一种合生元微胶囊及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种合生元微胶囊及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]大豆多肽具有优良的消化吸收和加工特性，能促进微生物的生长发育，已被广泛应用于运动食品、运动饮料、降压食品以及恢复疲劳食品等保健品中。
[0003]布拉迪酵母菌可以降低大肠杆菌感染过程中促炎症因子的分泌;在炎性肠道疾病中具有保护作用。布拉迪酵母菌可调节抗炎症因子IL-10表达水平上升的同时，抑制前炎症细胞因子TNF-α和IL-6等的降低。因而对于肠炎具有潜在的预防和治疗作用。
[0004]然而布拉迪酵母菌在生长过程中，不形成芽胞，抗逆性较差，在液体条件下难以长期保存。在体内，作为外源菌，受胃肠道环境影响较大，容易丢失活性，从而失去其益生功效，其抗炎作用也难以显现。
【发明内容】
[0005]为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种合生元微胶囊及其制备方法与应用，该合生元微胶囊即能够发挥益生元的健康功效，又能发挥益生菌的益生作用。
[0006]本发明所采用的技术方案为:
[0007]—种合生元微胶囊，包括囊材和壁材，所述壁材由液体石蜡和Span 80组成，所述囊材中含有大豆多肽和布拉迪酵母菌。
[0008]—种所述的合生元微胶囊的制备方法，包括以下步骤:
[0009](I)囊材溶液的配制:将大豆多肽加入到海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液中，至大豆多肽的浓度为50-150g/L为止，混合均匀制成大豆多肽溶液;再向所述大豆多肽溶液中加入布拉迪酵母菌种子液，至布拉迪酵母菌的浓度为(1-2) X 106cfu/mL为止，混合均勾制成合生元混合相；
[0010](2)壁材溶液的配制:在液体石蜡中添加Span 80，所述Span 80的添加量为所述液体石蜡体积的0.5-1.5%，混合均匀后制成油相；
[0011](3)合生元微胶囊的制备:在搅拌下，按所述合生元混合相与所述油相的体积比为1: 3-1: 7，向所述油相中加入所述合生元混合相，混合均匀后，边搅拌边逐滴加入冰醋酸进行固定化5-15分钟，然后停止搅拌;直到待培养合生元微胶囊沉降后，先分离出待培养微胶囊，再用无菌水清洗1-3次，得到待培养合生元微胶囊;冰醋酸是浓度为98%w/v的无水乙酸的水溶液；
[0012](4)合生元的培养:将所述待培养合生元微胶囊接入到发酵液中，将布拉迪酵母菌培养至对数生长末期，过滤分离微胶囊得到合生元微胶囊。
[0013]进一步的，步骤(4)后还包括步骤(5)合生元微胶囊的干燥:将所述合生元微胶囊进行干燥，得到合生元微胶囊干产品。
[0014]更进一步的，所述干燥的温度为45°C，所述干燥的时间为3小时。
[0015]进一步的，步骤(I)中所述海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液是按照以下步骤制备得到的:
[0016]1:海藻酸钠溶液的制备:配制浓度为0.6-1.0g/L的海藻酸钠溶液，灭菌备用；I1:复合水溶液的制备:向步骤I得到的所述海藻酸钠溶液中添加CaC03，至所述CaC03的浓度为0.8-1.2g/L为止，混合均匀后制得海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液。
[0017]更进一步的，步骤I中所述海藻酸钠溶液的浓度为0.8g/L，所述灭菌备用为在115°C下灭菌20分钟，在4°C下保存备用;步骤II中所述CaC03的浓度为1.0g/L。
[0018]进一步的，步骤(3)中所述合生元混合相与所述油相的体积比为1:5;所述冰醋酸与所述油相的体积比为1:8000。
[0019]进一步的，步骤(3)中所述搅拌速度为400-500rpm;所述固定化的时间为10分钟；所述待培养合生元微胶囊的粒径为300-400微米。
[0020]所述的合生元微胶囊在制备治疗结肠炎的药物中的应用。
[0021]所述的合生元微胶囊在制备治疗结肠炎的保健品中的应用。
[0022]微胶囊化技术在保护生物活性分子、组织和细胞以对抗不利环境方面取得了较好的成效。大豆多肽能促进微生物的生长发育。本发明采用发酵前包被技术，首先将大豆多肽和布拉迪酵母菌种子细胞同时包被在同一微胶囊媒介中，之后加入特定培养基进行包被后培养，使布拉迪酵母在微胶囊保护作用和大豆多肽促生长作用的双重作用下增殖达一定的密度，收集微胶囊，从而得到即含有大豆多肽，又含有布拉迪酵母菌的微囊化合生元产品，从而使布拉迪酵母菌的益生作用得以最大限度的发挥。
[0023]本发明的有益效果为:本发明的合生元微胶囊将大豆多肽和布拉迪酵母菌同时包被到同一微胶囊内，既发挥了大豆多肽对益生菌的促生长作用，又发挥了微胶囊对微生物的活性保护作用；
[0024]生产的产品为合生元产品，即能够发挥益生元(大豆多肽)的健康功效，又能发挥益生菌(布拉迪酵母)的益生作用；
[0025]采用发酵前包被技术，布拉迪酵母获得了再次增殖的机会，从而容易获得更高密度和活性的合生元微胶囊。
【附图说明】
[0026]图1是实施例1中待培养合生元微胶囊的扫描电镜图，放大倍数为10000倍；
[0027]图2是实施例1所制备的合生元微胶囊的扫描电镜图，放大倍数为10000倍；
[0028]图3是结肠炎小鼠血液炎症因子含量；
[0029]图4是小鼠病理切片结果；
[0030]图5是不同处理结肠炎小鼠的体重变化。
【具体实施方式】
[0031]下面结合具体实施例对本发明作更详细的描述:
[0032]本发明所用的布拉迪酵母菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，分类命名为布拉迪酵母菌(Saccharomyces boulardii)，保藏号:CGMCC N0.10381。
[0033]实施例1
[0034]如图1和图2所示，本发明提供了一种合生元微胶囊，包括囊材和壁材，壁材包括液体石錯和Span 80，囊材中含有大豆多肽和布拉迪酵母菌。
[0035]其制备方法，包括以下步骤:
[0036](I)微胶囊囊材溶液的配制:配制浓度为0.8g/L的海藻酸钠溶液，灭菌备用；向得至IJ的海藻酸钠溶液中添加CaCO3，至CaCO3的浓度为1.0g/L为止，混合均匀后制得海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液。
[0037]将大豆多肽加入到海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液中，至大豆多肽的浓度为100g/L为止，混合均匀制成大豆多肽溶液;再向大豆多肽溶液中加入布拉迪酵母菌种子液，至布拉迪酵母菌的浓度为1.0X 106cfu/mL为止，混合均勾制成合生元混合相；
[0038](2)油相的配制:在液体石蜡中添加Span 80,Span 80的添加量为液体石蜡体积的0.1%，混合均匀后制成油相；Span 80为黄色油状液体，表面活性剂，能分散于温水和乙醇中，溶于丙二醇、液体石蜡、乙醇、甲醇或醋酸乙酯等有机溶剂中，常用作油包水型乳剂的乳化剂。
[0039](3)合生元微胶囊的制备:在400rpm搅拌下，按合生元混合相:油相的体积比为1:5，向油相中加入合生元混合相，搅拌5分钟，混合均匀形成稳定的乳化液后，逐滴加入冰醋酸解离出碳酸钙中的Ca2+，与海藻酸钠发生胶凝化反应，形成海藻酸钙，固定化10分钟，停止搅拌;直到待培养合生元微胶囊沉降后，先分离出待培养微胶囊，再用无菌水清洗3次，通过分液漏斗分离沉降微胶囊得到粒径为300-400微米的待培养合生元微胶囊；
[0040](4)合生元的培养:将待培养合生元微胶囊接入到YPD培养基中，将布拉迪酵母菌发酵培养至对数生长末期，过滤分离微胶囊得到合生元微胶囊。
[0041](5)合生元微胶囊的干燥:将所述合生元微胶囊在45°C下进行干燥3小时，得到合生