剂(粒度2.68 μm，0.77 μm，0.49 μπι)中的粒度分布。
[0059]图3显示了体外Μ细胞模型的概念图。
[0060]图4显示了具有多种粒度的微球的体外Μ细胞通透性的结果。
[0061]图5显示了经杀死的具有多种粒度的乳酸菌或其微粒化形式的体外Μ细胞通透性结果。指示Caco-2的棒显示一个测试系统(=肠系膜模型)，其中仅对Caco-2细胞进行单层培养，并且细胞没有表现出Μ细胞样改变。指示Caco-2/Raji的棒显示一个测试系统(=Μ细胞模型)，其中对Caco-2细胞和Raji细胞共培养，以提供Μ细胞样细胞。Ρ#02和Ρ#03对应于两个独立的测试。
[0062]图6显示了经杀死的具有多种粒度的乳酸菌或其微粒化形式的体外Μ细胞通透性结果。左边棒显示在4°C的通透性，而右边棒显示在37°C的通透性。
[0063]图7显示了体内免疫诱导能力比较测试的组构成和测试日程表。
[0064]图8显示了体内细胞免疫诱导能力(IEL)的比较结果。图组成与图7中相同。
[0065]发明详述
[0066]本发明提供了含有经杀死的在表面上表达靶抗原的乳酸菌或其微粒化形式的口服制剂，所述乳酸菌或其微粒化形式具有2.68-30 μπι的平均粒度。本发明的口服制剂可用于诱导针对靶抗原的细胞免疫。使用病原体抗原作为靶抗原，本发明的口服制剂可用于预防或治疗病原体感染性疾病。
[0067]对靶抗原没有特别的限制，只要它被本发明的口服制剂的施用受试者(例如，人)的免疫系统识别为外来物质，并诱导获得性免疫反应，并且可以使用任何物质。该物质的实例包括，但不限于，多肽(包括肽，蛋白质)，糖脂，糖，核酸等。因为本发明的口服制剂在诱导细胞免疫的活性上是优良的，所以优选使用这样的抗体，其被摄取到抗原呈递细胞中，被加工处理，在MHC I类上呈递，并通过在细胞毒性Τ细胞(⑶8Τ细胞)上表达的Τ细胞受体(TCR)识别。在一般情况下，细胞毒性Τ淋巴细胞识别通过TCR在MHC I类上呈递的多肽和糖脂。因此，在本发明中待使用的靶抗原优选地是可以在施用受试者(例如，人)的MHCI类上呈递时被施用受试者(例如，人)的细胞毒性Τ淋巴细胞上的TCR识别的肽或糖脂；通过施用受试者(例如，人)的细胞中的蛋白酶体降解以产生这样的肽或糖脂的蛋白质，病原体，细胞或病原体或细胞的部分(提取物等)等。更优选地，本发明中待使用的靶抗原是在施用受试者(例如，人)的MHC I类上呈递时，被施用受试者(例如，人)细胞毒性Τ淋巴细胞上的TCR识别的肽；或通过施用受试者(例如，人)的细胞中的蛋白酶体降解以产生这样的肽的蛋白质。
[0068]这种靶抗原包括病原体抗原，肿瘤抗原，食品抗原，变应原等，并没有特别的限制。在一个实施方案中，靶抗原是病原体抗原。使用病原体抗原作为靶抗原，可以有效地诱导针对病原体抗原的细胞免疫，并可以预防或治疗病原体感染性疾病。病原体的实例包括，但不特别限于引起胞外或胞内感染的细菌，病毒，寄生性蠕虫，真菌等。
[0069]因为本发明的口服制剂在诱导细胞免疫的活性上是优良的，并且已知通过细胞免疫从机体消除细胞内感染性病原体和癌症，所以优选地将细胞内感染性病原体抗原和与癌化细胞相关的抗原(肿瘤抗原，例如，由于癌化而含有突变的蛋白质)用作靶抗原，更优选地将细胞内感染性病原体的抗原用作靶抗原。在由细胞内感染性病原体弓I起的感染性疾病中，主要诱导细胞免疫，并且感染了细胞内感染性病原体和在MHC I类上呈递病原体抗原的细胞被细胞毒性Τ细胞杀死，从而离体消除了细胞内感染性病原体。因此，使用胞内感染病原体的抗原作为本发明的口服制剂待使用的抗原，有效地诱导了针对该抗原的细胞免疫，并且促进了通过诱导的细胞免疫消除感染了细胞内感染性病原体的细胞，并且可以预防或治疗细胞内感染性病原体感染性疾病。
[0070]细胞内感染性病原体的实例包括，但不特别限定于，病毒；细胞内寄生菌如立克次氏体属(Rickettsia)，衣原体属(Chlamydiae)，植原体属(Phytoplasma)，支原体属(Mycoplasma)等；细胞内寄生性原生动物如弓形虫属(Toxoplasma)，利什曼原虫属(Leishmania)，症疾症原虫(Malaria plasmodium)，血吸虫病(Schistosomiasis)，Phytomyxea等，优选病毒。
[0071]病毒的实例包括，但不特别限于，人乳头状瘤病毒(HPV)，HTLV-1，EBV，HCV，HBV，流感病毒(influenza virus)，脊髓灰质炎病毒(pol1 virus) ?日本脑炎病毒(Japaneseencephalitis virus)，麻疫病毒(measles virus)，腿腺炎病毒(mumps virus)，风疫病毒(rubella virus)，狂犬病病毒(rabies virus)，黄热病病毒(yellow fever virus)，水痕病毒(varicella virus)，HAV，登革热病毒(dengue virus)，轮状病毒属(rotavirus)，细小病毒属(parvovirus)，HIV等在一个实施方案中，病毒是致癌病毒，如HPV，HTLV-1，EBV，
在一个实施方案中，病毒是HPV。
[0072]在本发明中，当病原体抗原用作靶抗原时，病原体的内部抗原和表面抗原可作为病原体抗原。本发明的口服制剂在诱导细胞免疫的活性上是优良的，甚至当使用通过仅诱导体液免疫难接近的内部抗原作为病原体抗原时，诱导了针对内部抗原的细胞免疫，并且呈递内部抗原的细胞被细胞毒性T细胞杀死，从而从机体消除了病原体并且可以预防或治疗病原体感染性疾病。
[0073]在一个实施方案，在本发明的口服制剂中，将HPV抗原用作靶抗原。HPV抗原的实例包括 El，E2，E4，E5，E6，E7，Ll，L2 等。在这些 HPV 抗原中，El，E2，E4，E5，E6 和 E7 对应内部抗原。在前述HPV抗原中，E6和E7是在针对HPV感染性疾病的细胞免疫诱导的治疗效果上优良的。
[0074]在本发明中，病原体感染性疾病包括病原体感染，通过感染引起的疾病和症状。例如，在HPV的情况下，HPV的感染性疾病包括HPV感染；癌前损伤(通过HPV感染引起的子宫颈上皮内肿瘤(CIN))，宫颈癌，肛门癌，外阴和阴道癌，阴茎癌，口咽癌，尖锐湿疣等一部分。
[0075]在本发明的口服制剂中待使用的乳酸菌包括乳杆菌属(genus Lactobacillus)、链球菌属(genus Streptococcus)、乳球菌属(genus Lactococcus)、肠球菌属(genus Enterococcus)和双歧杆菌属(genus Bifidobacterium) 0 乳杆菌属的代表性实例包括嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus (L.acidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei，L.casei)、植物乳杆菌(Lactobacillus piantarum, L.pi ant arum)) > 发酉孝乳杆菌(Lactobacillus fermentum，L.ferementum)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii，L.delbrueckii)、Lactobacillus johnsonii，L.johnsonii LJI)、罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri, L.reuteri))、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri，L.gasseri))、马里乳杆菌(Lactobacillus mali，L.mali)、布赫纳乳杆菌(Lactobacillus buchneri，L.buchneri)、Lactobacillus gall inarum，L.gall inarum)、Lactobacillus amylovorus (L.amylovorus)、短乳杆菌(Lactobacillusbrevis, L.brevis))、Lactobacillus rhamnosus (L.rhamnosus)、高力口索酉爱奶乳杆菌(Lactobacillus kefir, L.kefir))、Lactobacillus paracasei (L.paracasei)、 卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus，L.crispatus)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillusbulgaricus, L.bulgaricus)等。链球菌属的代表性实例包括嗜热链球菌(Streptococcusthermophiles, S.thermophilus)、格氏链球菌(Streptococcus gordonii (S.gordonii)等。乳球菌属的代表性实例包括乳乳球菌(Lactococcus lactis (L.lactis))、(Lactococcuscremoris, L.cremoris)等。肠球菌属的代表性实例包括奠肠球菌(Enterococcusfaecalis, E.faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium, E.faecium)等。双歧杆菌属的代表性实例包括婴儿双岐杆菌(Bifidobacterium infant is, B.1nfant is)、两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum, B.bifidum)、长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum, B.longum)、假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudolongum, B.psuedolongum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium b