专利名称：益母草碱的合成方法
技术领域：
本发明涉及一种天然生物碱的人工制备方法，确切地说是益母草碱的合成方法。
研究表明益母草碱在植物中含量很低，在0.1％以下，提取分离难度大，成本高，临床上主要以益母草的粗提物制成的益母草膏、益母草冲剂等剂型应用，患者服用剂量大，难以接受。
采用合成的方式制备益母草碱，并将其制成患者容易接受的剂型，有利于益母草碱深入研究和发展。
《药学学报》(19(6)419～424，1984)公开了一种用益母草胺同甲基异硫脲在DMF中合成益母草碱的方法，但未公开如何得到益母草胺。
《Tetrahedron》(255155，1969)公开了益母草碱的三种合成方法(1)以4-氯-1-丁醇为原料得到4-邻苯二甲酰亚胺基-1-丁醇，再与4-乙氧羰基-氧基-3，5-二甲氧基-苯甲酸反应制成益母草胺，最后接上胍基生成益母草碱；(2)以4-乙氧羰基-氧基-3，5-二甲氧基-苯甲酰氯为起始原料经脂化，再接胍基生成益母草碱；(3)以4氨基-丁醇为起始原料合成益母草碱。以上的各种制备方法起始原料不容易得到，反应条件要求高。
发明内容
本发明以丁香酸为起始原料，依次经羰基化、酰氯化、酯化和氨化反应后制备得到中间体益母草胺，最后益母草胺同甲基异硫脲合成益母草碱。
具体工艺过程如下丁香酸首先羰基化，将其异常活泼的羟基保护起来(下称羰基化的丁香酸为A)，后将A酰氯化，蒸去酰氯化剂后即同四氢呋喃反应制备羰基化产物4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯(以下称B)，B再依次同邻苯二甲酰亚胺盐和水合肼反应得到中间体益母草胺(丁香酸(4-氨基)丁酯，以下称C)，最后C同甲基异硫脲反应得到产品益母草碱(以下称D)。
本方法分离过程少，操作简便，反应温和，易于控制，原料易得，产品纯度高，经液相色谱分析测定纯度为99.81％，产品收率高，四步化学反应，收率达20％。
本方法所得的益母草碱经结果确证同天然益母草碱完全一致。1.益母草碱溶解性实验取益母草碱5g，加水50ml，搅拌成混悬溶液，滴加5％盐酸溶液适量，溶解，缓慢加入5％的氢氧化钠溶液适量，至出现白色，继续滴加5％的氢氧化钠溶液使白色沉淀完全析出，过滤，用水洗涤，80℃减压干燥3小时，得白色固体物，将该白色固体物进行红外吸收光谱测定，所得数据与益母草碱相比较，结果两者完全一致。
以上实验结果表明益母草碱易与酸成盐，其盐在水中易溶解。2.药效和毒理实验对子宫的作用本品对家兔子宫均呈兴奋作用，对未孕、早孕、晚期妊娠或产后的子宫均有效，由于益母草碱在水中不易溶解，所以在试验时是将益母草碱用适量的酸溶解，如盐酸，再进行试验，那么益母草碱的药效试验就是采用益母草碱盐酸盐进行的，结果表明其对子宫的作用，按益母草碱计算在0.1～0.2mcg/ml的剂量范围内呈剂量依赖性关系，剂量超过0.2mcg/ml时达到最大效应，呈持续兴奋作用。
急性毒性作用灌胃给予小鼠益母草碱盐(按照益母草碱计算)的LD50为2452.8±135.2mg/kg；静脉给予小鼠益母草碱盐(按照益母草碱计算)的LD50为601.2±45.1mg/kg。
具体实施例方式
1.由丁香酸经羰基化反应制备A(4-乙氧羰基-氧基-丁香酸)在1000ml的反应器中，加入800ml的1mol/L的氢氧化钠溶液，搅拌状态下加入丁香酸66g(0.33mol)，溶解后，待溶液温度降至10℃以下，滴加氯甲酸乙酯36.17g(0.33mol)，控制反应溶液温度在0～10℃，搅拌反应6小时，反应结束后，用盐酸溶液调节pH值至6.0左右，放置析出白色结晶，过虑，得白色固体，用丙酮重结晶，将产品减压干燥得到64g的白色结晶性标题产物，收率72％，熔点180～184℃，1HNMRδH1.33 CH3-(CH3CH2-)，δH3.39(CH3O-)，δH4.29-CH2-(CH3CH2-)，δH7.38(Ar-H)。
化学反应式 2.由A依次经酰氯化和酯化制备B(4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯)
在干燥的反应瓶中加入4-乙氧羰基-氧基-丁香酸135.1g(0.5mol)和109.4ml(1.5mol)氯化亚砜，60～70℃回流1小时后，60℃减压蒸馏过量的氯化亚砜，加入四氢呋喃60ml，无水氯化锌10.8g，充分搅拌，加热至80～90℃，使氯化锌溶解，反应30～60分钟，在溶液中加入100ml苯，5％的氯化钠溶液，充分搅拌，分离苯溶液，加入无水硫酸钠脱水，过滤，减压蒸馏除去溶剂苯，得油状物质为标题产物。
化学反应式 3.由B经氨基化制备中间体益母草胺C(丁香酸(4-氨基)丁酯)取4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯79g(0.22mol)于烧瓶中，加入DMF 400ml，邻苯二甲酰亚胺钾盐45.5g(0.25mol)，90～110℃搅拌反应2小时，加入水合肼，醋酸钠20g，95％乙醇800ml，回流3小时，浓缩，冷却析出结晶，过滤，晶体用水洗涤，并将其溶解在5％的氢氧化钠溶液中，加2mol/L的盐酸酸化，过滤，滤液用10％的碳酸氢钠水溶液调pH至8～10之间，析出结晶，得固体物45.5g，收率53.7％，熔点209～211℃。
化学反应式 4.产品益母草碱的合成将丁香酸(4-氨基)丁脂27g(0.1mol)溶于热的DMF溶液中，再加入200ml 20％的盐酸甲基异硫脲水溶液，回流4小时，冷却，4℃放置3小时，析出结晶，过滤，得固体物即为益母草碱的盐酸盐，将益母草碱盐酸盐，溶解于10％氢氧化钠溶液中，室温放置，析出结晶，过滤，得益母草碱，乙醇重结晶，干燥，得晶体14.3g，收率为43.7％，熔点为167～169℃。
化学反应式 三、益母草碱纯度测定高效液相检测实验色谱条件色谱仪Shimadzu LC-10AT检测器Shimadzu SPD-10AVP色谱柱VP-ODS 150L×4.6测定波长254nm流动相0.025mol/L磷酸溶液(pH3.5)∶乙腈＝85∶15，流速1.0ml/min进样量20μg/ml精密称取本品适量，加流动相溶解制成每1ml中含益母草碱0.2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液，取对照溶液20ul，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分的峰高为满量程的10-20％；取供试品溶液20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，与对照溶液相比，各杂质峰的面积总和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0％)。测定本品纯度为99.81％。
权利要求
1.一种益母草碱的合成方法，包括原料丁香酸依次经羰基化，酰氯化，酯化和氨化反应得到益母草胺，再与甲基异硫脲合成得到益母草碱，特征在于(1)所述的羰基化反应是丁香酸和氯甲酸乙酯在氢氧化钠溶液中于0～10℃条件下反应3～8小时，最后的pH值至3～7，分离得到4-乙氧羰基丁香酸；(2)所述的酰氯化和酯化反应是4-乙氧羰基-丁香酸在过量的氯化亚砜中回流0.5～1.5小时，然后在50～80℃减压蒸馏脱去过量的氯化亚砜，再加入四氢呋喃和无水氯化锌，搅拌均匀后，于70～90℃条件下反应0.5～1小时，冷却，分离得到4-乙氧羰基-丁香酸(4氯)丁酯；(3)所述的氨化反应是4-乙氧羰基-丁香酸(4氯)丁酯和邻苯二甲酰亚胺钾盐溶于DMF溶液中，于90～110℃条件下反应1～3小时，然后加入水合肼、醋酸钠和乙醇回流3小时，冷却分离得到中间体益母草胺。
全文摘要
一种益母草碱的合成方法，以丁香酸为起始原料，依次经羰基化反应，酰氯化反应，酯化反应和氨化反应后制备得到中间体益母草胺，最后由中间体益母草胺同甲基异硫脲合成得到益母草碱。本方法分离过程少，所以操作简便，反应温和，易于控制，原料易得，产品收率高，纯度高，经液相色谱分析测定纯度为99.81％，经验证，具有同天然益母草碱完全一致的化学结构和药理作用。
文档编号C07C277/00GK1415602SQ0213836
公开日2003年5月7日 申请日期2002年9月26日 优先权日2002年9月26日
发明者李晓祥, 徐自奥 申请人:李晓祥