一种裂环多氧取代环己烯类化合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物领域，涉及一种裂环多氧取代环己烯类化合物及其应用，具 体是一种来源于毛叶鹰爪花的具有新颖结构的裂环多氧取代环己烯类化合物及其在抗肿 瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 随着肿瘤发生机制的不断被阐明以及抗肿瘤作用靶点的不断被发现，多靶点抑制 肿瘤信号转导成为新型抗肿瘤药物开发的重要方向。相对于单靶点药物和多种单靶点药 物联合用药来说，多靶点药物具有更多的优越性。多靶点药物可有效避免产生药物之间的 相互作用，减少不良反应，治疗作用更全面等优点。在各种分子靶点中，蛋白酷氨酸激酶 (protein tyrosine kinase，PTK)是目前效果最明显且应用前景最广阔的抗肿瘤药物作用 靶点之一。PTK是一组催化蛋白质酪氨酸残基磷酸化的酶系，其在细胞内的信号转导中起着 十分重要的作用，与肿瘤细胞的生长、增殖、分化和凋亡密切相关，通过抑制PTK可破坏肿 瘤细胞的信号传递，抑制肿瘤细胞增殖，从而达到抗肿瘤的目的。目前已有多种酪氨酸激酶 抑制剂类抗肿瘤药物上市或进入临床研宄，并取得了良好的临床疗效，如伊马替尼等靶向 抗肿瘤药物。
[0003] 番落枝科（Annonaceae)鹰爪花属（Artabotrys)植物，通常为攀援灌木植物，全世 界约有100种，分布于热带和亚热带地区，我国产4种，即毛叶鹰爪花（A.pilosus Merr. et Chun)、狭辦鹰爪花（A. hainanensis R. Ε· Fries)、香港鹰爪花（A. hongkongensis Hance)和 鹰爪花（A. hexapetalus (L. f. )Bhandari)，分布于西南部至东南部，其中毛叶鹰爪花和狭瓣 鹰爪花为海南特有植物[中国科学院中国植物志编委会.中国植物志.第30卷.科学出 版社.北京：1979，pl21-128.]。在民间，鹰爪花属植物作药用植物已有很长历史，具有清 热解毒，消炎止痛的功效，常用作治疗疟疾和头颈部淋巴结核等。现代药理学研宄表明，该 属植物具有广泛的生物活性，如抗肿瘤、抗菌、抗疟以及杀虫等活性[顾关云；蒋昱.番荔枝 科植物细胞毒成分的研宄概况III.国外医药（植物药分册），1995, 10:153-156. ;RadlofT P.D,Philipps J, Nkeyi M,et al.Arteflene compared with mefloquine for treating Plasmodium falciparum malaria in children. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 1996, 55:259-262. ；Singh D. K, Basha S. A, Sarma, B. K, et al. Antifungal activity of a phytoterpenoid (AOS-A) isolated from Artabotrytis odoratissimus on spore germination of some fungi. Mycobiology, 2006, 34:120-123. ；Srivastava B,Singh P,Srivastava A. K, et al. Efficacy of Artabotrys odoratissimus oil as a plant based antimicrobial against storage fungi and a flatoxin BI secretion. International Journal of Food Science and Technology,2009, 44:1909-1915.； Tattersfield F, Potter C.The insecticidal properties of certain species of Annona and of an Indian strain of Mundulea sericea.Annals of Applied Biology, 1940, 27:262-273.]。正因为如此，多年来，该属植物备受植物化学界和药理 学界的青睐，截至目前已从该属多种植物中分离鉴定了大量类型极其丰富并具有广 泛生物活性的化合物，如生物碱类化合物[Zhou Q，Fu Y.H，Li X.B，et al.Bioactive benzylisoquinoline alkaloids from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry Lett. 2015, 11:296-300. ；Sichaem JjRuksilp TjWorawalai Wj et al.A new dimeric aporphine from the roots of Artabotrys spinosus. Fitoterapia 2011，82:422-425.]、 砲类化合物[Gupta C，Prasad S，Sahai M，et al. Artabotryols A_E，New Lanostane Triterpenes from the Seeds of Artabotrys odoratissimus. Helv.Chim. Act. 2010, 93:1925-1932. ；Zhang LjZhou W. Sj Xu X. X. et al.A new sesquiterpene peroxide(yingzhaosu C)and sesquiterpenol(yingzhaosu D)from Artabotrys unciatus(L. )Meer. J. Chem. Soc.，Chem. Commun. 1988, 8:523-524. ]、丁内醋类化合物[Wong H. Fj Brown,G.D. β -Methoxy-γ-methylene-α , β -unsaturated-γ -butyrolactones from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry，2002, 59:99-104·]以及黄酮类化合物 [Li T. Mj Li W. Kj Yu J. G. Flavonoids from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry 1997,45:831-833. ；Singh A. Pj Sahai M. Isolation of flavonol glycosides from the leaves of Artabotrys odoratissmus. Planta med. 1996, 62:192-194·]等多种结构类型化 合物。
[0004] 裂环多氧取代环己烯类化合物是一类极其罕见的化合物类型，分布植物类群极 其狭窄，主要分布于番荔枝科紫玉盘属植物中，截至目前为止仅报道7个该类型化合物 [Chen Zj Liu Y. Lj Xu Q. M. et al. New polyoxygenated cyclohexene and polyoxygenated seco-cyclohexene from Uvaria boniana. J.Asian Nat. Prod. Res. 2013, 15, 53-58.； Zhang C. RjWu YjYue J. M. Chin. J. Nat. Med. 2010, 8, 84-87. ；Wang SjChen R. Yj Yu S. S. et al. Uvamalols D-Gmovel polyoxygenated seco-cyclohexenes from the roots of Uvaria macrophylla. J. Asian Nat. Prod. Res. 2003, 5, 17-23. ；Lu Y. Pj Mu Q，Zheng H. L. et al. Two new constituents from Uvaria microcarpa. Chin. Chem. Lett. 1995, 6, 775-778.]。
[0005] 毛叶鹰爪花（(A. pilosus)为番荔枝科鹰爪花属植物，常生于低海拔至中海拔的 山地林中，为我国特有植物，仅分布于海南岛。前期初步研究发现，毛叶鹰爪花的乙醇提取 物具有很好的抗 HIV 活性[He J.J，Park I.W，Chen G.Y.et al. Extracts of medicinal plant and uses thereof. PCT Int.Appl. 2011，TO 2011014561 Al 20110203·]，除此之外， 目前国内外均未见有关毛叶鹰爪花中化学成分及其生物活性的研究报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种裂环多氧取代环己烯类化合物及其应用，是从毛叶鹰爪 花枝叶中分离得到的具有新颖结构的裂环多氧取代环己烯类化合物artabotrol A。多种体 外活性筛选表明：该化合物具有显著的抗肿瘤活性和与阳性对照药相当的蛋白酪氨酸激酶 的抑制活性，可以进一步开发成以蛋白酪氨酸激酶为靶标的抗肿瘤药物。
[0007] 本发明所提供的裂环多氧取代环己烯类化合物artabotrol A的化学结构如下：
[0008]
[0009] -种从毛叶鹰爪花枝叶中分离纯化化合物artabotrol A的分离纯化方法，其详细 步骤包括：
[0010] A.将毛叶鹰爪花枝叶用甲醇或95%乙醇溶液提取3次，过滤，收集滤液，再减压浓 缩干燥，获得醇提取物；
[0011] B.将醇提取物加水制成混悬液，依次用石油醚和乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯萃 取液减压浓缩，得乙酸乙酯萃取浸膏；
[0012] C.将乙酸乙醋萃取浸膏进行柱色谱分离纯化，得到单体化合物artabotrol A。
[0013] 进一步的，上述制备方法的步骤C包括：1、将乙酸乙酯萃取浸膏用硅胶柱层析划 段，分别按体积比20:1，10:1，5:1，1:1进行石油醚-丙酮梯度洗脱，收集体积比为10:1的 石油醚-丙酮的洗脱物；2、取石油醚-丙酮（体积比10:1)洗脱物经MCI树脂柱层析去除 色素，分别按体积比30:70, 50:50, 70:30进行甲醇-水梯度洗脱，收集体积比为70:30的 甲醇-水的洗脱物；3、取甲醇-水（体积比70:30)洗脱物进行反相硅胶柱层析，按体积 比60:40,65:45, 70:30进行甲醇-水梯度洗脱，收集体积比为60:40的甲醇-水的洗脱物 浓缩；4、取甲醇-水（体积比60:40)洗脱物用制备型高效液相色谱分离，流动相为体积比 35:65的乙腈-水，得到单体化合物artabotrol A。
[0014] 本发明所提供的化合