专利名称：一种大丁香素的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药活性成分的制备方法，具体地是ー种从榆绿木树皮中制备大丁香素的方法。
背景技术：
大丁香素(Grandinin),分子式C46H3403(l,分子量1066. 75,是从使君子科(Combretaceae)偷绿木acuminata var. Ianceolata Wall.的树皮中提取分离的ー种鞣质类活性成分。大丁香素细胞毒活性，对黑色素瘤(RPMI-7951)的ED50为O.10 μ g/mlο目前，国内对大丁香素的研究较少，尚处于起步阶段。因此，研究出ー种制备大丁香素的方法是非常必要的，对于扩大药源以及余甘子的综合利用具有很重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供ー种操作简单，产品纯度较高的大丁香素制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案
(1)超临界ニ氧化碳流体萃取榆绿木树皮中的油脂类物质，残留物用こ醇进行连续逆流超声提取后得到提取液；
(2)提取液浓缩，加入明胶溶液，离心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初歩纯化液；
(3)纯化液浓缩，上大孔树脂柱纯化，水和こ醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得
大丁香素。步骤(I)中所述超临界萃取温度为38-45°C，压カ为25_30MPa，时间为50_60min。步骤(I)中所述こ醇为70-85%的こ醇溶液溶液，用量为5-10倍量(V/W)，超声频率为 25-35KHz。步骤(2)中所述明胶溶液浓度为3-6%，丙酮水溶液浓度为50%。步骤(3)中所述大孔树脂可选HPD-400、DlOl或ADS-17型，洗脱剂为75%的こ醇水溶液。综上所述，本发明存在以下优点本エ艺采用连续逆流超声提取的方法提取大丁香素，提高了提取效率，节省了溶剂；70-85%的こ醇溶液作为提取溶剤，減少了多糖的溶出；采用大孔树脂分离大丁香素，成本低，分离效果好。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
对本发明做进ー步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
榆绿木树皮粉碎，取lkg，放入超临界萃取装置中，在温度为38°C，压カ为25MPa下萃取50min，残留物加8L80%的こ醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为25KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为3%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用4L水洗脱，再用4L75%こ醇溶液洗脱，控制流速为3ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素I. ISgo实施例2:
榆绿木树皮粉碎，取lkg，放入超临界萃取装置中，在温度为45°C，压カ为30MPa下萃取50min，残留物加5L70%的こ醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为35KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为6%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用5L水洗脱，再用5L75%こ醇溶液洗脱，控制流速为4. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素I. 27g。 实施例3
榆绿木树皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为40°C，压カ为30MPa下萃取60min，残留物加10L70%的こ醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为30KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为4. 5%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LADS-17大孔树脂柱，吸附完成后，先用3L水洗脱，再用6L75%こ醇溶液洗脱，控制流速为3. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素I. 22g。实施例4:
榆绿木树皮粉碎，取lkg，放入超临界萃取装置中，在温度为35°C，压カ为30MPa下萃取50min，残留物加7L80%的こ醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为35KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为5%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LD-101大孔树脂柱，吸附完成后，先用6L水洗脱，再用3L75%こ醇溶液洗脱，控制流速为4ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素I. 50g。实施例5:
榆绿木树皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为42°C，压カ为28MPa下萃取60min，残留物加6L85%的こ醇溶液进行连续逆流超声提取，超声频率为30KHz，过滤，合并提取液，浓缩，加入浓度为6%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用3L水洗脱，再用4L75%こ醇溶液洗脱，控制流速为2. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脱液，浓缩，冷冻干燥即得大丁香素I. 47g。
权利要求
1.一种大丁香素的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)超临界ニ氧化碳流体萃取榆绿木树皮中的油脂类物质，残留物用こ醇进行连续逆流超声提取后得到提取液； (2)提取液浓缩，加入明胶溶液，离心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初歩纯化液； (3)纯化液浓缩，上大孔树脂柱纯化，水和こ醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得大丁香素。
2.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述超临界萃取温度为38_45°C，压カ为 25_30MPa，时间为 5O-6Omin。
3.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述こ醇为70-85%的こ醇溶液溶液，用量为5-10倍量(V/W)，超声频率为25-35KHZ。
4.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述明胶溶液浓度为3-6%，丙酮水溶液浓度为50%。
5.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述大孔树脂可选HPD-400、DlOl或ADS-17型，洗脱剂为75%的こ醇水溶液。
全文摘要
本发明公开了一种大丁香素的制备方法。本方法是采用榆绿木树皮为原料。该工艺流程主要分为三部分(1)超临界二氧化碳流体萃取原料中的油脂类物质，脱脂原料进行连续逆流超声提取后得到提取液；(2)提取液浓缩，加入明胶溶液，离心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液；(3)上大孔树脂柱纯化，水和乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得大丁香素。本发明的制备方法在50℃以下进行，避免了大丁香素在常规热回流提取过程中因温度过高所引起的化学和结构的改变，因此本方法可得到纯度较高的大丁香素，产品中大丁香素含量大于62%，且本方法提取周期短，方法安全，适合于工业化生产。
文档编号C07H1/08GK102827214SQ201210368379
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月28日 优先权日2012年9月28日
发明者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司