一种治疗皮肤萎缩相关疾病的药物作用靶点的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，具体地说，是一种治疗皮肤萎缩相关疾病的药物作用 靶点。
【背景技术】
[0002] 萎缩性皮肤病（AtrophicSkinDisease)是由多种因素导致的生理性或病理性 的皮肤组织退行性变，基本病理改变表现为基底层干细胞数量减少，棘细胞层萎缩，表皮变 薄，表皮突变平。真皮层胶原蛋白合成分泌能力下降、胶原纤维断裂老化，从而导致真皮萎 缩、皮肤总厚度变薄等症状，并伴发皮肤功能障碍的一系列疾病。皮肤萎缩病覆盖人群广， 产生原因复杂，是目前学界亟待解决的难题之一。然而，目前尚无统一对症治疗方案，故该 问题的解决具有较高的学术和商业价值。
[0003] 以发生诱因分类，萎缩性皮肤病所涉及的主要疾病包括生理情况下的皮肤 萎缩，如衰老性皱纹；机械张力诱导的皮肤萎缩病，如妊娠纹、膨胀纹等；服用药物 后导致的皮肤萎缩，以及其他皮肤萎缩相关疾病，如系统性硬化病（scleroderma)、 皮肌炎（Dermatomyositis)、埃-当综合征（Ehlers-Danlossydrome)、皮肤异色病 (Poikiloderma)、Ccokayne氏综合征等。在前期的研宄中发现，以机械张力诱导的萎缩性 皮肤病为例，萎缩性皮肤病表现在几个主要的方面：1、表皮基底层干细胞数量的减少，增殖 细胞数量减少；2、真皮新生胶原减少，弹力纤维减少，排列紊乱，细胞间基质分泌减少；3、 表皮基底层端粒酶活性下降，细胞分裂潜力下降。4、皮肤厚度变薄，皮肤密度下降。针对以 上几个方面，几种现有的技术可针对萎缩性皮肤病进行对症治疗，如：1、为了增加皮肤组织 干细胞的含量，提升皮肤再生能力，可进行干细胞移植治疗；2、为了增加皮肤厚度，提升细 胞外基质含量，进行真皮填充物注射，如透明质酸、胶原蛋白等。3、肉毒毒素局部注射以麻 痹局部神经，以减少衰老性皱纹的发生。
[0004] 1?干细胞治疗存在的缺陷
[0005] 以骨髓间充质干细胞治疗为例：
[0006] (1)有限性：因免疫排异问题，用于治疗的干细胞必须来源于自体，而成体干细胞 的数量自出生即是恒定的，并且随着年龄增长其数量逐步减少。因此，自体干细胞是相当有 限和宝贵的自体再生资源，不能维系治疗周期较长的疾病。
[0007] (2)过程繁琐：目前最多用于临床干细胞治疗的是骨髓间充质干细胞，事先需服 用药物动员骨髓间充质干细胞，然后进行局麻下的骨髓穿刺，操作过程繁琐。
[0008] (3)体外污染：干细胞治疗环节涉及多道程序，干细胞在体外程序中易被病原体 污染，造成安全问题。
[0009](4)致瘤性：干细胞增殖分化过程中出现基因组不稳而导致自发突变，易出现染 色体异常而形成肿瘤，形成安全隐患。
[0010](5)有创性：干细胞治疗中，不论是提取骨髓间充质干细胞还是脂肪干细胞，都需 要进行有创性操作提取干细胞，给患者带来身体上的痛苦。
[0011] 2.透明质酸钠注射所存在的缺陷
[0012] (1)易吸收：仅作为真皮填充物增加细胞外基质的含量，而并不真正产生胶原蛋 白，易被机体吸收，维持时间短，需反复注射以维持填充量。
[0013] (2)有创性：仅能通过注射的用药途径到达真皮，注射点易发生淤血，血肿等注射 后并发症。
[0014] (3)血管堵塞风险：由于属于真皮注射物，如操作者经验不足，或操作不当则可发 生严重并发症，如注射物阻塞局部血管，造成局部皮肤组织坏死，严重者甚至导致失明。
[0015] 3.胶原蛋白注射所存在的缺陷
[0016] (1)免疫原性：现今的免疫学分析和研宄结果表明，动物制品来源胶原蛋白注射 能够诱导机体T细胞启动免疫反应，在治疗时对患者进行胶原注射，大约3%的患者有潜在 的反应，反复多次注射后有1% -2%的患者会产生迟发型过敏反应的症状，典型症状包括 局部水肿、红斑，又的伴有硬化和瘙痒，持续时间达4个月至一年。
[0017] (2)易吸收：胶原蛋白注射后一般三个月即被机体吸收，需重复注射以保持皮肤 真皮厚度。
[0018] (3)有创性：仅能通过注射的用药途径到达真皮，注射点易发生淤血，血肿等注射 后并发症。
[0019] 4.肉毒毒素注射所存在的缺陷
[0020] (1)表情僵硬：由于肉毒毒素注射阻断的是神经递质，其除皱效果是通过麻痹局 部运动神经而达到的，故除皱后局部表情僵硬，注射过量甚至形成所谓的"肉毒素脸"，为患 者平日生活工作交流带来负担和痛苦。
[0021] (2)不良反应：肉毒素注射后不良反应有头痛、背痛等。
[0022] (3)有创性：仅能通过注射的用药途径达到效果，注射点易发生淤血，淤青等注射 后并发症。
[0023] (4)仅有除皱作用：肉毒毒素作用的靶点为神经递质，通过麻痹神经达到除皱效 果，而并不对真皮间质产生直接作用，不增加胶原和细胞间基质的含量，亦无法真正促进皮 肤组织的再生。故肉毒毒素除了对衰老性皱纹有效外，对其他萎缩性皮肤病均无作用。
[0024] 中国专利文献CNlO1616675A公开了一种涉及糖皮质激素和0-环糊精缀合的维 生素A衍生物复合物的联合药物和含该联合药物的药用组合物，可用该发明联合药物和组 合物减少或消除由糖皮质激素（GC)治疗引起的皮肤萎缩症，还包括减少或消除由GC治疗 引起的皮肤萎缩症的方法。但是关于一种治疗皮肤萎缩相关疾病的药物作用靶点目前还未 见报道。
【发明内容】
[0025] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供以Cdhl基因/E-Cadherin蛋白作 为药物作用靶点的药物的应用。
[0026]本发明的第二个目的是，提供一种小核苷酸组合物或膏剂及其应用。
[0027]本发明的第三个目的是，提供以FoxOl基因/FoxOl蛋白作为药物作用靶点的药物 的应用。
[0028] 为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：以Cdhl基因作为药物作用靶 点的药物在制备治疗皮肤萎缩相关疾病药物中的应用。
[0029] 以E-Cadherin蛋白作为药物作用靶点的药物在制备治疗皮肤萎缩相关疾病药物 中的应用。
[0030] 所述的皮肤萎缩相关疾病包括但不仅限于：皮肤生理性萎缩，如因衰老形成的皱 纹；机械张力诱导的皮肤萎缩病，如妊娠纹、膨胀纹等；服用药物后导致的皮肤萎缩，以及 其他皮肤萎缩相关疾病，如系统性硬化病、皮肌炎、埃-当综合征、皮肤异色病、Ccokayne氏 综合征等。
[0031] 所述的以Cdhl基因或E-Cadherin蛋白作为药物作用靶点的药物是干预Cdhl基 因或E-Cadherin蛋白的表达与功能的抑制齐丨」，所述的干预Cdhl基因或E-Cadherin蛋白 的表达与功能的抑制剂包括但不仅限于：中和性抗体，小分子拮抗剂，小核苷酸，微小核糖 核酸，反义分子或多肽抑制剂。
[0032] 优选的，所述的小核苷酸选自表1中的小核苷酸分子。
[0033] 所述的以Cdhl基因或E-Cadherin蛋白作为药物作用靶点的药物可以激活哺乳 动物细胞端粒酶的活性，并因此延长端粒的长度。
[0034] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种组合物，所述的组合物包 括药学上可接受的载体和表1所述的小核苷酸分子。
[0035] -种无需载体即能导入皮肤组织的小核苷酸的膏剂，所述的膏剂的制备方法为： 对表1所述的小核苷酸分子进行2端OME修饰和胆固醇化学修饰，溶解于丙二醇，并混合于 Aquaphor?的愈合膏中。
[0036] 优选的，所述的丙二醇为体积质量比v/w为20% -100%丙二醇。
[0037] 所述的组合物或膏剂在制备经皮给药小核苷酸药物中的应用。
[0038] 优选的，所述的经皮给药小核苷酸药物是治疗皮肤萎缩相关疾病的药物。
[0039] 为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：以FoxOl基因作为药物作用 靶点的药物在制备治疗皮肤萎缩相关疾病的药物中的应用。
[0040] 以FoxOl蛋白作为药物作用靶点的药物在制备治疗皮肤萎缩相关疾病的药物中 的应用。
[0041] 所述的以FoxOl基因或FoxOl蛋白作为药物作用靶点的药物的干预方式是促进 FoxOl进入细胞核或者使FoxOl表达量增多。所述的以FoxOl基因或FoxOl蛋白作为药物 作用靶点的药物包括但不仅限于：FoxOl蛋白的入核激动剂，如小分子药物，多肽；或以慢 病毒、腺病毒、质粒作为载体构建的FoxOl过表达体系。
[0042] 本发明优点在于：
[0043] 1、本发明系通过干预E-cadherin以调控表皮细胞去分化，使干细胞的数量增多， 从而调节组织再生能力，并不动用机体有限宝贵的干细胞再生资源；
[0044] 2、本发明涉及的药物相对于干细胞治疗而言，用药途径无创简便，无需事先服药 动员干细胞，无需局麻手术提取干细胞，无需繁复的体外分离技术增加污染，细胞株突变致 瘤的可能。规避了诸多干细胞治疗过程中的弊端；
[0045] 3、两独立研宄证实，E-cadherin条件性敲除小鼠不具有致瘤性，敲除小鼠的存活 能力较野生型而言不具有明显的差异，佐证了以E-cadherin为靶点的药物的安全性；
[0046] 4、本发明涉及的药物相对于透明质酸注射、胶