[0086](5)结果分析
[0087]①结肠炎小鼠血液炎症因子含量分析
[0088]白细胞介素(IL-6)是一个多功能的细胞因子，它在宿主防御，急性期的免疫反应，神经细胞功能和造血过程中发挥重要作用。在炎症病理条件下，血清IL-6的水平会得到提高。如图3-a所示，结肠炎模型组(DSS)小鼠血清中IL-6含量显著高于空白对照组(P<
0.05);治疗组包括80111&1(1^组和611-13011131(1^组，这两组的11^-6均显著低于055组(？<0.05)，且en-boulardii组治疗效果最佳，其IL-6含量甚至于正常组之间无显著性差异；
[0089]肿瘤坏死因子-a(TNF-a)是一种由激活的巨噬细胞产生的能抑制成骨细胞和刺激破骨细胞的细胞因子，与IL-6—样，是主要的促炎症细胞因子，在各类炎症的发展过程中具有重要的作用。如图3_b结果表明，DSS小鼠的血液TNF-α含量显著提升，en-boulardii组小鼠血清中TNF-α含量降低最明显，其含量几乎达到了与正常组一致的水平，即与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05)。说明微囊化合生元起到了很好的抑制TNF-α表达的作用；
[0090]小鼠血液IL-10含量(n = 12)IL-10是一种多功能负性调节因子，主要由Th2细胞、活化的B细胞、单核细胞、巨噬细胞产生，它参与免疫细胞、炎症细胞、肿瘤细胞等多种细胞的生物调节，是一种抗炎性因子，发挥下调炎症反应，拮抗炎性介质的作用。图3表明，DSS小鼠血液中IL-10的表达受到了显著的抑制。而治疗组的小鼠血清IL-10含量均显著高于DSS组(Ρ<0.05)，且en-boulardii组效果最为显著(Ρ<0.05)；
[0091]上述促炎症和抗炎症因子的检测结果表明，布拉迪酵母菌只有在制备成包含了大豆肽的微胶囊合生元后，才真正发挥了炎症因子的调节作用。
[0092]②不同处理结肠炎小鼠的结肠病理分析
[0093]正常组小鼠结肠组织腺体排列整齐，隐窝正常，杯状细胞无减少，未见粘膜糜烂，出血(图4-A);DSS模型组小鼠结肠病变较轻部位可见部分隐窝破坏变形，少量淋巴结增生，腺体排列紊乱，杯状细胞减少。重者可见全结肠多灶性小溃疡或大面积深层溃疡，隐窝缺损明显，组织结构紊乱，粘膜糜烂，出血、坏死，部分上皮细胞残留或完全破坏，炎症主要累及黏膜，少数可达黏膜下层和浆膜层，浸润的炎症细胞以中性粒细胞为主，伴有少量单核、淋巴细胞(图4-B) C3Boulardii组结肠状态并未见明显好转(见图4-C)。而en-boulardii组小鼠粘膜缺失不同程度减少，只有小部分腺体不完整，少见粘膜糜烂，出血、坏死现象，炎症细胞浸润少，炎症程度较DSS组明显减轻，显示了良好的治疗效果(见图4-D)。
[0094]③不同处理结肠炎小鼠的体重变化分析
[0095]DSS结肠炎组小鼠体重下降明显，Boulardi i组的小鼠体下降也较为严重，而en_boulardii组，小鼠体重下降得到了很好的改善，其体重变化几乎和正常组小鼠一致。因此，本发明微囊化合生元对结肠炎小鼠的病症改善具有显著的效果。且本发明不含任何抗生素或其他类化学药物。其作为一种无抗类产品在饲料、食品、保健品甚至医药行业生产中都具有很强的实际应用价值。
[0096]本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种合生元微胶囊，其特征在于:包括囊材和壁材，所述壁材由液体石錯和Span 80组成，所述囊材中含有大豆多肽和布拉迪酵母菌。2.—种如权利要求1所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)囊材溶液的配制:将大豆多肽加入到海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液中，至大豆多肽的浓度为50-150g/L为止，混合均匀制成大豆多肽溶液;再向所述大豆多肽溶液中加入布拉迪酵母菌种子液，至布拉迪酵母菌的浓度为(1-2) X 106cfu/mL为止，混合均匀制成合生元混合相； (2)壁材溶液的配制:在液体石蜡中添加Span80，所述Span 80的添加量为所述液体石蜡体积的0.5-1.5%，混合均匀后制成油相； (3)合生元微胶囊的制备:在搅拌下，按所述合生元混合相与所述油相的体积比为1:3-1:7，向所述油相中加入所述合生元混合相，混合均匀后，边搅拌边逐滴加入冰醋酸进行固定化5-15分钟，然后停止搅拌;直到待培养合生元微胶囊沉降后，先分离出待培养微胶囊，再用无菌水清洗1-3次，得到待培养合生元微胶囊； (4)合生元的培养:将所述待培养合生元微胶囊接入到发酵液中，将布拉迪酵母菌培养至对数生长末期，过滤分离微胶囊得到合生元微胶囊。3.根据权利要求2所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:步骤(4)后还包括步骤(5)合生元微胶囊的干燥:将所述合生元微胶囊进行干燥，得到合生元微胶囊干产品。4.根据权利要求3所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:所述干燥的温度为45°C，所述干燥的时间为3小时。5.根据权利要求2所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:步骤(I)中所述海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液是按照以下步骤制备得到的: I:海藻酸钠溶液的制备:配制浓度为0.6-1.0g/L的海藻酸钠溶液，灭菌备用；I1:复合水溶液的制备:向步骤I得到的所述海藻酸钠溶液中添加CaCO3，至所述CaCO3的浓度为0.8_1.2g/L为止，混合均匀后制得海藻酸钠-碳酸钙复合水溶液。6.根据权利要求5所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:步骤I中所述海藻酸钠溶液的浓度为0.8g/L，所述灭菌备用为在115°C下灭菌20分钟，在4°C下保存备用;步骤II中所述CaCO3的浓度为1.0g/L。7.根据权利要求2所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:步骤(3)中所述合生元混合相与所述油相的体积比为1:5;所述冰醋酸与所述油相的体积比为1:8000。8.根据权利要求2所述的合生元微胶囊的制备方法，其特征在于:步骤(3)中所述搅拌速度为400-500rpm;所述固定化的时间为10分钟;所述待培养合生元微胶囊的粒径为300-400微米。9.如权利要求1或根据权利要求2-8任一项所述的合生元微胶囊在制备治疗结肠炎的药物中的应用。10.如权利要求1或根据权利要求2-8任一项所述的合生元微胶囊在制备治疗结肠炎的保健品中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种合生元微胶囊及其制备方法与应用，本发明的合生元微胶囊的壁材由液体石蜡和Span？80组成，囊材中含有大豆多肽和布拉迪酵母菌，通过先配制囊材溶液及油相，然后混合制成待培养合生元微胶囊，最后进行发酵培养的方法制成成品。本发明的有益效果为：本发明的合生元微胶囊将大豆多肽和布拉迪酵母菌同时包被到同一微胶囊内，既发挥了大豆多肽对益生菌的促生长作用，又发挥了微胶囊对微生物的活性保护作用；其成品即能够发挥益生元的健康功效，又能发挥益生菌的益生作用；采用发酵前包被技术，布拉迪酵母获得了再次增殖的机会，从而容易获得更高密度和活性的合生元微胶囊。
【IPC分类】A23K20/147, A61K36/064, A61K9/50, A23L33/14, A61P1/00, A23K10/18, A61K36/48, A61K38/01, A61K47/44, A23L33/18, A61K47/26, A23L33/00, A61P29/00
【公开号】CN105534951
【申请号】CN201610008368
【发明人】魏永刚, 栾兆文
【申请人】魏永刚
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月8日