一种隐丹参酮醇质体及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了一种隐丹参酮醇质体及其制备方法和应用。所述隐丹参酮醇质体以100mL计，原料组成为：隐丹参酮0.01～0.1g；磷脂0.5～8g；药用低分子量醇20～45mL；余量为水，其制备方法为：(1)将隐丹参酮和磷脂溶解于药用低分子量醇中获得醇溶液；(2)在搅拌下将水缓慢加入醇溶液中；(3)将步骤(2)所得混合物进行超声处理，然后挤压通过微孔滤膜，即制得所述隐丹参酮醇质体。本发明通过加入磷脂和药用低分子量醇，将隐丹参酮制成醇质体，使用本发明隐丹参酮醇质体制备的凝胶制剂，作为皮肤外用药物，药物在皮肤中的滞留量增加，提高皮肤中的药物浓度，对于痤疮的治疗效果更好，并且皮肤刺激性小。
【专利说明】
-种隐丹参酬醇质体及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明设及药物制剂领域，特别是设及一种隐丹参酬醇质体及其制备方法和应 用。
【背景技术】
[0002] 瘦疮是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病，主要好发于青少年，约85 %的 青少年曾受此疾病影响，对青少年的屯、理和社交影响很大，但青春期后往往能自然减轻或 痊愈。临床表现W好发于面部的粉刺、丘疹、脈瘤、结节等多形性皮损为特点。
[0003] 瘦疮的发生主要与皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺导管堵塞、细菌感染和炎症反应等 因素密切相关。进入青春期后人体内雄激素特别是睾酬的水平迅速升高，促进皮脂腺发育 并产生大量皮脂。同时毛囊皮脂腺导管的角化异常造成导管堵塞，皮脂排出障碍，形成角质 栓即微粉刺。毛囊中多种微生物尤其是瘦疮丙酸杆菌大量繁殖，瘦疮丙酸杆菌产生的脂酶 分解皮脂生成游离脂肪酸，同时趋化炎症细胞和介质，最终诱导并加重炎症反应。
[0004] 皮损好发于面部及上胸背部。瘦疮的非炎症性皮损表现为开放性和闭合性粉刺。 闭合性粉刺(又称白头）的典型皮损是约1毫米大小的肤色丘疹，无明显毛囊开口。开放性粉 刺(又称黑头)表现为圆顶状丘疹伴显著扩张的毛囊开口。粉刺进一步发展会演变成各种炎 症性皮损，表现为炎性丘疹、脈瘤、结节和囊肿。炎性丘疹呈红色，直径1~5毫米不等;脈瘤 大小一致，其中充满了白色脈液;结节直径大于5毫米，触之有硬结和疼痛感;囊肿的位置更 深，充满了脈液和血液的混合物。运些皮损还可融合形成大的炎性斑块和窦道等。炎症性皮 损消退后常常遗留色素沉着、持久性红斑、凹陷性或肥厚性癒痕。临床上根据瘦疮皮损性质 和严重程度将瘦疮分为3度、4级：1级（轻度）：仅有粉刺;2级（中度）：除粉刺外，还有一些炎 性丘疹;3级（中度）：除粉刺外，还有较多的炎性丘疹或脈瘤;4级(重度）：除有粉刺、炎性丘 疹及脈瘤外，还有结节、囊肿或癒痕。
[0005] 尽管目前有多种治疗瘦疮的药物，但是均存在不能针对瘦疮所有病因、产生副作 用等缺陷。
[0006] 隐丹参酬是中药丹参的一种疏水性提取物，被认为是W丹参或丹参提取物为组成 成分的治疗瘦疮的中药方剂或中成药的有效成分之一。隐丹参酬具有多种药理活性，其治 疗瘦疮的机制通常认为与其抗菌、抗炎和抗雄激素活性有关。但是隐丹参酬的水溶性和脂 溶性极差，只溶于乙醇等少数有机溶剂，口服生物利用度很低。局部给药是隐丹参酬治疗瘦 疮的理想给药方式。但是由于皮肤的屏障作用和隐丹参酬本身的扩散能力差，普通的局部 给药制剂不能发挥隐丹参酬的最佳疗效。
[0007] 醇质体是一种含有较高浓度低分子量醇的新型脂质体，具有高度变形性和高包封 率，能增加药物的经皮渗透速率和药物在皮肤内的含量。
【发明内容】
[000引针对现有技术的不足，本发明提供了一种隐丹参酬醇质体，利用该隐丹参酬醇质 体制备的凝胶制剂进行皮肤外用的局部给药，对隐丹参酬具有更好的吸收，皮肤中的药物 滞留量大大提高，并且皮肤刺激性小。
[0009] -种隐丹参酬醇质体，W lOOmL计，原料组成为：
[0010] 隐丹参酬0.01~O.lg;
[00川憐脂0.5~8g;
[001^ 药用低分子量醇20~45ιΛ;
[001引余量为水，
[0014]其制备方法为：
[0015] (1)将隐丹参酬和憐脂溶解于药用低分子量醇中获得醇溶液；
[0016] (2)在揽拌下将水缓慢加入醇溶液中；
[0017] (3)将步骤(2)所得混合物进行超声处理，然后挤压通过微孔滤膜，即制得所述隐 丹参酬醇质体。
[001引所述超声处理的功率为300~600瓦，工作1~3秒间歇2~4秒，共50~70次;所述微 孔滤膜的孔径大小为0.22μπι。超声条件和微孔滤膜的孔径大小可根据需要获得的隐丹参酬 醇质体的粒径大小进行调整优化。优选的，所述超声处理的功率为400瓦，工作2秒间歇3秒， 共60次;所述微孔滤膜的孔径大小为0.22μπι。
[0019] 优选的，所述隐丹参酬醇质体的粒径为50~400nm，外观为圆形或楠圆形。当粒径 过大或过小时，皮肤对隐丹参酬醇质体的吸收会受到影响。
[0020] 所述憐脂为大豆憐脂、卵憐脂、憐脂酷胆碱和憐脂酷胆碱衍生物中的一种或多种 的混合。其中，所述的大豆憐脂是从大豆中提取的产物，是由甘油、脂肪酸、胆碱或胆胺所组 成的醋，大豆憐脂的组成成分复杂，主要含有卵憐脂、脑憐脂、肌醇憐脂及其他憐脂。所述卵 憐脂为广义上的概念，是从大豆或蛋黄中提取的大豆卵憐脂或蛋黄卵憐脂，而不是指狭义 上的单一成分的憐脂酷胆碱。所述憐脂酷胆碱衍生物为常用的，比如聚乙二醇-憐脂酷胆碱 和二油酷憐脂酷乙醇胺等。
[0021] 低分子量醇为碳原子在3个及3个W下的醇类，包括甲醇、乙醇和丙醇。而本发明设 及药物，所W对于不能用于制药或明显有毒性的低分子醇，比如甲醇，不能被用于本发明隐 丹参酬醇质体的原料。所W，本发明所述的药用低分子量醇是指排除了甲醇的低分子量醇， 包括乙醇、乙二醇、正丙醇、异丙醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇和丙Ξ醇。优选的，所述药用低 分子量醇为乙醇和丙二醇中的一种或两种混合。
[0022] 本发明还提供了所述隐丹参酬醇质体在制备用于治疗瘦疮的外用制剂中的应用。
[0023] 本发明还提供了一种用于治疗瘦疮的外用制剂，其有效成分为所述的隐丹参酬醇 质体。
[0024] 优选的，所述外用制剂为凝胶制剂。隐丹参酬醇质体为液态状，也可W直接作为液 体制剂使用，但作为外用药来说，直接涂抹液体使用不便。而做成凝胶制剂涂抹使用时比较 方便。
[0025] 优选的，所述凝胶制剂使用的凝胶剂为卡波姆。卡波姆是W季戊四醇等与丙締酸 交联得到的丙締酸交联树脂，是一类非常重要的流变调节剂，中和后的卡波是优秀的凝胶 基质，有增稠、悬浮等重要用途，工艺简单，稳定性好，广泛应用于乳液、膏霜、凝胶中。粉末 状的卡波姆一般使用氨氧化钢来调节pH，当抑调节到大约为6~別寸便变成凝胶状。
[0026] 优选的，所述卡波姆的型号为974型。卡波姆974增稠效果好，在高粘度时具有永久 的稳定性，在水溶液中具有短流性。
[0027] 本发明通过加入憐脂和药用低分子量醇，将隐丹参酬制成醇质体，使用本发明隐 丹参酬醇质体制备的凝胶制剂，作为皮肤外用药物，使得皮肤对于隐丹参酬具有更好的吸 收效果，药物在皮肤中的滞留量增加，提高皮肤中的药物浓度，对于瘦疮的治疗效果更好， 并且皮肤刺激性小。
【附图说明】
[0028] 图1为实施例1制备的隐丹参酬醇质体的透射电镜图；
[0029] 图2为实施例9制备的隐丹参酬醇质体和对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶制剂的 体外透皮曲线图；
[0030] 图3为药效学研究病理切片图，其中，A:未治疗组，B:对比例1组，C:实施例9组。
【具体实施方式】
[0031] 实施例1~8
[0032] 隐丹参酬醇质体制备，各实施例配方如表1所示。
[0033] 表 1
[0034]
[0035]
[0036] W上各成分中，乙醇和丙二醇W体积计，单位为毫升(mU，其余均W重量计，单位 为克。各实施例中的憐脂种类如表2所示，其中实施例2使用的聚乙二醇-憐脂酷胆碱和实施 例3使用的二油酷憐脂酷乙醇胺均为憐脂酷胆碱衍生物。
[0037] 表 2 [00；3 引
'[0039]制备方法:将隐丹参酬、憐脂溶解于低分子量醇中，将水在揽拌下缓慢加入醇溶液 中，然后通过探头超声处理(400瓦，工作2秒间歇3秒，60次），然后挤压通过0.22皿微孔滤膜 即得。
[0040] 实施例9
[0041 ] 0.05g卡波姆974加入5mL水中揽拌溶解，然后加入0.2血质量体积浓度为10%的氨 氧化钢溶液调节抑使之形成凝胶。将所得凝胶与实施例6获得的隐丹参酬醇质体按照质量 体积比(g/mU 1:1的比例混合均匀，即得隐丹参酬醇质体凝胶制剂。
[00创对比例1
[0043] O.lg卡波姆974加入lOmL水中揽拌溶解，然后加入0.4mL质量体积浓度为10%的氨 氧化钢溶液调节pH使之形成凝胶。将0.0045g隐丹参酬溶解于乙醇，然后加入凝胶中，揽 拌均匀，再加入6mL水，揽拌均匀，即得普通隐丹参酬凝胶制剂。
[0044] 实施例10
[0045] 将实施例1所得隐丹参酬醇质体滴于铜网上，使用1%憐鹤酸溶液负染，使用透射 电镜观察其形貌。结果如图1所示，实施例1制备的隐丹参酬醇质体呈近圆形，粒径约250nm。
[0046] 实施例11
[0047] 将实施例6~8获得的隐丹参酬醇质体使用激光散射粒度测定仪测定，结果实施例 6制备的隐丹参酬醇质体的粒径为69. Inm，实施例7制备的隐丹参酬醇质体的粒径为 71.3nm，实施例8制备的隐丹参酬醇质体的粒径为82.9nm。
[004引实施例12
[0049] 使用超滤法测定包封率。取实施例6获得的醇质体5(Κ)化置于截留分子量为3000的 超滤管中，在eOOOrpm下离屯、5min。下清中的药物即为未被包封在醇质体中的药物。下清中 的药物浓度和醇质体悬液中的药物总浓度均使用高效液相色谱法测定。经测定和计算，实 施例6获得的隐丹参酬醇质体的包封率为98%。
[0050] 实施例13
[0051] 将实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂与对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶 制剂进行体外透皮实验。
[0052] 体外透皮实验的皮肤取自9~10日龄的乳猪背部。皮肤置于直立式扩散池(扩散面 积2.83cm2，接收室体积6.8mU的接收室和供应室之间，角质层面向供应室。使用含有40 % 聚乙二醇400的生理盐水作为接收液。扩散仪的溫度设置为37°C，转速设置为25化pm。实施 例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂和对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶制剂分别加入供 应室中（每供应室加 l.Og)，然后分别在预定的时间点取样接收液ImL，并补充ImL新鲜等溫 的接收液，直至24小时。样品中隐丹参酬的浓度使用高效液相色谱法测定，然后绘制透皮曲 线。
[0053] 结果如图2所示，实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂的透皮速度明显高于对 比例1制备的普通隐丹参酬凝胶制剂。
[0054]透皮实验结束后，将皮肤取下，剪下扩散部分皮肤，称重后进行前处理，使用高效 液相色谱法测定皮肤中药物的浓度。结果，隐丹参酬醇质体凝胶制剂组(实施例9组)隐丹参 酬在皮肤中的浓度为1.33yg/g，普通隐丹参酬凝胶制剂组(对比例1组)隐丹参酬在皮肤中 的浓度为0.62yg/g，实施例9组隐丹参酬在皮肤中的浓度为对比例1组的2.1倍。
[0化5] 实施例14
[0056] 对实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂与对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶 制剂进行药效学评价。
[0057] 家兔耳通过内侧涂抹油酸的方式制造瘦疮模型。模型制造成功后，家兔分别使用 实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂和对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶制剂进行局 部给药治疗或不治疗，连续14天。治疗结束后取模型部位皮肤，切片进行病理学观察。
[005引结果如图3所示，未治疗组角质层明显增厚，真皮组织有显著炎性细胞浸润，毛囊 处出现细菌菌栓;普通隐丹参酬凝胶制剂治疗组，毛囊处未见细菌菌栓，真皮组织炎症较 少，角质层略有增厚；隐丹参酬醇质体凝胶制剂治疗组，毛囊处未见细菌菌栓，真皮组织无 炎症，角质层厚度正常，与正常皮肤组织相似。说明隐丹参酬醇质体凝胶制剂对瘦疮的治疗 效果优于普通隐丹参酬凝胶制剂。
[0化9] 实施例15
[0060] 对实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂与对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶 制剂进行皮肤刺激性评价。
[0061] 家兔背部毛剌除，给予实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂或对比例1制备的 普通隐丹参酬凝胶制剂，24小时后除去药物，观察72小时，然后取给药部位皮肤制作切片， 进行病理学观察。结果两组给药过程中皮肤均未出现红斑、水肿的情况，病例切片均未见异 常。说明实施例9制备的隐丹参酬醇质体凝胶制剂与对比例1制备的普通隐丹参酬凝胶制剂 的皮肤刺激性均较小。
【主权项】
1. 一种隐丹参酮醇质体，其特征在于，以IOOmL计，原料组成为： 隐丹参酮0.01~0.Ig; 磷脂0.5~8g; 药用低分子量醇20~45mL; 余量为水， 其制备方法为： (1) 将隐丹参酮和磷脂溶解于药用低分子量醇中获得醇溶液； (2) 在搅拌下将水缓慢加入醇溶液中； (3) 将步骤(2)所得混合物进行超声处理，然后挤压通过微孔滤膜，即制得所述隐丹参 酮醇质体。2. 如权利要求1所述隐丹参酮醇质体，其特征在于，所述超声处理的功率为300~600 瓦，工作1~3秒间歇2~4秒，共50~70次;所述微孔滤膜的孔径大小为0.22μπι。3. 如权利要求1所述隐丹参酮醇质体，其特征在于，所述隐丹参酮醇质体的粒径为50~ 400nm，外观为圆形或椭圆形。4. 如权利要求1所述隐丹参酮醇质体，其特征在于，所述磷脂为大豆磷脂、卵磷脂、磷脂 酰胆碱和磷脂酰胆碱衍生物中的一种或多种的混合。5. 如权利要求1所述隐丹参酮醇质体，其特征在于，所述药用低分子量醇为乙醇和丙二 醇中的一种或两种混合。6. 如权利要求1~5任一所述隐丹参酮醇质体在制备用于治疗痤疮的外用制剂中的应 用。7. -种用于治疗痤疮的外用制剂，其特征在于，其有效成分为如权利要求1~5任一所 述的隐丹参酮醇质体。8. 如权利要求7所述用于治疗痤疮的外用制剂，其特征在于，所述外用制剂为凝胶制 剂。9. 如权利要求8所述用于治疗痤疮的外用制剂，其特征在于，所述凝胶制剂使用的凝胶 剂为卡波姆。10. 如权利要求9所述用于治疗痤疮的外用制剂，其特征在于，所述卡波姆的型号为974 型。
【文档编号】A61K9/127GK105919938SQ201610270271
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月27日
【发明人】俞振伟, 韩钢, 闾红燕, 马珂
【申请人】浙江大学