香菇菌多糖的应用_2

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t;0. 05 ;
[0024] 图5是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠长度、大体及组织病变的影 响的示意图;
[0025] 图5A是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠长度影响的示意图;
[00%] 图5B是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠大体病变影响的示意图;
[0027] 图5C是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠组织显微镜下病变影响的 不意图;
[0028] 图6是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠长度的影响,#,与空白对照 组相比,P<〇. 05 ;*,与DSS模型对照组相比,P<0. 05 ;
[0029] 图7是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠大体病变的影响,#,与空白 对照组相比,P<〇. 05 ;*,与DSS模型对照组相比,P<0. 05 ;
[0030] 图8是香茹菌多糖对DSS诱导的结肠炎慢性期结直肠组织病变的影响,#,与空白 对照组相比,P<〇. 05 ;*,与DSS模型对照组相比,P<0. 05 ;
[0031] 图9是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病血便影响的示意图; 阳03引图10是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病模型小鼠体重的影响,*,与TNBS模型 组和阳性对照药SASP组相比,P<0. 05 ;
[0033] 图11是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病结直肠长度影响的示意图;
[0034] 图12是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病结直肠长度的影响,#,与未造模的 50%乙醇组相比,P<0. 05, *,与TNBS模型组和阳性对照药SASP组相比,P<0. 05 ;
[0035] 图13是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病结直肠大体病变的影响;W及
[0036] 图14是香茹菌多糖对TNBS诱导的克罗恩病结直肠组织病变的影响。
【具体实施方式】
[0037] 下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例,本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的 范围。
[0038] 实施例1香茹菌多糖对5% DSS诱导的慢性溃瘍性结肠炎急性期的治疗作用
[0039] 实验材料;
[0040] SPF 级 C57 小鼠 18 ~22g ; 阳OW 硫酸葡聚糖值城购自AMRESCO公司;
[0042] 香茹菌多糖购自开封制药(集团)有限公司,为灰黄色粉末,由开封制药(集团) 有限公司提供,批号:20130914,总糖含量为64. 3%,多糖含量为60. 0%,符合中国药典 2010年版二部。 柳43] 实验方法:
[0044] 1.实验鼠在标准化动物房环境中适应7天,给予标准动物饲料,饮用高压灭菌水, 并及时更换垫料(每周2-3次)。
[0045] 2.配置5% DSS溶液:使用生理盐水按照重量体积比配制5% DSS溶液,配制好的 DSS溶液在4 °C冰箱中存放。
[0046] 3.实验开始后,按每只小鼠每天的饮水量6ml计算,每次在小鼠水瓶中倒入每日 饮水量的DSS溶液给予小鼠自由饮用(空白对照组小鼠饮用正常蒸馈水),次日补充DSS溶 液至日饮水量。DSS溶液共给予7天。
[0047] 4.末次给予DSS24小时后,对小鼠进行分组灌胃给药,分为3组谊白对照组, 模型组和香茹菌多糖组,每组10只。空白对照组小鼠和模型组小鼠每天给予生理盐水 (NS)O. ImL/只/天,香茹菌多糖组小鼠给予香茹菌多糖(20mg/kg),给药周期7天。
[0048] 5.开始造模同时记录小鼠的每日饮食量,并称量体重,观察小鼠一般生活状态及 有无血便。
[0049] 6.给药7天后对每只小鼠摘眼球取血,待测血清中各炎症因子的变化。取小鼠的 直结肠并测量长度,眼肠系膜方向降结肠纵向剪开,清洗粪便,固定于10%中性福尔马林 中。
[0050] 7.固定后流水冲洗,依次进行脱水、石蜡包埋、切片、肥染色,显微镜下观察病理 切片并进行评分。评分标准如下:
[0051]
[0052] 通过5%硫酸葡聚糖钢值S巧诱导急性期结肠炎小鼠模型,观察小鼠的一般状态、 排便情况等。结果表明,空白对照组小鼠十分活跃,皮毛光滑;模型对照组小鼠精神萎靡,懒 动,皮毛粗糖无光泽,而香茹菌多糖组小鼠一般状态良好,较为活跃,皮毛光滑,毛色发亮, 食欲好转。在给予DSS后的第3天发现,模型对照组小鼠有软便情况出现,第4天开始出现 腹泻,且可见肉眼血便。香茹菌多糖组小鼠脈血便和粘液便消失,大便成型。给药7天后剪 开剖取结直肠并测量结直肠长度,可见香茹多糖组结直肠长度明显长于对模型对照组(参 考图1A,图2)将结直肠沿肠系膜纵行剖开,肉眼观察各组小鼠肠道大体形态改变。DSS急 性结肠炎动物模型中,W结肠末端病变为主,可设及全结肠,表现为小鼠病变结肠连续性水 月中,肠道透壁性坏死。模型组小鼠粘膜充血、水肿、糜烂和溃瘍形成,溃瘍面大,界限清楚,炎 症明显,部分肠壁增厚,部分小鼠结肠与周围组织粘连(参考图1B、图3)。香茹菌多糖组小 鼠结肠炎症病变明显轻于模型组,轻度炎症充血、水肿,未见明显糜烂或溃瘍(参考图1B、 图4),且组间差异具有显著性(P<0. 05)。取病变结肠部位,经10%中性福尔马林固定、脱 水、石蜡包埋、组织切片、肥染色,观察组织形态学变化,并进行评分。显微镜下观察小鼠结 肠粘膜组织,正常组小鼠结肠组织结构规则,腺体排列整齐,少量炎性细胞浸润。模型组小 鼠结肠粘膜遭严重破坏,部分有缺损,结肠组织内充血、水肿,粘膜上皮可见有大量中性粒 细胞、淋己细胞及浆细胞浸润,W中性粒细胞浸润为主;粘膜内腺体排列素乱、变形。香茹菌 多糖组小鼠病变减轻,粘膜完整,溃瘍均见愈合,溃瘍灶表面由新生的上皮细胞覆盖,炎性 细胞浸润较模型组明显减少(参考图1C),评分值明显低于模型对照组,差异具有统计学意 义(P<0. 05,参考图4)。
[0053] W结直肠粘膜的组织评分巧视为治愈计算,香茹菌多糖对5% DSS诱导的慢性溃 瘍性结肠炎急性期的治疗作用中,治愈率为43. 8 %。
[0054] 实施例2香茹菌多糖对1 % DSS诱导的慢性溃瘍性结肠炎慢性期的治疗作用 阳〇5引 实验材料;
[0056] SPF 级 C57 小鼠 18 ~22g ;
[0057] 硫酸葡聚糖值城购自AMRESCO公司;
[005引香茹菌多糖购自开封制药(集团)有限公司,为灰黄色粉末,由开封制药(集团) 有限公司提供,批号:20130914,总糖含量为64. 3%,多糖含量为60. 0%,符合中国药典 2010年版二部。
[0059] 实验方法:
[0060] 1.实验鼠在标准化动物房环境中适应7天,给予标准动物饲料,饮用高压灭菌水, 并及时更换垫料(每周2-3次)。
[0061] 2.配置1 % DSS溶液:使用生理盐水按照重量体积比配制1 % DSS溶液,配制好的 DSS溶液在4 °C冰箱中存放。
[00创 3.实验开始后,按每只小鼠每天的饮水量6ml计算,每次在小鼠水瓶中倒入每日 饮水量的DSS溶液给予小鼠自由饮用(空白组小鼠正常饮用蒸馈水),次日补充DSS溶液至 日饮水量。DSS溶液共给予20天。 阳06引 4.末次给予DSS24小时后,对小鼠进行分组灌胃给药,分为3组谊白对照组、模 型对照组和香茹菌多糖组,每组10只小鼠。空白对照组小鼠给予生理盐水(N巧0. 1血/只 /天,香茹菌多糖组小鼠给予3mg/mL香茹菌多糖0.1 mL/只/天,给药周期20天。
[0064] 5.开始造模同时应记录小鼠的每日饮食量,并称量体重,观察小鼠一般生活状态 及有无血便。 阳0化]6.给药20天后对每只小鼠摘眼球取血,检测血清中各炎症因子的变化。取小鼠 的直结肠并测量长度,眼肠系膜方向降结肠纵向剪开,清洗粪便,固定于10%中性福尔马林 中。
[0066] 7.固定后流水冲洗,依次进行脱水、石蜡包埋、切片、肥染色,显微镜下观察病理 切片并进行评分。评分标准如下:
[0068] 通过1%硫酸葡聚糖钢值S巧诱
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