专利名称：低分子量肝素预防和治疗中枢神经系统创伤的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及低分子量肝素预防和治疗中枢神经系统创伤，特别是脊柱、颅或颅-脊柱创伤的应用。
本发明还涉及低分子量肝素在制备用于预防和治疗中枢神经系统创伤，特别是脊柱、颅或颅-脊柱创伤的药物方面的应用。
标准肝素是平均分子量为12000～15000Dalton，分离自牛、羊和猪的肠粘膜的磺化多糖。在临床上肝素用来预防和治疗血栓栓塞性疾病，但有时会引起出血。
十余年来，肝素逐渐被低分子量肝素所替代，它不再呈现或者仅在很低程度上呈现出血的缺点，而且每天只须注射一次，不象标准肝素那样一天注射2～3次。这种低分子量肝素具体是由肝素分级、控制解聚或化学合成制备的。其抗Xa活性/抗IIa活性之比大于2。
现已发现，低分子量肝素降低中枢神经系统创伤，特别是脊柱、颅或颅-脊柱创伤的严重程度。
中枢神经系统创伤(SNC创伤或神经创伤)涉及脑创伤(大脑创伤)和脊髓创伤(髓创伤)。这些都是中枢神经系统受冲击的结果(汽车、摩托车车祸、滑雪、游泳事故等)，经常但不是总是伴随着骨折。这些创伤的后果是神经系统的疾病，比如癫痫、意识衰退、运动障碍、记忆缺失、攻击性和心理感情缺乏。
按照本发明，优选使用平均分子量为1000～10000Dalton，特别是1500～6000Dalton，更特别是4000～5000Dalton的低分子量肝素。
它们可以由肝素经过不同的方法来制备借助于溶剂分级(FR2440376、US4692435)，在阴离子树脂上分级(FR2453875)，凝胶过滤(Barrowcliffe，Thromb.Res.12，27-36(1977))，亲和力色谱(US4401758)，
借助于化学试剂控制解聚亚硝酸(EP-14184、EP-37319、EP-76279、EP-623629、FR-2503714、US-4804652、WO-813276)、由肝素酯进行β-消除反应(EP-40144、US-5389618)、高碘酸盐(EP-287477)、硼氢化钠(EP-347588、EP-380943)、抗坏血酸(US-4533549)、过氧化氢(US-4629699、US-4791195)、由肝素季铵盐得到的氢氧化季铵(US-4981955)、碱金属氢氧化物(EP-380943、EP-347588)或者借助酶(EP64452、US-4396762、EP-244235、EP-244236、US-4826827、US-3766167)、借助于辐射(EP-269981)。
某些也可以通过化学合成制备(US-4801583、US-4818816、EP-165134、EP-84999、FR-2535306)。
在这些低分子量肝素当中，更具体可以举出由Rhone-Poulenc Rorer公司商品化的依诺肝素(DCI)、Sanofi公司商品化的那屈肝素(DCI)、Opocrin-Alfa公司商品化的帕肝素(DCI)、Knoll公司商品化的瑞维肝素(DCI)、Kabi Pharmacia公司商品化的达肝素(DCI)、Novo Nordisk公司商品化的亭扎肝素(DCI)、Organon公司商品化的Danaparine(DCI)、Wyeth Ayerst公司商品化的阿地肝素(DCI)、Sandoz公司商品化的舍托肝素(DCI)和正在研究中的产品，如Sanofi-Choay公司的CY-222[见Tromb.Haemostasis，58(1)，553(1987)]、Sanofi-Organon公司的SR90107/ORG31540[见Thrombosis and Haemostasis，74，1468-1473(1995)]。
低分子量肝素优选由在其一端具有2-O-磺基-4-enopyrano-suronique酸的低聚糖构成。
低分子量肝素特别优选借助碱如碳酸钠通过解聚肝素的酯得到。
低分子量肝素对中枢神经系统创伤的影响通过如下技术在诱发创伤的大鼠体内得到印证用N2O/O2(70/30)混合物中的卤代烷(1.5％)麻醉体重280-300g的Sprague-Dawley雄鼠(查尔斯河，法国)，将其放在趋触性固定器上(其中13只为对照组，13只作为治疗组)。切开头盖骨，借助带齿钻在靠近右顶部皮层处打一个洞(坐标在耳间线之上6mm前3.5mm处)。将一根内径3mm的聚乙烯管放在用牙科胶固定在头盖骨洞上的硬模上，并连接在一个螺形阀(Danfoss Evsi 24V，15W)上。该硬模保持不受损坏。该阀门连接着高性能液相色谱泵(Walters 590)。该系统充满灭菌水，当泵的压力达到3.8-4bar时，阀门短时间打开(20ms)引入中等程度(1.6-1.8bar)的流体冲击。然后取消管子，缝合切口，在加热到26-28℃的房间内，将动物送回其笼子中。
按照下面的方式服用低分子量肝素的盐水(NaCl 0.9％)溶液受伤后2小时0.5mg/kg/5mLIV丸，受伤后2小时15分钟1mg/kg/5mL SC，受伤后6小时1mg/kg/5mL SC，受伤后24小时1mg/kg/5mL SC以及受伤后30小时1mg/kg/5mL SC。
对照组在同样的条件下服用5mL/kg盐水溶液(NaCl 0.9％)。
在创伤后一周杀死动物，从组织学的角度评估创伤的创面。用苏木精/曙红的混合物将冠状截面染色，用形象分析仪测量创伤面积。
在此测试中，低分子量肝素减少了至少40％的大脑创伤创面。
依诺肝素(Lovenox)减少50％的大脑创伤创面。
采用呈组合物形式的低分子量肝素的盐(优选钠盐或钙盐)组成药物，在该组合物中该盐与可以呈惰性或生理活性的所有其它可药用成分结合。本发明的药物可以经静脉、皮下、口服、直肠、局部或肺(吸入)等途径给药。
经静脉或皮下给药的灭菌组合物一般是水溶液。这些组合物还可以含有助剂，特别是润湿剂、等渗剂、乳化剂、分散剂和稳定剂。可以用许多方式进行灭菌，比如灭菌过滤、在组合物中加入灭菌剂、辐照等。该药物还可以制备成固体的灭菌组合物形式，在使用时可以溶解于灭菌水或各种其它注射用灭菌介质中。
作为口服用的固体组合物，可以使用片剂、丸剂、粉剂(明胶胶囊、袋剂)或粒剂。在这些组合物中，活性组分在氩气流下与一种或几种惰性稀释剂如淀粉、纤维素、蔗糖、乳糖或二氧化硅混合。这些组合物还可以含有除稀释剂以外的其它物质，比如一种或几种润滑剂，如硬脂酸镁或滑石、口吸收的香味剂、着色剂、糖衣或凡士林。
作为口服的液体组合物，可以使用含有惰性稀释剂如水、乙醇、甘油、植物油或石蜡油的可药用溶液、悬浮液、乳液、糖浆和酏剂。这些组合物可以含有除稀释剂以外的其它物质，比如润湿剂、甜味剂、增稠剂、芳香剂或稳定剂。
用于直肠给药的组合物是锭剂或直肠胶囊，它们除了活性物质以外还含有赋形剂，如可可脂、半合成甘油酯或聚乙二醇。
局部给药组合物可以是比如乳脂、洗剂、洗眼剂、漱口剂、滴鼻剂或气溶胶。
其剂量根据目的效果、治疗时间或给药途径而定；一般通过皮下给药每天每kg体重0.2-4mg，对于成年人，每天给药14-280mg。
一般说来，医生将根据年龄、体重和被治疗主体的各种其它因素来确定适当的剂量。
本发明还涉及预防和治疗中枢神经系统创伤的方法，特别是人类的脊柱、颅或颅-脊柱创伤的预防和治疗方法，这包括给药有效量低分子量肝素。
权利要求
1.低分子量肝素在制备用于预防和治疗中枢神经系统创伤药物方面的用途。
2.权利要求1的用途，其中包括在制备用于预防和治疗脊柱创伤药物方面的用途。
3.权利要求1的用途，其中包括在制备用于预防和治疗颅创伤药物方面的用途。
4.权利要求1的用途，其中包括在制备用于预防和治疗颅-脊柱创伤药物方面的用途。
5.按照权利要求1的用途，其中低分子量肝素的平均分子量为1000-10000dalton。
6.按照权利要求1的用途，其中低分子量肝素的平均分子量为1500-6000dalton。
7.按照权利要求1的用途，其中低分子量肝素的平均分子量为4000-5000dalton。
8.按照权利要求1-4中任一项的用途，其中低分子量肝素由在其端部之一具有2-O-磺基-4-enopyrano-suronique酸的低聚糖构成。
9.按照权利要求1-5中任一项的用途，其中通过使用碱使肝素酯解聚而得到低分子量肝素。
10.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是依诺肝素(DCI)。
11.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是那屈肝素(DCI)。
12.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是帕肝素(DCI)。
13.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是瑞维肝素(DCI)。
14.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是达肝素(DCI)。
15.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是亭扎肝素(DCI)。
16.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是Danaparine(DCI)。
17.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是阿地肝素(DCI)。
18.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是舍托肝素(DCI)。
19.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是CY-222。
20.按照权利要求1-7中任一项的用途，其中低分子量肝素是SR90107/ORG31540。
全文摘要
低分子量肝素在制备用于预防和治疗中枢神经系统创伤,特别是脊柱创伤、颅创伤或颅－脊柱创伤药物方面的用途。
文档编号A61P25/00GK1257428SQ98805489
公开日2000年6月21日 申请日期1998年5月25日 优先权日1997年5月28日
发明者J－M·斯图兹曼, A·乌赞, F·威尔 申请人:罗纳-布朗克罗莱尔股份有限公司