术人员已知的任 何途径给药，其形式可以选自例如片剂或口服混悬剂，或其它形式。
[0045] 根据本发明的另一方面，提供了醋酸艾司利卡西平或其盐与至少一种其它抗癫痫 药组合在制备用于治疗癫痫的药物组合物中的应用，其中所述药物组合物用于每日一次给 药。所述至少一种其它抗癫痫药的浓度不会被包含醋酸艾司利卡西平的药物组合物的每日 一次剂量明显降低。优选地，所述至少一种其它抗癫痫药选自丙戊酸盐、拉莫三嗪、托吡酯 及其组合。
[0046] 根据本发明的另一方面，提供了包含约400至1200mg醋酸艾司利卡西平的单位剂 量药物组合物，所述单位剂型适合以高至每天1200mg的最大剂量口服给药以治疗上述除 癫痫以外的疾病。
[0047] 本文中使用的术语"约"意指表示由该术语修饰的数字可以被认为是约数，其可以 根据具体应用追求的所需性质或效果而变化，因此应该被认为是涵盖本领域技术人员将理 解的为达到所需或所示的性质或效果的范围。
[0048] 本文中所述的"治疗的方法"指以可有效减少所治疗的疾病或病症或其症状的影 响、对抗、或消除所治疗的疾病或病症或其症状的任何量向患者给药所述化合物。
[0049] 本文中所述的"提高患者对艾司利卡西平暴露的方法"指以可有效提高给药间隔 内患者艾司利卡西平血浆浓度的任何量向患者给药所述的化合物。这可能是例如相对于每 日两次给药由每日一次给药导致的提高。
[0050] 本文中所述的"减少患者的癫痫发作"指相对于未治疗患者所经历的癫痫的次数、 持续时间或频率，患者的癫痫发作的次数、持续时间或频率的任何减少。
[0051] 本文中所述的药物组合物中醋酸艾司利卡西平的"药理学有效量"指足以具有所 需的药理学活性的任何量。
[0052] 本文中所述的全部有效量均将根据各种公知和理解的因素变化，例如，所治疗的 病症和所治疗患者的生理特征。因此，确定有效量将完全处于本领域技术人员的能力范围 内。
[0053] 研究材料和方法
[0054] 作为本公开的一个实例，下列内容示范用于治疗有此需要的患者的癫痫的有效量 的包含醋酸艾司利卡西平的药物组合物的确定和给药。本领域技术人员将可基于本文中公 开的以及本领域已知的技术和概念来确定用于治疗其它疾病和/或病症的药物组合物的 有效量。
[0055] 至少在下列临床研究中研究了醋酸艾司利卡西平在人体内的作用。在第一项研 究即安慰剂-对照治疗探索性研究中，在标准抗癫痫药物治疗难医治的癫痫患者中比较每 日一次和每日两次剂量。在第二项研究中，健康受试者接受900mg醋酸艾司利卡西平的每 日一次（o.d.) 口服剂量或450mg醋酸艾司利卡西平的每日两次（b.i.d.)剂量。在第三项 研究中，健康受试者接受20mg至2400mg范围内的醋酸艾司利卡西平单次口服剂量，以及 400mg至2400mg范围内的醋酸艾司利卡西平的重复的每日一次（o.d.) 口服剂量。
[0056] 在相对生物利用度研究中证实了片剂和口服混悬剂的生物等效性。
[0057] 在癫痫患者中的研究
[0058] 该临床实验是由克罗地亚、捷克共和国、德国、立陶宛和波兰的20个中心开展的 双盲、随机、安慰剂对照研究。研究的规定目标是评价BIA2-093作为辅助治疗在具有难医 治的部分性癫痫患者中的有效性和安全性。将尽管用1种或2种抗癫痫药（AED)(例如苯妥 英、丙戊酸盐、扑米酮、苯巴比妥、拉莫三嗪、加巴喷丁、托吡酯或氯硝西泮）治疗，但每月仍 有至少4次部分性发作的总共143名18-65岁的患者随机分配到以下三组中的一组内：在 12周内（加1周逐渐停止（tapering off))，用安慰剂（n = 47)，每日一次BIA 2-093(n = 50)，或每日两次BIA 2-093(n = 46)治疗。对于第一个4周，日剂量为400mg。然后，日剂 量升至800mg (第5-8周），最后到达1200mg (第9-12周）。强度为200mg、400mg和600mg 醋酸艾司利卡西平的片剂和安慰剂片剂由BIAL(S. Mamede do Coronado,葡萄牙）按照GMP 制造。使用具有单级四极质谱检测（MS)的等度液相色谱（LC)，以非手性方法进行血浆测定 以测定BIA 2-005的浓度，如本文所述。参见例如Almeida I和Almeida II。
[0059] 在健康人志愿者中的研究
[0060] 实验 A
[0061] 这项人体药理学实验用于研究醋酸艾司利卡西平的每日一次和每日两次方案在 健康受试者中的稳态药物动力学。该研究是在12名健康志愿者（6名男性和6名女性）中 进行的单中心、开放标记、随机、双交叉研究，所述研究由两个8天的治疗期组成，两个治疗 期被10-15天的清除期（washout period)隔开。在每个治疗期中，志愿者接受每日一次 (〇. d.) 900mg醋酸艾司利卡西平、或者每日两次（b. i. d.) 450mg醋酸艾司利卡西平的每日 口服剂量。使用由BIAL(S. Mamede do Coronado,葡萄牙）按照GMP制造的强度为450mg 醋酸艾司利卡西平的片剂。
[0062] 在下列时间采集用于药物血浆测定的血样：
[0063] A 阶段：
[0064] 给药前，和给药后 0? 5、1、1. 5、2、3、4、6、8、12、24、36、48、72 和 96 小时；
[0065] B阶段：
[0066] 第5至第11天（包括端值）：每天给药前（用于"波谷"浓度测定）；
[0067] 第 12 天：给药前，和给药后 0? 5、1、1. 5、2、3、4、6、8、12、24、36、48、72、96 和 120 小 时。
[0068] 通过直接静脉穿刺或通过静脉导管将血样抽取到肝素锂试管内，在4°C下，在约 1500g下离心10分钟。将所得血浆分成ImL的2等分试样，在-20°C下贮存直到分析需要。 [0069] 使用具有单级四极质谱检测（MS)的等度液相色谱（LC)测定醋酸艾司利卡西平、 艾司利卡西平和R-利卡西平的血浆浓度。
[0070] 该方法包括将500 y L约0? 5 y g/mL的10, 11-二氢卡马西平（在体积比为3:97 的乙腈：水中制备的内标）添加到聚丙烯试管内的250 y L血浆（在分析前以1800rpm离 心）中。在祸旋混合10秒后，将混合物转移到Schleicher和Schuell C18/100mg 96孔固 相萃取板上。在应用总样品体积前，用800 y L甲醇、然后用800 y L乙腈和800 y L乙腈： 水（3:97,体积比）预处理各孔。然后用500 y L乙腈：水（3:97,体积比）洗涤各聚丙烯试 管，将洗液转移到各个孔中。用750 y L乙腈将化合物洗脱到收集板内，在40°C下，在无氧氮 下将萃取物蒸发至干。使用Tomtec QUADRA ()6'k Model 320系统进行Ali固相萃取操作， 对各洗脱步骤施加真空。将最后的萃取物复溶到l〇〇y L水：甲醇（90:10,体积比）中并混 合。然后在分析前，以约3000rpm离心收集板（在约4°C下进行约10分钟）。将最终萃取 物的等分试样（10 y U注射到LC-MS系统内。
[0071] 分析中使用的的LC-MS系统由Perkin Elmer系列200微量栗、Perkin Elmer系 列200自动进样器和配有Turbo IonSpr砂⑩源的Perkin Elmer/Sciex API 150EX单级 四极质谱仪组成。使用 LichroCART 250_4ChiraDex 柱（(6-环糊精，5 ym)、LichroCART 4-4ChiraDex柱保护柱（0 -环糊精，5 ym)、50°C下的Jones色谱7971柱加热器、流动相 A (0. 2mM醋酸钠，aq)和流动相B (0. 2mM醋酸钠，MeOH)实现分离。MS检测器以正离子模式运 行，BIA 2-093、艾司利卡西平、R-利卡西平、和内标的质量转变分别为319. 16amu (200ms)、 277. 08amu (200ms)、277. 08amu (200ms)和 261. 05amu (200ms)。测定对醋酸艾司利卡西平的 定量限为10ng/mL，对艾司利卡西平和R-利卡西平的定量限为100ng/mL。
[0072] 醋酸艾司利卡西平即（S)-(-)-10-乙酰氧基-10, 11-二氢-5H-二苯并/b，f/氮 杂.藥-5-甲酰胺;艾司利卡西平即⑶_(+)-10, 11-二氢-10-羟基普二苯并/b, f /氮 杂在-5-甲酰胺；和R-利卡西平即（R)-㈠-10, 11-二氢-10-羟基-5H-二苯并/b, f/氮 杂、擊-5-甲酰胺在BIAL化学实验室中合成，纯度>99. 5%。内标，即10, 11-二氢卡马西平 由 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO)提供。<