专利名称：一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法
技术领域：
本发明涉及一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法。
背景技术：
板栗(Castanea mollissima Blume)属山毛榉科(Fagacene)植物,为落叶乔木。 近些年来，我国板栗产业发展迅速，栽培面积由1989年的70万亩增加到2009年的3000万 亩，产量也由原来的10. 25万吨提高到108万吨，占全世界栗总产量的76. 5%，发展前景良 好。与此同时，板栗生产过程中产生的栗叶、栗苞、栗壳等废弃物量也不断增加，其同板栗坚 果生产比值达2. 5-3 1。目前对板栗栗蓬的开发仅有中国专利CN1651550A报道了一种板 栗苞壳固型炭及其制作方法，而板栗壳开发中国专利CN1765206A和中国专利CN 1569970A 报道了一种板栗壳天然色素的生产方法和提取方法，其中中国专利CN 1746107A记载了板 栗壳活性炭的制备方法，中国专利CN19552020A记载了板栗壳天然燃料的制备及其应用的 报道。如何对处理这些废弃物，提高其利用率，实现其循环产业发展，增加传统板栗种植业 新的经济增长点已逐渐成为新的研究方向，具有良好的开发前景和经济社会效益。栗蓬是栗子的外刺苞。众多研究表明，栗蓬中富含鞣花酸鞣质等植物多酚类物质。 植物多酚是一类多羟基化合物，是一种天然的无毒的抗氧化剂，试验表明其具有较强的清 除自由基和抗氧化能力，并对大肠杆菌有抑制作用，具有一定的药理作用。已经广泛应用于 食品、药品和日用品。因此，对栗蓬中鞣花酸鞣质进行制备，将其用于饲料工业原料、食品工 业原料、化工业原料和医药产品，将具有广阔的开发和应用前景；在使板栗废弃物得到充分 利用、减少环境污染的同时，也提高板栗的附加值，带动农村经济发展；对我国循环经济的 发展，建设资源节约型、环境友好型社会具有十分重要的意义。目前，鞣质类物质的提取，采用最多的是溶剂法选用乙醇-乙醚混合溶剂从石榴 皮中提取单宁的最佳工艺条件为时间12小时，溶剂用量100毫升(每10克干石榴皮粉) 溶剂配比乙醇乙醚1.5 1 ；石榴皮中选用水、吡啶、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、0. 碳酸钠、乙 醇、浓硫酸进行鞣花酸类色素的提取实验。老鹳草鞣质提取工艺乙醇浓度为40%，溶剂用 量24.倍(12倍、12倍)，提取时间他(3，；3)提取两次，老鹳草中鞣质提取量为3. 498%。还 有一些重金属盐离子沉淀法(包括乙酸铅、乙酸铜、氯化亚锡或碱土金属的氢氧化物水溶 液等)、超声回流辅助溶剂法，纯溶剂法提取的鞣质纯度较低，活性弱；重金属盐沉淀法会 导致重金属残留，安全性差；超声处理与水浴回流辅助制备鞣质含量高。
发明内容
本发明的目的是提供一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法。本发明提供的一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法，包括如下步骤将所述 板栗栗蓬粉末加入至乙醇水溶液中得到所述板栗栗蓬的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散 液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液即得所述鞣花酸鞣质。上述的方法中，所述板栗栗蓬粉末的粒度可为20目-40目，具体可为20目。
上述的方法中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量百分含量可为0% -45%，但不为 0%，具体可为15%、30%或45%。上述的方法中，所述板栗栗蓬粉末与所述乙醇水溶液的配比为每Ig所述板栗栗 蓬粉末需(10-40)ml所述乙醇水溶液。上述的方法中，所述超声提取的频率可为40KHz ；所述超声提取的温度可为 400C -50°C，如40°C ；所述超声提取的时间为30min-40min，如30min。上述的方法中，所述水浴回流提取可为2次；所述水浴回流中的溶剂为乙醇水溶 液，其中乙醇的质量百分含量为0% -45%，但不为0%，具体可为15%、30%或45% ；所述 水浴回流中，所述板栗栗蓬粉末与所述乙醇水溶液的配比为每Ig所述板栗栗蓬粉末需 (10-40)ml所述乙醇水溶液。上述的方法中，每次所述水浴回流提取的溶剂为等体积的所述乙醇水溶液；所用 的乙醇水溶液与初始加入的乙醇水溶液浓度和体积均相同。上述的方法中，每次所述水浴回流提取的溶剂可为等体积的所述乙醇水溶液。上述的方法中，所述水浴回流提取的温度可为50°C -80°C，具体可为50°C、50°C或 80°C ；所述水浴回流提取的时间为0. 5小时-1. 5小时，具体可为0. 5小时、1小时或1. 5小 时。上述的方法中，所述方法还包括将所述鞣花酸鞣质进行冷冻干燥的步骤；所述冷 冻干燥的温度可为_50°C —60°C，如-50°C、_56°C或-60°C;所述冷冻干燥的时间可为15小 时-25小时，如15小时、20小时或25小时。本发明提供的方法采用超声提取与水浴回流提取相结合，具有如下优点超声提 取优点彻底改变传统的水煮醇沉萃取方法，与水煮醇沉相比较，产生波萃取具有如下优 点(1)无需高温，在40°C-50°C水温下产生波强化萃取，不破坏药材中某些具有热不稳定， 易水解或氧化特性的药效成分，超声波能促进植物细胞破壁，提高中药效；( 常压萃取， 安全性好，操作简单易行，维护保养方便；(3)萃取效率高。超声波强化萃取20-40分钟可 获得最佳提取率，萃取时间水煮、醇沉法三分之一或者更少，萃取充分；(4)具有广谱性，适 用性广，绝大多数的中药材各类成分均可超声萃取；( 超声波萃取对溶剂和目标萃取物 的性质关系不大，因此可供萃取溶剂的种类多，目标萃取物范围广泛；(6)药材原料处理量 大，有效成分易于分离、净化；(7)萃取工艺成本低，综合经济效应显著。水浴回流提取的优 点(1)防止溶剂挥发损失；(2)保持恒温。本发明具有如下优点(1)工艺简单、成本低。本发明采用乙醇的水溶液进行精致 而成，条件温和。(2)提取过程选用乙醇，所制的鞣花酸鞣质安全无毒，对人体没有伤害。(3) 可推广到大范围的工业生产中去。栗蓬鞣花酸鞣质具有抗氧化能力，对人肌体内的一些有 害自由基有清除作用；同时具有一定的抑菌作用，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑根霉、啤酒 酵母均具有杀菌作用，与苯甲酸钠等防腐剂相比，有更显著的效果。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。本发明下述实施例的鞣花酸鞣质提取物中的鞣花酸鞣质的含量是按照以下方法进行测定的称取1. OOOg鞣花酸鞣质提取物用去离子水定容至200ml，放置在35°C左右 水浴锅中加热，精密吸取IOml浓度为lmol/L的乙酸锌水溶液放置锥形瓶中，加7ml饱 和氨水，摇勻使白色沉淀溶解后与上述提取物的水溶液混合，置于原水浴锅中继续加热 30min (间隙摇数次)，冷却至室温后，用水稀释至250ml容量瓶中，摇勻后用干滤纸过滤，收 集澄清滤液于干燥的锥形瓶中，弃去初滤液，取IOml续滤液至250ml锥形瓶中加150毫升 去离子水，12. 5ml pH为10的NH4-NH3 .H2O缓冲液，铬黑T指示剂0. 5ml，然后以0. 05mol/L 乙二胺-四乙酸钠(EDTA-2Na)标准溶液滴定，溶液由红色至蓝色即为终点，以下式计算结 果鞣花酸鞣质的含量(％) = (0. 1556XV)/WX100%其中，0. 1556 由实验求得的比例常数；V IM乙酸锌标准溶液的络合沉淀消耗量(毫升)=10 XMZn_25 XMeX Q ；Mzn 乙酸锌标准溶液的克分子浓度；Me 乙二胺四乙酸二钠标准溶液的克分子浓度；Q 乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定消耗的毫升数；W为样品质量(克)；实施例1、鞣花酸鞣质的提取将板栗栗蓬风干、粉碎后过20目筛，称取10. OOg栗蓬粉末，按质量体积比为 1 20(g/ml)将栗蓬粉末加入乙醇的质量百分含量为45%的乙醇水溶液中，混合均勻得到 栗蓬粉末的乙醇水分散液，在40°C下超声提取(超声频率为40KHz) 30min,然后在60°C下水 浴回流提取2次，每次均30min，每次回流提取后抽滤，再重新加入与初始加入的乙醇水溶 液等体积的乙醇水溶液(乙醇的质量百分含量为15% )进行提取，再抽滤，合并两次提取的 滤液。利用旋转蒸发仪减压浓缩合并得到的滤液，水浴温度为50°C，浓缩至小体积，用冷冻 干燥器冷冻干燥(温度为_56°C，时间为20小时)，得到1. 984g棕红色的栗蓬棕色粉末，即 栗蓬天然鞣花酸鞣质提取物，其中鞣花酸鞣质的含量为13. 53%,占原料栗蓬质量百分含量 为 2. 68%。实施例2、鞣花酸鞣质的提取将栗蓬风干、粉碎后过20目筛，称取10. 20g栗蓬粉末，按质量体积比为1 20 (g/ ml)将栗蓬粉末加入质量百分含量为30%的乙醇水溶液中，混合均勻得到栗蓬粉末的乙醇 水分散液，在40°C下超声提取(超声频率为40KHZ)30min，然后在80°C下水浴回流提取2 次，每次均90min，每次回流提取后抽滤，再重新加入与初始加入的乙醇水溶液等体积的乙 醇水溶液(乙醇的质量百分含量为30% )进行提取，再抽滤，合并两次提取的滤液。利用旋 转蒸发仪减压浓缩，水浴温度为50°C，浓缩至小体积，用冷冻干燥器冷冻干燥冷冻干燥(温 度为_60°C，时间为15小时)，得到2. 034g栗蓬棕色粉末，即栗蓬天然鞣花酸鞣质提取物， 其中鞣花酸鞣质的含量为13. 53%,占原料栗蓬质量百分含量为2. 75%。实施例3、鞣花酸鞣质的提取将栗蓬风干、粉碎后过20目筛，称取10. 08g栗蓬粉末，按质量体积比为1 10(g/ ml)将栗蓬粉末加入质量百分含量为45%的乙醇水溶液中，混合均勻得到栗蓬粉末的乙 醇水分散液，在40°C下超声提取(超声频率为40KHZ)30min，然后在80°C下水浴回流提取 2次，每次均60min，每次回流提取后抽滤，再重新加入与初始加入的乙醇水溶液等体积的乙醇水溶液(乙醇的质量百分含量为30% )进行提取，再抽滤，合并两次提取的滤液。利 用旋转蒸发仪减压浓缩，水浴温度为50°C，浓缩至小体积，用冷冻干燥器冷冻干燥(温度 为-50°C，时间为20小时)，得到2. 053g棕红色的栗蓬棕色粉末，即栗蓬天然鞣花酸鞣质提 取物，其中鞣花酸鞣质的含量为13. 53%,占原料栗蓬质量百分含量为2. 78%。实施例4、鞣花酸鞣质的提取将板栗蓬风干，粉碎后过20目筛，称取10. 08g栗蓬粉末，按质量体积比为 1 40 (g/ml)将板栗蓬粉末加入质量百分含量为15%的乙醇水溶液中，混合均勻得到栗蓬 粉末的乙醇水分散液，在40°C下超声提取(超声频率为40KHz)30min，在60°C下水浴回流 提取2次，每次均60min，每次回流提取后抽滤，再重新加入与初始加入的乙醇水溶液等体 积的乙醇水溶液(乙醇的质量百分含量为45% )进行提取，再抽滤，合并两次提取的滤液。 利用旋转蒸发仪减压浓缩，水浴温度为50°C，浓缩至小体积，用冷冻干燥器冷冻干燥(温度 为_56°C，时间为25小时)，得到2. 156g栗蓬棕色粉末，即栗蓬天然鞣花酸鞣质提取物，其 中鞣花酸鞣质的含量为14. 24%,占原料栗蓬质量百分含量为3. 07%。
权利要求
1.一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法，包括如下步骤将所述板栗栗蓬粉末加 入至乙醇水溶液中得到所述板栗栗蓬的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取 后再进行水浴回流提取，浓缩滤液即得所述鞣花酸鞣质。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述板栗栗蓬粉末的粒度为20目-40目。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述乙醇水溶液中乙醇的质量百分 含量为0% -45%，但不为0%。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于所述板栗栗蓬粉末与所述乙醇 水溶液的配比为每Ig所述板栗栗蓬粉末需(10-40)ml所述乙醇水溶液。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述超声提取的频率为40KHz； 所述超声提取的温度为40°C -50°C ；所述超声提取的时间为30min-40min。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于所述水浴回流提取为2次。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述水浴回流中的溶剂为乙醇水溶液，其 中乙醇的质量百分含量为0% -45%，但不为0% ；所述板栗栗蓬粉末与所述乙醇水溶液的 配比为每Ig所述板栗栗蓬粉末需(10-40)ml所述乙醇水溶液。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于每次所述水浴回流提取的溶剂为等 体积的所述乙醇水溶液；所用的乙醇水溶液与初始加入的乙醇水溶液浓度和体积均相同。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于所述水浴回流提取的温度为 500C -SO0C ；所述水浴回流提取的时间为0. 5小时-1. 5小时。
10.根据权利要求1-9中任一所述的方法，其特征在于所述方法还包括将所述鞣花酸 鞣质进行冷冻干燥的步骤；所述冷冻干燥的温度为-50°C -60°C ；所述冷冻干燥的时间为 15小时-25小时。
全文摘要
本发明提供了一种从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法，包括如下步骤将所述板栗栗蓬粉末加入至乙醇水溶液中得到所述板栗栗蓬的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液即得所述鞣花酸鞣质。本发明具有如下优点(1)工艺简单、成本低。本发明采用乙醇的水溶液进行精致而成，条件温和。(2)提取过程选用乙醇，所制的天然鞣质安全无毒，对人体没有伤害。
文档编号C07H13/08GK102140123SQ201110049948
公开日2011年8月3日 申请日期2011年3月2日 优先权日2011年3月2日
发明者冯永庆, 张小琴, 杨柳, 潘叶, 秦岭 申请人:北京农学院