专利名称：全氟辛酸人工完全抗原的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid，PF0A)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。
背景技术：
全氟辛酸(PFOA)是一种重要的含氟表面活性剂，主要用于聚合物添加剂、润滑剂、灭火剂、杀虫剂等。由于全氟辛酸的化学惰性及其广泛的生产和使用，已造成严重的环境累积和污染，成为继有机氯农药、二恶英之后日益引起重视的新型持久性有机污染物。研究表明，全氟辛酸是具有中等毒性的肝致癌物，可增加人类患癌症的风险，此外，全氟辛酸还具有胚胎毒性和潜在的神经毒性，而且生物蓄积性强，具有引起生物体脂肪代谢紊乱、能量代谢障碍、诱导过氧化产物作用及胚胎毒性等多种毒性。调查表明，职业性PFOA暴露人群、一般人群和野生动物体内以及环境中，均广泛存在着以PFOA为主的PFCs污染。因此， 对于环境中全氟辛酸的检测是非常重要的。目前国内的研究多集中于利用了固相萃取与高效液相色谱.质谱(HPLCMQ联用的方法同时检测生物体内和水中的PF0A。但样品预处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵，很难达到快速、简便的现场检测要求。如果能够采用金标免疫或酶联免疫的方法，则可达到快速、灵敏并能现场检测PFOA的需要。为了建立其免疫分析的方法，首先必须得到全氟辛酸的抗体。全氟辛酸分子结构简单，分子量小，属于半抗原，不能直接免疫制取抗体，必须首先将其与载体蛋白偶联制备出它的完全抗原，才能诱发动物产生抗体。
发明内容
本发明的目的在于寻求适当的试剂，用简单、实用的方法合成出全氟辛酸的完全抗原，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供基础。
发明内容
本发明涉及一种全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid, PF0A)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用全氟辛酸的羧酸基团，可以将全氟辛酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上；连接臂的类型或者长度的选择取决于由此抗原产生的抗体的活性，制备全氟辛酸的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白 (BSA)，卵清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。 MALDI-T0F-MS质谱确定载体蛋白上全氟辛酸的数量。本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
具体实施例方式实施例1
权利要求
1.本发明涉及一种全氟辛酸(Perfluorooctanoicacid, PF0A)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用全氟辛酸的羧酸基团，将全氟辛酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上，制备全氟辛酸的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。MALDI-TOF-MS质谱确定载体蛋白上全氟辛酸的数量。本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)jp 清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，可以将全氟辛酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上；连接臂的类型或者长度的选择取决于由此抗原产生的抗体的活性。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，能够将全氟辛酸链接到载体蛋白上的方法和试剂。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应温度在-100°C-100°C之间。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应时间在1分钟-200小时之间。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，全氟辛酸的用量为载体蛋白的 0. 001-2000摩尔当量。
全文摘要
本发明涉及一种全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid，PFOA)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用全氟辛酸的羧酸基团，将全氟辛酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上，制备全氟辛酸的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-TOF-MS质谱确定载体蛋白上全氟辛酸的数量。本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
文档编号C07K14/77GK102276713SQ20101020276
公开日2011年12月14日 申请日期2010年6月10日 优先权日2010年6月10日
发明者孙艳灵, 杜宇国, 魏国华 申请人:中国科学院生态环境研究中心