阳离子药理学活性物质的持续释放脂质预浓缩物和包含其的药物组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种包含阴离子锚定剂的持续释放脂质预浓缩物，以及包含其的药物 组合物。
【背景技术】
[0002] 持续释放制剂被设计成以预定速率释放单一剂量的药理学活性物质以便将所述 物质在血流中的有效浓度保持特定时期，从而使由多剂量引起的副作用最小。
[0003] PLGA[聚（乳酸-共-乙醇酸）]是由美国食品和药物管理局（FDA)批准用于持 续释放的当前使用的可生物降解材料的代表。美国专利号5, 480, 656记载了经由PLGA在 体内经过特定时期降解成乳酸和乙醇酸的方式持续释放药理学活性物质。然而，PLGA的 酸性降解产物引起炎症，减少细胞生长（K. Athanasiou，G. G. Niederauer和C. M. Agrawal， Biomaterials (生物材料），17,93 (1996))。持续释放需要注射其中负载了生理学活性物质 的10~IOOym PLGA颗粒，但是这引起疼痛或炎症，
[0004] 作为该问题的备选解决方案，国际专利公布号WO 2005/117830记载了一种预制 剂，其包含至少一种中性二酰基脂质和/或生育酚，至少一种磷脂，和至少一种生物相容 的、含氧的低粘性有机溶剂。国际专利公布号WO 2006/075124中记载了另一种备选方案， 其涉及包含至少一种二酰甘油、至少一种磷脂酰胆碱、至少一种含氧有机溶剂和字很少一 种促生长素斯特汀类似物的预制剂（pre-formation)。这些预制剂允许药理学活性物质在 体内持续释放两周以上，并且不由其聚合物系统形成乳酸或乙二酸降解，由此不引起疼痛 或炎症。然而，对于所述制剂存在这样的问题：其必要的有机溶剂引起一些药理学活性物质 活性的减少（H. Ljusberg-Wahre，F. S. Nielse，298,328_332(2〇〇 5) ;H. Sah，Y. Bahl ,Journal of Controlled Release(可控释放杂志）106,51_61 (2005))。另外，没有公开除由本专利 申请中提及的液晶相提供的能够加强持续释放的组合物。
[0005] 最后，在本发明中，本发明人对持续释放制剂的深入透彻的研究带来这样的发现： 包含：a)至少一种液晶形成剂；b)至少一种中性磷脂；c)至少一种液晶硬化剂；d)至少一 种阴离子锚定剂的脂质预浓缩物，其在不存在水性流体时作为脂质液相存在并且在暴露于 水性流体后转变成液晶；和e)药物组合物，其除所述预浓缩物外还包含至少一种具有（+) 的净电荷的阳离子药理学活性物质，所述药物组合物由于阳离子药理学活性物质与阴离子 锚定剂之间的离子相互作用而表现出增强的持续释放特性。
[0006] 在下文中给出与本发明相关的现有技术的描述。
[0007] 国际专利公布号WO 2009/024795记载了一种包含至少一种非聚合物可控释放的 基质、至少一种生物相容性有机有机、至少一种肽药理学活性物质的低粘性混合物与至少 一种脂溶性酸的组合物。然而，该必不可少的有机溶剂使某些药理学活性物质的活性减少， 并且所述脂溶性酸不作用为典型的酸，而是目的仅在于作为溶出稳定剂，这与本发明的不 同之处在于所述组合物与增强药理学活性物质的持续释放无关。
[0008] 国际专利公布号WO 2008/152401记载了一种用于延迟递送肽药理学活性物质的 组合物，其包含至少一种带正电荷的肽离子和至少一种包含带负电荷的平衡离子的药理学 活性物质的盐，和可控释放的递送赋形剂（vehicle)。然而，在该组合物中，所述可控释放的 递送赋形剂可以包括生物不耐受的聚合物，如PLGA，而所述药理学活性物质限制为肽。另 外，包含平衡离子的药理学活性物质的盐，即一种应用到可控释放基质上的药理学活性物 质，不同于本发明，原因在于在所述可控释放基质与所述离子之间没有相互作用。
[0009] 在日本专利公布号62-1239226中，记载了包含溶解或分散在溶液中的阳离子基 团的药理学活性物质与透明质酸的羧酸基团发生离子交换，由此诱导药理学活性物质的缓 慢的扩散。然而，即使充分考虑与粘性透明质酸相关的透明质酸与药理学活性物质的离子 交换，透明质酸持续释放制剂也难以允许在降解过程中充分的持续释放。另外，考虑到持续 释放机制是基于透明质酸的粘性，具有较高水溶性的药理学活性物质更加难以实现需要的 持续释放。这是参考文献不同于本发明的原因。
[0010] 国际专利公布号WO 1999/033491记载了含有离子化合物的离子药理学活性物质 的持续释放药物组合物，所述离子化合物与所述离子药理学活性物质带相反的电荷，并且 能够增加所述物质的疏水性。所述组合物与本发明的组合物相似，在于使用具有平衡离子 的离子化合物增强了持续释放，并且其可以进行皮下注射。然而，其与本发明在下述方面不 同。药理学活性物质的持续释放不是基于所述药理学活性物质与平衡离子化合物之间的直 接的离子相互作用，但是依赖于所述药理学活性物质的疏水性的改善。另外，发现这种组合 物仅在几小时内表现出暂时的持续释放，如在皮下注射到背区的大鼠中测量的。
[0011] 美国专利号7, 731，947公开了一种组合物，其包括：包含干扰素、蔗糖、甲硫氨酸 和柠檬酸盐缓冲液的颗粒制剂，混悬有机溶剂，诸如苯甲酸苄酯。在一个实施例中，描述了 磷脂酰胆碱连同维生素E(生育酚）溶解在有机溶剂中并用于将颗粒制剂分散在其中。然 而，该组合物不同于本发明，因为该组合物用于分散固体颗粒并且不允许形成液晶。
[0012] 美国专利号7, 871，642公开了制备用于递送药理学活性物质的分散体的方法，所 述方法包括将磷脂、聚氧乙烯助乳化剂、甘油三酯和乙醇的均匀混合物分散在水中，其中聚 氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯（聚山梨醇酯）或聚氧乙烯维生素E衍生物可以用作一种聚氧 乙烯表面活性剂。然而，通过将亲水聚合物聚氧乙烯分别缀合到脱水山梨醇脂肪酸酯和维 生素E上衍生的聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯和聚氧乙烯维生素E衍生物在结构上完全不 同于脱水山梨醇脂肪酸酯和维生素E。它们通常被用作利用聚氧乙烯的性质的亲水表面活 性剂，其不同于本发明的组分。
[0013] 美国专利号5, 888, 533记述了用于形成固体植入物的流体组合物，其包含：非聚 合的水不溶性可生物降解材料；和生物相容的有机溶剂，所述生物相容的有机溶剂最小程 度溶解所述材料，并且在水或体液中是可混溶的或可分散的，并在放置在体内时能够从组 合物扩散出或浸出到体液中，由此所述非聚合的水不溶性可生物降解的材料凝结或沉淀以 形成固体植入物。在该组合物中，固醇、胆留醇酯、脂肪酸、脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、脱 水山梨醇脂肪酸酯、脂肪醇、脂肪醇与脂肪酸通过酯化作用的组合、脂肪酸的酸酐、磷脂、羊 毛脂、羊毛脂醇，及其组合被描述为非聚合材料，并且使用乙醇用作溶剂之一。然而，与本发 明的不同在于，该组合物不能形成液晶，并且设计成通过水不溶性材料的简单凝结或沉淀 形成固体植入物，并且必然使用许多有机溶剂。
【发明内容】
[0014] 技术问题
[0015] 因此，本发明的目的是提供用于增强阳离子药理学活性物质的持续释放的持续释 放脂质预浓缩物，其包含阴离子锚定剂。
[0016] 本发明的另一个目的是提供包含阴离子锚定剂的持续释放脂质预浓缩物，其不具 有安全性和生物降解性的问题。
[0017] 问题的解决方案
[0018] 根据其一个方面，本发明涉及一种持续释放脂质预浓缩物，其包含：a)至少一种 液晶形成剂；b)至少一种中性磷脂；c)至少一种液晶硬化剂；和d)至少一种阴离子锚定 剂，所述脂质预浓缩物在不存在水性流体时作为脂质液相存在并且在暴露于水性流体后形 成液晶。
[0019] 根据其另一个方面，本发明涉及一种药物组合物，其包含所述持续释放脂质预浓 缩物和e)至少一种净电荷为（+)的阳离子药理学活性物质，其中所述阳离子药理学活性物 质由于所述阴离子锚定剂与所述阳离子药理学活性物质之间的离子相互作用而表现出增 强的持续释放。
[0020] 以下，将给出每种组分的详细描述。
[0021] a)液晶形成剂
[0022] 用于本发明的液晶形成剂负责形成非层状液晶，并且可以选自脱水山梨醇不饱和 脂肪酸酯、单酰甘油、二酰甘油，及其组合。
[0023] 对于在本发明中作为液晶形成剂的用途，所述脱水山梨醇不饱和脂肪酸酯优选地 在极性头中具有两个以上的-OH(羟基）基团。该脱水山梨醇不饱和脂肪酸酯可由下述化 学式1表示。化学式1的化合物是脱水山梨醇单酯，其中R 1= R2= 〇H，R3= R，以及脱水山 梨醇二酯，其中R1= 〇H，R2= R3= R，R是具有至少一个不饱和键的4-30个碳原子的烷基 酯基团。
[0024] [化学式1]
[0025]
[0026] 详细地，本发明的脱水山梨醇不饱和脂肪酸酯可以选自：脱水山梨醇单酯、脱水山 梨醇倍半酯、脱水山梨醇二酯，及其组合，它们可以来源于可由鲸油和鱼油以及植物油（例 如，椰子油，蓖麻油，橄榄油，花生油，菜籽油，玉米油，芝麻油，棉籽油，大豆油，葵花子油，红 花油，亚麻籽油等）和动物油脂（例如，乳脂、猪油、牛脂）得到的脂肪酸。
[0027] 脱水山梨醇单酯是其中一个脂肪酸基团经由酯键与脱水山梨醇结合的化合物，并 且可以选自脱水山梨醇单油酸酯、脱水山梨醇单亚油酸酯、脱水山梨醇单棕榈油酸酯、脱水 山梨醇单肉豆蔻脑酸酯，及其组合。
[0028] 脱水山梨醇倍半酯是其中平均1. 5个脂肪酸基团经由酯键与脱水山梨醇结合的 化合物，并且可以选自脱水山梨醇倍半油酸酯、脱水山梨醇倍半亚油酸酯、脱水山梨醇倍半 棕榈油酸酯、脱水山梨醇倍半肉豆蔻脑酸酯，及其组合。
[0029] 脱水山梨醇二酯是其中两个脂肪酸基团经由酯键与脱水山梨醇结合的化合物，并 且可以选自脱水山梨醇二油酸酯、脱水山梨醇二亚油酸酯、脱水山梨醇二棕榈油酸酯、脱水 山梨醇二肉豆蔻脑酸酯，及其组合。
[0030] 为了用于本发明，脱水山梨醇不饱和脂肪酸酯优选选自脱水山梨醇单油酸酯、脱 水山梨醇单亚油酸酯、脱水山梨醇单棕榈油酸酯、脱水山梨醇单肉豆蔻脑酸酯、脱水山梨醇 倍半油酸酯，及其组合。
[0031] 在本发明中可以用作另一种液晶形成剂的单酰甘油由经由酯键连接的作为极性 头的甘油和作为尾的一个脂肪酸组成，而二酰甘油包含经由酯键与两个脂肪酸连接的甘油 的极性头。在本发明中，可以与单酰甘油或二酰甘油连接的脂肪酸基团可以包含4-30个相 同或不同数目的碳原子，并且可以独立地是饱和的或不饱和的。脂肪酸可以能够选自由下 述组成的组中的多于一种：棕榈酸，棕榈油酸，月桂酸，丁酸，戊酸，己酸，庚酸，辛酸，壬酸， 癸酸，肉豆蔻酸，肉豆蔻脑酸，硬脂酸，花生酸，辣木子油酸，木蜡酸，蜡酸，亚麻酸，a _亚麻 酸（ALA)，二十碳五烯酸（EPA)，二十二碳六烯酸（DHA)，亚油酸（LA)，y-亚油酸（GLA)，双 高Y-亚油酸（DGLA)，花生四烯酸（AA)，油酸，异油酸，反油酸，花生酸，芥酸，神经酸，及其 组合。
[0032] 具体地，本发明的单酰甘油能够选自本发明的多于一种，包括，甘油单丁酸酯，甘 油单辣木子油酸酯，甘油单辛酸酯，甘油单月桂酸酯，甘油单甲基丙烯酸酯，甘油单棕榈酸 酯，甘油单硬脂酸酯，甘油单油酸酯，