，上光剂，防腐剂，稳定剂，甜味剂，增稠剂，营养添 加剂和调味剂。
[0039] 在又一实施例中，如上所述，组合物包括药学上可接受的赋形剂。
[0040] 组合物也可W是食品。例如，该组合物可W是酸奶，饮料，冰洪淋或奶酪。
[0041] 无需进一步详细说明，我们认为本领域的技术人员可W根据本文的公开内容，将 本发明利用至最大限度。因此，W下的具体实施例应理解为说明专利之用，不能W此限定其 公开保护范围。
[004引实施例
[0043] 实施例1:乳酸菌产生的黄嚷岭氧化酶抑制活性
[0044] 将34株乳酸菌菌株分别接种到MRS平板上，并在37°C培养3天。细菌菌株从健康婴 儿粪便，牛粪，乳固体，培根，腐乳，植物园±壤，泡菜，酸菜中分离。用化1无菌接种环从平板 中刮下细菌，接种到IOml MRS肉汤培养基中，并在37°C下兼性厌氧条件下培养1天，得到接 种物。该接种物随后被加入到l%(v/v)MRS肉汤培养基中，37°C下兼性厌氧条件培养访。将 培养基离屯、，收集上清液用于黄嚷岭氧化酶抑制活性的分析。
[004引黄嚷岭氧化酶抑制活性的测定方法如下。首先，在96孔板中的每个孔中加入菌株 的培养基10山。然后，加入15化1的50mM PBS缓冲液及SOiil的150mM黄嚷岭。在每个孔中加入 10山的黄嚷岭氧化酶(0.1U)之前，在290皿下测定一初始吸收值(0时t)。在25°C下培养35分 钟后，再次测量其在290nm下的吸收值(0化知。每个样本的黄嚷岭氧化酶抑制活性(XOI)依 据下列公式来计算：
[0047] 结果如W下表1所示。在所测试的34株乳酸菌菌株中，有2株菌株[即，菌株121及菌 株巧3( W斜体字显示）]抑制黄嚷岭氧化酶活性超过40%。
[0048] 表1.乳酸菌菌株的黃嚷岭氧化酶抑制活性
[0049]
[0051 ] a数值W黄嚷岭氧化酶活性的抑制百分比来表示
[0052]实施例2:黄嚷岭氧化酶活性抑制的HPLC分析
[005引将乳酸菌菌株F73及m接种至MRS平板上，并在37°C溫度下培养3天。用叫无菌接 种环从平板中刮下细菌，接种到IOml MRS肉汤培养基中，并在37°C下培养1天，制备得到接 种物。该接种物随后被加入到MRS肉汤培养基中，并于37°C下培养7天。样本分别在第1天、第 2天及第7天从培养中移出、离屯、，收集上清液用于黄嚷岭氧化酶抑制活性的分析。
[0054] 在反应管中，先将SSOiil的黄嚷岭（50μg/ml，配于lOOmmol/L PBS中）及40iil的 50mmol/L PBS或40山的培养上清液进行预混合，之后加入80山的黄嚷岭氧化酶(0.1U)引发 反应。在30°C下培养30分钟后，加入等体积的无水乙醇终止反应。终止后的反应物透过0.25 WIi的膜过滤器过滤，黄嚷岭的含量通过HPLC分析。样本的黄嚷岭氧化酶抑制活性依据下列 公式来计算：
[0056] 结果如下表2所述。
[0057] 表2.黄嚷岭氧化酶的抑制活性
[0059 ] a样本在该培养天数被移出
[0060] b数值是W黄嚷岭氧化酶的抑制活性百分比来表示
[0061] 结果表明，乳酸菌菌株121的黄嚷岭氧化酶抑制活性高于菌株巧3。值得注意的是， 菌株121的黄嚷岭氧化酶抑制活性在发酵1天后达到最大值。延长菌株121的培养时间到7 天，不会增加黄嚷岭氧化酶抑制活性。
[0062] 实施例3:乳酸菌菌株121的鉴定
[0063] 乳酸菌菌株121分离自健康婴儿的粪便。分析表明，该菌株为革兰氏阳性、过氧化 氨酶及氧化酶阴性，并不具运动性。此外，该菌株不会制备内抱子，且可生长于好气及兼性 厌气运两种条件下。
[0064] 经过对菌株的16s rDNA序列（SEQ ID NO: 1)的分析，确认其与干酪乳杆菌 化 actobacillus casei)、副干酪乳杆菌副干酪亚种化 actobacillus paracasei subsp.Paracasei)、副干酪乳杆菌坚初亚种（Lactobacillus paracasei subsp.Tolerans)、鼠李糖乳杆菌W及玉米乳杆菌（LactobacilIus zeae)最相似。16s rDNA 序列的相似度高达98 %。
[0065] 化aK基因的部分序列（SEQ ID N0:2)的分析结果显示，菌株121与鼠李糖乳杆菌具 有99 %序列一致性。
[0066] 使用anal^ical profile index AP隙鉴定系统，菌株121也表现出具有发酵某些 醋类的能力的特性。此试验显示菌株121是鼠李糖乳杆菌菌株。
[0067] 申请人依据布达佩斯条约在2014年6月2日将鼠李糖乳杆菌菌株121寄存在国际菌 株寄存机构莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物及细胞培养物收集中屯、（Inhof fens化.7B，D-38124 Braunschweig GERMANY)。该菌株的保藏登记号为DSM 28876。
[0068] 实施例4:治疗尿酸血症的实验
[0069] 将鼠李糖乳杆菌121接种至MRS平板上，并于37°C下培养3天。W化1无菌接种环从 MRS平板上刮下细菌、接种至MRS肉汤培养基中，并于37°C下生长1天，制备得到接种物。上述 接种物（30ml)随后被加到放置化MRS肉汤培养基的5L发酵槽中，37°C下生长2天。再在 30(K)rpm转速下，将发酵液离屯、15分钟，收集上清液，并冷冻干燥，得到鼠李糖乳杆菌121发 酵产物。
[0070] WlCR小鼠作为实验动物。利用氧嗦酸钟(一种尿酸酶抑制剂)诱导小鼠血清中产 生高水平的尿酸。小鼠被禁食1小时，然后通过喂食管喂食食盐水或氧嗦酸钟(400mg/kg)Dl 小时之后，经氧嗦酸钟处理的小鼠被喂食盐水、异嚷岭醇（lOmg/kg)或如上述所制备的鼠李 糖乳杆菌121发酵产物(每只小鼠150mg或200mg，其被再悬浮于食盐水中）。每个实验组及对 照组各使用10只动物。在1小时后处死动物并分析在它们血清中的尿酸水平。结果显示于下 面的表3中。
[0071] 表3.鼠李糖乳杆菌121的发酵产物可降低实验动物中血清尿酸水平
[0073] a小鼠（每个条件N= 10)喂总体积为2(K)山的食盐水或被指定的化合物
[0074] 其它实施例
[0075] 在说明书掲示的所有特征可W任何组合方式进行组合。在本说明书中掲示的每个 特征可被一用作相同、等效或相似目的的替代特征所替换。因此，除非另有明确说明，所掲 示的每个特征只是同属系列的等效或相似特征中的一个实施例。
[0076]从W上说明，本领域技术人员可轻易地确定本发明的必要特征，并且可作出本发 明的各种改变及修饰W使其适应各种用法及条件，而不偏离其精神及范围。因此，其它实施 方案也落入本申请专利范围内。
【主权项】
1. 一种用于降低个体的尿酸水平的方法，该方法包括在培养基中培养鼠李糖乳杆菌形 成组合物，以及将组合物以有效量施用给有需要的个体以降低尿酸水平的步骤。2. 如权利要求1所述的方法，其中所述鼠李糖乳杆菌是鼠李糖乳杆菌121，其保藏登记 号为DSM 28876。3. 如权利要求1所述的方法，其中所述个体患有痛风或高尿酸血症。4. 如权利要求1所述的方法，进一步包括在施用组合物之前从组合物中去除鼠李糖乳 杆菌的步骤。5. 如权利要求1所述的方法，其中所述组合物以口服、肌内、皮内、静脉内、皮下、腹膜 内、鼻内或粘膜方式被施用。6. 如权利要求1所述的方法，其中所述培养基是MRS肉汤培养基、牛奶或果汁。7. 如权利要求1所述的方法，进一步包含冷冻干燥组合物以形成粉末的步骤。8. -种用于降低个体的尿酸水平的组合物，该组合物包含鼠李糖乳杆菌的代谢产物， 其中该代谢产物是黄嘌呤氧化酶活性抑制剂。9. 如权利要求8所述的组合物，其中所述鼠李糖乳杆菌是鼠李糖乳杆菌121，其保藏登 记号为DSM 28876。10. 如权利要求8所述的组合物，其中该组合物中没有鼠李糖乳杆菌。11. 如权利要求8所述的组合物，进一步包含一种药学上可接受的赋形剂，其选自由缓 冲剂、稀释剂、崩解剂、结合剂、粘合剂、润湿剂、聚合物、润滑剂、助流剂及调味剂组成的群 组。12. 如权利要求8所述的组合物，进一步包含一种食物成分，其选自酸度调节剂，抗结块 剂，抗氧化剂，填充剂，载体，乳化剂，增味剂，上光剂，防腐剂，稳定剂，甜味剂，增稠剂，营养 添加剂和调味剂组成的群组。13. -种用于降低个体的尿酸水平的组合物的制备方法，该方法包括将鼠李糖乳杆菌 接种到培养基，在培养基中培养鼠李糖乳杆菌得到组合物的步骤。14. 如权利要求13所述的方法，其中所述鼠李糖乳杆菌是鼠李糖乳杆菌121，其保藏登 记号为DSM 28876。15. 如权利要求13所述的方法，进一步包括从组合物中去除鼠李糖乳杆菌的步骤。16. 如权利要求13所述的方法，其中培养基是MRS肉汤培养基、牛奶或果汁。17. 如权利要求13所述的方法，进一步包括冷冻干燥组合物的步骤。18. 如权利要求13所述的方法，进一步包括通过巴氏杀菌、辐射、高压灭菌或过滤对组 合物进行灭菌的步骤。19. 如权利要求17所述的方法，其中培养是在37°C下进行2天。20. 如权利要求19所述的方法，其中去除步骤之前的培养密度为1 X 109个细胞/ml。
【专利摘要】本发明公开一种用于抑制黄嘌呤氧化酶及用于降低尿酸水平的方法，该方法使用一种在培养基中培养鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus？rhamnosus)所获得的组合物。本发明还公开一种用于降低个体中的尿酸水平的组合物，其包括鼠李糖乳杆菌代谢产物；以及公开一种上述组合物的制备方法。
【IPC分类】A23C19/09, A23C9/13, C12R1/225, A61P19/06, A23L2/52, C12N1/20, A23G9/36, A23L33/135, A61K35/747
【公开号】CN105497078
【申请号】CN201510519096
【发明人】陈晓真, 陈彦霖, 许薰尹, 万诗韵, 陈美惠, 余立文
【申请人】财团法人食品工业发展研究所
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年8月22日
【公告号】US20160051602