一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及藏药领域，尤其涉及一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 宽筋藤（Tinospora sinensis (Lour. )Merr)是防己科植物宽筋藤的莖。藏药名 "勒哲"，是藏药中常用药材，微苦，凉。苦，归肝、脾经，常用于治疗祛风除湿，舒筋活络，祛风 止痛等病症。为此，研宄一种有效提取宽筋藤的方法显得尤为重要。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用，可以体外抑制流感 病毒H3N2。
[0004] 为达到上述目的，本发明的采用如下技术方案：
[0005] 一种宽筋藤提取物的获得方法，包括以下步骤：
[0006] 1)将宽筋藤干粉在室温下用95%的乙醇渗漉提取三次，每次2小时，将三次所得 提取液过滤浓缩，获得第一部分浸膏；
[0007] 2)将上述提取残渣再用70%的乙醇加热回流提取三次，每次2小时，将三次所得 提取液过滤浓缩，获得第二部分浸膏；
[0008] 3)合并所述第一部分浸膏和所述第二部分浸膏，获得宽筋藤提取物。
[0009] 4)上述的宽筋藤的提取物的应用，应用于抑制体外抗流感病毒H3N2。
[0010] 上述技术方案提供的一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用，通过用乙醇提取获 得上述的宽筋藤提取物，该宽筋藤提取物对流感病毒H3N2具有体外抑制作用。
【附图说明】
[0011] 图1为本发明提供的一种宽筋藤提取物的获得方法的流程示意图。
【具体实施方式】
[0012] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0013] 本发明提供了一种宽筋藤提取物的获得方法，所述方法包括：
[0014] 101 :将宽筋藤干粉室温下用95%的乙醇渗漉提取三次，每次2小时，将三次所得 提取液合并过滤浓缩，获得第一部分浸膏。
[0015] 102 :将以上方法提取后的残渣，用70%的乙醇加热回流提取三次，每次2个小时， 将三次所得提取液合并过滤浓缩，获得第二部分浸膏。
[0016] 103 :合并所述第一部分浸膏和所述第二部分浸膏，获得宽筋藤提取物。
[0017] 本发明提供的宽筋藤提取物，可以用于抑制流感病毒H3N2。下面应用具体的试验 来举例说明，本发明实施例提供的宽筋藤提取物可以用于抑制流感病毒H3N2。实施例试验 用到的甲型流感病毒H3N2 (A3/京科/30/95)，由上海市卫生防疫站提供。细胞模型为犬肾 细胞MDCK细胞（由中科院细胞所提供）。
[0018] 实施例
[0019] 1)将本发明实施例提供的宽筋藤提取物进行浓度配置：宽筋藤提取物首先用二 甲亚砜配制成20mg/ml。
[0020] 2)然后用MDCK细胞维持液（即不含血请的细胞培养液）分别稀释为浓度为 200 μ g/ml、100 μ g/ml、50 μ g/ml、25 μ g/ml、12. 5 μ g/ml 的不同药液。
[0021] 3)对不同浓度的药液进行毒性测试：MDCK细胞在96孔培养板单层培养37°C，5% CO2培养24小时，吸弃上清液，分别加入浓度为200 μ g/ml、100 μ g/ml、50 μ g/ml、25 μ g/ ml、12. 5 μ g/ml药液，每个药液平行4孔，每孔加药100 μ I。经72小时观察毒性。
[0022] 4)细胞病变抑制试验，实验设细胞对照组，病毒对照组，阳性对照组（利巴韦林） 及药物组。MDCK细胞在96孔培养板单层培养37°C，5 % CO2培养24小时，吸弃上清液，细胞 经洗涤，加入30TCID5(I病毒液，37°C，5% CO 2吸附2小时，吸去病毒液，加入最大无毒浓度下 药液，每个样品平行4孔，每孔加药液100 μ 1。经37°C，5% CO2培养72小时，观察CPE (病 变），实验设细胞对照组，病毒对照组，阳性对照组（利巴韦林）及药物组，同时观察CPE，若 抑制大于50%，则计算IC 5tl (半数有效抑制浓度）及治疗指数TI值。试验结果如表1所示， 表中TC5tl为半数毒性浓度。
[0023] 表 1
[0024]
【主权项】
1. 一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用，其特征在于，包括： 1) 将宽筋藤干粉室温下用95%的乙醇渗漉提取三次，每次2小时，将三次所得提取液 合并过滤浓缩，获得第一部分浸膏； 2) 将1)中提取后的残渣再用70%的乙醇加热回流提取三次，每次2小时，将三次所得 提取液合并过滤浓缩，获得第二部分浸膏； 3) 合并所述第一部分浸膏和所述第二部分浸膏，获得宽筋藤提取物。
2. 权利要求1所述的宽筋藤提取物的应用，其特征在于，所述宽筋藤提取物应用于抑 制流感病毒H3N2。
【专利摘要】本发明公开了一种宽筋藤提取物的获得方法及其应用，涉及藏药领域，可以对流感病毒H3N2起到体外抑制作用。所述方法包括以下步骤：将宽筋藤干粉室温下用95％的乙醇渗漉提取三次，每次2小时，将三次所得提取液过滤浓缩，获得第一部分浸膏；将上次提取后的残渣再用70％的乙醇加热回流提取三次，每次2小时，将三次所得提取液过滤浓缩，获得第二部分浸膏；合并所述第一部分浸膏和所述第二部分浸膏，获得宽筋藤提取物。
【IPC分类】A61P31-16, A61K36-59
【公开号】CN104815002
【申请号】CN201510238817
【发明人】芦永昌, 李海丽, 王欢, 梁永欣, 北里海雄
【申请人】青海民族大学
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年5月12日