专利名称：用作组胺h的制作方法
技术领域：
本发明涉及用作组胺H3拮抗剂的新的取代苯并咪唑及其氮杂-和二氮杂-衍生物。本发明也涉及包含所述化合物的药用组合物和它们在治疗炎症性疾病、变应性病症和中枢神经系统紊乱中的用途。本发明也涉及本发明的新组胺H3拮抗剂与组胺H1化合物的组合在炎症性疾病和变应性病症的治疗中的用途，以及包含一种或多种本发明的新组胺H3拮抗剂化合物与一种或多种组胺H1化合物的组合的药用组合物。
背景技术：
H1、H2和H3为公认的组胺受体形式。H1受体为那些介导被常规抗组胺药拮抗的反应的受体。H1受体存在于例如人和其它哺乳动物的回肠、皮肤和支气管平滑肌中。通过H2受体介导的反应，组胺可刺激哺乳动物的胃酸分泌以及分离的哺乳动物前房的变时性反应。
发现H3受体位于交感神经上，它们可介导交感神经传递并使各种交感神经系统控制的终器的反应减弱。具体地讲，通过组胺激活的H3受体抑制去甲肾上腺素流至阻抗和容抗血管中，引起血管舒张。
咪唑H3受体拮抗剂为本领域所熟知。最近，于2001年10月15日提交的PCT US01/32151和于2001年3月13日提交的美国临时申请60/275,417公开了非咪唑H3受体拮抗剂。
US 5,869,479公开了使用至少一种组胺H1受体拮抗剂和至少一种组胺H3受体拮抗剂的组合治疗过敏性鼻炎症状的组合物。
发明概述本发明提供式I的新化合物
或其药学可接受的盐或溶剂化物，其中虚线代表任选的双键；a为0至2；b为0至2；n为1、2或3；p为1、2或3；r为0、1、2或3；条件是当M2为N时，p不为1；和当r为0时，M2为C(R3)；并且p和r的和为1至4；M1为C(R3)或N；M2为C(R3)或N；X为键或C1-C6亚烷基；Y为-C(O)-、-C(S)-、-(CH2)q-、-NR4C(O)-、-C(O)NR4-、-C(O)CH2-、-SO2-、-N(R4)-、-NH-C(＝N-CN)-或-C(＝N-CN)-NH-；条件是当M1为N时，Y不为-NR4C(O)-或-NH-C(＝N-CN)-；当M2为N时，Y不为-C(O)NR4-或-C(＝N-CN)-NH-；和当Y为-N(R4)-时，M1为CH并且M2为C(R3)；q为1至5；条件是当M1和M2均为N时，q为2至5；Z为键、C1-C6亚烷基、C1-C6亚烯基、-C(O)-、-CH(CN)-、-SO2-或-CH2C(O)NR4-；R1为
Q为-N(R8)-、-S-或-O-；k为0、1、2、3或4；k1为O、1、2或3；k2为0、1或2；R为H、C1-C6烷基、卤代(C1-C6)烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-SO0-2、R32-芳基(C1-C6)烷氧基-、R32-芳基(C1-C6)烷基-、R32-芳基、R32-芳氧基、R32-杂芳基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷基-氧-、R37-杂环烷基、R37-杂环烷基-氧-、R37-杂环烷基-(C1-C6)烷氧基、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-、-N(R30)(R31)、-NH-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、-NHC(O)NH(R29)；R29-S(O)0-2-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)0-2-、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-S(O)0-2-或苯甲酰基；R8为H、C1-C6烷基、卤代(C1-C6)烷基-、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-、R32-芳基(C1-C6)烷基-、R32-芳基、R32-杂芳基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基、R37-杂环烷基、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-、R29-S(O)2-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)2-、R29-S(O)0-1-(C2-C6)烷基-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)0-1-(C2-C6)烷基-；R2为具有1或2个独立选自N或N-O的杂原子，及其余的环原子为碳的六元杂芳环；具有1、2、3或4个独立选自N、O或S的杂原子，及其余的环原子为碳的五元杂芳环；R32-喹啉基；R32-芳基；杂环烷基；(C3-C6)环烷基；C1-C6烷基；氢；硫茚基； 或 其中所述六元杂芳环或所述五元杂芳环任选被R6取代；R3为H、卤素、C1-C6烷基、-OH、(C1-C6)烷氧基或-NHSO2-(C1-C6)烷基；R4独立选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基、R33-芳基、R33-芳基(C1-C6)烷基和R32-杂芳基；R5为氢、C1-C6烷基、-C(O)R20、-C(O)2R20、-C(O)N(R20)2、(C1-C6)烷基-SO2-、或(C1-C6)烷基-SO2-NH-；或R4和R5与它们连接的氮一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环、哌嗪环或吗啉环；R6为1至3个独立选自-OH、卤素、C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、-CF3、-NR4R5、-CH2-NR4R5、-NHSO2R22、-N(SO2R22)2、苯基、R33-苯基、NO2、-CO2R4、-CON(R4)2、 和 的取代基；R7为-N(R29)-、-O-或-S(O)0-2-；R12独立选自C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基或氟基，条件是当R12为羟基或氟基时，那么R12不连接至与氮相邻的碳上；或两个R12取代基形成从一个环碳到另一个不相邻的环碳间的C1至C2烷基桥(alkyl bridge)；或R12为＝O；R13独立选自C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基或氟基，条件是当R13为羟基或氟基时，那么R13不连接至与氮相邻的碳上；或两个R13取代基形成从一个环碳到另一个不相邻环碳间的C1至C2烷基桥；或R13为＝O；R20独立选自氢、C1-C6烷基或芳基，其中所述芳基任选被1至3个独立选自卤素、-CF3、-OCF3、羟基或甲氧基的基团取代；或当存在两个R20基团时，所述两个R20基团可与它们连接的氮形成五元或六元杂环；R22为C1-C6烷基、R34-芳基或杂环烷基；R24为H、C1-C6烷基、-SO2R22或R34-芳基；R25独立选自C1-C6烷基、卤素、-CN、-NO2、-CF3、-OH、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、-C(O)OR29、-N(R4)(R5)、N(R4)(R5)-C(O)-、N(R4)(R5)-S(O)1-2-、R22-S(O)0-2-、卤基-(C1-C6)烷基-或卤基-(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-；R29为H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、R35-芳基或R35-芳基(C1-C6)烷基-；R30为H、C1-C6烷基-、R35-芳基或R35-芳基(C1-C6)烷基-；R31为H、C1-C6烷基-、R35-芳基、R35-芳基(C1-C6)烷基-、R35-杂芳基、(C1-C6)烷基-C(O)-、R35-芳基-C(O)-、N(R4)(R5)-C(O)-、(C1-C6)烷基-S(O)2-或R35-芳基-S(O)2-；或R30和R31一起为-(CH2)4-5-、-(CH2)2-O-(CH2)2-或-(CH2)2-N(R38)-(CH2)2-并与它们连接的氮一起形成环；R32为1至3个独立选自H、-OH、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、R35-芳基-O-、-SR22、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NR39R40、苯基、R33-苯基、NO2、-CO2R39、-CON(R39)2、-S(O)2R22、-S(O)2N(R20)2、-N(R24)S(O)2R22、-CN、羟基-(C1-C6)烷基-、-OCH2CH2OR22和R35-芳基(C1-C6)烷基-O-的取代基，或两个在相邻碳原子上的R32基团一起形成-OCH2O-或-O(CH2)2O-基团；R33为1至3个独立选自C1-C6烷基、卤素、-CN、-NO2、-CF3、-OCF3、-OCHF2和-O-(C1-C6)烷基的取代基；R34为1至3个独立选自H、卤素、-CF3、-OCF3、-OH和-OCH3的取代基；R35为1至3个独立选自氢、卤基、C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基、苯氧基、-CF3、-N(R36)2、-COOR20和-NO2的取代基；R36独立选自H和C1-C6烷基；R37为1至3个独立选自氢、卤基、C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基、苯氧基、-CF3、-N(R36)2、-COOR20、-C(O)N(R29)2和-NO2的取代基，或R37为一至两个＝O基；R38为H、C1-C6烷基、R35-芳基、R35-芳基(C1-C6)烷基-、(C1-C6)烷基-SO2或卤代(C1-C6)烷基-SO2-；R39独立选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基、R33-芳基、R33-芳基(C1-C6)烷基和R32-杂芳基；和R40为氢、C1-C6烷基、-C(O)R20、-C(O)2R20、-C(O)N(R20)2、(C1-C6)烷基-SO2-或(C1-C6)烷基-SO2-NH-；或R39和R40与它们连接的氮一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环、哌嗪环或吗啉环；本发明也提供一种包含有效量的至少一种式I的化合物和药学可接受载体的药用组合物。
本发明还提供一种治疗以下病症的方法变态反应，变态反应引起的呼吸道(例如上呼吸道)反应，充血(例如鼻充血)，低血压，心血管疾病，胃肠道疾病，胃肠道运动过度和不足以及酸性分泌过度和不足，肥胖，睡眠障碍(例如睡眠过度、嗜眠和发作性睡眠)，中枢神经系统紊乱，注意力不集中的过度反应症(ADHD)，中枢神经系统活动减退和过强(例如激动和抑郁症)，和/或其他CNS障碍(例如阿尔茨海默病、精神分裂症和偏头痛)，所述方法包括给予需要该治疗的患者(例如哺乳动物，如人)有效量的至少一种式I的化合物。
本发明的化合物特别适用于治疗变态反应、变态反应引起的呼吸道反应和/或充血。
本发明还提供一种药用组合物，所述药用组合物包含有效量的至少一种式I的化合物和至少一种H1受体拮抗剂的组合，以及药学可接受的载体。
本发明还提供一种治疗变态反应、变态反应引起的呼吸道(例如上呼吸道)反应和/或充血(例如鼻充血)的方法，所述方法包括给予需要该治疗的患者(例如哺乳动物，如人)有效量的至少一种式I的化合物和至少一种H1受体拮抗剂的组合。
本发明也提供一种包含在一个包装中的药剂盒，所述药剂盒包括包含在药用组合物中的式I的化合物和分开的包含在药用组合物中的H1受体拮抗剂。
发明详述优选的式I结构中各变量的定义如下优选R1为任选取代的苯并咪唑基或7-氮杂苯并咪唑基，其中R优选为烷基、烷氧基、烷氧基烷氧基、烷硫基、杂芳基或R32-芳基。更优选R为-CH3、-CH2CH3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH(CH3)2、-SCH3、-SCH2CH3、吡啶基(特别为2-吡啶基)、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噁唑基或R32-苯基。
优选R25为卤素或-CF3并且k为0或1。
优选R2为六元杂芳环，任选被一个取代基取代。更优选R2为嘧啶基、R6-嘧啶基、吡啶基、R6-吡啶基或哒嗪基，其中R6为-NR4R5，其中R4和R5独立选自H和(C1-C6)烷基，或R4和R5与它们连接的氮形成吡咯烷环、哌啶环或吗啉环。更优选R6为-NH2。
优选X为键。
优选Y为-C(O)-。
优选Z为直链或支链C1-C3烷基。
优选M1为N；优选a为0；并且优选n为2；优选任选的双键不存在(即存在单键)。
优选M2为C(R3)，其中R3为氢或氟；优选b为0；优选r为1；并优选p为2。
除非另外说明，否则本文使用的以下术语具有下述含义烷基(包括如芳烷基和烷氧基的烷基部分)表示直链和支链碳链并含有1至6个碳原子；亚烷基表示二价的直链或支链的烷基链，例如1，2-亚乙基(-CH2CH2-)或1，3-亚丙基(-CH2CH2CH2-)；卤代烷基和卤代烷氧基表示其中一个或多个氢原子被卤原子置换的烷基链或烷氧基链，例如-CF3、CF3CH2CH2-、CF3CF2-或CF3S；芳基(包括芳烷基的芳基部分)表示含有6至14个碳原子并具有至少一个芳环(例如芳基为苯环或萘环)的碳环基团，并且碳环基团上所有可取代的碳原子将可能为连接位置；芳烷基表示如上定义的芳基连接至如上定义的烷基上，其中所述烷基连接至化合物上；环烷基表示3至6个碳原子的饱和碳环；卤素(卤基)表示氟基、氯基、溴基和碘基；杂芳基表示具有1至4个选自O、S或N的杂原子的环基，所述杂原子插入碳环结构中并具有足够数目的可提供芳香性的离域π电子，优选芳族杂环基含有2至14个碳原子；实例包括但不限于异噻唑基，异噁唑基，噁唑基，呋咱基，三唑基，四唑基、噻唑基，噻二唑基，异噻二唑基，噻吩基，呋喃基，吡咯基，吡唑基，吡喃基，嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，吡啶基(例如2-、3-、或4-吡啶基)，吡啶基N-氧化物(例如2-、3-、或4-吡啶基N-氧化物)，三嗪基，蝶啶基，吲哚基(苯并吡咯基)，吡啶并吡嗪基，异喹啉基(isoqinolinyl)，喹啉基，1，5-二氮杂萘基；通过上面列举的杂芳基例证了R2定义中包括的5-和6-元杂芳基；按照定义，所有可取代的碳和氮原子均可被取代；杂环烷基表示含有3至15个碳原子，优选4至6个碳原子的饱和碳环；实例包括但不限于2-或3-四氢呋喃基、2-或3-四氢噻吩基、2-、3-或4-哌啶基、2-或3-吡咯烷基、2-或3-哌嗪基、2-或4-二噁烷基、1，3-二氧戊环基、1，3，5-三噻烷基、硫杂己环、全氢化异喹啉基、十氢喹啉基、氧杂环丁烷、氮杂环丁烷基、1-氮杂环庚基、1，3-二噻烷基、1，3，5-三噁烷基、吗啉基、硫代吗啉基、1，4-噻噁烷基和1，3，5-六氢化三嗪基、噻唑烷基、四氢吡喃基。
在R32的定义中，当提及芳环或杂芳环中相邻碳原子上的两个R32基一起形成-OCH2O-或-O(CH2)2O-基时，表示两个R32基形成稠合至所述芳环或杂芳环上的亚甲二氧环或亚乙二氧环。当提及R12、R13或R37为一个或两个＝O基时，表示环上同一碳原子上的两个氢原子可被＝O基置换；环上可有两个这样的基团。
例如在结构 中， 表示位于环上4个非稠合位置中的一个的氮原子，即下面指出的4、5、6或7位 同样， 表示位于环上4个非稠合位置中的任何两个的两个氮，例如4和6位、4和7位或5和6位。
也同样，本文使用的“上呼吸道”通常表示上部呼吸系统，即鼻、喉及相关结构。
也同样，本文使用的“有效量”一般表示治疗有效量。
“患者”表示哺乳动物，虽然也包括兽用，但一般指人。
连接至环内的线表示指定的键可连接至任何可取代的环碳原子上。
本发明的某些化合物可以不同的异构体(例如对映体、非对映异构体和几何异构体)的形式存在。本发明包括纯形式和混合物形式(包括外消旋混合物)两者的所有这些异构体。也包括烯醇形式和互变异构体。
本发明的化合物为组胺H3受体的配体。也将本发明的化合物描述为H3受体拮抗剂或H3拮抗剂。
本发明的化合物为碱性并可与有机酸和无机酸形成药学可接受的盐。形成该类盐的适合酸的实例有盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和其他本领域技术人员熟知的无机酸和羧酸。用常规的方法将游离碱形式与足量的需要的酸接触成盐，可制备这些盐。通过用合适的稀碱水溶液(如稀氢氧化钠、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠的水溶液)处理这些盐，可再生成所述游离碱形式。所述游离碱形式与它们相应的盐形式在例如在极性溶剂中的溶解性等某些物理性质方面有些不同，但就本发明而言，所述盐与它们相应的游离碱形式又是等价的。
根据本发明化合物上的取代基，化合物可与碱形成盐。因此，例如如果在分子中具有羧酸取代基，可与无机碱及有机碱(例如NaOH、KOH、NH4OH、氢氧化四烷基铵等)形成盐。
式I的化合物可以非溶剂化形式及溶剂化(包括如半水合物的水合形式)形式存在。一般情况，就本发明而言，具有药学可接受的溶剂(例如水、乙醇等)的溶剂合形式与非溶剂化形式等价。
本发明的化合物可与H1受体拮抗剂组合(即本发明的化合物可在药用组合物中与H1受体拮抗剂组合，或本发明的化合物可与H1受体拮抗剂一起给药)。
已知许多化学物质有组胺H1受体拮抗剂的活性，并因此可用于本发明的方法中。可将用于本发明的方法中的许多H1受体拮抗剂分类为乙醇胺、乙二胺、烷基胺、吩噻嗪或哌啶。代表性的H1受体拮抗剂包括但不限于阿司咪唑，阿扎他定，氮草斯汀，阿伐斯汀，溴苯那敏，西替利嗪，氯苯那敏，氯马斯汀，赛克力嗪，卡瑞斯汀，赛庚啶，卡比沙明，脱碳乙氧基氯雷他定(descarboethoxyloratadine)，苯海拉明，多西拉敏，二甲茚定，依巴斯汀，依匹斯汀，乙氟利嗪，非索非那定，羟嗪，酮替芬，氯雷他定，左卡巴斯汀，美克咯嗪，咪唑斯汀，美喹他嗪，米安色林，诺柏斯汀，诺阿斯米唑，哌香豆司特，美吡拉敏，异丙嗪，特非那定，曲吡那敏，替美斯汀，阿利马嗪和曲普利啶。通过包括特异性阻断分离的豚鼠回肠对组胺的收缩反应的已知方法测定其对H1受体的活性，可容易评价其他化合物。参见，例如于1998年2月19日公开的WO 98/06394。
本领域技术人员将理解按其已知的治疗有效量使用H1受体拮抗剂，或按通常描述的剂量使用H1受体拮抗剂。
优选所述H1受体拮抗剂选自阿司咪唑，阿扎他定，氮斯汀，阿伐斯汀，溴苯那敏，西替利嗪，氯苯那敏，氯马斯汀，赛克力嗪，卡瑞斯汀，赛庚啶，卡比沙明，脱碳乙氧基氯雷他定，苯海拉明，多西拉敏，二甲茚定，依巴斯汀，依匹斯汀，乙氟利嗪，非索非那定，羟嗪，酮替芬，氯雷他定，左卡巴斯汀，美克咯嗪，咪唑斯汀，美喹他嗪，米安色林，诺柏斯汀，诺阿斯米唑，哌香豆司特，美吡拉敏，异丙嗪，特非那定，曲吡那敏，替美斯汀，阿利马嗪或曲普利啶。
更优选所述H1受体拮抗剂选自阿司咪唑，阿扎他定，氮斯汀，溴苯那敏，西替利嗪，氯苯那敏，氯马斯汀，卡瑞斯汀，脱碳乙氧基氯雷他定，苯海拉明，多西拉敏，依巴斯汀，非索非那定，氯雷他定，左卡巴斯汀，咪唑斯汀，诺阿斯米唑或特非那定。
最优选所述H1受体拮抗剂选自阿扎他定，溴苯那敏，西替利嗪，氯苯那敏，卡瑞斯汀，脱碳乙氧基氯雷他定，苯海拉明，依巴斯汀，非索非那定，氯雷他定或诺阿斯米唑。
甚至更优选所述H1拮抗剂选自氯雷他定，脱碳乙氧基氯雷他定，非索非那定或西替利嗪。还甚至更优选所述H1拮抗剂选自氯雷他定或脱碳乙氧基氯雷他定。
在一个优选的实施方案中，所述H1受体拮抗剂为氯雷他定。
在另一个优选的实施方案中，所述H1受体拮抗剂为脱碳乙氧基氯雷他定。
在再一个优选的实施方案中，所述H1受体拮抗剂为非索非那定。
在还一个优选的实施方案中，所述H1受体拮抗剂为西替利嗪。
在上述方法中，优选治疗变态反应引起的呼吸道反应。
在上述方法中，也优选治疗变态反应。
在上述方法中，也优选治疗鼻充血。
在本发明的方法中，给予本发明的H3拮抗剂(式I的化合物)与H1受体拮抗剂的组合，这些拮抗剂可同时或依次给药(首先给一种，一段时间后再给另一种)。一般情况下，当依次给予这些拮抗剂时，首先给予本发明(式I的化合物)的H3拮抗剂。
通过许多本领域技术人员显而易见的方法，可制备本发明的化合物。优选的方法包括但不限于本文描述的通用合成方法。根据选用的附属取代基，本领域技术人员将会选择出最佳的路线。另外，本领域技术人员会认识到在一些情况中，须控制步骤的顺序以避免官能团不相容。
用于制备描述的化合物的起始原料和试剂，可通过例如AldrichChemical Co.(美国威斯康星州)和Acros Organics Co.(美国新泽西州)的商业供应商得到，也可通过本领域技术人员熟知的文献方法制备。
本领域技术人员会认识到式I化合物的合成可能需要构建C-N键。方法包括但不限于在0℃至200℃下使用取代的芳族化合物或杂芳族化合物和胺。该反应可在无溶剂或可在溶剂中进行。该反应的适合溶剂有卤代烃、醚溶剂、甲苯、二甲基甲酰胺等。
本领域技术人员会认识到式I化合物的合成可能需要构建杂环。方法包括但不限于在0℃至200℃下使用二氨基化合物和羰基等价物。该反应可在酸、碱或中性条件下进行。该反应的适合溶剂有水、卤代烃、醚溶剂、醇溶剂、甲苯、酮、二甲基甲酰胺等。
本领域技术人员会认识到式I化合物的合成可能需要保护某些官能团(即为化学相容性的目的，采用特殊的反应条件进行衍生化)。参见，例如Green等，Protective Groups in Organic Synthesis。胺的合适保护基有甲基、苄基、乙氧基乙基、叔丁氧基羰基、邻苯二甲酰基等，可通过本领域技术人员熟知的文献方法添加和除去这些保护基。
本领域技术人员会认识到式I化合物的合成可能需要构建酰胺键。方法包括但不限于使用活性羧基衍生物(例如酰卤)或在0℃至100℃下使用酸、偶合剂(例如EDCI、DCC、HATU)和胺。该反应的合适溶剂有卤代烃、醚溶剂、二甲基甲酰胺等。
本领域技术人员会认识到式I化合物的合成可能需要还原官能团。该反应的合适还原剂包括在-20℃至100℃下的NaBH4、氢化铝锂、乙硼烷等。该反应的合适溶剂有卤代烃、醚溶剂等。
如果需要，可采用常规技术(包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等)分离和纯化所述反应的原料和中间体。采用包括物理常数和波谱数据的常规方法可表征这些原料。
一种如下面方案1所示的方法可用于式IA的化合物的制备，其中R1为1-苯并咪唑基或2-苯并咪唑基并且X为键或烷基。可采用类似的方法制备其中苯并咪唑基的苯环被取代的化合物以及氮杂-苯并咪唑化合物(即以上定义的其中R1不为苯并咪唑基的化合物)和苯并噁唑基和苯并噻唑基衍生物。
方案1.
步骤a使用卤化物将适当单保护的式X的二胺烷基化或芳化，其中X为键或烷基，Prot为保护基，并且余下的变量同上述定义。然后将中间体二胺与合适的羰基或甲酰基等价物环化，形成式XI的化合物。合适的保护基有甲基、苄基、丁氧基羰基或乙氧基羰基。烷基化的合适卤化物有如Henning等，J.Med Chem.30(1987年)，814-819页描述的取代的芳族化合物或取代的杂芳族化合物。
步骤b使用本领域技术人员熟知的方法将式XI的保护的胺去保护。一种合适的去甲基保护的方法为与卤代甲酸酯或类似物反应。一种合适的去苄基保护的方法为在常压或高于常压下并且在例如钯催化剂存在下，用氢裂解。合适的去氨基甲酸酯保护的方法为用酸、碱或碘化三甲基硅烷处理。
步骤c将式XII的胺与式XIII的活化官能团Y反应，以形成式IA中氮和官能团Y之间的键。当Y为羰基并且M2为碳时，可通过卤化物(即酰氯中间体)或其他偶合剂(EDCI、DCC、HATU或类似偶合剂)活化。适合的反应条件可能需要例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺等碱的存在。
下面的方案2表示另一种制备式IA的化合物的方法，其中R1为1-苯并咪唑基或2-苯并咪唑基并且X为键或烷基。可采用类似的方法制备其中苯并咪唑基的苯环被取代的化合物以及氮杂-苯并咪唑化合物(即以上定义的其中R1不为苯并咪唑基的化合物)。
方案2.
步骤d使用卤化物将适当单保护的式X的二胺烷基化或芳化，以形成式XIV的化合物，其中X为键或烷基，Prot为保护基，并且余下的变量同上述定义。合适的保护基有甲基、苄基、丁氧基羰基和乙氧基羰基。烷基化的合适卤化物有如Henning等描述的取代的芳族化合物或取代的杂芳族化合物。
步骤e(1)使用本领域技术人员熟知的方法将式XIV的保护的胺去保护。一种合适的去甲基保护的方法为与卤代甲酸酯或类似物反应。一种合适的去苄基保护的方法为在常压或高于常压下，并且在例如钯催化剂存在下，用氢裂解。合适的去氨基甲酸酯保护的方法为用酸、碱或碘化三甲基硅烷处理。
(2)将步骤e(1)得到的胺与式XIII的活化官能团Y反应，以形成氮和官能团Y之间的键，从而得到式XV的化合物。当Y为羰基并且M2为碳时，可通过卤化物(即酰氯中间体)或其他偶合剂(EDCI、DCC、HATU或类似偶合剂)活化。适合的反应条件可能需要例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺、吡啶或类似的碱。
步骤f式XV被还原以后，将得到的化合物与羰基等价物反应得到式IA的环化化合物。还原条件可为催化剂存在下的氢、酸或碱存在下的金属或其他还原剂。可在酸性或碱性条件下进行环化。
下面的方案3表示更详尽的合成化合物的方法。表示的是式IB(其中R1为1-苯并咪唑基(方法A、B、C和F)，Y为-C(O)-并且R2为取代的吡啶基)的化合物以及式IC和IC’(其中R1为2-苯并咪唑基(方法D和E)，Y为-C(O)-并且R2为取代的吡啶基)的化合物的制备，但本领域技术人员会认识到可采用类似的方法制备其中所述苯并咪唑基上的苯环被取代、R2不为吡啶基的化合物，和氮杂苯并咪唑化合物(即以上定义的其中R1不为苯并咪唑基的化合物)。
方案3.
方法A
方法B 方法C 方法D
方法E 方法F 特别的示例性化合物按以下实施例的描述，采用本领域已知的原料或如下描述的方法制得的原料进行制备。提供这些实施例用于进一步说明本发明。它们仅为说明目的；因此并无意限定本发明的范围。
除非另外说明，否则下面的缩写在下述实施例中的含义如下Me＝甲基；Et＝乙基；Bu＝丁基；Pr＝丙基；Ph＝苯基；t-BOC＝叔丁氧基羰基；CBZ＝苄氧羰基；和Ac＝乙酰基DCC＝二环己基碳二亚胺DMAP＝4-二甲氨基吡啶DMF＝二甲基甲酰胺EDCI＝1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺
ESMS＝电子喷雾质谱法FAB＝快速原子轰击质谱法HATU＝O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸脲鎓(uronium)HOBT＝1-羟基苯并三唑LAH＝氢化铝锂LDA＝二异丙氨基化锂NaBH(OAc)3＝三乙酸基硼氢化钠NBS＝N-溴代琥珀酰亚胺PPA＝多磷酸RT＝室温TBAF＝四丁基氟化铵TBDMS＝叔丁基二甲硅烷基TMEDA＝N，N，N′，N′-四甲基乙二胺TEMPO＝2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基，自由基TLC＝薄层色谱法HRMS＝高分辨质谱法LRMS＝低分辨质谱法nM＝毫微摩尔Ki＝底物/受体络合物的解离常数pA2＝-logEC50，如J.Hey，Eur.J.Pharmacol.，(1995年)，294卷329-335页的定义Ci/mmol＝居里/mmol(特异性活性的测定)
制备1 步骤1 向2-氨基-4-甲基吡啶(10.81g，100mmol)的叔丁醇(250ml)溶液中加入t-BOC酐(26.19g，120mmol)。23℃下搅拌反应混合物过夜，然后浓缩成油状物。将粗产物干品装入硅胶柱并经快速层析(洗脱液30％己烷-CH2Cl2至0-2％丙酮-CH2Cl2)纯化，得到15.25g(73.32mmol；73％)的目的产物，呈白色固体。
步骤2 -78℃下、30分钟内，将正丁基锂(1.4M，272ml，381mmol)的己烷溶液分批加至步骤1的产物(35.96g，173mmol)的THF(1.4L)溶液中。将反应混合物缓慢升温并在23℃下搅拌2小时，形成橙色沉淀。然后将混合物冷却回-78℃，并在维持-78℃的同时，将预先干燥的氧(通过燥石膏塔(Drierite column))鼓泡通入悬浮液中6小时。期间反应混合物的颜色由橙色变为黄色。-78℃下依次用(CH3)2S(51.4ml，700mmol)和AcOH(22ml，384mmol)猝灭反应物，并在搅拌下升温至23℃。48小时后，加入水并将产物萃取至EtOAc。通过硅胶快速层析(洗脱液0-15％丙酮/CH2Cl2)纯化，得到20.15g(90mmol；52％)的醇，呈浅黄色固体。
步骤3 向步骤2的产物(19.15g，85.5mmol)的CH2Cl2(640ml)溶液中加入NaHCO3(8.62g，103mmol)和NaBr(444mg，4.3mmol)的饱和水溶液。将反应混合物冷却至0℃，并加入TEMPO(140mg，0.90mmol)。剧烈搅拌下，40分钟内分批加入商业漂白液(122ml，0.7M，85.4mmol)(5.25％在NaOCl中)。0℃下再经20分钟后，用饱和的Na2S2O3水溶液将反应混合物猝灭并加热至23℃。用水稀释并用CH2Cl2萃取，然后浓缩并经快速层析(洗脱液30％己烷-CH2Cl2至0-2％丙酮-CH2Cl2)纯化，得到15.97g(71.9mmol；收率84％)的醛，呈灰白色固体。
步骤4 向步骤3的产物(11.87g，53.5mmol)的CH2Cl2(370ml)溶液中加入异哌啶甲酸乙酯(9.07ml，58.8mmol)，然后滴加4滴AcOH。23℃下搅拌反应混合物40分钟，然后加入NaB(OAc)3H(22.68g，107mmol)。23℃下搅拌反应混合物过夜，用饱和NaHCO3水溶液中和，用水稀释并用CH2Cl2萃取。浓缩有机萃取液，然后通过硅胶快速层析(洗脱液0-4％饱和NH3的CH3OH-CH2Cl2溶液)纯化，得到19.09g(52.6mmol；98％)的酯，呈灰白色固体。
步骤5向步骤4的产物(1.57g，4.33mmol)的THF-水-CH3OH(10ml的3∶1∶1的混合物)溶液中加入LiOH一水合物(0.125g，5.21mmol)。23℃下搅拌反应混合物过夜，高真空下浓缩得到1.59g粗制标题化合物，呈微黄色固体，该产物未经纯化直接使用。
制备2 步骤1 在冰水浴中将二胺1B(见方法A，步骤1)(20g，71.1mmol)和Et3N(30ml，213mmol)的CH2Cl2(400ml)溶液冷却至0℃。30分钟内向搅拌充分的溶液中小心(放热)分批加入三光气(14.2g，47.3mmol)。当加入结束后，在0℃下继续搅拌1小时，然后在室温下搅拌16小时。用0.5N NaOH(200ml)洗涤混合物，有机层经无水MgSO4干燥并在真空下浓缩。将热的EtOAc(200ml)加至半固体状的残余物中，并将得到的混合物冷却至室温。过滤生成的化合物P2-1，呈白色固体(16.5g)；并将滤液经硅胶快速层析[CH2Cl2/CH3OH(2N NH3)＝40∶1]纯化，得到另外的产物，呈白色固体(2.7g)[合并收率88％]。FABMS308(MH+；100％)。
步骤2
将POCl3(100ml)加至经干N2吹干的圆底烧瓶中的P2-1(17.2g；56mmol)中。将混合物置于油浴中加热至108℃并维持回流6小时。真空下除去POCl3。剩余物用7N甲醇氨调节至pH约9-10，并在真空下浓缩至干。将CH2Cl2加至残余物中，过虑掉不溶物质，并将滤液再次于真空下浓缩。残余物在EtOH中结晶得到化合物P2-2，呈白色固体(12.6g；67％)。ES-MS326.1(MH+；100％)。
该方法可生成不同数量的化合物P2-10，并可按以下方法转化为需要的产物P2-20℃下、在CH2Cl2溶液中，在原位用各为1当量的EtOH和NaH仔细地处理，然后用冰-水和CH2Cl2后处理。为最大程度地减少在苯并咪唑母核的2-位上的反应，需维持低温。
步骤3 将硫代甲醇钠(1.05g；15.0mmol)加至用干N2吹干的圆底烧瓶中的DMF(15ml)中。室温下搅拌30分钟，加入固体氯化物P2-2(3.25g，10mmol)，室温下搅拌得到的混合物16小时。将EtOAc(100ml)和水(50ml)加至反应混合物中。分离水层并再用EtOAc(50ml)萃取。合并的萃取液用无水MgSO4干燥并真空下浓缩。通过硅胶快速层析纯化残余物，用EtOAc-己烷(3∶4)洗脱，得到化合物P2-3，呈白色固体(2.12g；63％)。FABMS338.3(MH+；100％)。
步骤4向搅拌下的P2-3(300mg，12.5mmol)的乙醇(40ml)-异丙醇(40ml)溶液中加入25％(w/w)的NaOH水溶液(20ml)。85℃下搅拌得到的混合物24小时，然后100℃下再搅拌4小时。真空下除去醇，并依次用CH2Cl2(2×40ml)和EtOAc(30ml)萃取。用无水MgSO4干燥合并的萃取液。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析(CH2Cl2/2N甲醇氨＝12∶1)纯化残余物，得到制备2的产物，呈灰白色固体(2.85g，70％)。ES-MS266(MH+；100％)。
制备3 步骤1 将NaH(60mg的60％分散液；1.48mmol)加至充满N2的烧瓶中的CH3OH(4ml)中。室温下搅拌30分钟后，加入氯化物P2-2(400mg，1.23mmol)，并将得到的混合物在室温搅拌16小时。真空下除去CH3OH，并将CH2Cl2(30ml)和水(10ml)加至残余物中。用无水MgSO4干燥有机层，过滤并在真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析纯化残余物，用EtOAc-己烷(3∶2)洗脱得到P3-1，呈白色泡沫状物(0.232g；59％)。ES-MS；322.1(MH+；100％)。
步骤2将1N的KOH(4.82mL；4.82mmol)水溶液加至P3-1的EtOH(15mL)溶液中，并在80℃下搅拌得到的混合物48小时。真空下浓缩混合物。将水(3mL)和CH2Cl2(15ml)加至残余物中，分离有机层并用无水MgSO4干燥。过滤干燥剂，真空下浓缩滤液得到制备3的产物，呈无色玻璃状物(160ng；95％)。FABMS250.2(MH+；100％)。
制备4 步骤1 N2下，将P2-2(300mg；0.923mmol)和吗啉(3ml)在圆底烧瓶中混合，并在80℃下加热混合物16小时。真空下除去吗啉，并将残余物溶于CH2Cl2(20ml)中。将不溶的白色沉淀过滤掉，滤液在真空下浓缩并通过硅胶快速层析纯化，用CH2Cl2/2N甲醇氨(45∶1)洗脱得到P4-1，呈无色玻璃状物(0.325g；94％)。ES-MS377.1(MH+；100％)。
步骤2N2下，将碘化三甲基硅烷(240微升；1.64mmol)加至P4-1(316mg；0.843mmol)的CHCl3(2ml)溶液中，55℃下搅拌得到的溶液7小时。用EtOH(2ml)猝灭反应物，并在真空下将该混合物浓缩至干。残余物用1∶1(v/v)的浓NH4OH和水的混合物碱化至pH约为10，并用CH2Cl2(2×5ml)萃取。用无水MgSO4干燥合并的萃取液。过滤干燥剂并真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析纯化残余物，用CH2Cl2-2N甲醇氨(13∶1)洗脱，得到制备4的化合物，呈无色玻璃状物(181mg；70％)。ES-MS305.1(MH+；100％)。
制备5 步骤1 将P5-1(3.5g，21mmol)和P5-2(6.5g，38mmol)的CH2Cl2(3ml)溶液在110℃下加热24小时及在室温下加热24小时。用CH2Cl2稀释反应物，用水、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。通过快速柱层析(SiO2，己烷中40％至60％的EtOAc)纯化，得到P5-3(1.3g，21％；M+H＝295)。
步骤2 向P5-3(1.3g，4.4mmol)的CH3OH(30ml)溶液加入Ra-Ni(0.5g)并在H2气氛(50psi)下氢化该混合物18小时。通过celite硅藻土垫过滤，得到P5-4，呈灰色固体(1.05g，90％；M+H＝265)，该产物不经进一步纯化，直接使用。
步骤3 室温下，搅拌P5-4(1.05g，3.97mmol)、P5-5(0.49g，3.97mmol)，DEC(1.14g，5.96mmol)和HOBT(0.8g，5.96mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液18小时。再加CH2Cl2稀释粗反应混合物，用5％的NaOH水溶液和盐水洗涤并干燥(Na2SO4)。采用快速层析(SiO2，8％的EtOAc/己烷至10％的CH3OH/EtOAc)纯化得到P5-6(0.35g，24％；M+H＝370)。
步骤4 将化合物P5-6(0.7g，1.89mmol)溶于HOAC(10ml)中并在120℃下加热3.5小时。反应物冷却至室温，真空下浓缩，加入10％的NaOH水溶液中和并用CH2Cl2萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层并浓缩得到P5-7(0.58g，87％；M+H＝352)，该产物可不经进一步纯化而直接用于下一步骤。
步骤5100℃下将P5-7(0.58g，1.65mmol)和NaOH(0.43g，13.2mmol)的EtOH/H2O(9/1，10ml)溶液加热18小时。冷却反应物并浓缩，然后通过快速柱层析(SiO2，氨水饱和的10％的甲醇/CH2Cl2)纯化剩余物，得到制备5的产物(0.42g，91％；M+H＝280)。
制备6 步骤1 用1M的ET3O+BF4-(在CH2Cl2中，55ml，55mmol)溶液处理化合物P6-1(通过类似P2-1的方法制备)(10.5g，36.2mmol)和2，6-二叔丁基吡啶(12.2ml，54.4mmol)的CH2Cl2(400ml)溶液。反应混合物在室温下搅拌2小时，用1N NaOH(100ml)猝灭，用CH2Cl2(3×)萃取，Na2SO4干燥并浓缩。通过硅胶层析(洗脱液5-10％丙酮/CH2Cl2)纯化，得到6.37g的P6-2(20.0mmol，55％)。
步骤2采用类似于制备3、步骤2描述的方法，将P6-2转化为制备6的产物。
制备7
步骤1 N2、120℃下，搅拌P7-1(40g，150mmol)、原甲酸三甲酯(66ml，64.0g，600mmol)和催化量的对甲苯磺酸一水合物(300mg，1.58mmol)的混合物3小时。真空下除去过量的原甲酸酯。将残余物在EtOAc(200ml)和1N NaOH(100ml)之间分配。用盐水(100ml)洗涤有机层并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析(CH2Cl2/CH3OH(2N NH3)＝45∶1)纯化残余物得到P7-2，呈深紫色浆状物(27.2g，66％)，其放置后固化。ES-MS275(MH+；100％)。
步骤2 将NBS分批(放热)加至P7-2(27g，100mmol)的CHCl3(300ml)中，并在60℃下搅拌得到的溶液16小时。然后真空下除去溶剂，并将残余物在EtOAc(200ml)和0.7N Na2S2O4(250ml)之间分配。用盐水(150ml)洗涤有机层并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析(CH2Cl2/丙酮＝45∶1)纯化残余物得到P7-3，呈黄色固体(24.2g，69％)。ES-MS353(MH+；100％)。
步骤3将NaH(544mg的60％分散体，13.6mmol)加至CH3OH(0.551ml，436mg，13.6mmol)的DMF(5ml)溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟，随后加入固体溴化物P7-3(3.99g，11.3mmol)。在室温下将该反应悬浮液搅拌16小时。然后将混合物在EtOAc(800ml)和水(40ml)之间分配。用EtOAc(40ml)萃取水层。用盐水(30ml)洗涤合并的萃取液并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液得到制备7的产物，呈白色浆状物(2.81g，81％)，其不需进一步纯化即可使用。ES-MS305(MH+；100％)。
制备8 步骤1 N2、72℃下，搅拌1B(15g，52.8mmol)和1，1’-硫代羰基二咪唑(25g，140mmol)的THF(300ml)溶液16小时，期间有沉淀生成。在真空下除去THF，通过硅胶快速层析(CH2Cl2/丙酮＝20∶1)纯化残余物得到P8-1，呈浅黄色固体(16.7g，＞95％)。ES-MS324(MH+；100％)。
步骤2N2气氛下，向搅拌的P8-1(4.00g，12.5mmol)和K2CO3(2.05g，13.6mmol)在DMF(40ml)中的混合物中加入CH3I(0.85ml，1.94g，13.6mmol)。室温下搅拌得到的混合物16小时，随后在EtOAc(100ml)和水(40ml)之间分配。用EtOAc(40ml)萃取水层。用盐水(30ml)洗涤合并的萃取液并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液得到制备8的产物，呈白色泡沫状固体(4.20g，＞95％；含有少量DMF)，其不需进一步纯化即可使用。ES-MS338(MH+；100％)。
制备9 步骤1 (公开的改进方法G.Heinisch，E.Luszczak和M.PailerMonatshefte für Chemie，1973年(104)，1372页。)N2下、在160℃的浴温中，在干燥的装置中将P9-1(4.5g，47.8mmol)、P9-2(8.12g，76.5mmol)和无水ZnCl2加热5小时。通过硅胶快速层析纯化得到的油状物，使用30％的己烷/EtOAc洗脱，得到5.92g(67％)的产物。
步骤2充分搅拌下，6小时内将OsO4(5.0ml，叔丁醇溶液，2.5％w/w)以小部分方式分次加至溶于对二噁烷(87ml)和水(29ml)的P9-3(5.9g，32.38mmol)中。然后用对二噁烷稀释该混合物并过滤。在减压下除去大部分溶剂后，将残余物加至CH2Cl2(600ml)中并用无水Na2SO4干燥。除去溶剂后，使用5％CH3OH/CH2Cl2为洗脱液，通过硅胶快速层析纯化该混合物得到制备9的产物。产量2.89g(82％)。
制备10
步骤1 用Et3N(3g，30mmol)和三苯基甲基氯(TrCl，4.25g，15.3mmol)处理P10-1(2g，15mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液并在室温下搅拌过夜。在真空下除去溶剂并通过快速柱层析(SiO2，20％的EtOAc/己烷)纯化残余物得到P10-2(5.2g，46％)。
步骤2用NBS(7.8g，43mmol)处理P10-2(5.2g，14.6mmol)的CCl4(80ml)溶液并将反应物在80℃下加热过夜。冷却反应物，过滤并浓缩，然后通过快速柱层析(SiO2，20％至30％的EtOAc/己烷)纯化残余物得到制备10的产物(2.8g，42％，M+H＝453，455)。
制备11 步骤1 向搅拌的P8-1(6.5g，20.1mmol)的EtOH(80ml)溶液中加入25％(w/w)的NaOH水溶液(20ml)。90℃下搅拌得到的混合物16小时。在真空下除去EtOH，并将残余物直接吸附在硅胶上，然后经快速层析(CH2Cl2/2N甲醇氨＝9∶1)得到P11-1，呈白色固体(4.46g，70％).ES-MS252(MH+；100％)。
步骤2 N2、室温下，搅拌P11-1(3.95g；15.7mmol)、BOC-异哌啶甲酸(3.60g；15.7mmol)、HOBT(3.19g；23.6mmol)、DIPEA(3ml；2.23g；17.2mmol)和EDCI(4.50g；23.6mmol)在DMF(30ml)中的混合物16小时。将反应混合物在EtOAc(60ml)和水(40ml)之间分配。用EtOAc(40ml)萃取水相，并用盐水(40ml)洗涤合并的萃取液，然后用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析(CH2Cl2/CH3OH(2N NH3)＝40∶1)纯化该残余物得到P11-2，呈白色固体(约7.3g，约100％)，含有少量DMF，该产物不需进一步纯化即可用于下面步骤3中。ES-MS463(MH+；70％)；407(100％)。
步骤3 N2气氛下，向搅拌的P11-2(460mg；1mmol)和K2CO3(165mg；1.20mmol)在DMF(4ml)中的混合物中加入EtI(92微升；179mg；1.15mmol)。室温下搅拌得到的混合物16小时，然后在EtOAc(20ml)和水(10ml)之间分配。用EtOAc(10ml)萃取水相，用盐水(20ml)洗涤合并的萃取液，并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液得到P11-3，呈淡黄色泡沫状物(471mg，96％)，含有少量DMF，产物不需进一步纯化即可用于下面步骤4中。ES-MS463(MH+；85％)；435(100％)。
步骤4将TFA(1ml；1.54g；13.5mmol)加至P11-3(465mg；0.949mmol)的CH2Cl2(4ml)溶液中。室温下搅拌得到的混合物2小时，然后在CH2Cl2(20ml)和1∶1(v/v)的浓NH4OH∶水(5ml)之间分配。依次用95∶5的CH2Cl2∶EtOH(5ml)和EtOAc(5ml)萃取。用无水MgSO4干燥合并的萃取液。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液得到制备11的产物，呈淡白色泡沫状物(353mg，95％)，产物不需进一步纯化即可使用。ES-MS391(MH+；100％)。
实施例1 方法A步骤1 将a(25g，0.16mol)、b(27g，0.16mol)、K2CO3(26g，0.19mol)和NaI(2.4g，0.016mol)在二甲基乙酰胺(50ml)中的混合物在140℃下加热3.5小时。浓缩该反应混合物至1/3体积，倒入饱和的NaHCO3水溶液中，并用EtOAc(4×)萃取。合并的有机层用水(2×)和盐水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。用EtOH重结晶得到1A(48g，98％)。
H2(40psi)气氛中，振荡1A(20.00g，64.2mmol)和Raney2800镍(5.0g)在乙醇(70ml)和THF(140ml)中的悬浮液2小时。通过少量celite硅藻土垫过滤该混合物。浓缩滤液并真空干燥得到黄褐色固体(18.20g，约100％)。
步骤2 室温下搅拌1B(5.00g，17.77mmol)和吡啶甲酰氯盐酸盐(3.16g，17.75mmol)的CH2Cl2(400ml)和Et3N(15ml)溶液。15小时后，反应物用CH2Cl2稀释，用水洗涤，Na2SO4干燥，浓缩并真空干燥得到棕色泡沫状物(6.47g，94％)。
步骤3 将1C(1.77g，4.58mmol)在乙醇(50ml)和浓H2SO4(5.0ml)中的溶液回流3小时，然后冷却至室温，并用1.0M NaOH中和至pH＝10。用CH2Cl2萃取得到的混合物。合并的有机溶液用Na2SO4干燥并在减压下浓缩。通过快速层析(硅胶，5％的CH3OH/CH2Cl2为洗脱液)纯化残余物得到黄褐色的泡沫状物(1.58g，94％)。
步骤4 将碘化三甲基硅烷(6.30g，31.48mmol)加至1D(3.88g，10.53mmol)的无水1，2-二氯乙烷(40ml)溶液中。75℃下搅拌得到的溶液4小时，然后冷却至室温，并用1.0M NaOH溶液处理。然后用CH2Cl2萃取该混合物。合并的萃取液用水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发溶剂。通过快速层析(硅胶，10％的CH3OH/CH2Cl2为洗脱液)纯化残余物得到灰白色泡沫状物(2.10g，67％)。
步骤5 将胺1E(5.80g，19.6mmol)和制备1的产物(5.32g，23.4mmol)溶于DMF(60ml)和CH2Cl2(60ml)中。向得到的溶液中依次加入EDCI盐酸盐(5.70g，24.50mmol)、HOBT(1.30g，24.50mmol)和二异丙基乙胺(5.08g，39.6mmol)。将得到的反应混合物在70℃下搅拌4小时，然后冷却至室温，用CH2Cl2稀释，用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。残余物通过快速层析(SiO2，5％的CH3OH/CH2Cl2至90∶10∶0.5的CH2Cl2∶CH3OH∶NH4OH)得到黄褐色泡沫状物(7.89g，65％)。
步骤6室温下搅拌1F(7.89g，12.88mmol)和TFA(29g，257mmol)的CH2Cl2(65ml)溶液12小时，用1.0M NaOH中和并用CH2Cl2萃取。合并的有机层用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。通过快速层析(SiO2，5％的CH3OH/CH2Cl2至90∶10∶0.5的CH2Cl2∶CH3OH∶NH4OH)纯化粗产物，得到标题化合物，呈白色固体(5.80g，88％)。MS514(MH+)。
实施例2 方法B步骤1 将TFA(200ml，2.596mol)加至2A(20g，51.36mmol)的CH2Cl2(100ml)溶液中。将得到的反应混合物在室温下搅拌6小时，用1.0M的NaOH中和并萃取。合并的萃取液用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。通过快速层析得到橙色固体(13.50g，91％)。
步骤2 将胺2B(1.50g，5.19mmol)和制备1的产物(1.75g，5.13mmol)溶于DMF(10ml)和CH2Cl2(10ml)中。向得到的溶液中依次加入EDCI盐酸盐(1.50g，7.83mmol)、HOBT(1.05g，7.82mmol)和二异丙基乙胺(3.71g，28.70mmol)。70℃下搅拌得到的反应混合物18小时，然后冷却至室温，用CH2Cl2稀释，用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。残余物通过快速层析得到橙色胶状物(2.31g，74％)。
步骤3 H2(30psi)下振荡2C(2.10g，3.46mmol)和Raney2800镍(1.0g)在CH3OH(100ml)中的悬浮液6小时。通过较短的填充celite硅藻土的垫过滤该混合物。浓缩滤液并真空干燥得到橙色固体(1.80g，90％)。
步骤4 将胺2D(200mg，0.347mmol)和吡啶甲酰氯盐酸盐(62mg，0.348mmol)溶于CH2Cl2中。然后通过注射器加入Et3N。室温下搅拌得到的溶液6小时，然后用1.0M NaOH溶液处理并萃取。萃取液用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。通过快速层析纯化残余物得到白色泡沫状物(167mg，收率71％)。
步骤5将2E(160mg，0.235mmol)和浓H2SO4(0.50ml)的乙醇(10ml)溶液回流2.5小时，然后冷却至室温，并用1.0M NaOH中和。萃取该混合物后，合并的有机层用水洗涤，Na2SO4干燥并浓缩。使用制备型TLC(10％的CH3OH/CH2Cl2)纯化该粗产物得到标题化合物，呈白色固体(88mg，66％)。MS564(MH+)。
实施例3 方法D步骤1 将二胺3A(1.43g，10mmol)和异哌啶甲酸3B(1.29g，10mmol)混合，并加入PPA(20g)。将得到的混合物在180℃下加热3.5小时，然后冷却至室温并用水稀释至100ml。然后用固体NaOH碱化该溶液至pH为14。过滤得到的大量沉淀。用CH3OH反复洗涤沉淀物，并将合并的CH3OH萃取液浓缩至干，装在硅胶上并进行快速层析(25-40％的5N NH3/CH3OH/CH2Cl2)纯化，得到3C，呈黑色固体(1.90g，81％)。
步骤2 将胺3C(126mg，0.54mmol)加至酸3D(181mg，0.54mmol)、HATU(247mg，0.65mmol)和Et3N(84μl，0.6mmol)在DMF(12ml)中的混合物中。将得到的混合物在室温下搅拌24小时，然后浓缩，溶于CH3OH中，将浓缩的干品装在硅胶上并进行快速层析(5-10％的5NNH3/CH3OH/CH2Cl2)纯化，得到3E，呈黄色油状物(210mg，70％)。
步骤3室温下搅拌3E(96mg，0.174mmol)在1M HCl/25％CH3OH/二噁烷(15ml)中的溶液48小时。在高真空下浓缩该混合物，然后再溶于CH3OH中，将浓缩的干品装在硅胶上并进行快速层析(10-15％的5NNH3/CH3OH/CH2Cl2)纯化，得到标题化合物，呈无色油状物(48mg，61％)。MS453(MH+)。
实施例4 方法E步骤1 将纯4A(1.75g，6.66mmol)和4B(2.93g，15.07mmol)的混合物在120℃下搅拌2天，然后冷却至室温，用1.0M NaOH溶液(30ml)处理，并用EtOAc萃取。合并的有机层用水洗涤并用Na2SO4干燥。蒸发至干后，该粗残余物通过快速层析(硅胶，50％的EtOAc/己烷为洗脱液)纯化，得到510mg 4C(18％)。
步骤2 将4C(490mg，1.18mmol)在CH3OH(20ml)中的溶液加至500ml耐压瓶中。N2流下加入氢氧化钯(300mg，20％重量，碳上)固体。55psi的氢气压力下振荡该反应混合物40小时，然后过滤。浓缩滤液并真空干燥得到黄色固体(340mg，88％)。
步骤3 依次将4D(287mg，0.88mmol)、制备1的产物(300mg，0.88mmol)、EDCI盐酸盐(210mg，1.10mmol)、HOBT(149mg，1.10mmol)和二异丙基乙胺(228mg，1.76mmol)加至50ml圆底烧瓶中。经注射器加入DMF(3ml)和CH2Cl2(3ml)。70℃下搅拌该反应混合物15小时，然后冷却至室温。加入1N NaHCO3溶液后，用CH2Cl2萃取得到的混合物。用Na2SO4干燥合并的有机溶液并浓缩。采用10％的CH3OH/CH2Cl2为洗脱液，通过硅胶快速层析纯化该粗产物得到4E，呈固体(231mg，41％)。
步骤4将4E(200mg，0.31mmol)在CH2Cl2(2.5ml)中的溶液加至25ml圆底烧瓶中。然后经注射器加入TFA。将得到的溶液在室温下搅拌15小时，然后用CH2Cl2稀释，1.0M NaOH溶液中和，并分离。用水洗涤有机溶液并用Na2SO4干燥。将溶剂蒸发后，使用10％的CH3OH/CH2Cl2为洗脱液，经制备性TLC板纯化该粗产物得到标题化合物，呈白色固体(85mg，50％)。MS544(MH+)。
实施例5
步骤1 0℃下，在1.0小时内将化合物5A(100g，0.389mol)的THF(400ml)溶液滴加至LDA(233mL，THF/庚烷/乙苯溶液，2.0M，0.466mol)的THF(300ml)溶液中。0℃下搅拌该橙红色溶液30分钟，然后通过套管转移至预先冷却(0℃)的N-氟苯磺酰亚胺(153g，0.485mol)的无水THF(600ml)溶液中。0℃下搅拌该反应混合物30分钟，然后在20℃下搅拌18小时。总溶剂体积减少至约1/3时，加入EtOAc(11)。依次用水、0.1N的HCl水溶液、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩得到粗液体状物。通过快速层析(6∶1的己烷-EtOAc)纯化，得到化合物5B(93.5g，87％)。
步骤2 用LiOH-H2O(9.2g，0.218mol)的水(100ml)溶液处理5B(50g，0.181mol)在THF(300ml)和CH3OH(200ml)中的溶液，然后在45℃下加热6小时。然后浓缩混合物并真空干燥，得到5C(45g，100％)。
步骤3 20℃下将化合物5C(20.4g，0.081mol)缓慢加至搅拌的装有CH2Cl2(250ml)的烧瓶中。冷却得到的白色浆状物至0℃，并用草酰氯(6.7ml，0.075mol)和1滴DMF缓慢处理。20℃下搅拌0.5小时后，浓缩混合物并真空干燥得到5D。
步骤4A 将c(64g，0.40mol)、d(84ml，0.52mol)和K2CO3(66g，0.48mol)在无水甲苯(350ml)中的混合物加热回流过夜。反应混合物用CH2Cl2稀释，用5％的NaOH水溶液洗涤3次，NaSO4干燥并浓缩。用MeOH重结晶得到e(121g，约100％)，呈黄色固体。
H2(40psi)气氛中，振荡e(121g，0.41mol)和Raney镍(10g)在EtOH(400ml)中的悬浮液4小时。通过短的Celite硅藻土垫过滤该混合物(用CH3OH洗涤)。浓缩滤液并真空干燥得到f(109g，约100％)，呈黑褐色固体。
用吡啶甲酸(61g，0.50mol)、EDCl(119g，0.62mol)、HOBt(84g，0.62mol)和iPr2NEt(141ml，1.03mol)处理f(109g，0.41mol)的CH2Cl2-DMF(1∶1，500ml)溶液。该混合物在70℃下搅拌6小时，然后在20℃下搅拌过夜。该反应混合物用EtOAc稀释，用5％的NaOH水溶液洗涤3次，NaSO4干燥并浓缩。通过快速层析(0-100％的EtOAc/己烷)得到g(131g，86％)。
120℃下将g(131g，0.36mol)的AcOH(200ml)溶液加热过夜。冷却该反应混合物，用5％的NaOH水溶液小心碱化并用CH2Cl2萃取。用NaSO4干燥合并的有机萃取液并浓缩。通过快速层析(0-80％的EtOAc/己烷)得到h(95g，76％)，呈黄色固体。
用碘化三甲基硅烷(272g，1.36mol)处理h(95g，0.27mol)的无水CHCl3(300ml)溶液并在70℃下加热5小时。将该反应混合物冷却，用10％的冷NaOH水溶液猝灭，并用CH2Cl2萃取。用NaSO4干燥合并的有机萃取液并浓缩。通过快速层析(2N NH3-CH3OH/EtOAc)得到5E(43g，57％)，呈淡黄色固体。
步骤4B 保持在20℃的温度下，用5E(15g，0.054mol)和iPr2NEt(25ml，0.135mol)处理5D(0.075mol)在CH2Cl2(250ml)中的混合物。1小时后，浓缩该混合物，然后于20℃下，在CH3OH(200ml)/CH2Cl2(200ml)/H2O(1ml)中搅拌1小时。然后蒸发溶剂。20℃下用TFA(200ml)在CH2Cl2(250ml)中的溶液处理，然后通过快速层析(0-7％的7N NH3-CH3OH/CH2Cl2)得到5F(80-90％，基于5C计算)。
步骤5方法A 用5G(0.31g，2.5mmol，日本专利63227573，1988年)、NaBH(OAc)3(0.53g，2.5mmol)和几滴AcOH处理5F(0.41g，1.0mmol)的CH2Cl2(20ml)溶液，然后于20℃下搅拌过夜。将该混合物在10％NaOH和CH2Cl2之间分配。用NaSO4干燥有机层并浓缩。通过快速层析(0-5％的7NNH3-CH3OH/CH2Cl2洗脱)得到标题化合物(0.45g，87％)。MS516(M+H)。
方法B 将5G(50g，0.41mol)的CH3OH(300ml)溶液冷却至0℃并小心用NaBH4(20g，0.53mol，分6批)处理20分钟。然后将反应物加热至20℃并搅拌4小时。再将该混合物冷却至0℃，小心用饱和的NH4Cl水溶液猝灭并浓缩。通过快速层析(5-10％的7N NH3-CH3OH/CH2Cl2洗脱)得到5H(31g，62％)，呈浅黄色固体。
将5H(31g，0.25mol)在CH2Cl2(500ml)中的浆状物冷却至0℃并用SOCl2(55ml，0.74mol，30分钟)缓慢处理。然后20℃下搅拌反应物过夜。浓缩原料，然后用丙酮打浆并过滤。将得到的驼色固体5I真空干燥过夜(38.4g，52％，HCl盐)。
将均匀的5F(16.4g，40mmol)的无水DMF(200ml)溶液冷却至0℃，然后用NaH(8g，200mmol)小心处理，并在20℃下搅拌20分钟。然后将反应混合物冷却至0℃，用NaI(6g，40mmol)和5I(14.5g，80mmol)处理，接着在20℃下搅拌过夜。反应物用CH2Cl2(500ml)稀释，用1N的NaOH水溶液洗涤，用盐水洗涤，通过Celite硅藻土过滤并浓缩。通过快速层析(0-4％的7N NH3-CH3OH/CH2Cl2)得到实施例5(16.9g，82％)，呈驼色固体。
实施例6 步骤1 室温下将固体CNBr(564mg；5.33mmol)分批加至搅拌下的二胺1B(1.0g，3.55mmol)的C2H5OH(25ml)溶液中。室温下搅拌得到的溶夜5天，接着在真空下除去溶剂。残余油状物在EtOAc(30ml)和2MNa2CO3(10ml)之间分配。通过加入几滴6N NaOH调节水层至pH约为10，然后再用EtOAc(2×10ml)萃取。用盐水(5ml)洗涤合并的萃取液并通过无水MgSO4过滤。真空下汽提滤液得到纯度足以不纯化即可使用的化合物6A，呈褐色粉末(1.03g；94％)。FABMS307(MH+；100％)。
步骤2 惰性气氛下，在干燥的烧瓶中搅拌化合物6A(369mg；1.20mmol)和CH2Cl2(11ml)的混合物并超声处理直至生成澄清的琥珀色溶液，然后经注射器加入异氰酸(4-氟苯酯)(158微升；190mg；1.38mmol)。保持在室温下30.5小时后，将几滴CH3OH加至反应溶液中，并在真空下除去溶剂。将残余的固体溶于沸腾的Et2O(约30ml)中。过滤掉不溶物质，并用热己烷将滤液稀释至约60ml的体积。用蒸汽浴浓缩该溶液至约30ml的体积，此时开始有沉淀生成。该混合物在室温下放置约3小时。过滤并用Et2O-己烷(1∶1 v/v)洗涤得到化合物6B，呈微红至棕色的粉末(394mg；74％)。FABMS444(MH+；100％)。虽然TLC和NMR表明有少量杂质存在，但该产物的纯度足以在下面的步骤3中使用。
步骤3 惰性气氛下，经注射器将(CH3)3SiI(214微升；301mg；1.51mmol)加至搅拌下的盛在烧瓶中(配有回流装置)的化合物6B(333mg；0.751mmol)在CHCl3(2ml)中的悬浮液中。固体迅速溶解生成深红至棕色的溶液。继续在室温下搅拌20分钟，随后将反应混合物置于预热至50℃的油浴中。保持50℃下5小时后，加入第二部分的(CH3)3SiI(54微升；75mg；0.378mmol)并再维持50℃2.5小时。从热浴中撤下反应混合物(由固相和溶液组成)并分两部分加入CH3OH(2.5ml)处理。搅拌该反应混合物并在50℃下加热几分钟，然后冷却并过滤。用1∶1(v/v)CH3OH-EtOAc洗涤收集的固体，得到6C的氢碘酸盐，呈淡红色至褐色粉末(356mg)，产物可不需进一步纯化即用于下一步骤。FABMS372(MH+；100％)。
步骤4 将固体EDCI(163mg；0.851mmol)加至搅拌下的6C(340mg；0.681mmol)、制备1的产物(228mg；0.681mmol)、HOBT(9.2mg；0.0681mmol)和NEt3(379微升；275mg；2.72mmol)在DMF(13ml)中的悬浮液中。将浑浊的反应混合物置于预热的油浴中并在50℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌生成的澄清琥珀色溶液23.5小时。加入几滴水，并在60℃下真空浓缩该反应混合物。将浓缩物在EtOAc(20ml)和水(5ml)-盐水(2.5ml)之间分配。用EtOAc(2×5ml)萃取水层。用盐水(2.5ml)洗涤合并的萃取液并通过无水MgSO4过滤。在真空下蒸发滤液，通过硅胶快速层析纯化残余物，用CH2Cl2-CH3OH-NH4OH(97∶3∶0.5至＞96∶4∶0.5)的梯度洗脱液洗脱，得到产物6D(222mg；47％)，呈淡黄色粉末。FABMS689(MH+；约93％)；578(约58％)；478(100％)。
步骤5在转动烧瓶的同时，将TFA(928微升；1.37g；12.1mmol)加至6D(208mg；0.302mmol)的CH2Cl2(3ml)溶液中，然后用干燥的N2冲洗，密封并在室温下放置6小时。在真空下蒸发该反应溶液，并将残余物在EtOAc(20ml)和2M Na2CO3(3ml)之间分配，加足量的水以生成清晰的两相。用EtOAc(3×5ml)萃取水相。合并的萃取液用盐水(3ml)洗涤并通过无水MgSO4过滤。真空下汽提滤液中的溶剂，并且将残余物通过硅胶快速层析纯化，用CH2Cl2-CH3OH-NH4OH(97∶3∶0.5)洗脱。得到标题化合物(130mg；72％)，呈淡黄色粉末。FABMS589(MH+；约64％)；478(100％)。
采用与上述那些方法类似的方法，使用合适的原料，可制备下表中的化合物
实施例388
实施例388 步骤1 用吡啶甲酸N-氧化物(1.5g，10.6mmol)、EDCI(2.6g，13.3mmol)和HOBT(1.8g，13.3mmol)处理P7-1(2.3g，8.9mmol)的CH2Cl2-DMF(1∶1，50ml)溶液。70℃下搅拌该混合物过夜。将该反应混合物浓缩，用EtOAc稀释，用5％的NaOH水溶液洗涤3次，用Na2SO4干燥并浓缩。通过快速层析(50％EtOAc/己烷)得到388A(2.5g，74％)。
步骤2 采用类似于制备5、步骤4描述的方法，将化合物388A转化为化合物388B。
步骤3 用5C(0.62g，2.5mmol)、1-丙烷膦酸环酐(propanephosphonic acidcyclic anhydride)(3.3ml，11.2mmol，50％重量，EtOAc溶液)和N-乙基吗啉(1.4ml，10.7mmol)处理388B(0.66g，2.2mmol)的DMF(15ml)溶液。50℃下搅拌该混合物3小时。将反应混合物浓缩并用EtOAc稀释。溶液用5％的NaOH水溶液洗涤3次，Na2SO4干燥，浓缩并经快速层析(10％2N NH3-CH3OH/EtOAc)分离。将所得物加入CH2Cl2(20ml)中并用4M HCl-二噁烷(4ml)处理。20℃下搅拌过夜后，仔细用10％的NaOH水溶液碱化该反应物并用CH2Cl2萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥，浓缩并经快速层析(30％2N NH3-CH3OH/EtOAc)纯化得到388C，呈白色固体(0.08g，10％)。
步骤4采用类似于实施例5、步骤5描述的方法，可将化合物388C转化为实施例388。
实施例389
步骤1 向搅拌下的浑浊的389A(300mg，1.14mmol)的THF(15ml)溶液中加入389B(292mg，1.37mmol)的THF(1ml)溶液，然后加入NaBH(OAc)3(483mg，2.28mmol)。室温下搅拌39小时后，TLC表明在浑浊的白色反应悬浮液中存在没有反应的原料。因此，加入另一部分的NaBH(OAc)3(242mg，1.14mmol)并在室温下继续搅拌113小时。然后过滤该反应混合物并用CH2Cl2充分洗涤收集的固体。真空下汽提合并的滤液和洗液，并将残余物在EtOAc(60ml)和由水(2.5ml)、2M Na2CO3(6.5ml)和6N NaOH(5ml)组成的溶液之间分配。用EtOAc(3×15ml)进一步萃取水层。用盐水(5ml)洗涤合并的萃取液并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液。通过硅胶快速层析(EtOAc/己烷＝1∶1)纯化残余物得到389C，为无色胶状物和白色泡沫状物的混合物(368mg，70％)，TLC表明为同一物质，该物质放置后会固化。ES-MS461(MH+；100％)。
步骤2 经注射器将冷的纯TFA(576微升，886mg，7.77mmol)加至搅拌下的冰浴冷却的389C(358mg，0.777ml)的CH2Cl2(7ml)溶液中。在冰水浴中搅拌得到的溶液30分钟，然后在室温下搅拌29.5小时。真空下除去挥发性物质，并且在Et2O(35ml)中研磨该胶状残余物(电磁搅拌器)16小时。过滤并用Et2O洗涤得到389D的双(三氟乙酸盐)，呈白色粉末(449mg，98％)。
步骤3将Et3N(47.4微升，34.4mg，0.340mmol)加至搅拌下的389D(100mg，0.170mmol)在CH2Cl2(5ml)中的悬浮液中，使全部固体溶解。向搅拌下的该溶液中加入5G(25.1mg，0.204mmol)，然后加入NaBH(OAc)3(72.1mg，0.340mmol)。室温下搅拌66小时后，TLC表明在淡黄色的反应悬浮夜中存在未反应的原料。因此，加入另一部分的NaBH(OAc)3(72.1mg，0.340mmol)并在室温下继续搅拌90小时。然后过滤该反应混合物并用Et2O充分洗涤收集的固体。真空下汽提合并的滤液和洗液中的溶剂，并将残余物在EtOAc(20ml)和由水(0.6ml)、2M Na2CO3(1.5ml)和6N NaOH(1.2ml)组成的溶液之间分配。用EtOAc(3×5ml)进一步萃取水层。合并的萃取液用盐水(2ml)洗涤并用无水MgSO4干燥。过滤除去干燥剂，并在真空下浓缩滤液。通过制备性TLC(硅胶CH2Cl2/CH3OH/浓NH4OH＝90∶9∶1)纯化残余物得到标题化合物，呈驼色泡沫状物(36mg，45％)。FABMS468(MH+；100％)。
采用类似于上面实施例1-6和388-389描述的那些方法，制备以下的化合物。
实施例665 室温下搅拌加有活化的3埃分子筛(6.5g)的无水CH2Cl2(25ml)中的4-[[4-[2-(5-甲基-3-异噁唑基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基]-1-(4-哌啶基羰基)哌啶(0.99g，2.51mmol)和哒嗪4-甲醛(0.35g，3.26mmoles)。5小时后，加入氢硼化三乙酸(3.2g，15mmol)并搅拌该混合物70小时。用CH2Cl2稀释该混合物并通过Celite硅藻土垫过滤出固体。将滤液与饱和的NaHCO3水溶液一起搅拌20分钟，然后分离，用盐水洗涤，并用无水Na2SO4干燥。通过制备性TLC纯化该反应混合物。用EtOAc∶己烷∶CH3OH(NH3)(75∶20∶5)洗脱所述TLC板。用13％CH3OH(NH3)/EtOAc萃取带，得到实施例665和实施例496的混合物。实施例658MS(M+H)423。
按照类似的方法，使用4-[[4-[2-(甲硫基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基]-1-(4-哌啶基羰基)哌啶(0.88g；2.44mmol)、哒嗪4-甲醛(0.34g，3.18mmol)和氢硼化三乙酸，制备实施例666和实施例495的混合物。
实施例666MS(M+H)388H3-受体结合测定的通用方法本实验中H3受体的来源为豚鼠脑。动物体重400-600g。用50mMTris(pH 7.5)溶液使脑组织均匀化。组织在均化缓冲液中的终浓度为10％(w/v)。为除去块状组织和碎屑，以1,000×g将组织匀浆离心10分钟。然后为使膜沉降，以50,000×g离心得到的上清液20分钟，随后用均化缓冲液洗涤3次(50,000×g，每次20分钟)。将膜冷冻并在-70℃储存至需要时使用。
将所有待测试的化合物溶于DMSO中，然后在结合缓冲液(50mMTris，pH 7.5)中稀释，以使终浓度为2μg/ml(0.1％DMSO)。然后将膜(400μg蛋白质)加至反应试管中。通过加入3nM[3H]R-α-甲基组胺(8.8Ci/mmol)或3nM[3H]Rα-甲基组胺(80Ci/mmol)启动反应并在30℃下连续培养30分钟。过滤将结合的配体从未结合的配体中分离出，并通过液体闪烁光谱测定法定量结合至所述膜上的放射性配体的量。全部培养均一式两份进行并且标准偏差均应小于10％。将抑制放射性配体特异性结合至受体上超过70％的化合物连续稀释，以确定Ki(nM)。
rHu H3结合测定的通用方法[3H]N∝-甲基组胺(82Ci/mmol)来自Dupont NEN。噻普酰胺来自Schering-Plough Research Institute的化学研究部。
37℃下在湿润的CO2(5％)气氛中，在Dulbecco氏改进的Eagle培养基/10％胎牛血清/青霉素(100U/ml)/链霉素(100μg/ml)/遗传霉素(0.5mg/ml)中培养稳定表达人组胺H3受体的HEK-293人胚胎肾细胞。37℃下用5mM EDTA/Hank平衡盐溶液收获第5代和第20代之间的细胞并进行膜制备。低速离心(1,000×g 10分钟)后，将它们置于10体积的冰冷却的缓冲液中并用Polytron(PTA 35/2顶端，设定6，30秒)使它们破裂。经后来的低速离心后，以50,000×g离心上清液10分钟。将高速沉淀再悬浮在原体积的缓冲液中，取样用于蛋白质测定(双金鸡宁酸，Pierce)并以50,000×g再离心上清液。将膜再悬浮在1mg蛋白质/ml缓冲液中并在-80℃冷冻至使用。
在总体积为200μl的缓冲液中，没有或有抑制剂化合物情况下用1.2nM[3H]N∝-甲基组胺培养膜(15μg蛋白质)。在10-5M的噻普酰胺存在下，测定非特异性结合。30℃下在96孔深孔聚丙烯板中培养测定混合物30分钟，然后通过浸泡0.3％聚乙烯亚胺的GF/B滤器过滤。用1.2ml 4℃的缓冲液洗涤这些混合物3次，然后在微波炉中干燥，用Meltilex蜡闪烁体浸渗并用Betaplate闪烁计数器(Wallac)以40％效率计数。
根据这些数据可推导出IC50或根据匹配这些数据的曲线使用Prism非线性最小二乘法曲线拟合程序(GraphPad Software，加利福尼亚州圣地亚哥)确定IC50。根据Cheng和Prusoff方程，可从IC50值确定Ki值。
在这些测定中，式I的化合物具有约0.1至约600nM的Ki。优选的式I的化合物具有约0.1至约100nM的Ki。更优选的式I的化合物具有约0.1至约20nM的Ki。
按照上述方法测试的本发明的代表性化合物具有以下的Ki值
在本说明书中，术语“至少一种式I的化合物”意指1至3种不同的式I化合物可用于药用组合物或治疗方法中。优选使用一种式I的化合物。同样，“至少一种H1受体拮抗剂”意指1至3种不同的H1拮抗剂可用于药用组合物或治疗方法中。优选使用一种H1拮抗剂。
对于由本发明描述的化合物制备药用组合物而言，惰性的药学可接受的载体可为固体也可为液体。固体形式的制剂包括散剂、片剂、可分散的颗粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。散剂和片剂可包含约5％至约95％的活性组分。合适的固体载体为本领域所熟知，例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖或乳糖。片剂、散剂、扁囊剂和胶囊剂可用作适合口服给药的固体剂型。对于各种组合物，药学可接受的载体和制备方法的实例可见于A.Gennaro(编著)，The Science andPractice of Pharmacy，第20版(2000年)，Lippincott Williams & Wilkins，Baltimore，MD。
液体形式的制剂包括溶液剂、悬浮剂和乳剂。可提及的实例有用于肠胃外注射剂的水或水-丙二醇溶液，或对于口服溶液剂、混悬剂和乳剂，还可加有甜味剂和遮光剂。液体形式的制剂也可包括鼻内给药的溶液剂。
适合吸入的气雾剂可包括可与药学可接受的载体(例如惰性压缩气体(如氮气))组合的溶液和粉末形式的固体。
也包括在临用前将其转化为经口或肠胃外给药的液体形式的制剂的固体形式的制剂。这些液体形式包括溶液、混悬液和乳液。
本发明的化合物也可经皮释放。这些经皮组合物可采用乳膏剂、洗剂、气雾剂和/或乳剂的形式，并可以本领域为此目通常使用的方式，包括在骨架或贮藏库型的经皮贴片中。
优选所述化合物经口给药。
优选所述药用制剂为单位剂型。在该形式中，将所述制剂细分为合适大小的含有适当数量的活性组分(例如达到所需目的的有效量)的单剂量。
根据特定的施用，制剂的单剂量中活性化合物的量可从约1mg至约350mg，优选从约1mg至约150mg，更优选从约1mg至约50mg变化或调整。
根据患者的需要和待治疗病症的严重度，实际施用的剂量可以不同。对于特定情况，合适的用药方法的确定为本领域的通用技术。为了方便，根据需要可在每天内将总剂量分开并分次给药。
本发明的化合物和/或其药学可接受的盐的量和给药次数将根据临床主治医师考虑例如年龄、病症和患者体重以及治疗症状的严重度等因素作出的判断而调整。一般推荐的口服给药日剂量可为约1mg/天至约300mg/天、优选1mg/天至约75mg/天，分2至4次给药。
当本发明包含H3拮抗剂和H1拮抗剂化合物的组合时，可同时或依次联合给予这两种活性组分，或给予单独的包含在药学可接受的载体中的H3拮抗剂和H1拮抗剂的药用组合物。所述组合中的各组分可个别或一起，采用任何常规剂型(例如胶囊剂、片剂、散剂、扁囊剂、混悬剂、溶液剂、栓剂鼻喷雾剂等)给予。根据公开的材料，可确定H1拮抗剂的剂量，并且每个剂量可为1至1000mg。
当H3和H1拮抗剂药用组合物分别给药时，可用一个包含在单个包装中的药剂盒来提供，在药剂盒中包括一个包含在药学可接受的载体中的H3拮抗剂的容器和一个分开的包含在药学可接受的载体中的H1拮抗剂的容器，并且所使用H3和H1拮抗剂的量使所述组合治疗有效。例如当必须以不同的时间间隔给予所述组分或者它们的剂型不同时，药剂盒有利于给予这样的组合。
虽然已结合上述具体实施方案对本发明作出描述，但是对本领域普通技术人员来讲，其中许多替代、修改及变更是显而易见的。所有的该类替代、修改和变更将落入本发明的宗旨和范围内。
权利要求
1.一种由以下结构式表示的化合物 或其药学可接受的盐或溶剂合物，其中虚线代表任选的双键；a为0至2；b为0至2；n为1、2或3；p为1、2或3；r为0、1、2或3；条件是当M2为N时，p不为1；和当r为0时，M2为C(R3)；并且p和r的和为1至4；M1为C(R3)或N；M2为C(R3)或N；X为键或C1-C6亚烷基；Y为-C(O)-、-C(S)-、-(CH2)q-、-NR4C(O)-、-C(O)NR4-、-C(O)CH2-、-SO2-、-N(R4)-、-NH-C(＝N-CN)-或-C(＝N-CN)-NH-；条件是当M1为N时，Y不为-NR4C(O)-或-NH-C(＝N-CN)-；当M2为N时，Y不为-C(O)NR4-或-C(＝N-CN)-NH-；和当Y为-N(R4)-时，M1为CH并且M2为C(R3)；q为1至5，条件是当M1和M2均为N时，q为2至5；Z为键、C1-C6亚烷基、C1-C6亚烯基、-C(O)-、-CH(CN)-、-SO2-或-CH2C(O)NR4-；R1为 Q为-N(R8)-、-S-或-O-；k为0、1、2、3或4；k1为0、1、2或3；k2为0、1或2；R为H、C1-C6烷基、卤代(C1-C6)烷基-、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-、(C1-C6)-烷氧基-(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-SO0-2、R32-芳基(C1-C6)烷氧基-、R32-芳基(C1-C6)烷基-、R32-芳基、R32-芳氧基、R32-杂芳基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)环烷基-氧-、R37-杂环烷基、R37-杂环烷基-氧-、R37-杂环烷基-(C1-C6)烷氧基、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-、-N(R30)(R31)、-NH-(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基、-NHC(O)NH(R29)；R29-S(O)0-2-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)0-2-、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-S(O)0-2-或苯甲酰基；R8为H、C1-C6烷基、卤代(C1-C6)烷基-、(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-、R32-芳基(C1-C6)烷基-、R32-芳基、R32-杂芳基、(C3-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基-(C1-C6)烷基、R37-杂环烷基、N(R30)(R31)-(C1-C6)烷基-、R29-S(O)2-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)2-、R29-S(O)0-1-(C2-C6)烷基-、卤代(C1-C6)烷基-S(O)0-1-(C2-C6)烷基-；R2为具有1或2个独立选自N或N-O的杂原子，及其余的环原子为碳的六元杂芳环；具有1、2、3或4个独立选自N、O或S的杂原子，及其余的环原子为碳的五元杂芳环；R32-喹啉基；R32-芳基；杂环烷基；(C3-C6)环烷基；C1-C6烷基；氢；硫茚基； 其中所述六元杂芳环或所述五元杂芳环任选被R6取代；R3为H、卤素、C1-C6烷基、-OH、(C1-C6)烷氧基或-NHSO2-(C1-C6)烷基；R4独立选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基、R33-芳基、R33-芳基(C1-C6)烷基和R32-杂芳基；R5为氢、C1-C6烷基、-C(O)R20、-C(O)2R20、-C(O)N(R20)2、(C1-C6)烷基-SO2-或(C1-C6)烷基-SO2-NH-；或R4和R5与它们连接的氮一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环、哌嗪环或吗啉环；R6为1至3个独立选自-OH、卤素、C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、-CF3、-NR4R5、-CH2-NR4R5、-NHSO2R22、-N(SO2R22)2、苯基、R33-苯基、NO2、-CO2R4、-CON(R4)2、 和 的取代基；R7为-N(R29)-、-O-或-S(O)0-2-；R12独立选自C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基或氟基，条件是当R12为羟基或氟基时，那么R12不连接至与氮相邻的碳上；或两个R12取代基形成从一个环碳到另一个不相邻环碳间的C1至C2的烷基桥；或R12为＝O；R13独立选自C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基或氟基，条件是当R13为羟基或氟基时，那么R13不连接至与氮相邻的碳上；或两个R13取代基形成从一个环碳到另一个不相邻环碳间的C1至C2的烷基桥；或R13为＝O；R20独立选自氢、C1-C6烷基或芳基，其中所述芳基任选被1至3个独立选自卤素、-CF3、-OCF3、羟基或甲氧基的基团取代；或当存在两个R20基团时，所述两个R20基团可与它们连接的氮一起形成五或六元杂环；R22为C1-C6烷基、R34-芳基或杂环烷基；R24为H、C1-C6烷基、-SO2R22或R34-芳基；R25独立选自C1-C6烷基、卤素、-CN、-NO2、-CF3、-OH、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、-C(O)OR29、-N(R4)(R5)、N(R4)(R5)-C(O)-、N(R4)(R5)-S(O)1-2-、R22-S(O)0-2-、卤基-(C1-C6)烷基-或卤基-(C1-C6)烷氧基-(C1-C6)烷基-；R29为H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、R35-芳基或R35-芳基(C1-C6)烷基-；R30为H、C1-C6烷基-、R35-芳基或R35-芳基(C1-C6)烷基-；R31为H、C1-C6烷基-、R35-芳基、R35-芳基(C1-C6)烷基-、R35-杂芳基、(C1-C6)烷基-C(O)-、R35-芳基-C(O)-、N(R4)(R5)-C(O)-、(C1-C6)烷基-S(O)2-或R35-芳基-S(O)2-；或R30和R31一起形成-(CH2)4-5-、-(CH2)2-O-(CH2)2-或-(CH2)2-N(R38)-(CH2)2-并与它们连接的氮一起形成环；R32为1至3个独立选自H、-OH、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、R35-芳基-O-、-SR22、-CF3、-OCF3、-OCHF2、-NR39R40、苯基、R33-苯基、NO2、-CO2R39、-CON(R39)2、-S(O)2R22、-S(O)2N(R20)2、-N(R24)S(O)2R22、-CN、羟基-(C1-C6)烷基-、-OCH2CH2OR22和R35-芳基(C1-C6)烷基-O-的取代基，或两个在相邻碳原子上的R32基团一起形成-OCH2O-或-O(CH2)2O-基团；R33为1至3个独立选自C1-C6烷基、卤素、-CN、-NO2、-CF3、-OCF3、-OCHF2和-O-(C1-C6)烷基的取代基；R34为1至3个独立选自H、卤素、-CF3、-OCF3、-OH和-OCH3的取代基；R35为1至3个独立选自氢、卤基、C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基、苯氧基、-CF3、-N(R36)2、-COOR20和-NO2的取代基；R36独立选自H和C1-C6烷基；R37为1至3个独立选自氢、卤基、C1-C6烷基、羟基、C1-C6烷氧基、苯氧基、-CF3、-N(R36)2、-COOR20、-C(O)N(R29)2和-NO2的取代基，或R37为一个或两个＝O基；R38为H、C1-C6烷基、R35-芳基、R35-芳基(C1-C6)烷基-、(C1-C6)烷基-SO2或卤代(C1-C6)烷基-SO2-；R39独立选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6)环烷基(C1-C6)烷基、R33-芳基、R33-芳基(C1-C6)烷基和R32-杂芳基；和R40为氢、C1-C6烷基、-C(O)R20、-C(O)2R20、-C(O)N(R20)2、(C1-C6)烷基-SO2-或(C1-C6)烷基-SO2-NH-；或R39和R40与它们连接的氮一起形成氮杂环丁烷环、吡咯烷环、哌啶环、哌嗪环或吗啉环。
2.权利要求1的化合物，其中M1为N，a为0，和n为2，并且所述任选双键不存在。
3.权利要求2的化合物，其中M2为其中R3为氢或氟的C(R3)，b为0，r为1，和p为2。
4.权利要求3的化合物，其中X为键。
5.权利要求4的化合物，其中Y为-C(O)-。
6.权利要求5的化合物，其中Z为直链或支链C1-C3烷基。
7.权利要求6的化合物，其中R2为任选被一个R6取代基取代的6元杂芳环。
8.权利要求7的化合物，其中R2为嘧啶基、R6-嘧啶基、吡啶基、R6-吡啶基或哒嗪基并且R6为-NH2。
9.权利要求8的化合物，其中R2为 或
10.权利要求2的化合物，其中R1为
11.权利要求10的化合物，其中R为(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、杂芳基或R32-芳基；R25为卤素或-CF3；并且k和k1为0或1。
12.权利要求11的化合物，其中R为-CH3、-CH2CH3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH(CH3)2、-CH2CH3、-SCH3、-SCH2CH3、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噁唑基或R32-苯基。
13.权利要求12的化合物，其中R2为 或
14.权利要求1的化合物，所述化合物选自
15.一种药用组合物，所述组合物包含有效量的权利要求1的化合物和药学有效载体。
16.权利要求1的化合物在制备用于治疗以下病症的药物中的用途变态反应，变态反应引起的呼吸道反应，充血，低血压，心血管疾病，胃肠道疾病，胃肠道的运动过度和不足以及酸性分泌过度和不足，肥胖，睡眠障碍，中枢神经系统紊乱，注意力不集中的过度反应症，中枢神经系统活动减退和过强，阿尔茨海默病，精神分裂症和偏头痛。
17.一种药用组合物，所述组合物包含有效量的权利要求1的化合物、有效量的H1受体拮抗剂和药学有效载体。
18.权利要求1的化合物在制备与H1受体拮抗剂联合用于治疗以下的病症的药物中的用途变态反应，变态反应引起的呼吸道反应和充血。
19.权利要求19的用途，其中所述H1受体拮抗剂选自阿司咪唑，阿扎他定，氮斯汀，阿伐斯汀，溴苯那敏，西替利嗪，氯苯那敏，氯马斯汀，赛克力嗪，卡瑞斯汀，赛庚啶，卡比沙明，脱碳乙氧基氯雷他定，苯海拉明，多西拉敏，二甲茚定，依巴斯汀，依匹斯汀，乙氟利嗪，非索非那定，羟嗪，酮替芬，氯雷他定，左卡巴斯汀，美克咯嗪，咪唑斯汀，美喹他嗪，米安色林，诺柏斯汀，诺阿斯米唑，哌香豆司特，美吡拉敏，异丙嗪，特非那定，曲吡那敏，替美斯汀，阿利马嗪或曲普利啶。
全文摘要
公开了式(I)的组胺H
文档编号C07D417/14GK1658874SQ03813779
公开日2005年8月24日 申请日期2003年4月16日 优先权日2002年4月18日
发明者Q·曾, R·G·阿斯拉尼安, M·Y·伯林, C·W·博伊斯, J·曹, J·A·科兹罗夫斯基, P·曼加拉茨纳, K·D·麦科尔米克, M·W·穆塔希, S·B·罗森布卢姆, N·-Y·施, D·M·索洛蒙, W·C·托姆 申请人:先灵公司