黄刺果实多糖改善脂代谢紊乱的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于保健品领域，具体涉及黄刺果实多糖在制备改善脂代谢紊乱的药物中 的用途。 技术背景
[0002] 脂质的代谢包括脂类在小肠内消化、吸收，由淋巴系统进入血循环（通过脂蛋白 转运），经肝脏转化，储存于脂肪组织，需要时被组织利用。脂质在体内的主要功用是氧化供 能，脂肪组织是机体的能量仓库，脂肪也能协同皮肤、骨骼、肌肉保护内脏，防止体温散发和 帮助食物中脂溶性维生素的吸收。磷脂是所有细胞膜的重要结构成分，胆固醇是胆酸和类 固醇激素（肾上腺皮质激素和性腺激素）的前体。脂类代谢受遗传、神经体液、激素、酶以 及肝脏等组织器官的调节。当这些因素有异常时，可造成脂代谢紊乱（也称为脂质代谢紊 乱）和有关器官的病理生理变化，如高脂蛋白血症、脂质贮积病及其造成的临床综合征、肥 胖症、酮症酸中毒、脂肪肝和新生儿硬肿症等。
[0003]黄刺，小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim?，是与白刺、沙棘（黑 刺）一样为蒙、藏、维吾尔等少数民族药用与食用的传统野生浆果，统称为"青海三刺"。《青 海常用中草药手册》中对黄刺皮（即根皮）有详细记载：黄刺皮即为双子叶植物药小檗科 植物直穗小檗的茎皮。其果实医药功能也做了简要的记述，其具有治疗腹痛，消化不良，腹 胀，痢疾等功能。
[0004] 目前还未见对黄刺果实多糖改善脂质异常的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供黄刺果实多糖的新用途。
[0006] 具体地，本发明提供了黄刺果实多糖在制备改善脂代谢紊乱的药物、保健品或食 品中的用途。
[0007]进一步地，所述药物、保健品或食品是改善糖尿病患者脂代谢紊乱的药物、保健品 或食品，即可用于治疗糖尿病合并高脂血症。
[0008] 其中，所述改善脂代谢紊乱是指降低糖尿病患者胆固醇、甘油三脂或/和低密度 脂蛋白，升尚尚密度脂蛋白。
[0009] 其中，所述糖尿病为I型或II型糖尿病。
[0010] 进一步地，所述糖尿病患者为肝功能正常或受损的患者。本发明研宄发现，与格列 本脲等化药不同的是，黄刺果实多糖对肝功能无损害，因此，可以将黄刺果实多糖用于肝功 能受损患者的治疗。
[0011] 其中，所述药物、保健品或食品为口服剂型；进一步地，所述口服剂型选自片剂、胶 囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服液。
[0012] 本发明所述的黄刺果实多糖，为小檗科植物直穗小檗Berberisdasystachya Maxim.果实的提取物，提取物中多糖为主要成分。本发明【具体实施方式】中测定表明，提取物 中多糖含量为93±2% w/w，该多糖纯度较高，用此纯度下的多糖进行生物活性实验，其结 果能够真实的反映出黄刺果实多糖的生物活性，有效地避免了其他成分对多糖活性测定的 干扰。在已知多糖生物活性的基础上，即便是降低多糖在提取物中的含量，只要适当调节提 取物用量，使得多糖达到相应的起效浓度，同样能够发挥出相同或相似的生物活性。因此， 本发明限定，提取物中多糖含量应为60~95% w/w。
[0013] 进一步地，提取物中多糖含量为80~95% w/w，更进一步为90~95% w/w。
[0014] 其中，所述黄刺果实多糖采用水提醇沉法制备得到。
[0015] 进一步地，醇沉步骤中，乙醇终浓度达到60~85% v/v即可，更进一步为70~ 80% v/v，优选为 75±2% v/v。
[0016] 进一步地，所述水提醇沉法具体操作如下：将黄刺果实脱脂、去单糖后，加水提取， 水提液脱色、除蛋白、透析除小分子后，加入乙醇至含醇量达到60~85% v/v，静置，待沉淀 完全，取沉淀，干燥，即得到黄刺果实多糖。
[0017] 更进一步地，透析除去的小分子分子量在3500Da以下。
[0018] 更进一步地，脱脂具体操作如下：将黄刺果实粉碎后，过筛，采用石油醚或乙醚为 提取溶剂，提取后的残渣过滤，挥干溶剂，得已脱脂黄刺果实残渣。
[0019] 更进一步地，去单糖的具体操作如下：所得已脱脂黄刺果实残渣，以70~85% v/ V乙醇提取，提取后的残渣挥干溶剂，即得已除单糖黄刺果实残渣；优选的乙醇浓度为80% v/v〇
[0020] 更进一步地，透析除小分子后加入乙醇至含醇量至70~80 % v/v，优选为75 ± 2 % v/v〇
[0021] 经过上述纯化步骤，可以有效提高黄刺果实多糖的纯度。当然，若是仅仅需要制备 纯度较低的黄刺果实多糖，亦可以省略除醇沉外的其他纯化步骤中的一项或多项。
[0022] 另外，对于多糖的脱色处理，常常采用离子交换法（如DEAE-纤维素）、氧化法（如 H 2O2)、吸附法（如活性炭）等，在实际使用过程中可以根据自身需求，结合后期多糖的收率 和纯度来选定适合的脱色方法，本发明一个【具体实施方式】中选用H 2O2脱色，但这并不限于 本发明仅仅只能使用此种脱色方式。
[0023] 对于除蛋白而言，常用方法有三氯乙酸法、盐酸法、Sevage法（亦有记载为Sevag 法）等，在实际使用过程中可以根据自身需求，结合后期多糖的收率和纯度来选定适合的 除蛋白方法，本发明一个【具体实施方式】中选用Sevage法，但这并不限于本发明仅仅只能使 用此种除蛋白方式。
[0024] 其中，所述黄刺为小檗科植物直穗小檗Berberis dasystachya Maxim.。
[0025] 本发明研宄表明，黄刺果实多糖具有改善脂代谢紊乱的作用，可以降低胆固醇 (TC)、甘油三酯（TG)、低密度脂蛋白（LDL)，升高高密度脂蛋白（HDL);且能够升高脂代谢 相关的酶活性即升高脂蛋白酯酶和肝酯酶活性，同时能够降低谷草转氨酶和谷丙转氨酶活 性，对肝组织无损伤，可以将其作为安全性良好的改善脂代谢紊乱的药物、保健品或食品。
【具体实施方式】
[0026] 本发明【具体实施方式】中使用的黄刺果实多糖采用常规的多糖提取、纯化方式制备 得到，在本发明中具体操作如下：
[0027] 实施例1:黄刺果实多糖的制备
[0028] 1)黄刺果实脱脂：取成熟的黄刺（即直穗小檗）的果实400g烘干，粉碎后过筛； 取黄刺果实与石油醚混合，混合后超声提取，离心除去提取液，残渣过滤，挥干石油醚，得已 除脂黄刺果实残渣；
[0029] 2)黄刺果实除单糖：已除脂黄刺果实残渣与乙醇混合，所述乙醇浓度为70~85% v/v，回流提取，离心除去提取液，残渣过滤后挥干乙醇，得已除单糖黄刺果实残渣；
[0030] 3)黄刺粗多糖提取：将步骤2)所得已除单糖黄刺果实残渣与纯水混合，微波辅助 提取，离心得到提取液，残渣过滤后弃去；提取液浓缩得到粗多糖提取液；
[0031] 4)黄刺粗多糖的纯化：粗多糖提取液中依次采用H2O2，进行脱色、Savege法除去蛋 白质，再透析除去3500Da以下小分子物质，得到纯化的多糖水提液；
[0032] 5)黄刺果实多糖的制备：将步骤4)所得的已纯化的多糖水提液浓缩液加入乙醇 溶液，使乙醇终浓度达到75% v/v，所得沉淀干燥后，即得到黄刺果实多糖BDP共计2. 06g。
[0033] 实施例2 :黄刺果实多糖的制备
[0034] 1)黄刺果实脱脂：取成熟的黄刺（即直穗小檗）的果实400g烘干，粉碎后过筛； 取黄刺果实与石油醚混合，回流提取，离心除去提取液，残渣过滤，挥干石油醚，得已除脂黄 刺果实残渣；
[0035] 2)黄刺果实除单糖：已除脂黄刺果实残渣与乙醇混合，所述乙醇浓度为70~85% v/v，超声提取，离心除去提取液，残渣过滤后挥干乙醇，得已除单糖黄刺果实残渣；
[0036] 3)黄刺粗多糖提取：将步骤2)所得已除单糖黄刺果实残渣与纯水混合，温浸提 取，离心得到提取液，残渣过滤后弃去；提取液浓缩得到粗多糖提取液；
[0037] 4)黄刺粗多糖的纯化：粗多糖提取液中依次采用H2O 2，进行脱色、Savege法除去蛋 白质，再透析除去3500Da以下小分子物质，得到纯化的多糖水提液；5)黄刺果实多糖的制 备：将步骤4)所得的已纯化的多糖水提液浓缩液加入乙醇溶液，使乙醇终浓度达到80% v/ v，所得沉淀干燥，即得到黄刺果实多糖BDP共计I. 355g。
[0038] 实施例3 :黄刺果实多糖的制备
[0039] 1)黄刺果实脱脂：取成熟的黄刺（即直穗小檗）的果实400g烘干，粉碎后过筛； 取黄刺果实与石油醚混合，超声后再回流提取，离心除去提取液，残渣过滤，挥干石油醚，得 已除脂黄刺果实残渣；
[0040] 2)黄刺果实除单糖：已除脂黄刺果实残渣与乙醇混合，所述乙醇浓度为70~85% v/v，超声提取，离心除去提取液，残渣过滤后挥干乙醇，得已除单糖黄刺果实残渣；
[0041] 3)黄刺粗多糖提取：将步骤2)所得已除单糖黄刺果实残渣与纯水混合，回流提 取，离心得到提取液，残渣过滤后弃去；提取液浓缩得到粗多糖提取液；
[0042] 4)黄刺粗多糖的纯化：粗多糖提取液中依次采用H2O 2，进行脱色、Savege法除去蛋 白质，再透析除去3500Da以下小分子物质，得到纯化的多糖水提液；
[0043] 5)黄刺果实多糖的制备：将步骤4)所得的已纯化的多糖水提液浓缩液加入乙醇 溶液，使乙醇终浓度达到70% v/v，所得沉淀用20mL无水乙醇洗涤3次，其洗涤后的沉淀物 进行喷雾干燥，使得物料水分含量降至10 %以下，得到黄刺果实多糖BDP共计I. 67g。
[0044] 对本发明方法制备的黄刺果实多糖进行蒽酮-硫酸法测定，其中多糖含量为93% ±2w/w〇
[0045]本发明以下实施例中使用的黄刺果实多糖剂量，均以多糖提取物总质量计算。 [0046]实施例4黄刺果实多糖改善脂代谢紊乱作用实验<