加而增加。据此推测，泰瑞米特钠在哺乳动物体内导致肝转氨酶 升高的风险低于来氟米特，在人体不产生肝脏毒性或低肝脏毒性的最大剂量约为200mg/d， 该剂量是来氟米特常规临床应用剂量的10倍。其优势在于，用于自身免疫病治疗时，在耐 受剂量范围内，可通过提高给药剂量以增加药物的疗效。
[0045]疾病模型动物实验还表明，泰瑞米特钠能有效改善系统性红斑狼疮小鼠的皮损、 淋巴结肿大和脾脏肿大等症状，降低尿蛋白、血清抗双链DNA(dsDNA)抗体和IL-17水平，其 总体疗效显著高于糖皮质激素和相同剂量来氟米特。
[0046] 药物组合物
[0047]本发明还提供包含泰瑞米特钠和药学上可接受的载体的药物组合物，可用于预防 和/或治疗自身免疫病。
[0048]"药学上可接受的载体"指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质， 它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。
[0049] "相容性"在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分（即泰瑞米特钠）以 及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。
[0050] 药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物（如羧甲基纤维素钠、乙基 纤维素钠、纤维素乙酸酯等）、明胶、滑石、固体润滑剂（如硬脂酸、硬脂酸镁）、硫酸钙、植物 油（如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等）、多元醇（如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等）、乳 化剂（如吐温? )、润湿剂（如十二烷基硫酸钠）、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐 剂、无热原水等。
[0051]本发明的泰瑞米特钠或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式 包括（但并不限于）：口服、直肠、肠胃外（静脉内、肌肉内或皮下）等。
[0052]用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。
[0053] 在这些固体剂型中，活性成分泰瑞米特钠与至少一种常规惰性赋形剂（或载体） 混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗 糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯 烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；（d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀 粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；（e)缓溶剂，例如石蜡；（f)吸收加速剂， 例如，季胺化合物；（g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土； 和⑴润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合 物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
[0054] 所述的固体剂型还可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它 们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道内的某 一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。
[0055] 用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。 除了活性成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶 剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺 以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物 等。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫 味剂和香料。
[0056] 除了活性成分外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山 梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
[0057] 用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、 悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和 非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
[0058] 使用药物组合物时，是将安全有效量的泰瑞米特钠或药物组合物施用于需要治疗 的哺乳动物（如人），其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而 言，日给药剂量通常为1~2000mg，优选20~500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、 病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
[0059] 在一优选例中，以泰瑞米特钠制备的药物组合物的配方和制备方法如下：
[0060] 按处方量称取糊精、乳糖、淀粉、羟丙纤维素，过筛（80目筛）使混合均匀；按处方 量称取泰瑞米特钠（过80目筛），以等量递增法投入到混合好的辅料中，并混合均匀；加 5%聚维酮K30水溶液制软材，20目筛制粒；60°C干燥；干颗粒用18目筛整粒；加适量硬脂 酸镁，混匀；中间体检查含量；压片、包薄膜衣、铝塑包装；外包装、入库。
[0061] 以上述制备工艺进行中试放大生产三批（每批不少于10000片），连续生产工艺稳 定，可以满足工业化生产的要求，质量满足如下特征：
[0062] 1)稳定性和有关物质含量：室温留样观察60个月，样品有关物质检查单个杂质均 小于0. 5 %，总杂质小于1 %。加速试验可致样品产生两个杂质，其中含量大于0. 1 %的为 N- (4-二氟甲基苯基）-2-氰基-乙酰胺。
[0063] 2)含量均匀度：采用UV法和HPLC法，3批样品均为A+1. 80S彡15. 0。
[0064] 3)崩解时限：以水为介质，温度为37°C，3批样品崩解时限为7-8分钟。
[0065] 4)溶出度：优化后的溶出条件为：以水900ml为溶出介质，转速为50转/分，温度 为37°C，取样时间为30分钟，取续滤液作为供试品溶液。在该方法下，3批样品的溶出度均 符合规定。
[0066] 5)微生物限度：根据中国药典2010版微生物限度检查法（附录XIJ)进行微生 物限度检查，三批样品均符合要求。
[0067] 含量及限度：采用HPLC方法和UV法测定泰瑞米特钠的含量范围为99% -102%。
[0068] 以上述组方所制成的胶囊剂饲喂beagle犬，活性组分泰瑞米特钠在beagle犬体 内的生物利用度高于等量的来氟米特。
[0069] 本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示 的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特 征的一般性例子。
[0070] 除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文 中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0071] 实施例1
[0072] 泰瑞米特钠的制备
[0073] 1. 1泰瑞米特的制备
[0074] 来氟米特溶于碱溶液中水解反应，酸化得泰瑞米特，过滤后得泰瑞米特湿品。此湿 品直接进入下一步反应。
[0075] 1.2泰瑞米特钠的制备
[0076] 泰瑞米特湿品投入氢氧化钠水溶液中，升温反应2小时，过滤掉不溶物，滤液降 至室温养晶，过滤、干燥的泰瑞米特钠粗品。经乙醇重结晶后得纯品泰瑞米特钠（纯度 > 99. 5) 〇
[0077] 实施例2
[0078] 泰瑞米特钠在人原代肝细胞的安全性评价
[0079] 本实验的目的是检测泰瑞米特钠对人肝细胞的毒性，并比较其与来氟米特和泰瑞 米特的肝细胞毒性大小，包括细胞活性实验（MTT)、乳酸脱氢酶（LDH)释放实验以及线粒体 膜电位实验。
[0080] 实验步骤：
[0081] 本实验选用大鼠原代肝细胞和人原代肝细胞。其中大鼠原代肝细胞来源于SD大 鼠，原代肝细胞的分离得到药物所IACUC2013-06-PGY-03批准。原代人肝细胞购自英潍捷 基（上海）贸易有限公司，批号HU4239。供试品为：泰瑞米特、泰瑞米特钠和来氟米特。
[0082] 大鼠原代肝细胞先采用1 %青链霉素，1 %谷氨酰胺，0. 1 %胰岛素，0.01 %地塞米 松，5%胎牛血清的WilliamsEMedium培养液培养3小时贴壁，然后采用含1 %青链霉素， 1 %L-谷氨酰胺，0.001 %地塞米松，1 %ITS的WilliamsEMedium培养液，人肝细胞采用 含1%青链霉素，5%胎牛血清，0.01%地塞米松，0.1%胰岛素，1%61此 &嫩乂~，1.5%羟乙 基哌嗪乙硫磺酸的WilliamsEMedium培养液，置于37°C，5%二氧化碳培养箱作单层细胞 培养。
[0083] 1.MTT实验
[0084] 在96孔培养板中接种细胞，每孔接种5万个细胞。细胞贴壁后除去培养液，加入 受试物稀释液l〇〇yL，每个剂量设6个复孔（剂量见表1);同时设定空白、阳性对照组。受 试物与细胞作用24h后，每孔加入MTT(5mg/mL)剂的20μL培养液，3h后加入100μL三联 液。作用l〇h后，在570nm测0D值。用Logit法计算受试物对细胞的IC5。值。
[0085] 表1.MTT实验受试物剂量设计
[0086]
[0087] 注：双氯芬酸，胺碘酮为阳性对照品；"一"表示未设该剂量。
[0088] 2.线粒体膜电位实验
[0089] 在96孔培养板中接种细胞，每孔约5万个细胞。细胞贴壁后除去培养液，加入受 试物稀释液l〇〇yL，每个剂量设6个复孔（剂量设计见表2);同时设空白、阳性对照组。受 试物与细胞作用3h后（阳性药仅作用细胞20min后），每孔加入TRME(四甲基若丹明乙酯 酸铵，1μM) 10μL。20min后，吸去上清液，加入100μL洗液(；BSA, 2mg/mL)。吸去洗液后， 在549/575nm检测吸光度。
[0090] 表2.线粒体膜电位实验剂量设计
[0091]
[0092] 注：CCCP(羰基氰化氯苯腙），为阳性对照品。
[0093] 3.乳酸脱氢酶释放实验
[0094] 在24孔培养板中接种大鼠和人肝原代细胞，每孔约25万个细胞；在96孔培养板 中接种人肝细胞，每孔约5万个细胞。细胞贴壁后除去培养液，加入供试品稀释液100μL， 每个剂量设6复孔（剂量设计见表3);同时设定空白、阳性对照组。供试品与细胞作用12h 后，将细胞培养板于4°C，1000g离心5min。每孔取20μL上清检测LDH(具体参见产品说明 书）。
[0095]表3.乳酸脱氢酶释放实验剂量设计