠源(musmusculus)<400>6glnglnvaltyrserileprotrpthr15<210>7<211>443<212>prt<213>人工序列(artificialsequence)<220><221>peptide<222>(1)..(443)<223>重链序列<400>7gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly151015serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr202530metmetsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval354045alathrileserglyglyglyalaasnthrtyrtyrproaspserval505560lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr65707580leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys859095alaargglnleutyrtyrpheasptyrtrpglyglnglythrthrval100105110thrvalserseralaserthrlysglyproservalpheproleuala115120125procysserargserthrsergluserthralaalaleuglycysleu130135140vallysasptyrpheprogluprovalthrvalsertrpasnsergly145150155160alaleuthrserglyvalhisthrpheproalavalleuglnserser165170175glyleutyrserleuserservalvalthrvalproserserserleu180185190glythrlysthrtyrthrcysasnvalasphislysproserasnthr195200205lysvalasplysargvalgluserlystyrglyproprocyspropro210215220cysproalaproglupheleuglyglyproservalpheleuphepro225230235240prolysprolysaspthrleumetileserargthrprogluvalthr245250255cysvalvalvalaspvalserglngluaspprogluvalglnpheasn260265270trptyrvalaspglyvalgluvalhisasnalalysthrlysproarg275280285glugluglnpheasnserthrtyrargvalvalservalleuthrval290295300leuhisglnasptrpleuasnglylysglutyrlyscyslysvalser305310315320asnlysglyleuproserserileglulysthrileserlysalalys325330335glyglnproarggluproglnvaltyrthrleuproproserglnglu340345350glumetthrlysasnglnvalserleuthrcysleuvallysglyphe355360365tyrproseraspilealavalglutrpgluserasnglyglnproglu370375380asnasntyrlysthrthrproprovalleuaspseraspglyserphe385390395400pheleutyrserargleuthrvalasplysserargtrpglnglugly405410415asnvalphesercysservalmethisglualaleuhisasnhistyr420425430thrglnlysserleuserleuserleuglylys435440<210>8<211>214<212>prt<213>人工序列(artificialsequence)<220><221>peptide<222>(1)..(214)<223>轻链序列<400>8aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly151015aspargvalthrilethrcysleualaserglnthrileglythrtrp202530leuthrtrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile354045tyrthralathrserleualaaspglyvalproserargphesergly505560serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro65707580gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnvaltyrserileprotrp859095thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargthrvalalaala100105110proservalpheilepheproproseraspgluglnleulyssergly115120125thralaservalvalcysleuleuasnasnphetyrproarggluala130135140lysvalglntrplysvalaspasnalaleuglnserglyasnsergln145150155160gluservalthrgluglnaspserlysaspserthrtyrserleuser165170175serthrleu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