专利名称：一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法
技术领域：
本发明是一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，属柑桔功能性成分的二次深加 工领域。
二背景技术：
橙皮苷是柑桔中含量最为丰富的黄酮类物质之一，但是橙皮苷在柑桔果实中是以活性较 低的糖苷形式存在，提取得到的橙皮苷其糖苷键并没有断开，这种糖苷键的存在特别是鼠李 糖糖苷键的存在，阻碍了其被生物体消化吸收，降低了其生物利用率。而且橙皮苷的溶解性 很差，它的水溶性和脂溶性都相当低，使得它不易被生物酶类利用，也不易透过生物细胞膜， 因而也限制了它在食品等领域中的应用。
从柑桔中提取橙皮苷在上世纪70年代就已经工业化生产了 ，这些橙皮苷大部分应用于医 药和化妆品领域中，在食品和保健品领域几乎没有应用。因为橙皮苷中糖基的存在，经人体 口服后需要经人体大肠中微生物分解后才能被吸收，未被分解的部分则随大便排出体外，而 对于肠胃功能不好的人则橙皮苷的药效也会降低。至于人体皮肤吸收，也由于糖基的存在， 降低了橙皮苷的亲脂性，不易通过皮肤细胞，因此也会降低它对皮肤作用的效果。而去除糖 基或部分糖基后，橙皮苷的衍生物在水溶性、脂溶性和生物利用率上面都会改善。本发明就 是针对橙皮苷所连的糖基对橙皮苷理化性质和活性的影响，利用酸对糖基的水解作用，得到 生物利用率较高的橙皮素-7-葡萄糖苷以及副产品橙皮素。另外，橙皮素-7-葡萄糖苷也是合成 高倍甜味剂的原料，合成药物的原材料。
目前除了用酸来水解橙皮苷外，也有用酶法水解的。相对于酸法水解，酶法水解温度较 低，水解反应较好控制，但是经发酵产酶的产率并不高，价格昂贵，而且水解率较低，若酶 系中含有多种酶，得到的反应产物仍然复杂，使得分离纯化困难。而用酸法来水解，水解率 高，成本低廉，水解产物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素易于分开，未经水解的橙皮苷也可以循 环利用用于下一次水解。
三
发明内容
本发明公开了一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于通过对橙皮苷 适度的水解，并通过一定的分离纯化方法，得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。本 发明的内容分为两部分， 一部分为通过橙皮苷的酸水解得到水解混合产物， 一部分为水解混
合产物的分离提纯。为了达到这一目的，本发明的技术方案如下橙皮苷的酸水解时，采用的方法如下称取橙皮苷适量，先加碱溶液，使橙皮苷溶解， 再加入一定量的有机溶剂，预热使其中的橙皮苷完全溶解，最后加入预热过的盐酸溶液，加 热回流一段时间，终止反应，调节pH值，静置，过滤，滤液浓縮，浓縮到一定倍数后，过 滤析出的物质，两次滤渣合并，烘干用于下一步提纯用。
对水解混合产物的分离提纯时，所用的方法特征在于混合物中的三种组分在纯丙酮和丙 酮的水溶液中的溶解度不同，通过这一性质对混合产物进行提纯。将混合产物按固液比为1 : 10溶解在纯的丙酮中，在40 50'C下搅拌1-2h ,过滤，得到滤液I和滤渣I ，滤渣I溶解 在40 50匸60%~80%的丙酮中，zK浴20-60min，再过滤，滤液II和滤渣II，滤液II经真空蒸
干，得到橙皮素-7-葡萄糖苷，滤渣n可循环利用再用来酸水解。滤液I蒸干得到橙皮素。反
复上述步骤，即可得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。 本发明的优点
(1) 本发明独特的酸水解工艺，先用碱对橙皮苷进行溶解，加入有机溶剂促进其溶解， 使得橙皮苷在整个溶液中呈分散状态，再加入酸后，橙皮苷能够较快地被水解。
(2) 本发明通过橙皮苷的酸水解，改善了其理化性质和生物利用率。
(3) 本发明独特的分离提纯工艺，与以前树脂层析方法相比，具有快速、溶剂消耗低、 工艺简单、成本低廉等优点。
(4) 本发明把分离提纯得到的未分解的橙皮苷进行循环利用，再用于下一步的酸水解， 从而提到了橙皮苷总的水解率。
具体实施例方式
下面通过具体的实施方式对本发明作进一步描述，但绝不是要对本发明作任何限制。 实施例h橙皮苷购自浙江衢州天圣植物提取有限公司，含量为96。/。(HPLC)。橙皮苷称取 3g，溶解于15ml 1M的氢氧化钠溶液中，加入20ml的异丙醇，预热，充分溶解后加入预热 过的5M的盐酸溶液18ml，补水至50-60ml，加热沸腾回流15min，终止反应，调节pH值至4， 静置，过滤，得到水解产物2.2g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为17.31%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为16.26%、 4.36%。把得到的水解产物进行分离提纯，得到橙皮素 -7-葡萄糖苷制品0.6g，纯度为64%，得到橙皮素制品0.2g,纯度达84。/。。
实施例2:称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M的氢氧化钠溶液中，加入20ml的异丙醇， 预热，加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产物2. 3g，经HPLC 分析，可知橙皮苷水解率为35. 53%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为28. 05%、 10. 06%。 水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品lg，纯度为70%，得到橙皮素制品0. 4g，纯度达86%。
实施例3:称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml的乙醇，预热， 加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产物2. 5g，经HPLC分析， 可知橙皮苷水解率为9. 18%,橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别为8.68%、 4.50%。水解产 物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.22g，纯度为63%,得到橙皮素制品0.1g， 纯度达82%。
实施例4:称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml的DMF(N，N—二 甲基甲酰胺)，预热，加入预热过的5M的盐酸溶液18ml，加热沸腾回流45min，得到水解产 物2. 3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为16. 3%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含量分别 为20.06%、 0.24%。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0. 3g，纯度为63%， 得到橙皮素制品0. lg,纯度达82%。
实施例5:称取橙皮苷3g，溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ral异丙醇，预热， 充分溶解后加入预热过的5M盐酸，使反应体系中盐酸浓度为l.ON ，加热沸腾回流45min， 得到水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为15. 51%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮 素含量分别为12.39%、 6.50%。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0.4g， 纯度为68%,得到橙皮素制品0. 2g,纯度达84%。
实施例6:称取橙皮苷3g,溶解于15ml 1M氢氧化钠溶液中，加入20ml异丙醇，预热， 加入预热过的盐酸，使反应体系中使盐酸浓度2.0N ，加热沸腾回流45min，终止反应，得到 水解产物2.3g，经HPLC分析，可知橙皮苷水解率为48. 0%，橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素含 量分别为含量为22. 05%、 28.06%。水解产物经过分离提纯，得到橙皮素-7-葡萄糖苷制品0. 8g， 纯度为70%，得到橙皮素制品0. 6g,纯度达85%。
权利要求
1. 一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于以从柑桔中提取的橙皮苷为原料，溶于10～30ml1M的碱性溶液中，添加20～40ml的有机溶剂，充分溶解后，预热，最后加入预热过的5M盐酸10～30ml，沸水浴回流15～60min，冷却，调节pH值至3～6，静置，过滤得到水解混合物。混合物经分离提纯得到橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。其中的碱性溶液为氢氧化钠或氢氧化钙溶液。
2. 根据权利要求书1所述， 一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，所述的有机溶剂 为下列之一异丙醇、乙醇、甲醇、正丁醇、DMF、丙酮。
3. 根据权利要求书1所述，其中的分离提纯方法是采用60% 80%丙酮水溶液和纯丙酮两种 有机溶剂来进行的。所述的方法为(1)水解混合产物先用纯丙酮来溶解，搅拌1 2h， 过滤，得到滤渣，滤渣用纯的丙酮再洗涤两次；(2)用60% 80%丙酮溶液溶解滤渣，过 滤，滤液真空蒸发至干；(3)蒸干物在4(TC真空干燥，即可得含量较高的橙皮素-7-葡萄糖 苷。重复步骤(2)，可得到步骤(l)滤渣中残留的橙皮素-7-葡萄糖苷。把步骤(l)中得到的滤 液真空蒸干，可得到含量较高的橙皮素。
4. 根据权利要求书3所述，水解产物经过分离提纯后，可以把产物中的三种组分分开，其中 的橙皮苷部分可以进行循环利用，再用于下一次的酸水解。
全文摘要
本发明公开了一种橙皮苷的高生物利用率衍生物的制备方法，其特征在于通过对橙皮苷适度的水解，并通过一定的分离纯化方法，得到纯度较高的橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。其制备方法为以从柑桔中提取的橙皮苷为原料，溶于一定量的碱性溶液中，添加一定量的有机溶剂，充分溶解后，预热，最后加入也预热过的一定量的盐酸，沸水浴回流一定时间，冷却，调节pH后，静置，过滤得到水解混合产物。混合物经分离提纯得到橙皮素-7-葡萄糖苷、橙皮素。产物经分离提纯后未分解的橙皮苷可以循环利用于下一次的酸水解。本发明通过简单的酸水解方法，即可得到高生物利用率的橙皮苷衍生物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素，因此具有成本低廉、工艺简单的优点，可循环生产，易于实现工业化生产。
文档编号C07H17/07GK101445530SQ20081016383
公开日2009年6月3日 申请日期2008年12月25日 优先权日2008年12月25日
发明者夏其乐, 颖 杨, 邢建荣, 郑美瑜, 陆胜民, 陈剑兵 申请人:浙江省农业科学院